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磷酸肌酸对心肌细胞线粒体的保护作用 被引量:56
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作者 刘瑛琪 李天德 +1 位作者 任艺虹 李宁 《心脏杂志》 CAS 2004年第1期14-16,共3页
目的 :研究能量治疗对心力衰竭的治疗机制。观察磷酸肌酸 (phosphocreatine,CP)对心肌细胞线粒体膜电位的保护作用。方法 :采用胶原酶分离成年大鼠心肌细胞 ,0 .2 mmol/ L H2 O2 刺激细胞 ,于刺激前 10 min加入 10mm ol/ L CP,利用荧光... 目的 :研究能量治疗对心力衰竭的治疗机制。观察磷酸肌酸 (phosphocreatine,CP)对心肌细胞线粒体膜电位的保护作用。方法 :采用胶原酶分离成年大鼠心肌细胞 ,0 .2 mmol/ L H2 O2 刺激细胞 ,于刺激前 10 min加入 10mm ol/ L CP,利用荧光探针 JC-1结合流式细胞仪检测线粒体膜电位的变化 ;Annexin-V/ PI及 TUNEL 染色法鉴定心肌细胞的凋亡。结果 :H2 O2 导致线粒体膜电位下降 ,细胞凋亡增加。CP有效地减低了线粒体膜电位的下降 ,减少了细胞凋亡。结论 :CP能够抗心肌细胞氧化损伤 ,其机制可能依赖于减少或抑制线粒体膜电位的下降 。 展开更多
关键词 线粒体膜电位 磷酸肌酸 细胞凋亡
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游泳训练后大鼠骨骼肌细胞自由基代谢、线粒体膜电位变化与细胞凋亡的关系 被引量:42
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作者 王长青 刘丽萍 +2 位作者 李雷 郝晓东 郑师陵 《中国运动医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第3期256-260,共5页
目的 :研究游泳训练前后大鼠骨骼肌自由基代谢、线粒体膜电位变化与细胞凋亡的关系 ,寻找评定运动性疲劳与恢复的可行性指标。方法 :5 0只雄性SD大鼠 (10 0± 5 )g ,随机分为对照组 (G1)、训练 1天组 (G2 )、训练 6天组 (G3 )、训练... 目的 :研究游泳训练前后大鼠骨骼肌自由基代谢、线粒体膜电位变化与细胞凋亡的关系 ,寻找评定运动性疲劳与恢复的可行性指标。方法 :5 0只雄性SD大鼠 (10 0± 5 )g ,随机分为对照组 (G1)、训练 1天组 (G2 )、训练 6天组 (G3 )、训练 12天组 (G4 )、训练 18天组 (G5)。用流式细胞仪检测肌细胞线粒体膜电位、DNA倍体分析 ,MDA测定采用硫代巴比妥酸比色法 ,SOD测定使用放免法 ,JEM - 12 0 0EX电镜及脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记技术 (TUNEL)检测细胞凋亡。结果 :游泳训练后各组骨骼肌细胞线粒体膜电位均发生改变 ,G3 组最低。运动后G3 、G5组的DNA出现凋亡峰。TUNEL染色显示 ,游泳训练后大鼠骨骼肌呈棕黄色的凋亡细胞明显增加 ,G3组比例最高。各训练组之间SOD活性变化差异显著 ,G3 、G4 组MDA数量显著升高。电镜观察G3组肌细胞溶酶体增多 ,部分线粒体嵴消失 ,但膜完整 ,形似空泡 ,枯否细胞活跃。G5组肌细胞的超微结构似G3 组 ,细胞完整。结论 :游泳训练可诱发细胞凋亡 ,不同运动负荷对线粒体膜电位、MDA、SOD的影响各异 ,运动引起线粒体膜电位下降的同时可导致细胞凋亡。线粒体膜电位。 展开更多
关键词 细胞凋亡 线粒体膜电位 SOD MDA 骨骼肌细胞 游泳训练 抗氧化物 脂质过氧化物
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芹菜素诱导人胃癌细胞凋亡作用及机制研究 被引量:36
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作者 胡太平 曹建国 《国际病理科学与临床杂志》 CAS 2007年第1期6-10,F0002,共6页
目的:研究芹菜素(apigenin,API)致人胃癌细胞凋亡作用及其机制。方法:培养人胃癌BGC823细胞株,加入不同浓度的API,孵育48h。PI染色流式细胞术(FCM)分析测定凋亡率;罗丹明染色FCM分析测定细胞线粒体跨膜电位(Δψm);Caspase-9分光光度法... 目的:研究芹菜素(apigenin,API)致人胃癌细胞凋亡作用及其机制。方法:培养人胃癌BGC823细胞株,加入不同浓度的API,孵育48h。PI染色流式细胞术(FCM)分析测定凋亡率;罗丹明染色FCM分析测定细胞线粒体跨膜电位(Δψm);Caspase-9分光光度法检测试剂盒测定caspase-9活性;Western印迹检测线粒体凋亡信号转导通路相关蛋白的表达,包括bax,bcl-2,caspase-9和caspase-3。结果:API(20,40和80μg/mL)作用48h能呈浓度依赖性地诱导BGC823细胞凋亡。而且,API也能降低BGC823细胞的Δψm,增加caspase-9活性,促进细胞色素c(Cytc)释放,上调bax,caspase-9和caspase-3蛋白的表达,同时下调bcl-2蛋白表达,且呈剂量依赖性。结论:API通过活化线粒体信号转导途径诱导人胃癌细胞凋亡。 展开更多
关键词 胃肿瘤 芹菜素 凋亡 线粒体跨膜电位 CASPASE
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游泳训练后大鼠肝细胞SOD、MDA、线粒体膜电位变化与细胞凋亡的关系 被引量:28
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作者 刘丽萍 李雷 +2 位作者 王光平 郝晓冬 郑师陵 《中国运动医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第2期161-165,共5页
目的 :通过对游泳训练前后大鼠肝细胞SOD、MDA、线粒体膜电位的测定及DNA倍体分析 ,综合观察不同负荷阈所致的肝细胞凋亡 ,探讨不同负荷阈与肝细胞凋亡的关系。方法 :5 0只雄性Sprague -Dauley大鼠 (10 0g± 5g) ,随机分为对照组 (... 目的 :通过对游泳训练前后大鼠肝细胞SOD、MDA、线粒体膜电位的测定及DNA倍体分析 ,综合观察不同负荷阈所致的肝细胞凋亡 ,探讨不同负荷阈与肝细胞凋亡的关系。方法 :5 0只雄性Sprague -Dauley大鼠 (10 0g± 5g) ,随机分为对照组 (G1)、1天训练组 (G2 )、6天训练组 (G3 )、12天训练组 (G4 )和 18天训练组 (G5)。训练方案为每天游泳 30分钟 ,休息 4 0分钟后再游泳 2 0分钟。取材当天训练后休息 4 0分钟取材。用流式细胞仪 (flowcytometry ,FCM )检测肝细胞线粒体膜电位、DNA倍体分析。JEM - 12 0 0EX电镜及末端转移酶标记技术 (TUNEL)检测细胞凋亡。结果 :随着游泳训练时间的延长 ,肝细胞线粒体膜电位的变化为升高、恢复、再升高。运动后各组DNA均出现亚“G1”峰 ,即凋亡峰。 6天训练组凋亡细胞比例最高 ,可见凋亡小体。肝细胞SOD活性和MDA含量显著升高。结论 :运动引起线粒体膜电位、DNA倍体、SOD、MDA发生改变 ,提示这些变化可能诱导细胞凋亡。 展开更多
关键词 细胞凋亡 线粒体膜电位 SOD MDA 肝细胞 游泳训练
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电针对脑缺血再灌注大鼠脑组织细胞线粒体膜电位及凋亡的影响 被引量:33
5
作者 陈小娱 张秋玲 白波 《针刺研究》 CAS CSCD 2008年第2期107-110,共4页
目的:探讨针刺对脑缺血再灌注大鼠神经元保护作用的机制。方法:雄性SD大鼠36只,随机分为假手术组(Sham)、脑缺血再灌注组(CI/R)及脑缺血再灌注+电针组(CI/R+EA),每组12只。采用改良线栓法制备局灶性脑缺血(MCAO)再灌注... 目的:探讨针刺对脑缺血再灌注大鼠神经元保护作用的机制。方法:雄性SD大鼠36只,随机分为假手术组(Sham)、脑缺血再灌注组(CI/R)及脑缺血再灌注+电针组(CI/R+EA),每组12只。采用改良线栓法制备局灶性脑缺血(MCAO)再灌注模型。于再灌流开始后,CI/R+EA组电针“水沟”“百会”穴,电针参数:频率2~15Hz,间断疏密波,电流强度1mA,以局部肌肉轻微震颤为度,时间30min。以罗丹明123和AnnexinV—FITC进行荧光染色,通过流式细胞仪检测细胞内荧光强度,分析脑组织细胞线粒体膜电位及凋亡发生率的变化。结果:CI/R组大鼠大脑皮层细胞线粒体膜电位明显低于假手术组(P〈0.01),细胞凋亡率显著升高(P〈0.01);电针治疗后,线粒体膜电位升高,细胞凋亡率受到抑制,与CI/R组比较差异有显著性意义(P〈0.01)。结论:针刺治疗可明显减轻大鼠脑缺血再灌注损伤,上调神经细胞线粒体膜电位水平可能是针刺抑制大鼠脑缺血再灌注后神经细胞凋亡的机制之一。 展开更多
关键词 脑缺血再灌注损伤 电针 线粒体膜电位 细胞凋亡
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红车轴草总黄酮对H_2O_2诱导的血管内皮细胞损伤的保护作用 被引量:34
6
作者 高蒙蒙 孙桂波 +5 位作者 斯建勇 秦蒙 罗云 孟祥宝 王敏 孙晓波 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第2期201-207,共7页
目的观察红车轴草总黄酮对H2O2诱导的血管内皮细胞损伤的保护作用,并探讨其可能的作用机制。方法利用体外培养的人脐静脉血管内皮细胞ECV-304,采用H2O2诱导细胞损伤模型,观察红车轴草总黄酮对H2O2所致的血管内皮细胞损伤的保护作用。MT... 目的观察红车轴草总黄酮对H2O2诱导的血管内皮细胞损伤的保护作用,并探讨其可能的作用机制。方法利用体外培养的人脐静脉血管内皮细胞ECV-304,采用H2O2诱导细胞损伤模型,观察红车轴草总黄酮对H2O2所致的血管内皮细胞损伤的保护作用。MTT法检测细胞存活率、试剂盒测定细胞中超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性及细胞中丙二醛(MDA)的含量、乳酸脱氢酶(LDH)的漏出量;荧光法检测Caspase-3的活性;Hoechst33342及PI荧光染色法观察红车轴草总黄酮对H2O2诱导血管内皮细胞凋亡的影响;JC-1染色法检测红车轴草总黄酮对H2O2损伤血管内皮细胞线粒体膜电位的影响,检测各组细胞内ROS的表达水平。结果与空白对照组相比,H2O2损伤组细胞存活率降低、细胞内LDH,漏出量增加(P<0.001);抗氧化酶SOD、CAT、GSH-Px活性降低、MDA含量升高(P<0.01);Caspase-3活性升高(P<0.001)、ROS含量升高、线粒体膜电位降低;与模型组相比,红车轴草总黄酮各剂量组(12.5、25、50mg.L-1)及槲皮素组(30 mg.L-1)细胞存活率明显增加(P<0.01,P<0.05),红车轴草总黄酮各剂量组(12.5、25、50 mg.L-1)及槲皮素组(30 mg.L-1)均能明显降低LDH漏出量(P<0.01,P<0.05)、明显增强SOD、CAT及GSH-Px活力(P<0.01,P<0.05)、降低MDA、ROS含量及Caspase-3活性(P<0.05,P<0.01)、升高线粒体膜电位(P<0.01)。结论红车轴草总黄酮对H2O2诱导的内皮细胞损伤有明显的保护作用,其初步作用机制可能与抗自由基,减轻脂质过氧化、降低Caspase-3活性及稳定线粒体膜电位有关。 展开更多
关键词 红车轴草总黄酮 H2O2 内皮细胞 抗氧化 线粒体膜电位 CASPASE-3
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硫化氢对抗化学性缺氧引起的心肌细胞损伤及其机制 被引量:32
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作者 廖新学 杨春涛 +6 位作者 杨战利 李建平 王礼春 黄雪 郭瑞鲜 陈培熹 冯鉴强 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第8期1012-1017,共6页
目的观察H2S对氯化钴(CoCl2)诱导的H9C2心肌细胞缺氧性损伤的影响,探讨其作用机制。方法用CoCl2处理H9C2心肌细胞,建立化学性缺氧诱导心肌细胞损伤的实验模型。NaHS(H2S的供体)在CoCl2处理H9C2心肌细胞前30 min加入培养基中,作为预... 目的观察H2S对氯化钴(CoCl2)诱导的H9C2心肌细胞缺氧性损伤的影响,探讨其作用机制。方法用CoCl2处理H9C2心肌细胞,建立化学性缺氧诱导心肌细胞损伤的实验模型。NaHS(H2S的供体)在CoCl2处理H9C2心肌细胞前30 min加入培养基中,作为预处理。应用CCK-8比色法检测细胞存活率;PI染色流式细胞仪检测细胞凋亡率;Western blot法检测Cleaved Caspase-3的表达;GSSG试剂盒检测GSSG/(GSSG+GSH)的比值;双氯荧光素(DCFH-DA)染色荧光显微镜照相检测细胞内的活性氧(ROS);罗丹明123(Rh123)染色荧光显微镜照相检测线粒体膜电位(MMP)。结果在400~800μmol.L-1浓度范围内,CoCl2处理H9C2心肌细胞36 h,呈剂量依赖性地降低细胞存活率。在600μmol.L-1CoCl2处理H9C2心肌细胞前30 min,应用400μmol.L-1NaHS可明显地抑制CoCl2对细胞的损伤作用,使细胞存活率明显升高,细胞凋亡率及CleavedCaspase-3表达降低;并使H9C2心肌细胞内GSSG/(GSH+GSSG)比值及ROS水平明显降低,同时明显地改善MMP。结论H2S能明显地对抗化学性缺氧诱导的心肌细胞损伤,此保护作用与其降低GSSG/(GSH+GSSG)比值和ROS水平,改善MMP,抑制Caspase-3活化等机制有关。 展开更多
关键词 硫化氢 心肌保护 化学性缺氧 凋亡 氯化钴 活性氧 线粒体膜电位
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红景天苷减轻叠氮钠诱导线粒体损伤的作用 被引量:26
8
作者 曹立莉 杜冠华 王敏伟 《药学学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第8期700-704,共5页
目的观察红景天苷对呼吸链复合体IV抑制剂叠氮钠(NaN3)诱导的线粒体损伤的保护作用,探讨其在防治神经退行性疾病中可能的作用机制。方法将叠氮钠与人神经母细胞瘤细胞株SHSY5Y共同孵育,MTT法测定细胞存活力,JC1法检测线粒体膜电位变化... 目的观察红景天苷对呼吸链复合体IV抑制剂叠氮钠(NaN3)诱导的线粒体损伤的保护作用,探讨其在防治神经退行性疾病中可能的作用机制。方法将叠氮钠与人神经母细胞瘤细胞株SHSY5Y共同孵育,MTT法测定细胞存活力,JC1法检测线粒体膜电位变化。刃天青法检测大鼠脑线粒体功能。结果64mmol·L-1叠氮钠与SHSY5Y共同孵育4h后,细胞存活率明显下降,线粒体膜电位下降。预先加入红景天苷能明显提高细胞存活率,维持线粒体膜电位。650μmol·L-1叠氮钠能使大鼠脑线粒体功能下降,预先加入红景天苷能明显改善线粒体功能。结论红景天苷能够减轻叠氮钠(NaN3)诱导的线粒体损伤,能够改善线粒体功能,这可能是其抗老年痴呆的机制之一。 展开更多
关键词 线粒体 叠氮钠 线粒体膜电位 红景天苷
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红芪总多糖诱导S180瘤细胞凋亡的实验研究 被引量:24
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作者 雷丰丰 赵健雄 +2 位作者 王学习 姚宝泰 丁侃 《中成药》 CAS CSCD 北大核心 2008年第7期961-964,共4页
目的:研究红芪总多糖(THPS)诱导小鼠S180瘤细胞凋亡作用及其机制。方法:昆明小鼠60只接种S180瘤后随机分为5组。(1)模型组(S):生理盐水腹腔注射,(2)环磷酰胺组(CY):CY腹腔注射,(3)THPS低剂量(H100),(4)THPS中剂量(H200)和(5)THPS高剂量... 目的:研究红芪总多糖(THPS)诱导小鼠S180瘤细胞凋亡作用及其机制。方法:昆明小鼠60只接种S180瘤后随机分为5组。(1)模型组(S):生理盐水腹腔注射,(2)环磷酰胺组(CY):CY腹腔注射,(3)THPS低剂量(H100),(4)THPS中剂量(H200)和(5)THPS高剂量组(H400):分别给予THPS低剂量、中剂量和高剂量腹腔注射,14 d后处死小鼠。电镜观察各组瘤细胞的形态,激光共聚焦(LSCM)测定每组瘤细胞DNA、RNA含量、细胞内钙离子浓度、自由基含量及线粒体膜电位。结果:中剂量的THPS可明显升高细胞内钙离子浓度、自由基含量及降低线粒体膜电位和瘤细胞DNARNA含量的作用。结论:THPS中剂量通过升高细胞内钙离子浓度、自由基含量及降低线粒体膜电位诱导小鼠S180瘤细胞凋亡。 展开更多
关键词 红芪总多糖 S180瘤 钙离子 自由基 线粒体膜电位
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Lycium barbarum polysaccharides protects retinal ganglion cells against oxidative stress injury 被引量:28
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作者 Lian Liu Xiao-Yuan Sha +2 位作者 Yi-Ning Wu Meng-Ting Chen Jing-Xiang Zhong 《Neural Regeneration Research》 SCIE CAS CSCD 2020年第8期1526-1531,共6页
The accumulation of excessive reactive oxygen species can exacerbate any injury of retinal tissue because free radicals can trigger lipid peroxidation,protein damage and DNA fragmentation.Increased oxidative stress is... The accumulation of excessive reactive oxygen species can exacerbate any injury of retinal tissue because free radicals can trigger lipid peroxidation,protein damage and DNA fragmentation.Increased oxidative stress is associated with the common pathological process of many eye diseases,such as glaucoma,diabetic retinopathy and ischemic optic neuropathy.Many studies have demonstrated that Lycium barbarum polysaccharides(LBP)protects against oxidative injury in numerous cells and tissues.For the model of hypoxia we used cultured retinal ganglion cells and induced hypoxia by incubating with 200μM cobalt chloride(CoCl2)for 24 hours.To investigate the protective effect of LBP and its mechanism of action against oxidative stress injury,the retinal tissue was pretreated with 0.5 mg/mL LBP for 24 hours.The results of flow cytometric analysis showed LBP could effectively reduce the CoCl2-induced retinal ganglion cell apoptosis,inhibited the generation of reactive oxygen species and the reduction of mitochondrial membrane potential.These findings suggested that LBP could protect retinal ganglion cells from CoCl2-induced apoptosis by reducing mitochondrial membrane potential and reactive oxygen species. 展开更多
关键词 CASPASE cell apoptosis cobalt chloride Lycium barbarum polysaccharides mitochondrial membrane potential oxidative stress injury reactive oxygen species retinal ganglion cells
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褪黑素在活性氧致精子线粒体功能损伤中的保护作用 被引量:28
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作者 商学军 黄宇烽 +2 位作者 叶章群 余虓 顾万建 《中华男科学杂志》 CAS CSCD 2004年第8期604-607,共4页
目的 :探讨活性氧 (ROS)对精子线粒体功能的损伤以及褪黑素 (MLT)的保护作用。 方法 :采用Percoll梯度离心法选择具有正常生理功能的精子 ,作为本实验的正常精子模型。应用次黄嘌呤—黄嘌呤氧化酶体系产生ROS ,在MLT存在与不存在情况... 目的 :探讨活性氧 (ROS)对精子线粒体功能的损伤以及褪黑素 (MLT)的保护作用。 方法 :采用Percoll梯度离心法选择具有正常生理功能的精子 ,作为本实验的正常精子模型。应用次黄嘌呤—黄嘌呤氧化酶体系产生ROS ,在MLT存在与不存在情况下 ,与精子模型分别孵育 30和 6 0min后 ,采用酶组织化学方法分析精子线粒体部位的琥珀酸脱氢酶 (SDH)活性 ,采用Rhodamine 1 2 3(Rh1 2 3)荧光探针标记精子 ,通过流式细胞仪检测线粒体膜电位。 结果 :正常精子与ROS孵育后 ,精子线粒体膜电位明显降低 ,线粒体SDH活力降低极为显著 ;而MLT则减轻了ROS对精子线粒体功能的损伤。 结论 :ROS可通过对精子线粒体膜电位和SDH活力的影响 ,而导致精子线粒体功能损伤 ;MLT可通过其有效的抗氧化能力 。 展开更多
关键词 褪黑素 活性氧 琥珀酸脱氢酶 线粒体膜电位 精子
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丹参素对缺氧/缺糖损伤神经细胞线粒体的保护作用 被引量:18
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作者 张文生 朱陵群 +1 位作者 张丽慧 牛福玲 《北京中医药大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第3期53-56,共4页
目的 观察丹参素对SH SY5Y细胞缺氧 缺糖损伤时胞浆内 [Ca2 + ]i、细胞凋亡率、细胞活性和线粒体膜电位的变化 ,探讨其对神经细胞线粒体的保护作用及其可能的机理。方法 应用细胞培养、四唑盐比色实验 (MTT)检测细胞活力 ,流式细胞... 目的 观察丹参素对SH SY5Y细胞缺氧 缺糖损伤时胞浆内 [Ca2 + ]i、细胞凋亡率、细胞活性和线粒体膜电位的变化 ,探讨其对神经细胞线粒体的保护作用及其可能的机理。方法 应用细胞培养、四唑盐比色实验 (MTT)检测细胞活力 ,流式细胞术检测细胞内 [Ca2 + ]i、细胞凋亡百分率和线粒体膜电位。结果 SH SY5Y细胞缺氧 缺糖损伤 2h时 ,细胞内 [Ca2 + ]i明显增加 ,为 8 4 6nmol L(P <0 0 1) ,细胞凋亡率明显增高 ,为 18 5 9% (P <0 0 1) ,细胞内 [Ca2 + ]i的浓度 4h时达到高峰 ,为 9 89nmol L(P <0 0 1) ,而后呈下降趋势 ,细胞凋亡率随缺氧 缺糖损伤时间的延长而明显增高12h时达到 4 5 91% ,细胞经缺氧 缺糖处理 2h后 ,线粒体膜电位和细胞活性分别降低 2 9 17% (P<0 0 1)、38 80 % (P <0 0 1) ,随着缺氧 缺糖时间的延长线粒体膜电位和细胞活性进一步下降 ,12h时分别降低 5 6 72 % (P <0 0 1)、6 3 5 8% (P <0 0 1) ,丹参素能显著降低细胞内 [Ca2 + ]i,抑制细胞凋亡的发生 ,提高细胞活性和线粒体膜电位 ,与缺氧 缺糖组相比均有显著性差异 (P <0 0 5 ,P <0 0 1)。结论 丹参素可抑制缺氧 缺糖损伤所致的线粒体膜电位的降低 ,从而具有稳定线粒体膜电位的作用 ,抑制细胞凋亡的发生 。 展开更多
关键词 丹参素 神经细胞 线粒体膜电位 缺氧/缺糖
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桔梗皂苷D诱导人肺癌细胞A549的凋亡及机制 被引量:27
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作者 代群 陈哲 +4 位作者 葛宇清 刘培 王海兵 马小琼 吴葆华 《中国中药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第17期2626-2629,共4页
目的:研究桔梗皂苷D(platycodin,PD)抑制人肺癌A549细胞株增殖和诱导凋亡的分子机制。方法:体外培养人肺癌细胞株A549,PD作用终浓度分别为5~20μmol.L-1。MTT法测定PD对细胞的增殖抑制作用,显微镜观察细胞的形态学变化,Annexin V-FITC... 目的:研究桔梗皂苷D(platycodin,PD)抑制人肺癌A549细胞株增殖和诱导凋亡的分子机制。方法:体外培养人肺癌细胞株A549,PD作用终浓度分别为5~20μmol.L-1。MTT法测定PD对细胞的增殖抑制作用,显微镜观察细胞的形态学变化,Annexin V-FITC/PI双标法检测细胞凋亡率,JC-1检测线粒体膜电位的变化,Western blot方法检测PD对Caspase-3,Caspase-9,PARP的剪切片段和Bax,Bcl-2,Bak,Bcl-xl蛋白表达的影响。结果:PD抑制A549细胞的增殖,并随药物浓度的增加和作用时间的延长,作用更显著;与对照组相比,不同浓度的PD作用24 h后,细胞凋亡率增加,线粒体膜电位降低,且差异显著。蛋白电泳检测结果显示蛋白Caspase-3,Caspase-9均出现剪切片断,并随着时间的增加断裂更明显。PD处理A549细胞后,Bax和Bak蛋白表达升高,Bcl-2和Bcl-xl蛋白表达下降。结论:PD具有明显的细胞毒作用,能诱导A549细胞凋亡,通过对Bax,Bak和Bcl-2,Bcl-xl表达的调控,导致线粒体膜电位的下降,进而激活Caspase最终导致肺癌细胞死亡。 展开更多
关键词 桔梗皂苷D A549 线粒体膜电位 细胞凋亡
原文传递
青蒿琥酯诱导人早幼粒白血病细胞HL60凋亡的线粒体机制 被引量:19
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作者 聂蕾 殷祎隆 尹少甫 《中国临床药理学与治疗学》 CAS CSCD 2005年第2期176-179,共4页
目的 :探讨青蒿琥酯 (artesunate ,Art)诱导人急性早幼粒白血病细胞HL6 0凋亡的线粒体机制。方法 :用Art处理HL6 0细胞 ,通过MTT比色法检测细胞增殖抑制的效果 ;透射电镜、DNA凝胶电泳技术观察细胞的凋亡 ;流式细胞术 (flowcytometry ,F... 目的 :探讨青蒿琥酯 (artesunate ,Art)诱导人急性早幼粒白血病细胞HL6 0凋亡的线粒体机制。方法 :用Art处理HL6 0细胞 ,通过MTT比色法检测细胞增殖抑制的效果 ;透射电镜、DNA凝胶电泳技术观察细胞的凋亡 ;流式细胞术 (flowcytometry ,FCM)进行细胞周期分析和线粒体膜电位 (mitochon drialmembranepotential ,MMP)水平的检测 ;比色法检测半胱 天冬氨酸蛋白酶 3(cysteinecontainingas partate,Caspase 3)活性。结果 :Art呈浓度和时间依赖性的抑制HL6 0细胞的增殖 (P <0 .0 5 )。Art诱导后HL6 0细胞出现典型的凋亡形态学变化和生化改变 ,G2 +M期细胞比例增高 ,S期减少 ,凋亡率上升 (P <0 .0 5 ) ,线粒体膜电位降低 (P <0 .0 5 ) ,Caspase 3活性增强 (P <0 .0 5 )。结论 :Art可能通过线粒体 半胱 天冬氨酸蛋白酶 3特定途径诱导HL6 0细胞凋亡。 展开更多
关键词 青蒿琥酯 HL60细胞系 凋亡 线粒体膜电位 半胱-天冬氨酸蛋白酶3
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胡黄连苷Ⅱ对H_2O_2损伤L-02细胞的保护作用 被引量:25
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作者 顾伟 范昕建 +1 位作者 吴疆 牛智强 《世界华人消化杂志》 CAS 北大核心 2008年第29期3274-3278,共5页
目的:探讨胡黄连苷Ⅱ(picroside Ⅱ)对氧化应激损伤L-02细胞的保护作用.方法:H2O2损伤的L-02细胞作为氧化应激损伤模型,MTT法检测细胞增殖状况,膜联蛋白(Annexin-V)和碘化丙啶(PI)染色流式细胞术(flow cytometry,FCM)检测细胞凋亡,罗丹... 目的:探讨胡黄连苷Ⅱ(picroside Ⅱ)对氧化应激损伤L-02细胞的保护作用.方法:H2O2损伤的L-02细胞作为氧化应激损伤模型,MTT法检测细胞增殖状况,膜联蛋白(Annexin-V)和碘化丙啶(PI)染色流式细胞术(flow cytometry,FCM)检测细胞凋亡,罗丹明123染色FCM检测细胞线粒体膜电位(mitochondrial potential membrane,△Ψm),双氢罗丹明123染色FCM检测细胞内活性氧(reactive oxygen species,ROS)的含量.结果:0.6mmol/LH2O2可诱导L-02细胞凋亡,细胞内ROS浓度增加,细胞线粒体跨膜电位明显下降.预先经过0.05,0.5,5mmol/L浓度的胡黄连苷Ⅱ处理后,H2O2诱导的L-02细胞凋亡明显减少(30.8%±9.09%,10.2%±9.82%,8.2%±7.10%vs42.8%±8.28%,均P<0.01),同时明显减弱H2O2对细胞内ROS浓度和线粒体跨膜电位的影响.结论:胡黄连苷Ⅱ对氧化应激损伤L-02细胞具有保护作用,其机制可能与降低细胞内ROS含量,进而抑制△Ψm的降低有关. 展开更多
关键词 胡黄连苷Ⅱ 氧化应激 L-02 细胞线粒体膜电位 甲氮甲唑蓝法 流式细胞术
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六味地黄汤及其活性组分含药血清对原代培养海马神经元的保护作用 被引量:18
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作者 聂伟 张永祥 周金黄 《中国实验方剂学杂志》 CAS 2001年第6期14-16,共3页
目的 :运用血清药理学方法观察六味地黄汤 (LW)及其活性组分 (CA4、CA4 3)含药血清对原代培养胚胎大鼠海马神经元的保护作用。方法 :首先通过MTT法观察了LW及CA4、CA4 3对海马神经元存活的影响 ,进而采用流式细胞术观察LW及CA4、CA4 3... 目的 :运用血清药理学方法观察六味地黄汤 (LW)及其活性组分 (CA4、CA4 3)含药血清对原代培养胚胎大鼠海马神经元的保护作用。方法 :首先通过MTT法观察了LW及CA4、CA4 3对海马神经元存活的影响 ,进而采用流式细胞术观察LW及CA4、CA4 3对海马神经元线粒体膜电位的影响。结果 :LW及CA4、CA4 3含药血清均可不同程度地提高海马神经元的存活率 ,并且稳定线粒体膜电位与其神经保护作用具有密切关系。 展开更多
关键词 血清药理学 海马神经元 线粒体膜电位 六味地黄汤
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对一氧化碳中毒迟发性脑病相关因素的研究 被引量:22
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作者 葛环 高春锦 +3 位作者 赵立明 李茁 夏成青 姜秀芹 《中国急救医学》 CAS CSCD 北大核心 2001年第5期253-255,共3页
目的 观察一氧化碳中毒 (COP)后大鼠脑组织一氧化氮合酶 (NOS)、外周血内皮细胞计数、血小板体积变化、血小板CD61表达、多形核白细胞粘附分子 (CD11b/CD18)表达、海马神经细胞凋亡细胞百分比及线粒体膜电位的改变。方法 Wistar大鼠共... 目的 观察一氧化碳中毒 (COP)后大鼠脑组织一氧化氮合酶 (NOS)、外周血内皮细胞计数、血小板体积变化、血小板CD61表达、多形核白细胞粘附分子 (CD11b/CD18)表达、海马神经细胞凋亡细胞百分比及线粒体膜电位的改变。方法 Wistar大鼠共 16只随机分成正常对照组及一氧化碳中毒组各 8只。制作COP动物模型。用流式细胞仪测定大鼠脑组织一氧化氮合酶 (NOS)、外周血内皮细胞计数、血小板体积变化、血小板CD61表达、多形核白细胞粘附分子 (CD11b/CD18)表达的动态变化 ,海马神经细胞凋亡细胞百分比及线粒体膜电位的改变。用分光光度法测定血浆组织型纤溶酶原激活剂 (tPA)和抑制剂(PAI)。结果 COP后NOS水平降低 ,血小板活性增高 ,纤溶系统变化不明显 ,细胞粘附分子表达增加 ,线粒体膜电位降低 ,凋亡细胞数增加。结论 COP后血小板活性增高 ,细胞粘附分子表达增加 ,导致脑微小动脉血栓形成趋势并引起白细胞浸润造成脑组织损伤 。 展开更多
关键词 一氧化碳中毒 迟发性脑病 细胞粘附分子 血小板活性 线粒体膜电位 细胞凋亡
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淫羊藿苷对异丙肾上腺素所致乳鼠心肌细胞损伤的保护作用 被引量:19
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作者 刘桦 季晖 张超英 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第12期1509-1512,共4页
目的在异丙肾上腺素(isoproterenol,ISO)诱导原代培养乳鼠心肌细胞损伤的模型上,探讨淫羊藿苷对心肌细胞的保护作用。方法采用ISO损伤心肌细胞,通过MTT法检测心肌细胞存活率,以荧光染色激光共聚焦显微镜检测线粒体膜电位的变化,流式细... 目的在异丙肾上腺素(isoproterenol,ISO)诱导原代培养乳鼠心肌细胞损伤的模型上,探讨淫羊藿苷对心肌细胞的保护作用。方法采用ISO损伤心肌细胞,通过MTT法检测心肌细胞存活率,以荧光染色激光共聚焦显微镜检测线粒体膜电位的变化,流式细胞仪检测细胞凋亡的发生。结果ISO处理心肌细胞72h后降低心肌细胞的存活率,诱导心肌细胞发生凋亡,凋亡率达35%,线粒体的膜电位明显降低。预先给予0.1~10μmol.L-1淫羊藿苷,可提高心肌细胞的存活率,改善线粒体的膜电位,降低心肌细胞的凋亡率。结论淫羊藿苷对ISO诱导原代培养心肌细胞损伤具有明显的保护作用。 展开更多
关键词 淫羊藿苷 异丙肾上腺素 心肌细胞 线粒体膜电位 细胞凋亡
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硫化氢通过抑制p38 MAPK保护PC12细胞对抗化学性缺氧损伤 被引量:24
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作者 兰爱平 梅卫义 +5 位作者 孟金兰 胡芬 杨春涛 杨战利 陈培熹 冯鉴强 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第10期1339-1344,共6页
目的探讨硫化氢(H2S)是否通过抑制p38MAPK保护PC12细胞对抗化学性缺氧诱导的损伤。方法应用化学性低氧模拟剂氯化钴(CoCl2)处理PC12细胞建立化学性缺氧损伤模型。应用CCK-8比色法检测细胞存活率;Hochest33258核染色法观察细胞凋亡的形... 目的探讨硫化氢(H2S)是否通过抑制p38MAPK保护PC12细胞对抗化学性缺氧诱导的损伤。方法应用化学性低氧模拟剂氯化钴(CoCl2)处理PC12细胞建立化学性缺氧损伤模型。应用CCK-8比色法检测细胞存活率;Hochest33258核染色法观察细胞凋亡的形态学改变;双氯荧光素(DCFH-DA)染色荧光显微镜照像检测细胞内的活性氧(ROS);罗丹明123(RH123)染色荧光显微镜照像检测线粒体膜电位(MMP);Western blot法检测p38MAPK蛋白的表达水平。结果应用600μmol·L-1CoCl2处理PC12细胞2h可使磷酸化(p)p38明显增多;在应用600μmol·L-1CoCl2处理PC12细胞前30min,应用400μmol·L-1硫氢化钠(NaHS,H2S的供体)预处理细胞不仅可明显的抑制CoCl2诱导的p-p38MAPK表达的增多,还能保护PC12细胞对抗600μmol·L-1CoCl2引起的损伤,使细胞存活率升高,凋亡细胞和胞内ROS水平明显降低,MMP丢失减小;在CoCl2损伤PC12细胞前60min应用p38抑制剂SB302580(20μmol·L-1)预处理也能产生类似NaHS预处理的细胞保护作用。结论 p38MAPK介导CoCl2引起PC12细胞的损伤作用;H2S通过抑制p38MAPK的表达及氧化应激反应保护PC12细胞对抗化学性缺氧引起的损伤作用。 展开更多
关键词 硫化氢 预处理 氯化钴 P38MAPK 活性氧 线粒体膜电位 凋亡
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附子-黄芪-葶苈子角药对心力衰竭模型大鼠心肌细胞线粒体膜电位及钙调节蛋白NCX1、SERCA2的影响 被引量:24
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作者 李焱 姜泽丰 +2 位作者 乔冬卉 刘雯雯 薛一涛 《中医杂志》 CSCD 北大核心 2021年第3期252-258,共7页
目的探讨附子-黄芪-葶苈子角药治疗心力衰竭的可能作用机制。方法将75只SD大鼠随机分为空白组、模型组、角药组、黄芪甲苷组与曲美他嗪组,每组15只。除空白组外,其余各组大鼠以腹腔注射盐酸阿霉素6周的方式建立心力衰竭大鼠模型,实验第... 目的探讨附子-黄芪-葶苈子角药治疗心力衰竭的可能作用机制。方法将75只SD大鼠随机分为空白组、模型组、角药组、黄芪甲苷组与曲美他嗪组,每组15只。除空白组外,其余各组大鼠以腹腔注射盐酸阿霉素6周的方式建立心力衰竭大鼠模型,实验第2周起角药组给予附子、黄芪、葶苈子免煎颗粒15g/(kg·d)灌胃,曲美他嗪组给予盐酸曲美他嗪片10mg/(kg·d)灌胃,黄芪甲苷组给予黄芪甲苷水溶液1g/(kg·d)灌胃,空白组和模型组大鼠给予2ml双蒸水灌胃。各组均每日灌胃1次,共6周。末次给药12h后,检测大鼠心功能指标及血清脑钠尿肽(BNP)水平,测定大鼠心肌组织线粒体膜电位的变化及心肌细胞钙调节蛋白钙钠交换体(NCX1)和心肌细胞肌浆网Ca^(2+)-ATP酶(SERCA2)mRNA和蛋白表达。结果与空白组比较,模型组大鼠血清BNP水平升高,心功能及心肌细胞线粒体膜电位未降低细胞的百分比明显降低,心肌细胞NCX1蛋白及mRNA表达升高,SERCA2蛋白及mRNA表达降低(P<0.01)。与模型组比较,黄芪甲苷组、曲美他嗪组和角药组上述各指标均有不同程度改善(P<0.01),且角药组在改善心肌细胞线粒体膜电位未降低细胞的百分比及NCX1、SERCA2 mRNA表达方面优于黄芪甲苷组、曲美他嗪组(P<0.01)。结论附子-黄芪-葶苈子角药可稳定心力衰竭大鼠心肌细胞线粒体膜电位,改善心肌细胞的线粒体功能,调节NCX1和SERCA2表达平衡,从而改善心功能。 展开更多
关键词 心力衰竭 附子 黄芪 葶苈子 线粒体膜电位 钙调节蛋白 钙钠交换体 肌浆网Ca^(2+)-ATP酶
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