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miR-224-3p通过抑制TLR4改善高糖诱导的大鼠肾小管上皮细胞的炎性反应 被引量:6
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作者 胡绍兰 孙蓓 +3 位作者 韩菲 李晓喻 薛梅 陈莉明 《临床合理用药杂志》 2017年第22期52-53,共2页
目的探讨miR-224-3p在改善高糖诱导的大鼠肾小管上皮细胞(NRK-52E)炎性反应中的作用及机制。方法应用qRT-PCR检测不同糖浓度培养的NRK-52E细胞中miR-224-3p的表达,向高糖培养的NRK-52E细胞中转染miR-224-3p mimics,应用qRT-PCR及Western... 目的探讨miR-224-3p在改善高糖诱导的大鼠肾小管上皮细胞(NRK-52E)炎性反应中的作用及机制。方法应用qRT-PCR检测不同糖浓度培养的NRK-52E细胞中miR-224-3p的表达,向高糖培养的NRK-52E细胞中转染miR-224-3p mimics,应用qRT-PCR及Western-blot分别检测Toll样受体4(TLR4)、细胞核转录因子(NF-κB)和转化生长因子-1(TGF-β1)mRNA和蛋白的表达。结果高糖培养的NRK-52E细胞中miR-224-3p表达明显降低(P<0.05),TLR4、NF-κB和TGF-β1的表达明显增加(P<0.05),转染miR-224-3p mimics后TLR4、NF-κB和TGF-β1的表达明显降低(P<0.05)。结论在高糖培养的NRK-52E细胞中,miR-224-3p通过抑制TLR4的表达改善高糖诱导的大鼠肾小管上皮细胞炎性反应。 展开更多
关键词 微小RNA microrna-224-3p 炎性反应 糖尿病肾病
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LINC00657对氧糖剥夺诱导的小鼠海马神经元细胞损伤的影响及机制研究
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作者 史倩 王保奇 +1 位作者 齐桃桃 鲍汉中 《实用临床医药杂志》 CAS 2024年第13期82-86,共5页
目的探讨LINC00657对氧糖剥夺(OGD)诱导的小鼠海马神经元细胞损伤的影响及作用机制。方法对小鼠海马神经元细胞HT22进行OGD处理,建立损伤模型,将正常培养的HT22细胞作为对照;将si-NC、si-LINC00657、微小RNA(miR)-NC、miR-224-3p mimic... 目的探讨LINC00657对氧糖剥夺(OGD)诱导的小鼠海马神经元细胞损伤的影响及作用机制。方法对小鼠海马神经元细胞HT22进行OGD处理,建立损伤模型,将正常培养的HT22细胞作为对照;将si-NC、si-LINC00657、微小RNA(miR)-NC、miR-224-3p mimics分别转染至HT22细胞,然后进行OGD处理;向HT22细胞共转染si-LINC00657和anti-miR-NC,或共转染si-LINC00657和anti-miR-224-3p,然后进行OGD处理。采用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测LINC00657、miR-224-3p相对表达量;采用CCK-8法、流式细胞术分别检测细胞存活率、细胞凋亡率;采用试剂盒检测乳酸脱氢酶(LDH)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性和丙二醛(MDA)水平;采用双荧光素酶报告基因实验检测miR-224-3p过表达对野生型LINC00657载体(WT-LINC00657)、突变型LINC00657载体(MUT-LINC00657)荧光素酶活性的影响。结果与对照细胞相比,OGD诱导的HT22细胞中LINC00657表达上调,miR-224-3p表达下调,差异有统计学意义(P<0.05);分别与转染si-NC或转染miR-NC相比,转染si-LINC00657或转染miR-224-3p mimics后,细胞存活率、SOD活性和GSH-Px活性升高,细胞凋亡率、LDH活性和MDA水平降低,差异有统计学意义(P<0.05);miR-224-3p过表达降低了WT-LINC00657的荧光素酶活性,差异有统计学意义(P<0.05);与共转染si-LINC00657和anti-miR-NC的细胞相比,共转染si-LINC00657和anti-miR-224-3p的细胞存活率降低,细胞凋亡率升高,LDH活性、MDA水平升高,SOD、GSH-Px活性降低,差异有统计学意义(P<0.05)。结论干扰LINC00657可通过上调miR-224-3p而促进细胞增殖,并抑制细胞凋亡和氧化应激反应,从而减轻OGD诱导的小鼠海马神经元细胞损伤。 展开更多
关键词 海马神经元细胞 氧糖剥夺 LINC00657 微小RNA-224-3p 细胞增殖 细胞凋亡 氧化应激
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血清microRNA-224-3p在结直肠癌中的表达及临床研究 被引量:4
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作者 朱莹 王亚南 《国际检验医学杂志》 CAS 2019年第13期1548-1552,共5页
目的探讨microRNA-224-3p(miR-224-3p)在结直肠癌患者血清中的表达及临床意义。方法采用荧光定量PCR(SYBRGreen法)检测miR-224-3p在50例结直肠癌患者和44例健康者(健康对照组)血清中的表达量。结果血清miR-224-3p在健康对照组中的相对... 目的探讨microRNA-224-3p(miR-224-3p)在结直肠癌患者血清中的表达及临床意义。方法采用荧光定量PCR(SYBRGreen法)检测miR-224-3p在50例结直肠癌患者和44例健康者(健康对照组)血清中的表达量。结果血清miR-224-3p在健康对照组中的相对表达量中位数(四分位数)为1.04(0.80~1.40),在结直肠癌组中相对表达量为2.01(0.92~3.05),差异有统计学意义(P<0.05)。对结直肠癌患者的病理参数进行进一步分析发现,血清miR-224-3p在癌胚抗原(CEA)<10ng/mL的分组中相对表达量中位数(四分位数)为1.47(0.84~2.56),在CEA>10ng/mL的分组中相对表达量为2.96(2.22~3.39),差异有统计学意义(P<0.05),miR-224-3p和CEA联合检测,可以提高诊断的准确性。血清miR-224-3p在不同预后情况以及CEA表达水平中差异有统计学意义(P<0.05),提示血清miR-224-3p可用于结直肠癌患者的预后判断。结论在结直肠癌患者的血清中,miR-224-3p的表达量高于健康者,与CEA联合检测,有望用于结直肠癌的辅助诊断,也可用于结直肠癌的预后判断。 展开更多
关键词 结直肠癌 microrna-224-3p 荧光定量pCR
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LINC00707靶向miR-224-3p调控IL-1β诱导的软骨细胞损伤 被引量:2
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作者 徐显春 齐保闯 邱宇 《现代医学》 2021年第5期520-525,共6页
目的:探讨长基因间非编码RNA00707(LINC00707)对白细胞介素(IL)-1β诱导的软骨细胞损伤的影响及其分子机制。方法:用10 ng·ml^(-1)的IL-1β处理人软骨细胞,记为IL-1β组,正常培养的细胞作为对照组,将LINC00707抑制表达载体质粒(si-... 目的:探讨长基因间非编码RNA00707(LINC00707)对白细胞介素(IL)-1β诱导的软骨细胞损伤的影响及其分子机制。方法:用10 ng·ml^(-1)的IL-1β处理人软骨细胞,记为IL-1β组,正常培养的细胞作为对照组,将LINC00707抑制表达载体质粒(si-LINC00707)及微小RNA-224-3p过表达载体(miR-224-3p)转染至软骨细胞后用10 ng·ml^(-1)的IL-1β处理,将LINC00707抑制表达载体质粒分别与miR-224-3p抑制表达载体共转染至软骨细胞后用10 ng·ml^(-1)的IL-1β处理;实时荧光定量PCR检测LINC00707和miR-224-3p的表达水平,酶联免疫吸附试验检测IL-6、干扰素γ(IFN-γ)水平,流式细胞术检测细胞凋亡,蛋白质印迹法检测蛋白表达,双荧光素酶报告实验验证LINC00707和miR-224-3p的靶向关系。结果:与对照组相比,IL-1β组LINC00707表达水平升高,miR-224-3p表达水平降低,IL-6、IFN-γ水平升高,细胞凋亡率升高,B细胞淋巴瘤/白血病-2(Bcl-2)表达水平降低,Bcl-2相关X(Bax)表达水平升高(P <0.05)。抑制LINC00707表达或过表达miR-224-3p后,IL-1β诱导的软骨细胞中IL-6、IFN-γ水平降低,细胞凋亡率降低,Bcl-2表达水平升高,Bax表达水平降低(P <0.05)。下调miR-224-3p表达逆转了抑制LINC00707表达对IL-1β诱导的软骨细胞损伤的保护作用。LINC00707靶向调控miR-224-3p的表达。结论:抑制LINC00707表达可能通过靶向上调miR-224-3p抑制IL-1β诱导的软骨细胞损伤。 展开更多
关键词 长基因间非编码RNA00707 微小RNA-224-3p 软骨细胞 凋亡 炎症因子 损伤
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miRNA-224-3p对人结肠癌细胞株SW480的增殖及侵袭的作用 被引量:1
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作者 葛洋 刘臻 《解剖学研究》 CAS 2020年第3期233-236,240,共5页
目的探讨低表达miRNA-224-3p对结肠癌细胞株SW480增殖及侵袭的作用机制。方法采用siRNA技术沉默miRNA-224-3p在结肠癌细胞株SW480中的表达,实验分为si RNA组和NC组;采用CCK8法检测细胞增殖率;采用流式细胞术检测细胞周期分布;采用Wester... 目的探讨低表达miRNA-224-3p对结肠癌细胞株SW480增殖及侵袭的作用机制。方法采用siRNA技术沉默miRNA-224-3p在结肠癌细胞株SW480中的表达,实验分为si RNA组和NC组;采用CCK8法检测细胞增殖率;采用流式细胞术检测细胞周期分布;采用Western blot检测细胞中miRNA-224-3p、Cyclin D1以及CDK4蛋白的表达;采用Transwell小室检测细胞侵袭力。结果转染si RNA后,siRNA组中miRNA-224-3p蛋白表达明显低于NC组(P<0.05);CCK8结果表明在结肠癌细胞株在转染24 h、48 h和72 h时的细胞增殖率分别明显低于NC组(P<0.05);流式检测结果表明在siRNA组中,处于G0~G1期的SW480的细胞数量显著高于NC组(P<0.05),处于S期的SW480细胞数量显著低于NC组(P<0.05);Western blot结果表明siRNA组中的Cyclin D1和CDK4蛋白表达明显高于NC组(均P<0.05);Transwell小室检测表明siRNA组细胞的侵袭力明显低于NC组(P<0.05)。结论低表达miRNA-224-3p可显著抑制结肠癌细胞株SW480增殖和侵袭,其机制可能与阻滞细胞周期进程有关。 展开更多
关键词 结肠癌细胞 微小RNA-224-3p 增殖 侵袭 SW480细胞株
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长链非编码RNA核仁小RNA宿主基因8通过靶向微小RNA-224-3p调控肾癌细胞增殖、侵袭迁移以及顺铂敏感性
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作者 毕建朋 顾朝辉 +4 位作者 冯子煜 贾占奎 杨锦建 杨艳芳 张潍平 《中华实验外科杂志》 CAS 北大核心 2021年第11期2199-2203,共5页
目的探讨长链非编码RNA核仁小RNA宿主基因8(lncRNA SNHG8)对肾癌细胞增殖、侵袭、迁移和顺铂敏感性的影响及其分子机制。方法实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)检测SNHG8和微小RNA(miR)-224-3p表达水平;蛋白质印迹(Western blot)法检... 目的探讨长链非编码RNA核仁小RNA宿主基因8(lncRNA SNHG8)对肾癌细胞增殖、侵袭、迁移和顺铂敏感性的影响及其分子机制。方法实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)检测SNHG8和微小RNA(miR)-224-3p表达水平;蛋白质印迹(Western blot)法检测基质金属蛋白酶-2(MMP-2)、细胞增殖核抗原Ki-67(Ki-67)、裂解半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(cleaved Caspase-3)和多药耐药基因1(MDR1)蛋白表达;四甲基偶氮唑盐比色法(MTT)检测细胞存活率和顺铂半数抑制浓度(IC50);Transwell检测细胞迁移和侵袭;流式细胞术检测细胞凋亡;荧光素酶报告实验检测SNHG8和miR-224-3p的靶向关系。两组比较采用t检验。结果肾癌细胞系ACHN、786-O和A498中SNHG8高表达(1.05±0.09比4.58±0.47、6.19±0.52、5.37±0.48,t=22.130、29.219、26.538,P<0.05),miR-224-3p低表达(1.02±0.08比0.53±0.07、0.41±0.06、0.47±0.08,t=13.829、18.300、14.584,P<0.05)。与si-con组相比,si-SNHG8组,肾癌细胞786-O中MMP-2、Ki-67、MDR1表达降低,cleaved Caspase-3表达升高,细胞存活率降低[(69.86±6.37)%比(96.42±9.26)%,t=7.089,P<0.05],迁移和侵袭数[(175.64±12.20)个比(292.70±20.45)个、(92.81±8.38)个比(147.24±15.93)个,t=14.748、9.072,P<0.05]降低,凋亡率升高[(19.48±2.28)%比(4.28±0.64)%,t=19.256,P<0.05],顺铂IC50值降低(1.47±0.14比7.81±0.22,t=19.454,P<0.05)。过表达miR-224-3p后,肾癌细胞786-O中MMP-2、Ki-67、MDR1表达降低,cleaved Caspase-3表达升高,细胞存活率降低[(67.36±8.65)%比(98.24±9.53)%,t=7.198,P<0.05],迁移和侵袭数[(155.81±16.67)个比(274.73±28.61)个、(72.96±8.35)个比(156.61±14.28)个,t=10.774、15.170,P<0.05]降低,凋亡率升高[(18.49±2.28)%比(4.67±0.63)%,t=17.527,P<0.05],顺铂IC50值降低(1.79±0.15比6.72±0.26,t=49.273,P<0.05)。结论沉默SNHG8可抑制肾癌细胞786-O增殖、迁移、侵袭,促进细胞凋亡,增强其对顺铂的敏感性;其机制可能与miR-224-3p有关。 展开更多
关键词 核仁小RNA宿主基因8 微小RNA-224-3p 肾癌 增殖 侵袭 迁移 凋亡 顺铂敏感性
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