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基于微流控芯片的荧光定量PCR法快速检测乙肝病毒核酸
被引量：
16
1
作者
王可可
杨柯
+3 位作者
赵俊
朱灿灿
朱灵
刘勇
《分析科学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2018年第4期450-454,共5页
提出了一种基于微流控荧光定量聚合酶链式反应(Polymerase Chain Reaction,PCR)的血液病毒快速检测新技术。采用3D打印技术制作了一种集气动阀和"树型"结构为一体的微流控芯片;运用Comsol软件对芯片导热性能进行了仿真;根据...
提出了一种基于微流控荧光定量聚合酶链式反应(Polymerase Chain Reaction,PCR)的血液病毒快速检测新技术。采用3D打印技术制作了一种集气动阀和"树型"结构为一体的微流控芯片;运用Comsol软件对芯片导热性能进行了仿真;根据血站血液核酸检测工作中乙型肝炎病毒(HBV)、丙型肝炎病毒(HCV)、人类免缺陷病毒(HIV)三种病毒的筛查流程,结合高温控性能的微流控荧光定量PCR分析系统,在所设计微流控芯片上开展了血液样本中HBV的检测研究。实验结果表明,该芯片具有良好的温度均匀性和导热性,芯片上可实现血液样本中HBV的快速检测,其Ct值在37左右呈弱阳性。该技术与目前血液筛查使用的大型核酸检测系统相比,具有操作过程简单、所占空间小、检测效率高且试剂消耗量少的优点,进一步优化实验条件可实现多病毒核酸的并行检测。
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关键词
3D打印
微流控芯片
HBV检测
Comsol
荧光定量
pcr
下载PDF
职称材料
5种主要海水养殖病原菌多重微流控荧光定量PCR快速检测技术的建立
被引量：
4
2
作者
徐媛媛
于永翔
+5 位作者
王印庚
王春元
李永杰
刘定远
秦蕾
张正
《渔业科学进展》
CSCD
北大核心
2023年第3期222-234,共13页
在养殖现场开展多病原的快速检测是水产养殖产业健康发展的重要技术需求之一。本研究选取哈维氏弧菌(Vibrio harveyi)的vhhA基因、副溶血弧菌(Vibrio parahaemolyticus)的toxR基因、大菱鲆弧菌(Vibrio scophthalmi)的luxR基因、鳗弧菌(V...
在养殖现场开展多病原的快速检测是水产养殖产业健康发展的重要技术需求之一。本研究选取哈维氏弧菌(Vibrio harveyi)的vhhA基因、副溶血弧菌(Vibrio parahaemolyticus)的toxR基因、大菱鲆弧菌(Vibrio scophthalmi)的luxR基因、鳗弧菌(Vibrio anguillarum)的empA基因和美人鱼发光杆菌美人鱼亚种(Photobacterium damselae subsp.damselae)的Mcp基因作为靶基因,设计特异性引物,通过优化反应体系和条件,并在微流控芯片进行集成,建立了可同步检测这5种病原菌的多重微流控荧光定量PCR检测技术。结果显示,本研究所建立的检测技术最佳反应体系:2×Taq Pro Universal SYBR qPCR Master Mix 5μL,Primer F/R各1μL,DNA模板2μL,ddH_(2)O 1μL。反应条件为95℃30 s,95℃5 s,61℃30 s,扩增30个循环。通过绘制标准曲线发现,在10^(9)~10^(4)copies/μL浓度范围内均有良好的线性相关性。该方法对哈维氏弧菌、副溶血弧菌、大菱鲆弧菌、鳗弧菌和美人鱼发光杆菌美人鱼亚种特异性强,对5种病原菌的最低检测限分别为40、20、200、500和20 CFU/mL,显示出较高的灵敏度,且样品平均检测时间缩短至26 min左右。本研究结果为开发水产养殖多病原快速、精准的现场检测技术奠定了重要基础。
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关键词
哈维氏弧菌
副溶血弧菌
大菱鲆弧菌
鳗弧菌
美人鱼发光杆菌美人鱼亚种
微流控
pcr
现场快速检测
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职称材料
题名
基于微流控芯片的荧光定量PCR法快速检测乙肝病毒核酸
被引量：
16
1
作者
王可可
杨柯
赵俊
朱灿灿
朱灵
刘勇
机构
中国科学院合肥物质科学研究院应用技术研究所安徽省生物医学光学仪器工程技术研究中心安徽省医用光学诊疗技术与装备工程实验室
中国科学技术大学
出处
《分析科学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2018年第4期450-454,共5页
基金
国家自然科学基金(No.61504152)
安徽省科技重大专项(No.16030801123)
+1 种基金
安徽省自然科学基金(No.1608085QF135)
安徽省国际科技合作计划(No.1704e1002224)
文摘
提出了一种基于微流控荧光定量聚合酶链式反应(Polymerase Chain Reaction,PCR)的血液病毒快速检测新技术。采用3D打印技术制作了一种集气动阀和"树型"结构为一体的微流控芯片;运用Comsol软件对芯片导热性能进行了仿真;根据血站血液核酸检测工作中乙型肝炎病毒(HBV)、丙型肝炎病毒(HCV)、人类免缺陷病毒(HIV)三种病毒的筛查流程,结合高温控性能的微流控荧光定量PCR分析系统,在所设计微流控芯片上开展了血液样本中HBV的检测研究。实验结果表明,该芯片具有良好的温度均匀性和导热性,芯片上可实现血液样本中HBV的快速检测,其Ct值在37左右呈弱阳性。该技术与目前血液筛查使用的大型核酸检测系统相比,具有操作过程简单、所占空间小、检测效率高且试剂消耗量少的优点,进一步优化实验条件可实现多病毒核酸的并行检测。
关键词
3D打印
微流控芯片
HBV检测
Comsol
荧光定量
pcr
Keywords
3D
printing
microfluidic
chip
HBV
detection
Comsol
fluorescence
quantitative pcr
分类号
O657 [理学—分析化学]
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职称材料
题名
5种主要海水养殖病原菌多重微流控荧光定量PCR快速检测技术的建立
被引量：
4
2
作者
徐媛媛
于永翔
王印庚
王春元
李永杰
刘定远
秦蕾
张正
机构
江苏海洋大学
农业农村部海水养殖病害防治重点实验室、中国水产科学研究院黄海水产研究所
青岛海洋科学与技术试点国家实验室海洋渔业科学与食品产出过程功能实验室
出处
《渔业科学进展》
CSCD
北大核心
2023年第3期222-234,共13页
基金
国家重点研发计划课题(2019YFD0900104)
山东省自然科学基金项目(ZR2020QC216
+1 种基金
ZR2021MC027)
江苏省研究生科研与实践计划项目(SJCX20_1288)共同资助。
文摘
在养殖现场开展多病原的快速检测是水产养殖产业健康发展的重要技术需求之一。本研究选取哈维氏弧菌(Vibrio harveyi)的vhhA基因、副溶血弧菌(Vibrio parahaemolyticus)的toxR基因、大菱鲆弧菌(Vibrio scophthalmi)的luxR基因、鳗弧菌(Vibrio anguillarum)的empA基因和美人鱼发光杆菌美人鱼亚种(Photobacterium damselae subsp.damselae)的Mcp基因作为靶基因,设计特异性引物,通过优化反应体系和条件,并在微流控芯片进行集成,建立了可同步检测这5种病原菌的多重微流控荧光定量PCR检测技术。结果显示,本研究所建立的检测技术最佳反应体系:2×Taq Pro Universal SYBR qPCR Master Mix 5μL,Primer F/R各1μL,DNA模板2μL,ddH_(2)O 1μL。反应条件为95℃30 s,95℃5 s,61℃30 s,扩增30个循环。通过绘制标准曲线发现,在10^(9)~10^(4)copies/μL浓度范围内均有良好的线性相关性。该方法对哈维氏弧菌、副溶血弧菌、大菱鲆弧菌、鳗弧菌和美人鱼发光杆菌美人鱼亚种特异性强,对5种病原菌的最低检测限分别为40、20、200、500和20 CFU/mL,显示出较高的灵敏度,且样品平均检测时间缩短至26 min左右。本研究结果为开发水产养殖多病原快速、精准的现场检测技术奠定了重要基础。
关键词
哈维氏弧菌
副溶血弧菌
大菱鲆弧菌
鳗弧菌
美人鱼发光杆菌美人鱼亚种
微流控
pcr
现场快速检测
Keywords
Vibrio
harveyi
Vibrio
parahaemolyticus
Vibrio
scophthalmi
Vibrio
anguillarum
Photobacterium
damselae
subsp.damselae
microfluidic
fluorescence
quantitative pcr
On-site
rapid
detection
分类号
S917.1 [农业科学—水产科学]
下载PDF
职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
基于微流控芯片的荧光定量PCR法快速检测乙肝病毒核酸
王可可
杨柯
赵俊
朱灿灿
朱灵
刘勇
《分析科学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2018
16
下载PDF
职称材料
2
5种主要海水养殖病原菌多重微流控荧光定量PCR快速检测技术的建立
徐媛媛
于永翔
王印庚
王春元
李永杰
刘定远
秦蕾
张正
《渔业科学进展》
CSCD
北大核心
2023
4
下载PDF
职称材料
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