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微小RNA-646/CXC型趋化因子配体10轴对肝癌侵袭及其相关蛋白的影响 被引量：3
1
作者 王哲 张朕 +3 位作者 冯延冰 刘蕾 裴正浩 乔兵兵 《中华实验外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第9期1720-1723,共4页
目的观察微小RNA(miRNA,miR)-646/CXC型趋化因子配体10(CXCL10)轴对肝癌侵袭的影响并探讨其分子机制。方法选取2018年6月到2020年1月南阳市中心医院收集的108例肝癌组织和对应癌旁组织作为研究对象,采用荧光定量聚合酶链反应(PCR)分析mi... 目的观察微小RNA(miRNA,miR)-646/CXC型趋化因子配体10(CXCL10)轴对肝癌侵袭的影响并探讨其分子机制。方法选取2018年6月到2020年1月南阳市中心医院收集的108例肝癌组织和对应癌旁组织作为研究对象,采用荧光定量聚合酶链反应(PCR)分析miR-646表达水平。采用Lipofectamine 2000转染miR-646 mimic和对照mimic至肝癌细胞MHCC97H,转染48 h后采用Transwell分析细胞侵袭能力;采用生物信息学和双荧光素酶报告基因分析miR-646的靶基因,采用蛋白质印迹法(Western blot)分析细胞和肿瘤组织中CXCL10蛋白表达水平。组间数据比较采用t检验。结果与癌旁组织(1.10±0.19)比较,肝癌组织中miR-646表达水平(0.44±0.17)显著下调,差异有统计学意义。与对照组细胞[(108.55±12.35)个]比较,实验组细胞侵袭数量[(45.36±8.99)个]显著下调,差异有统计学意义。生物信息学和双荧光素酶报告基因显示CXCL10是miR-646的靶基因。与癌旁组织(0.68±0.10)比较,肝癌组织中CXCL10表达水平(1.33±0.21)显著上调,差异有统计学意义。与对照组细胞(0.54±0.11)比较,实验组细胞表CXCL10表达水平(0.21±0.09)显著下调,差异有统计学意义。与癌旁组织基质金属蛋白酶(MMP)-2和MMP-9蛋白表达水平(0.85±0.19和0.58±0.18)比较,肝癌组织中MMP-2和MMP-9表达水平(1.75±0.25和1.49±0.18)显著增加,差异有统计学意义。与对照组细胞MMP-2和MMP-9表达水平(1.24±0.14、1.16±0.18)比较,实验组细胞MMP-9和MMP-2表达水平(0.37±0.12、0.18±0.08)显著下调,差异有统计学意义(t=3.018、5.091,P<0.05)。结论miR-646通过靶向CXCL10调节肝癌细胞的侵袭能力。 展开更多
关键词 微小RNA-646 肝癌 侵袭 CXC型趋化因子配体10
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microRNA-646在脂多糖处理后的A549细胞中的表达及功能分析 被引量：1
2
作者 王斌 程东良 +2 位作者 王淋立 杜江 周细中 《中华实用儿科临床杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第6期452-455,共4页
目的检测microRNA-646（miR-646）在不同浓度脂多糖处理后的A549细胞中表达量的变化，并探讨其可能机制。方法实验分为对照组及实验组，对照组以RPMI-1640培养液处理A549细胞24h，实验组分别以5、10、15mg／L的脂多糖处理A549细胞24h。... 目的检测microRNA-646（miR-646）在不同浓度脂多糖处理后的A549细胞中表达量的变化，并探讨其可能机制。方法实验分为对照组及实验组，对照组以RPMI-1640培养液处理A549细胞24h，实验组分别以5、10、15mg／L的脂多糖处理A549细胞24h。通过免疫细胞化学染色、Westernblot法检测各组细胞中的肺表面活性蛋白A（SP-A）、肺表面活性蛋白C（SP-C）的表达量。实时荧光定量PCR法检测各组细胞中miR．646的表达量。结果实验组不同浓度脂多糖处理细胞的SP-A的表达量较对照组均下降，差异具有统计学意义（P均〈0．05），且SP—A的下降呈药物浓度依赖性；实验组不同浓度脂多糖处理细胞的SP-C的表达量较对照组均下降，差异具有统计学意义（P均〈0．05），其中10mg／L脂多糖处理组的SP—C表达量最低。miR-646在对照组的相对表达量为0．9597±0．0200，5mg／L脂多糖处理组的相对表达量为1．6319±0．1325，10mg／L脂多糖处理组的相对表达量为2．4762±0．1380，15mg／L脂多糖处理组的相对表达量为1．6642±0．0938，实验组与对照组比较差异均有统计学意义（P均〈0．01）。结论miR-646可能通过抑制SP-C的翻译，在急性呼吸窘迫综合征过程中发挥生物学功能。 展开更多
关键词 microrna-646 急性呼吸窘迫综合征 肺表面活性蛋白C A549细胞
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miR-646调控BIRC5基因表达对结直肠癌细胞增殖与侵袭的影响
3
作者 李红海 吴俊梅 周江浩 《中国病原生物学杂志》 CSCD 北大核心 2021年第8期955-959,共5页
目的检测微小RNA-646(miR-646)与含杆状病毒凋亡抑制蛋白重复序列蛋白5(BIRC5)基因在结直肠癌组织表达情况,探讨miR-646对结直肠癌细胞(HT-29)增殖、迁移及侵袭的影响。方法 2018年4月-2020年12月在本院行手术治疗的结直肠癌患者72例,... 目的检测微小RNA-646(miR-646)与含杆状病毒凋亡抑制蛋白重复序列蛋白5(BIRC5)基因在结直肠癌组织表达情况,探讨miR-646对结直肠癌细胞(HT-29)增殖、迁移及侵袭的影响。方法 2018年4月-2020年12月在本院行手术治疗的结直肠癌患者72例,手术中取结直肠癌组织及癌旁组织标本,采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测miR-646、BIRC5 mRNA表达水平。体外培养结直肠癌细胞系HT-29细胞并随机分为对照组、miR-646阴性对照(NC)组和miR-646模拟物(mimics)组(设正常结肠上皮细胞CCD841对照),RT-qPCR检测各组HT-29细胞miR-646、BIRC5 mRNA的表达;MTT法检测HT-29细胞存活率变化;Transwell小室法检测HT-29细胞迁移与侵袭情况;Western blot检测HT-29细胞凋亡抑制蛋白Survivin、基质金属蛋白酶2(MMP-2)及MMP-9表达的变化;双荧光素酶报告验验证miR-646与BIRC5基因的靶向关系。结果与癌旁组织和正常结肠上皮细胞CCD841细胞比较,结直肠癌组织与HT-29细胞miR-646相对表达水平显著降低,BIRC5 mRNA相对表达水平显著升高(P<0.05)。targetscan数据库预测miR-646与BIRC5基因3’UTR区有结合位点。与BIRC5-3’UTR-WT+miR-646 NC组(0.81±0.09)比较,BIRC5-3’UTR-WT+miR-646 mimics组(0.28±0.04)荧光素酶活性降低(P<0.05);与对照组[(3.04±0.21)个、(3.41±0.24)个、(98.56±0.64)%]和miR-646 NC组[(2.96±0.25)个、(3.32±0.23)个、(97.94±0.57)%]相比,miR-646 mimics组HT-29细胞miR-646表达水平显著升高(P<0.05),细胞存活率[(47.34±1.78)%]、迁移数[(1.35±0.08)个]与侵袭数[(1.48±0.05)个]、BIRC5和Survivin蛋白、MMP-2和MMP-9蛋白表达水平均显著降低(均P<0.05)。结论 miR-646与BIRC5基因存在靶向关系,可能通过靶向抑制BIRC5基因的表达抑制HT-29细胞的增殖、迁移与侵袭。 展开更多
关键词 微小RNA-646 含杆状病毒凋亡抑制蛋白重复序列蛋白5 结直肠癌细胞 增殖 侵袭
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