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Performance of Crude Coagulants from Adult Rabbit Stomach and Their Influence on the Brazilian Prato Cheese Type Composition
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作者 Maximiliano S. E. Jiménez Neila S. P. S. Richards 《Food and Nutrition Sciences》 CAS 2023年第5期462-479,共18页
This study aimed to evaluate the milk clotting capacity (MCA), and caseinolytic activity (CA) of crude coagulant from the stomachs of adult rabbits (RC), and their influence on the composition, proteolysis, and textur... This study aimed to evaluate the milk clotting capacity (MCA), and caseinolytic activity (CA) of crude coagulant from the stomachs of adult rabbits (RC), and their influence on the composition, proteolysis, and texture of type Prato cheese. We tested two ways for salting the abomasum and three levels of pH and times for enzyme activation. The presence of enzymes and caseinolytic activity in RC was assayed by SDS-PAGE. The effects of three pH levels and the milk’s temperature on RC’s water-holding capacity (WHC) were evaluated. Brazilian Prato cheese type was developed and its proximate composition, texture, and change during ripening were assessed. The saturated NaCl solutions (37%, m/v) were more efficient for enzyme extraction from adult rabbit stomachs, and conditions of pH of 4.3 for 24 h showed better performance for enzyme activation into RC. An early and more active proteolytic reaction of RC on bovine caseinate was appreciated at the first 5 min of digestion when compared to commercial chymosin (CC). The water holding capacity of gel coagulated by RC was optimum at pH 6.4 and 37°C and is highly dependent on pH and temperature parameters. Total dry extract and fat were higher for treatment coagulated with RC. Conversely, hardness, gumminess, and chewability were lower in the same treatment. Yield, protein content, and changes that occurred during the ripening stage of cheeses were similar for both treatments, demonstrating that casein proteolysis was developed in a similar way. Coagulants from adult rabbits’ stomachs can be used to make semi-cooked curd cheeses. 展开更多
关键词 RENNET milk clotting activity Prato Cheese Caseinolytic activity
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微小毛霉凝乳酶基因的定点突变及突变菌株的筛选
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作者 王茜 王昕 +2 位作者 张杰 李倬林 李铁柱 《中国乳品工业》 CAS CSCD 北大核心 2015年第2期16-19,共4页
为了提高重组微小毛霉凝乳酶凝乳特性,对微小毛霉凝乳酶基因进行定点突变,分析了不同突变方案对凝乳活性、蛋白水解活性、酶的热稳定性的影响。以此为指标筛选到了突变体T218S菌株一株,其所产凝乳酶凝乳活力及C/P比值为52.35 U/m L和29.... 为了提高重组微小毛霉凝乳酶凝乳特性,对微小毛霉凝乳酶基因进行定点突变,分析了不同突变方案对凝乳活性、蛋白水解活性、酶的热稳定性的影响。以此为指标筛选到了突变体T218S菌株一株,其所产凝乳酶凝乳活力及C/P比值为52.35 U/m L和29.03,分别较改造前提高了23.2%和233.7%;非特异性水解活力由改造前的4.90 U/m L降低到1.80 U/m L,降低了63.3%。 展开更多
关键词 微小毛霉凝乳酶 定点突变 凝乳活性 水解活性 热稳定性
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产高效凝乳酶菌株获得方法的探讨 被引量:20
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作者 周俊清 林亲录 赵谋明 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2005年第3期253-256,共4页
凝乳酶是奶酪生产中的关键性酶,高效的凝乳酶应具有较高的凝乳活力与较低的蛋白分解力。本文介绍了凝乳活力和蛋白分解力的测定方法,同时对产凝乳酶菌种的来源,产高效凝乳酶菌株获得的途径进行了综述。
关键词 凝乳酶 奶酪 高效 凝乳活力 蛋白分解力
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凝乳酶的研究进展 被引量:18
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作者 杭锋 洪青 +3 位作者 王钦博 刘沛毅 刘振民 陈卫 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2016年第3期273-279,共7页
传统干酪制作使用的凝乳酶来源于小牛皱胃,目前小牛皱胃酶的供应量仅能满足世界干酪产量所需凝乳酶的20%~30%。小牛皱胃酶的供需矛盾和价格高昂等因素,使得寻求其替代物成为乳品领域科学研究的热点之一。本文首先介绍了小牛皱胃酶的研... 传统干酪制作使用的凝乳酶来源于小牛皱胃,目前小牛皱胃酶的供应量仅能满足世界干酪产量所需凝乳酶的20%~30%。小牛皱胃酶的供需矛盾和价格高昂等因素,使得寻求其替代物成为乳品领域科学研究的热点之一。本文首先介绍了小牛皱胃酶的研究现状,其次从动物、植物、基因重组以及微生物来源,综述了不同凝乳酶之间酶性质差异以及凝乳酶在干酪应用中的研究,旨在为凝乳酶的研究提供一定的理论参考,为寻找凝乳酶替代物提供思路。 展开更多
关键词 凝乳酶 凝乳酶活力 蛋白水解活力 干酪
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牛凝乳酶原基因在乳酸乳球菌中的表达 被引量:9
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作者 孙大庆 秦兰霞 +4 位作者 姚丽燕 李彬 曲行光 韩希妍 姜毓君 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第5期628-633,共6页
【目的】利用乳酸乳球菌nisin诱导基因表达系统(the NIsin Controlled gene Expression system,NICE)表达牛凝乳酶原。【方法】从克隆载体pS19-PPC中获得牛凝乳酶原基因,将该基因与表达载体pNZ8148连接并电转化乳酸乳球菌NZ9000,转化子... 【目的】利用乳酸乳球菌nisin诱导基因表达系统(the NIsin Controlled gene Expression system,NICE)表达牛凝乳酶原。【方法】从克隆载体pS19-PPC中获得牛凝乳酶原基因,将该基因与表达载体pNZ8148连接并电转化乳酸乳球菌NZ9000,转化子经酶切、PCR和测序鉴定后,用nisin进行诱导表达,表达产物利用SDS-PAGE和Western blot鉴定,表达产物纯化后检测凝乳活性。【结果】重组牛凝乳酶原与天然牛凝乳酶原比较,其分子量大小、免疫性质、生物活性和抑制剂敏感性没有发现显著差异,其凝乳活性可达2×103IMCU/mL。【结论】在乳酸乳球菌中表达了具有凝乳活性的牛凝乳酶原,同时乳酸乳球菌作为发酵剂和凝乳酶产生菌双重角色的实现,为奶酪加工提供了新思路和新方法。 展开更多
关键词 牛凝乳酶原 乳酸乳球菌 蛋白印迹 凝乳活性
原文传递
影响微小毛霉凝乳酶活力的因素 被引量:4
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作者 徐速 《生物技术》 CAS CSCD 1996年第4期28-30,共3页
介绍影响微小毛霉凝乳酶活力的几个因素.该微小毛霉凝乳酶的最适pH在5.4~7.0范围;在pH2~7之间酶活保持稳定;凝乳酸最适温度在25~70℃,并随温度的增高酶活增大;60℃处理10min酶活损失68%,并随时间的... 介绍影响微小毛霉凝乳酶活力的几个因素.该微小毛霉凝乳酶的最适pH在5.4~7.0范围;在pH2~7之间酶活保持稳定;凝乳酸最适温度在25~70℃,并随温度的增高酶活增大;60℃处理10min酶活损失68%,并随时间的延长酶活损失加大;Fe2+、Mg2+对酶有激活作用,Na+、Cu2+对酶有抑制作用。 展开更多
关键词 毛霉 微小毛霉 凝乳酶 酶活力
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小牛皱胃酶提取技术的研究 被引量:7
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作者 张富新 《西北农林科技大学学报(自然科学版)》 CSCD 北大核心 2002年第1期103-106,共4页
以小牛皱胃为原料 ,研究了食盐浓度、酒精浓度、提取温度和 p H对小牛皱胃酶提取效果的影响。结果表明 ,用 5 0 g/ L 的食盐在 p H4.0 ,30℃下提取时 ,小牛皱胃酶凝乳活性最高。
关键词 小牛皱胃酶 凝乳活性 提取技术 干酪
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Paenibacillus spp.BD3526发酵小麦麸皮生产凝乳酶 被引量:7
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作者 杭锋 洪青 +3 位作者 陶源 王钦博 刘振民 陈卫 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2016年第2期35-40,共6页
对Paenibacillus spp.BD3526凝乳酶的发酵条件和凝乳性能进行了研究,探讨了不同培养基、发酵时间、碳源、氮源和装液量对凝乳酶活力和活菌数的影响,并与商业化的小牛皱胃酶、重组凝乳酶、Rhizomucor miehei来源凝乳酶进行凝乳性能比较... 对Paenibacillus spp.BD3526凝乳酶的发酵条件和凝乳性能进行了研究,探讨了不同培养基、发酵时间、碳源、氮源和装液量对凝乳酶活力和活菌数的影响,并与商业化的小牛皱胃酶、重组凝乳酶、Rhizomucor miehei来源凝乳酶进行凝乳性能比较。实验结果表明:发酵时间、碳源、氮源和装液量对BD3526凝乳酶活力(milkclotting activity,MCA)和蛋白水解活力(proteolytic activity,PA)均有不同程度的影响。选用小麦麸皮培养基进行发酵至24 h时,MCA达到最大至3 279.76±67.11 SU/m L,凝乳性能强,PA值在整个发酵期间变化不大;添加碳源或氮源会不同程度地降低MCA值;装液量为30 m L时,发酵上清液中菌体浓度最高、MCA达到6 000 SU/m L。与商业化的凝乳酶相比,BD3256凝乳酶在凝乳过程中未使凝乳块产生过度水解,也无乳清析出现象,具有应用到干酪生产中的潜力。 展开更多
关键词 PAENIBACILLUS spp. 凝乳酶 小麦麸皮 凝乳酶活力 蛋白酶活力
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离子液体双水相体系分离辣木叶凝乳酶 被引量:5
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作者 施娅楠 沐剑蓉 +1 位作者 黄子玉 黄艾祥 《食品科技》 CAS 北大核心 2018年第11期240-245,共6页
采用[C_4mim]Br/K_2HPO_4双水相抽提技术从辣木叶蛋白中分离凝乳酶,研究双水相参数[C_4mim]Br浓度、K_2HPO_4浓度、粗酶浓度、体系pH对凝乳酶活力和分离效果的影响,并与传统的硫酸铵三步盐析法相比较。结果表明:1.3 g/mL的[C_4mim]Br,2.... 采用[C_4mim]Br/K_2HPO_4双水相抽提技术从辣木叶蛋白中分离凝乳酶,研究双水相参数[C_4mim]Br浓度、K_2HPO_4浓度、粗酶浓度、体系pH对凝乳酶活力和分离效果的影响,并与传统的硫酸铵三步盐析法相比较。结果表明:1.3 g/mL的[C_4mim]Br,2.2 g/mL的K_2HPO_4,粗酶添加量为20 mg/mL,pH7.5可达最佳凝乳酶萃取效果,此条件下辣木叶凝乳酶的酶活性回收率达到85.5%,纯化因子达1.49。与三步盐析法相比,较强的疏水相互作用提高了酶的分离效果,且分离步骤少可有效降低酶活力损失。根据电泳结果,分相后的辣木叶凝乳酶分子量为(55~60)ku存在于上层的富离子液体相,部分杂蛋白的分子量为(25~40)ku保持在富盐底部。 展开更多
关键词 辣木叶 凝乳酶 离子液体双水相体系 萃取 凝乳活力回收率
原文传递
辣木籽凝乳酶的提取分离条件优化
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作者 吴改转 庄玺 +1 位作者 王雪峰 黄艾祥 《中国油脂》 CAS CSCD 北大核心 2023年第7期137-142,152,共7页
为给辣木籽凝乳酶的开发利用提供理论依据,以脱脂辣木籽粉为原料,采用盐法提取、硫酸铵(AS)分级沉淀和离子交换色谱法提取分离凝乳酶。通过单因素试验和正交试验对辣木籽凝乳酶的盐法提取条件进行优化,采用单因素试验对离子交换色谱法... 为给辣木籽凝乳酶的开发利用提供理论依据,以脱脂辣木籽粉为原料,采用盐法提取、硫酸铵(AS)分级沉淀和离子交换色谱法提取分离凝乳酶。通过单因素试验和正交试验对辣木籽凝乳酶的盐法提取条件进行优化,采用单因素试验对离子交换色谱法分离纯化条件进行优化,并采用SDS-PAGE和RP-HPLC对分离得到的辣木籽凝乳酶的分子质量和纯度进行分析。结果表明:盐法提取的最佳条件为料液比1∶10、提取温度30℃、pH 7.15、NaCl浓度0.3 mol/L、提取时间0.5 h;在20%~40%AS饱和度下的沉淀蛋白凝乳活性最好且蛋白质总占有率达61.71%;离子交换色谱法的最佳分离条件为进样质量浓度30 mg/mL、流动相pH 5.15、流速1.68 mL/min、流动相组成为0.05 mol/L醋酸钠+0.05 mol/L氯化钠,在此条件下辣木籽凝乳酶的凝乳比活力值达到24 SU/mg;该凝乳酶的分子质量主要分布在35~45 kDa,纯度达到90%以上。采用该方法能有效提取分离辣木籽凝乳酶,且能很好地保持其凝乳活性。 展开更多
关键词 辣木籽 凝乳酶 硫酸铵分级沉淀 离子交换色谱法 凝乳活性 SDS-PAGE
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原核表达重组牛凝乳酶原及重组牛凝乳酶酶学特性 被引量:4
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作者 普燕 李轶杰 张富春 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2013年第8期13-19,共7页
摘要凝乳酶能够专一性裂解κ-酪蛋白,是制造干酪的关键酶。运用大肠杆菌表达系统对牛凝乳酶原进行了原核表达和初步纯化,活化重组凝乳酶原及测定凝乳活性,对重组凝乳酶的酶学特性进行分析。结果表明i大肠杆菌表达的重组蛋白约占菌体... 摘要凝乳酶能够专一性裂解κ-酪蛋白,是制造干酪的关键酶。运用大肠杆菌表达系统对牛凝乳酶原进行了原核表达和初步纯化,活化重组凝乳酶原及测定凝乳活性,对重组凝乳酶的酶学特性进行分析。结果表明i大肠杆菌表达的重组蛋白约占菌体总蛋白的66.3%,每升培养液可纯化约200mg的重组凝乳酶原,活化后的凝乳酶活力可达600000SU/g。经测定凝乳酶最适作用温度为57~62℃,并在pH2~7、低于40℃的温度范围内稳定。金属离子中Al3+,Fe3+和Cu2+能显著增强酶活;胃蛋白酶抑制剂pepstatinA对酶有明显的抑制作用。 展开更多
关键词 牛凝乳酶原 凝乳酶 原核表达 凝乳酶活力 酶学特性
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牛凝乳酶原基因在大肠杆菌中的高效表达及活性检测 被引量:3
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作者 张俊瑞 马夏吟 +1 位作者 张红星 郝彦玲 《中国乳品工业》 CAS 北大核心 2012年第3期4-6,共3页
以实验室保存的携带凝乳酶原前体基因的重组载体pMD 19-T/bPPC为模板克隆凝乳酶原基因,经双酶切后与载体pET-30a连接得到重组载体pET-30a/bPC,转化大肠杆菌BL21(DE3),经IPTG诱导后,采用SDS-PAGE检测目的蛋白表达情况。重组蛋白经变性/... 以实验室保存的携带凝乳酶原前体基因的重组载体pMD 19-T/bPPC为模板克隆凝乳酶原基因,经双酶切后与载体pET-30a连接得到重组载体pET-30a/bPC,转化大肠杆菌BL21(DE3),经IPTG诱导后,采用SDS-PAGE检测目的蛋白表达情况。重组蛋白经变性/复性、DEAE-Sepharose Fast Flow纯化和自催化后检测凝乳活性。结果表明,重组凝乳酶原基因在大肠杆菌中高效表达,表达量占菌体总蛋白的68%,采用Arima K方法检测,其凝乳活力达到80 SU/mL。因此,通过大肠杆菌表达系统大量制备具有生物活性的重组牛凝乳酶原的策略是可行的,研究结果为弥补国内天然牛凝乳酶的短缺提供一种途径。 展开更多
关键词 牛凝乳酶原 高效表达 大肠杆菌BL21(DE3) 凝乳活性
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羔羊皱胃酶提取技术的研究 被引量:2
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作者 张富新 陈锦屏 《食品工业科技》 CAS CSCD 北大核心 2002年第12期49-51,共3页
以2周龄羔羊皱胃酶为原料,研究了食盐浓度、酒精浓度、pH以及提取液与皱胃粉比例(v/w)对羔羊皱胃酶提取效果的影响。结果表明,酒精浓度对提取效果无明显影响;当提取液中食盐浓度为5%、pH为4、提取液与皱胃粉比例为20∶1时,提取羔羊皱胃... 以2周龄羔羊皱胃酶为原料,研究了食盐浓度、酒精浓度、pH以及提取液与皱胃粉比例(v/w)对羔羊皱胃酶提取效果的影响。结果表明,酒精浓度对提取效果无明显影响;当提取液中食盐浓度为5%、pH为4、提取液与皱胃粉比例为20∶1时,提取羔羊皱胃酶凝乳活性最高。 展开更多
关键词 羔羊皱胃酶 凝乳活性 提取技术 干酪生产
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超声处理对羔羊皱胃酶比活的影响
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作者 王毕妮 张富新 《华北农学报》 CSCD 北大核心 2006年第3期129-132,共4页
以2周龄羔羊皱胃为原料,研究了超声强度、超声提取时间、食盐浓度以及皱胃黏膜与提取液的比率(W/V)对羔羊皱胃酶比活的影响,并进行验证试验。结果表明,此4因素对羔羊皱胃酶的比活均有极显著的影响,超声强度和皱胃黏膜与提取液比率、提... 以2周龄羔羊皱胃为原料,研究了超声强度、超声提取时间、食盐浓度以及皱胃黏膜与提取液的比率(W/V)对羔羊皱胃酶比活的影响,并进行验证试验。结果表明,此4因素对羔羊皱胃酶的比活均有极显著的影响,超声强度和皱胃黏膜与提取液比率、提取时间和皱胃黏膜与提取液比率间还存有交互作用,且对酶比活也有显著的影响。超声提取羔羊皱胃酶的最优条件为:超声强度38 W/cm2下处理25 min,提取液浓度14%,皱胃与提取液比率1∶30,预测出提取羔羊皱胃酶的比活最高可达267.320 SU/mg,与试验值无显著差异。 展开更多
关键词 超声提取 羔羊皱胃酶 比活
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发酵法生产凝乳酶的概述 被引量:6
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作者 王明强 张惟广 《四川食品与发酵》 2008年第2期21-24,共4页
凝乳酶是干酪生产过程中的关键性酶,其主要作用是凝聚牛奶中的酪蛋白。本文简要介绍了凝乳酶的起源和它的凝乳机制。并着重阐述了微生物源凝乳酶的特点及研究者们在提高微生物凝乳酶活性降低其蛋白分解活力上所做的研究。
关键词 微生物凝乳酶 酶活性 基因工程
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