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准噶尔小胸鳖甲抗冻蛋白MPAFP5毕赤酵母表达产物的理化性质
被引量：
7
1
作者
吕国栋
孙洁
+1 位作者
马纪
张富春
《昆虫知识》
CAS
CSCD
北大核心
2006年第6期821-826,共6页
研究准噶尔小胸鳖甲Microdera punctipennis dzhungarica Kasz抗冻蛋白MPAFP5真核表达产物的功能及理化性质。首先用硫酸铵浓度梯度沉淀初步纯化酵母真核表达产物,然后通过细菌低温保护实验检测抗冻蛋白MPAFP5低温保护功能,同时探讨抗...
研究准噶尔小胸鳖甲Microdera punctipennis dzhungarica Kasz抗冻蛋白MPAFP5真核表达产物的功能及理化性质。首先用硫酸铵浓度梯度沉淀初步纯化酵母真核表达产物,然后通过细菌低温保护实验检测抗冻蛋白MPAFP5低温保护功能,同时探讨抗冻蛋白MPAFP5在酸碱环境和100℃时的稳定性,并通过等电聚焦凝胶电泳检测其等电点。研究表明MPAFP5真核表达产物在低温下能够提高细菌的存活率,能够耐受高温和一定程度的强酸强碱,其等电点约为5.8左右。准噶尔小胸鳖甲抗冻蛋白MPAFP5真核表达产物与赤翅甲抗冻蛋白(DAFP)的比较表明拟步甲类昆虫抗冻蛋白具有相似的理化性质。
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关键词
准噶尔小胸鳖甲
抗冻蛋白
理化性质
等电点
下载PDF
职称材料
准噶尔小胸鳖甲融合抗冻蛋白活性的比较研究
被引量：
4
2
作者
李素丽
张富春
+2 位作者
孙琳杰
刘璇
马纪
《昆虫学报》
CAS
CSCD
北大核心
2008年第7期694-699,共6页
为了比较准噶尔小胸鳖甲Microdera punctipennis dzhungarica原核表达的不同融合抗冻蛋白活性是否存在差异,分别利用重组表达质粒pGEX-4T-1-Mpafp5和pMAL-p2x-Mpafp5在大肠杆菌Escherichia coliBL21(DE3)中诱导表达融合抗冻蛋白GST-MpA...
为了比较准噶尔小胸鳖甲Microdera punctipennis dzhungarica原核表达的不同融合抗冻蛋白活性是否存在差异,分别利用重组表达质粒pGEX-4T-1-Mpafp5和pMAL-p2x-Mpafp5在大肠杆菌Escherichia coliBL21(DE3)中诱导表达融合抗冻蛋白GST-MpAFP5和MBP-MpAFP5,并利用亲和层析纯化蛋白。SDS-PAGE分析结果证明获得了两种高效表达纯化的GST-MpAFP5和MBP-MpAFP5融合蛋白。在浓度为0.5mg/mL时,两种蛋白的热滞值分别为0.51℃和1.336℃,其溶液冰晶形态均为棱型。抗冻保护实验结果显示:准噶尔小胸鳖甲两种融合抗冻蛋白均能够显著提高细菌在低温下的存活率,并且MBP-MpAFP5对细菌的保护效果显著高于GST-MpAFP5。研究结果对于准噶尔小胸鳖甲抗冻蛋白的应用具有重要的理论意义。
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关键词
准噶尔小胸鳖甲
抗冻蛋白
原核表达
热滞活性
冰晶形态
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职称材料
准噶尔小胸鳖甲抗冻蛋白MpAFP698在真核细胞中的表达与鉴定
被引量：
1
3
作者
姜敏
于继云
+1 位作者
李晨晨
马纪
《生物技术通讯》
CAS
2011年第2期154-157,共4页
目的:构建真核表达质粒pEGFP-N1-mpafp698,转染人胚肾293T细胞,并表达准噶尔小胸鳖甲抗冻蛋白MpAFP698。方法:PCR扩增出mpafp698序列,将其克隆入本室保存的真核表达载体pEGFP-N1中,转染293T细胞;利用RT-PCR、流式细胞仪、免疫荧光、West...
目的:构建真核表达质粒pEGFP-N1-mpafp698,转染人胚肾293T细胞,并表达准噶尔小胸鳖甲抗冻蛋白MpAFP698。方法:PCR扩增出mpafp698序列,将其克隆入本室保存的真核表达载体pEGFP-N1中,转染293T细胞;利用RT-PCR、流式细胞仪、免疫荧光、Western印迹检测蛋白表达。结果:构建了真核表达载体pEGFP-N1-mpafp698,在转染后24 h可检测到绿色荧光的表达,而对照组则没有检测到荧光蛋白;Western印迹结果显示表达蛋白的相对分子质量约37 000。结论:为准噶尔小胸鳖甲抗冻蛋白的细胞表达及功能研究奠定了基础。
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关键词
准噶尔小胸鳖甲
抗冻蛋白
细胞表达
下载PDF
职称材料
题名
准噶尔小胸鳖甲抗冻蛋白MPAFP5毕赤酵母表达产物的理化性质
被引量：
7
1
作者
吕国栋
孙洁
马纪
张富春
机构
新疆大学生命科学与技术学院分子生物学重点实验室
出处
《昆虫知识》
CAS
CSCD
北大核心
2006年第6期821-826,共6页
基金
科技部重大基础研究前期研究专项(2003CCA01000)
新疆生物资源基因工程重点实验室开放课题(XJDX0201-200403)
文摘
研究准噶尔小胸鳖甲Microdera punctipennis dzhungarica Kasz抗冻蛋白MPAFP5真核表达产物的功能及理化性质。首先用硫酸铵浓度梯度沉淀初步纯化酵母真核表达产物,然后通过细菌低温保护实验检测抗冻蛋白MPAFP5低温保护功能,同时探讨抗冻蛋白MPAFP5在酸碱环境和100℃时的稳定性,并通过等电聚焦凝胶电泳检测其等电点。研究表明MPAFP5真核表达产物在低温下能够提高细菌的存活率,能够耐受高温和一定程度的强酸强碱,其等电点约为5.8左右。准噶尔小胸鳖甲抗冻蛋白MPAFP5真核表达产物与赤翅甲抗冻蛋白(DAFP)的比较表明拟步甲类昆虫抗冻蛋白具有相似的理化性质。
关键词
准噶尔小胸鳖甲
抗冻蛋白
理化性质
等电点
Keywords
microdera
punctipennis
dzhungarica
,
antifreeze
protein,
physical-chemical
properties,
isoelectric
focusing
point
分类号
Q966 [生物学—昆虫学]
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职称材料
题名
准噶尔小胸鳖甲融合抗冻蛋白活性的比较研究
被引量：
4
2
作者
李素丽
张富春
孙琳杰
刘璇
马纪
机构
新疆大学生命科学与技术学院新疆生物资源基因工程重点实验室
出处
《昆虫学报》
CAS
CSCD
北大核心
2008年第7期694-699,共6页
基金
国家自然科学基金项目(30760056)
新疆生物资源基因工程重点实验室开放课题(XJDX0201-200804)
文摘
为了比较准噶尔小胸鳖甲Microdera punctipennis dzhungarica原核表达的不同融合抗冻蛋白活性是否存在差异,分别利用重组表达质粒pGEX-4T-1-Mpafp5和pMAL-p2x-Mpafp5在大肠杆菌Escherichia coliBL21(DE3)中诱导表达融合抗冻蛋白GST-MpAFP5和MBP-MpAFP5,并利用亲和层析纯化蛋白。SDS-PAGE分析结果证明获得了两种高效表达纯化的GST-MpAFP5和MBP-MpAFP5融合蛋白。在浓度为0.5mg/mL时,两种蛋白的热滞值分别为0.51℃和1.336℃,其溶液冰晶形态均为棱型。抗冻保护实验结果显示:准噶尔小胸鳖甲两种融合抗冻蛋白均能够显著提高细菌在低温下的存活率,并且MBP-MpAFP5对细菌的保护效果显著高于GST-MpAFP5。研究结果对于准噶尔小胸鳖甲抗冻蛋白的应用具有重要的理论意义。
关键词
准噶尔小胸鳖甲
抗冻蛋白
原核表达
热滞活性
冰晶形态
Keywords
microdera
punctipennis
dzhungarica
antifreeze
protein
prokaryotic
expression
thermalhysteresis
activity
ice
crystal
morphology
分类号
Q966 [生物学—昆虫学]
下载PDF
职称材料
题名
准噶尔小胸鳖甲抗冻蛋白MpAFP698在真核细胞中的表达与鉴定
被引量：
1
3
作者
姜敏
于继云
李晨晨
马纪
机构
新疆大学生命科学与技术学院新疆生物资源基因工程重点实验室
军事医学科学院基础医学研究所
出处
《生物技术通讯》
CAS
2011年第2期154-157,共4页
基金
国家自然科学基金(30760056)
新疆生物资源基因工程重点实验室开放课题(XJDX0201-200804)
文摘
目的:构建真核表达质粒pEGFP-N1-mpafp698,转染人胚肾293T细胞,并表达准噶尔小胸鳖甲抗冻蛋白MpAFP698。方法:PCR扩增出mpafp698序列,将其克隆入本室保存的真核表达载体pEGFP-N1中,转染293T细胞;利用RT-PCR、流式细胞仪、免疫荧光、Western印迹检测蛋白表达。结果:构建了真核表达载体pEGFP-N1-mpafp698,在转染后24 h可检测到绿色荧光的表达,而对照组则没有检测到荧光蛋白;Western印迹结果显示表达蛋白的相对分子质量约37 000。结论:为准噶尔小胸鳖甲抗冻蛋白的细胞表达及功能研究奠定了基础。
关键词
准噶尔小胸鳖甲
抗冻蛋白
细胞表达
Keywords
microdera
punctipennis
dzhungarica
antifreeze
protein
cell
expression
分类号
Q78 [生物学—分子生物学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
准噶尔小胸鳖甲抗冻蛋白MPAFP5毕赤酵母表达产物的理化性质
吕国栋
孙洁
马纪
张富春
《昆虫知识》
CAS
CSCD
北大核心
2006
7
下载PDF
职称材料
2
准噶尔小胸鳖甲融合抗冻蛋白活性的比较研究
李素丽
张富春
孙琳杰
刘璇
马纪
《昆虫学报》
CAS
CSCD
北大核心
2008
4
下载PDF
职称材料
3
准噶尔小胸鳖甲抗冻蛋白MpAFP698在真核细胞中的表达与鉴定
姜敏
于继云
李晨晨
马纪
《生物技术通讯》
CAS
2011
1
下载PDF
职称材料
已选择
0
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