微小RNA-21-5p促进梗死心肌纤维化加重心力衰竭的作用及机制 被引量：12

1

作者 孟华 安松涛 +2 位作者 刘军 李文博 陈岩 《中国心血管杂志》 2019年第6期545-549,共5页

目的探讨微小RNA-21-5p(miR-21-5p)在心肌梗死后心力衰竭中的作用及相关机制。方法构建小鼠心肌梗死模型,利用实时荧光定量PCR方法分析梗死心肌中miR-21-5p的表达变化;构建miR-21-5p过表达慢病毒,通过在体感染合并心肌梗死小鼠模型,采... 目的探讨微小RNA-21-5p(miR-21-5p)在心肌梗死后心力衰竭中的作用及相关机制。方法构建小鼠心肌梗死模型,利用实时荧光定量PCR方法分析梗死心肌中miR-21-5p的表达变化;构建miR-21-5p过表达慢病毒,通过在体感染合并心肌梗死小鼠模型,采用超声心动图及免疫组化方法明确miR-21-5p对心肌梗死后心肌纤维化、心力衰竭的影响;体外进行miR-21-5p慢病毒感染,采用细胞划痕试验及细胞计数检测明确miR-21-5p对心脏成纤维细胞功能的影响。结果小鼠梗死心肌中miR-21-5p的表达是假手术组小鼠的1.75倍(t=8.633,P<0.01);与阴性对照组相比,miR-21-5p可导致心肌梗死后心功能进一步恶化(左室射血分数:31.62%±7.63%比42.69%±4.47%,t=2.800,P=0.02),并加重梗死心肌纤维化程度(42.61%±6.73%比23.23%±4.07%,t=3.470,P=0.01);miR-21-5p可下调Smad7表达(0.72倍,t=3.432,P=0.01),促进心脏成纤维细胞的增殖(1.42倍,t=5.855,P<0.01)和迁移能力(1.41倍,t=6.658,P<0.01)。结论miR-21-5p通过下调Smad7表达,增强心脏成纤维细胞的增殖和迁移能力,加重心肌梗死后心肌纤维化和心力衰竭。 展开更多

关键词 心肌梗死 心力衰竭 心肌纤维化 微小RNA-21-5p Smad7蛋白质

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2型糖尿病患者血清miR-21-5p与肠道菌群失调及炎症状态的关系研究 被引量：11

2

作者 蔡辉耀 杨鑫娜 +4 位作者 陈丽君 林如海 蔡清颜 林家煜 李良毅 《中国病原生物学杂志》 CSCD 北大核心 2020年第11期1344-1347,1352,共5页

目的检测2型糖尿病(T2DM)患者血清微小RNA-21-5p(miR-21-5p)与肠道菌群失调及炎症状态的关系。方法选取2018年6月-2019年6月本院收治的T2DM患者65例作为研究对象,另选取同期在本院进行体检的健康者45例作为对照组。收集受试者的一般资... 目的检测2型糖尿病(T2DM)患者血清微小RNA-21-5p(miR-21-5p)与肠道菌群失调及炎症状态的关系。方法选取2018年6月-2019年6月本院收治的T2DM患者65例作为研究对象,另选取同期在本院进行体检的健康者45例作为对照组。收集受试者的一般资料进行比较分析;采集受试者血清,采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测miR-21-5p水平,酶联免疫吸附法(ELISA)检测受试者血清高敏C反应蛋白(hs-CRP)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素-6(IL-6)、白介素-18(IL-18)水平。采集受检者粪便标本,采用平板培养法检测肠道肠球菌、肠杆菌、乳杆菌、双歧杆菌水平及双歧杆菌与肠杆菌的比值(B/E);Pearson法分析miR-21-5p与肠杆菌、乳杆菌、双歧杆菌、B/E、hs-CRP、TNF-α、IL-6、IL-18的相关性。结果与对照组相比,T2DM组血清miR-21-5p(2.34±0.35)、肠杆菌(9.08±0.65)、hs-CRP(3.41±0.62)mg/L、TNF-α(53.85±15.15)μg/L、IL-6(53.41±14.36)ng/ml、IL-18(215.62±42.46)μg/l水平升高(P<0.05);乳杆菌(9.41±0.36)、双歧杆菌(9.02±0.66)、B/E(0.96±0.19)水平降低(P<0.05)。Pearson法分析显示,miR-21-5p与肠杆菌、hs-CRP、TNF-α、IL-6、IL-18呈正相关(P<0.05),与乳杆菌、双歧杆菌、B/E水平呈负相关(P<0.05)。结论T2DM患者血清miR-21-5p水平与肠道菌群失调及炎症水平异常有关,可作为潜在的诊断指标。 展开更多

关键词 2型糖尿病 miRNA-21-5p 肠道菌群 炎症状态

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miR-21-5p过表达对高氧性急性肺损伤大鼠AECⅡ早期凋亡的影响 被引量：10

3

作者 张伟 徐乐 +4 位作者 陈淼 梅鸿 李康 覃松 刘国跃 《中华危重病急救医学》 CAS CSCD 北大核心 2019年第8期978-982,共5页

目的探讨微小RNA-21-5p(miR-21-5p)过表达对高氧性急性肺损伤(HALI)大鼠Ⅱ型肺泡上皮细胞(AECⅡ)早期凋亡的影响。方法按随机数字表法将SD大鼠分为对照组(CON组)、高氧组(H组)、过表达组(OE组)及空载体组(EV组)4组,每组20只。以吸入90%... 目的探讨微小RNA-21-5p(miR-21-5p)过表达对高氧性急性肺损伤(HALI)大鼠Ⅱ型肺泡上皮细胞(AECⅡ)早期凋亡的影响。方法按随机数字表法将SD大鼠分为对照组(CON组)、高氧组(H组)、过表达组(OE组)及空载体组(EV组)4组,每组20只。以吸入90%以上高浓度氧制备HALI动物模型;CON组则吸入空气。OE组及EV组分别经气管导管往肺内滴入miR-21-5p腺相关病毒-?6(AAV-6)过表达载体或空载体,饲养3周后制备HALI模型。各组于制模0、24、48、60h分别取5只动物,检测肺损伤相关指标,如氧合指数(OI)、呼吸指数(RI)、肺湿/干重比值(W/D)、肺组织病理评分;同时采用实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)检测AECⅡ中miR-21-5p表达,用流式细胞仪检测AECⅡ早期凋亡率。结果①肺损伤相关指标:H组OI随时间延长逐渐降低,RI、肺W/D比值及病理评分均随时间延长逐渐增高,24h即与CON组差异有统计学意义〔OI(mmHg,1mmHg=0.133kPa):336.04±5.79比400.22±19.70,RI:0.20±0.02比0.10±0.06,肺W/D比值:5.04±0.09比4.85±0.09,肺组织病理评分(分):0.13±0.01比0.07±0.01,均P<0.05〕,表明持续吸入高浓度氧可成功建立HALI模型。②miR-21-5p表达:H组、OE组及EV组AECⅡ细胞中miR-21-5p表达均随时间延长逐渐增高,且24、48、60h时miR-21-5p表达均显著高于CON组。OE组0、24、48、60h时miR-21-5p表达较H组进一步增高(2-ΔΔCt:3.75±0.11比0.98±0.14,3.98±0.12比1.18±0.13,4.28±0.18比1.49±0.06,4.66±0.12比1.80±0.12,均P<0.05)。③AECⅡ早期凋亡率:H组、OE组及EV组AECⅡ细胞早期凋亡率均随时间延长逐渐升高,且24、48、60h时细胞早期凋亡率均显著高于CON组。而OE组24、48、60h时AECⅡ早期凋亡率较H组显著降低〔(1.22±0.63)%比(2.84±0.59)%,(5.76±0.18)%比(13.10±2.01)%,(29.48±0.48)%比(49.04±1.36)%,均P<0.05〕。④EV组各时间点miR-21-5p表达和AECⅡ早期凋亡率与H组比较差异均无统计学意义。结论miR-21-5p过表达可抑制HALI大鼠AEC 展开更多

关键词 微小RNA-21-5p 高氧性急性肺损伤 肺泡上皮细胞 Ⅱ型 凋亡

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血浆微RNA联合检测在前列腺癌中的诊断价值 被引量：2

4

作者 蔡鹏 吴叶晨 +6 位作者 陈曦 张益萍 马少泽 朱小琼 胡锦新 殷建华 曹廷虎 《海军军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第1期14-20,共7页

目的分析前列腺癌患者血浆miRNA的差异表达,探索血浆miRNA联合检测在前列腺癌中的诊断潜能。方法应用基因表达汇编数据库获得前列腺癌患者血浆及血清差异表达的miRNA,通过最近邻中心分类器曲线下面积优化模型(NCC-AUC)筛选出3个权重最高... 目的分析前列腺癌患者血浆miRNA的差异表达,探索血浆miRNA联合检测在前列腺癌中的诊断潜能。方法应用基因表达汇编数据库获得前列腺癌患者血浆及血清差异表达的miRNA,通过最近邻中心分类器曲线下面积优化模型(NCC-AUC)筛选出3个权重最高的miRNA;收集上海市宝山区中西医结合医院诊治的45例前列腺癌患者(前列腺癌组)、40例慢性前列腺炎患者(前列腺炎组)和42例健康体检者(健康对照组)血浆样本,采用qPCR对候选血浆miRNA表达水平进行检测;应用ROC曲线分析候选miRNA单独及联合检测对前列腺癌的诊断价值。结果通过生物信息学分析,获得26个前列腺癌相关的差异表达miRNA,经NCC-AUC进一步筛选,miRNA-21-5p、miRNA-5189-5p和miRNA-6780a-5p权重最高,进入临床样本验证阶段。临床验证结果显示,血浆miRNA-21-5p水平在健康对照组、前列腺炎组、前列腺癌组中依次升高,3组之间差异有统计学意义(P<0.01);前列腺炎组血浆miRNA-5189-5p水平低于前列腺癌组与健康对照组(P均<0.01);前列腺癌组血浆miRNA-6780a-5p水平高于前列腺炎组和健康对照组(P均<0.01)。ROC曲线分析显示,血浆miRNA-21-5p和miRNA-6780a-5p对前列腺癌均有较好的诊断潜能(P均<0.001),AUC分别为0.695和0.787,灵敏度分别为95.6%和64.4%,特异度分别为41.5%和81.7%。miRNA-21-5p与miRNA-6780a-5p联合应用可有效提高对前列腺癌的诊断效能,AUC为0.830,灵敏度和特异度分别为82.2%和74.4%。结论血浆miRNA-21-5p和miRNA-6780a-5p均有成为前列腺癌诊断标志物的潜能,两者联合检测可提高对前列腺癌的诊断效能。 展开更多

关键词 前列腺肿瘤 微RNA-21-5p 微RNA-5189-5p 微RNA-6780a-5p 诊断

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微小RNA-21-5p靶向Smad7调控转化生长因子-β1诱导心肌纤维化促进房颤的发生 被引量：8

5

作者 朱参战 王新宏 +5 位作者 刘昕 薛嘉虹 赵玲 宋雅璠 周甜 张明娟 《临床内科杂志》 CAS 2019年第7期485-489,共5页

目的探讨微小RNA(miR)-21-5p对转化生长因子(TGF)-β1,诱导心肌纤维化从而促进房颤的影响。方法采用实时定量聚合酶链反应(RT-qPCR)和蛋白质印迹法(Western blot)检测房颤患者(AF组)和窦性心律患者(SR组)右心耳肌组织miR-21-5p、Smad7、... 目的探讨微小RNA(miR)-21-5p对转化生长因子(TGF)-β1,诱导心肌纤维化从而促进房颤的影响。方法采用实时定量聚合酶链反应(RT-qPCR)和蛋白质印迹法(Western blot)检测房颤患者(AF组)和窦性心律患者(SR组)右心耳肌组织miR-21-5p、Smad7、TGF-Bi和纤粘蛋白(Fibronecin)的表达。采用RT-qPCR和Westernblot检测过表达miR-21-5p和敲减Smad7对SD乳鼠心肌成纤维细胞TGF-β1,和Fibronecin表达的影响。釆用双荧光素酶报告基因实验验证miR-21-5p和Smad7的靶向关系。结果AF组miR-21-5p、TGF-β1 mRNA及蛋白、Fibronecin蛋白表达水平均高于SR组,Smad7 mRNA和蛋白表达水平均低于SR组(P<0.05).miR-21-5p mimics组miR-21-5p和TGF-β1、Fibronecin mRNA及蛋白表达水平均高于miR-NC组(P<0.05)。si-Smad7组TGF-Rix Fibronecin mRNA及蛋白表达水平均高于si-NC组(P<0.05)omiR-21-5pmimics与Smad73'-UTR野生型质粒共转染后SD乳鼠心肌成纤维细胞荧光素酶活性明显降低(P<0.05)。miR-21-5p mimics组Smad7 mRNA和蛋白表达水平均低于miR-NC组,TGF-β1、Fibronecin mRNA及蛋白表达水平均高于miR-NC组(P<0.05);miR-21-5pmimics+pcDNA3.1-Smad7组TGF-β1、Fibronecin mRNA及蛋白表达水平均低于miR-21-5pmimics+pcDNA3.1组(PvO.05)。结论miR-21-5p表达上调能够通过靶向抑制Smad7促进TGF-β1和Fibronecin分泌,诱导心肌纤维化。 展开更多

关键词 微小RNA-21-5p 转化生长因子-Β1 SMAD7 心肌纤维化 心房颤动

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血清miR-150-5p、miR-196a、miR-21-5p水平与宫颈癌患者病理参数的相关性

6

作者 段情 房爱芳 +1 位作者 黄相艳 李秀芳 《中国民康医学》 2024年第12期130-133,共4页

目的:探讨血清微小RNA-150-5p(miR-150-5p)、微小RNA-196a(miR-196a)、微小RNA-21-5p(miR-21-5p)水平与宫颈癌患者病理参数的相关性。方法:选取2020年1月至2023年1月该院收治的130例宫颈癌患者设为宫颈癌组,82例癌前病变患者设为癌前病... 目的:探讨血清微小RNA-150-5p(miR-150-5p)、微小RNA-196a(miR-196a)、微小RNA-21-5p(miR-21-5p)水平与宫颈癌患者病理参数的相关性。方法:选取2020年1月至2023年1月该院收治的130例宫颈癌患者设为宫颈癌组,82例癌前病变患者设为癌前病变组,同期130名健康体检者设为对照组。比较三组血清miR-150-5p、miR-196a、miR-21-5p水平,并分析其与宫颈癌患者病理参数的相关性。结果:宫颈癌组、癌前病变组血清miR-150-5p、miR-196a、miR-21-5p水平均高于对照组,且宫颈癌组高于癌前病变组,差异有统计学意义(P<0.05);不同年龄、肿瘤直径、病理类型宫颈癌患者血清miR-150-5p、miR-196a、miR-21-5p水平比较,差异均无统计学意义(P>0.05);低分化、国际妇产科联盟(FIGO)分期Ⅲ~Ⅳ期、有淋巴结转移、浸润深度>1/2宫颈癌患者血清miR-150-5p、miR-196a、miR-21-5p水平均高于中高分化、FIGO分期Ⅰ~Ⅱ期、无淋巴结转移、浸润深度≤1/2宫颈癌患者,差异有统计学意义(P<0.05);Pearson相关性分析结果显示,血清miR-150-5p、miR-196a、miR-21-5p水平与宫颈癌患者FIGO分期、淋巴结转移、浸润深度均呈正相关(r>0,P<0.05),与分化程度呈负相关(r<0,P<0.05)。结论:血清miR-150-5p、miR-196a、miR-21-5p水平与宫颈癌患者FIGO分期、淋巴结转移、浸润深度均呈正相关,与分化程度呈负相关。 展开更多

关键词 宫颈癌 病理参数 微小RNA-150-5p 微小RNA-196a 微小RNA-21-5p 相关性

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微小RNA-21-5p靶基因调控自噬的相关研究进展 被引量：6

7

作者 刘鑫鑫 陈淼 +1 位作者 陈博文 冯帮海 《中华危重病急救医学》 CAS CSCD 北大核心 2020年第1期112-117,共6页

自噬是降解细胞内蛋白质和受损细胞器的一个动态过程,维持着细胞内的环境稳定,并为细胞的存活提供良好条件。高氧性急性肺损伤(HALI)是临床氧疗的严重并发症之一。HALI的发病机制尚不明确,已有研究表明自噬参与了HALI的发生过程。调控... 自噬是降解细胞内蛋白质和受损细胞器的一个动态过程,维持着细胞内的环境稳定,并为细胞的存活提供良好条件。高氧性急性肺损伤(HALI)是临床氧疗的严重并发症之一。HALI的发病机制尚不明确,已有研究表明自噬参与了HALI的发生过程。调控自噬的通路机制众多,包括磷脂酰肌醇-3-激酶/丝氨酸苏氨酸蛋白激酶/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(PI3K/Akt/mTOR)信号通路、丝裂素活化蛋白激酶/细胞外信号调节激酶(MAPK/ERK)信号通路、磷酸腺苷依赖性蛋白激酶/unc-51类自噬激活激酶1(AMPK/ULK1)信号通路以及转化生长因子-β(TGF-β)、叉头转录因子O1(FoxO1)和Ras三磷酸腺苷酶超家族成员Rab11a参与的信号通路,上述信号通路相关基因作为微小RNA-21-5p(miR-21-5p)靶基因在众多疾病中具有调控自噬活性的作用。本文就miR-21-5p靶基因调控自噬的各信号通路进行综述,以期寻找到有关HALI中miR-21-5p靶基因调控自噬发挥肺保护作用机制的线索,也为后续基础研究提供相关理论依据。 展开更多

关键词 高氧性急性肺损伤 微小RNA 微小RNA-21-5p 自噬

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微小RNA-21-5p通过激活PI3K/Akt信号通路调控Ⅱ型肺泡上皮细胞凋亡减轻大鼠高氧性急性肺损伤 被引量：2

8

作者 冯帮海 梅鸿 +5 位作者 刘鑫鑫 刘君亚 余琨 覃松 刘国跃 陈淼 《中华危重病急救医学》 CAS CSCD 北大核心 2023年第2期140-145,共6页

目的探讨微小RNA-21-5p(miR-21-5p)是否通过激活磷脂酰肌醇3激酶/丝氨酸-苏氨酸蛋白激酶(PI3K/Akt)信号通路调控Ⅱ型肺泡上皮细胞(AECⅡ)凋亡减轻高氧性急性肺损伤(HALI)。方法将72只雄性SD大鼠按随机数字表法分为常氧对照组、HALI组、P... 目的探讨微小RNA-21-5p(miR-21-5p)是否通过激活磷脂酰肌醇3激酶/丝氨酸-苏氨酸蛋白激酶(PI3K/Akt)信号通路调控Ⅱ型肺泡上皮细胞(AECⅡ)凋亡减轻高氧性急性肺损伤(HALI)。方法将72只雄性SD大鼠按随机数字表法分为常氧对照组、HALI组、PI3K/Akt信号通路抑制剂LY294002+HALI组(LY+HALI组)、miR-21-5p过表达+LY294002+HALI组(miR-21-5p+LY+HALI组)、miR-21-5p过表达+HALI组(miR-21-5p+HALI组)及二甲基亚砜(DMSO)+HALI组,每组12只。用95%氧气制备HALI动物模型;常氧对照组动物在常氧状态下正常饲养。制模前3周经气管导管滴入200μL滴度(1×10^(12) TU/mL)的miR-21-5p腺相关病毒载体AAV6-miR-21-5p转染肺组织;DMSO及LY294002均以0.3 mg/kg于制模前1 h经尾静脉给药。制模后48 h,取颈动脉血检测氧合指数(OI)及呼吸指数(RI),采用实时荧光定量反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测miR-21-5p表达;取肺组织,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测炎症因子〔肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白细胞介素(IL-6、IL-1β)〕水平,测定肺湿/干质量(W/D)比值,苏木素-伊红(HE)染色后光镜下观察肺组织病理学改变并进行病理学评分。每组取6只大鼠提纯AECⅡ细胞,应用流式细胞仪检测凋亡率,采用蛋白质免疫印迹试验(Western blotting)检测磷酸酶及张力蛋白同源基因(PTEN)和PI3K/Akt信号通路蛋白的表达水平。结果与常氧对照组比较,高氧暴露后可见肺泡间隔增厚,大量炎症细胞浸润,RI、炎症因子、肺W/D比值、病理学评分,以及AECⅡ细胞早期凋亡率、PTEN蛋白表达和Akt磷酸化水平均升高,而OI及miR-21-5p表达降低,说明模型制备成功。LY294002预处理后,可进一步加重HALI大鼠肺组织病理损伤,RI、炎症因子、肺W/D比值均较HALI组进一步升高,OI进一步降低,同时可促进AECⅡ细胞凋亡,进一步上调PTEN蛋白表达,并抑制Akt磷酸化;而miR-21-5p预处理可负向调控PTEN,激活PI3K/Akt信号通路,抑制AECⅡ细� 展开更多

关键词 微小RNA-21-5p 高氧性急性肺损伤 Ⅱ型肺泡上皮细胞 磷脂酰肌醇3激酶/丝氨酸-苏氨酸蛋白激酶信号通路 凋亡

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干眼症患者结膜上皮细胞及泪液中CCL1、miR-21-5p表达及临床意义 被引量：2

9

作者 李霞 张茂菊 《徐州医科大学学报》 CAS 2023年第8期613-619,共7页

目的分析干眼症患者结膜上皮细胞及泪液中趋化因子C-C-基元配体1(CCL1)、微小RNA(miR)-21-5p表达水平及其临床意义。方法以恩施土家族苗族自治州中心医院收治的118例干眼症患者作为干眼组,92例体检健康者作为对照组;根据病情严重程度将... 目的分析干眼症患者结膜上皮细胞及泪液中趋化因子C-C-基元配体1(CCL1)、微小RNA(miR)-21-5p表达水平及其临床意义。方法以恩施土家族苗族自治州中心医院收治的118例干眼症患者作为干眼组,92例体检健康者作为对照组;根据病情严重程度将干眼症组分为轻度组(39例)、中度组(46例)及重度组(33例)。收集2组对象结膜上皮细胞及泪液并检测CCL1、miR-21-5p表达水平,比较2组CCL1、miR-21-5p表达水平以及泪膜破裂时间(BUT)值、泪液分泌试验(SIT)值、角膜荧光素染色(CFS)评分差异。分析CCL1、miR-21-5p表达水平与SIT值、BUT值、CFS评分的相关性。受试者工作特征曲线(ROC)分析CCL1、miR-21-5p诊断干眼症的效能。结果干眼组患者结膜上皮细胞中CCL1、miR-21-5p表达水平为(353.26±70.45)ng/L、1.67±0.38,显著高于对照组的(263.16±49.27)ng/L、1.01±0.12(P<0.05);干眼组泪液中CCL1、miR-21-5p表达水平为(265.29±55.90)ng/L、1.45±0.28,显著高于对照组的(189.71±32.56)ng/L、0.98±0.13(P<0.05)。干眼组患者SIT值、BUT值低于对照组,CFS评分高于对照组(P<0.05)。轻度组、中度组、重度组结膜上皮细胞、泪液CCL1、miR-21-5p表达水平及CFS评分逐次升高,SIT值、BUT值逐次降低(P<0.05)。相关性分析显示,结膜上皮细胞及泪液中CCL1与miR-21-5p表达水平呈正相关(r=0.706、0.752,P=0.000),结膜上皮细胞及泪液CCL1、miR-21-5p与SIT值、BUT值呈显著负相关,与CFS评分呈正相关(P<0.05)。结膜上皮细胞CCL1、miR-21-5p以及CCL1联合miR-21-5p诊断干眼症的价值分别为0.850、0.869、0.937。泪液CCL1、miR-21-5p以及CCL1联合miR-21-5p诊断干眼症的价值分别为0.907、0.881、0.964。结论干眼症患者结膜上皮细胞及泪液中CCL1、miR-21-5p表达水平均升高,CCL1、miR-21-5p均与病情以及SIT值、BUT值、CFS评分有关,联合检测结膜上皮细胞或泪液CCL1、miR-21-5p表达水平有助于干眼症的辅助诊断。 展开更多

关键词 干眼症 C-C-基元配体1 微小RNA-21-5p 结膜上皮细胞 泪液 诊断

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血清微小RNA-21-5p与相关生物标志物对阵发性心房颤动射频消融复发的预测

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作者 李振莲 史苏娜 +2 位作者 杨柳 任振芳 朱凌凌 《中国心血管病研究》 CAS 2024年第7期623-628,共6页

目的分析微小RNA(miR)-21-5p与血清C反应蛋白(CRP)、B型利钠肽(BNP)、中性粒细胞/淋巴细胞(N/L)、D-二聚体(D-D)对阵发性心房颤动(房颤)患者射频消融复发的预测价值。方法选择2020年1月至2021年1月邢台市中心医院心血管内科收治的120例... 目的分析微小RNA(miR)-21-5p与血清C反应蛋白(CRP)、B型利钠肽(BNP)、中性粒细胞/淋巴细胞(N/L)、D-二聚体(D-D)对阵发性心房颤动(房颤)患者射频消融复发的预测价值。方法选择2020年1月至2021年1月邢台市中心医院心血管内科收治的120例首次行射频消融术的阵发性房颤患者作为本次的研究对象,根据随访时是否复发分为复发组50例,未复发组70例,另招募同期健康志愿者60例成立对照组,比较各组患者miR-21-5p与炎性因子水平,并分析两者之间的相关性,探究其对阵发性房颤患者射频消融复发的预测价值。结果复发组及未复发组患者血清miR-21-5p水平显著高于对照组,复发组患者血清miR-21-5p水平显著高于未复发组(F=1079.07,P<0.05)。复发组及未复发组患者血清CRP、BNP、N/L水平显著高于对照组,且复发组显著高于未复发组;复发组及未复发组患者血清D-二聚体水平显著低于对照组,且复发组更低;复发组与未复发组左心房前后径(LAD)、舒张早期二尖瓣口血流速度峰值/环根部侧壁运动速度峰值(E/Ea)数值显著高于对照组,且复发组显著高于未复发组[(35.37±2.76)mm比(34.18±2.54)mm比(33.26±2.32)mm,P<0.05];但复发组与未复发组左心房射血分数(LAEF)和收缩期左心房峰值应变率(LASRs)显著低于对照组,复发组更低[LAEF:(0.34±0.08)比(0.48±0.09)比(0.57±0.09),LASRs(1.64±0.37)/s比(1.98±0.43)/s比(3.53±0.51)/s,P<0.05];多因素logistic回归分析提示,D-二聚体、BNP、LAD、E/Ea比值升高是持续性房颤复发的独立危险因素;Pearson法分析阵发性房颤患者血清miR-21-5p水平与CRP、N/L、BNP呈正相关,而与D-二聚体呈负相关(r=0.423,0.271,-0.412,0.325,P均<0.05);受试者工作特征曲线(ROC)研究结果可知,血清miR-21-5p相对表达水平AUC为0.924。血清CRP、BNP、N/L、D-二聚体AUC分别为0.823、0.815、0.733、0.685(P<0.05)。结论血清miR-21-5p在阵发性房颤射频消融复发患者中� 展开更多

关键词 miR-21-5p 血清CRp BNp N/L D-DIMER 阵发性心房颤动 射频消融 相关性分析

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miR21-5p靶向转录激活蛋白STAT3减轻高氧性急性肺损伤 被引量：2

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作者 周先贵 蒋艳 +2 位作者 韩梅 郑杰 覃松 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2023年第1期21-27,共7页

目的探讨miR21-5p调控转录激活蛋白STAT3在高氧性急性肺损伤(HALI)中的作用及机制。方法选择40只C57BL/6J小鼠随机分为常氧组、高氧组、高氧+miR21-5p组及高氧+空载体组,吸入90%以上浓度氧气建立HALI小鼠模型。常氧组饲养于正常空气中;... 目的探讨miR21-5p调控转录激活蛋白STAT3在高氧性急性肺损伤(HALI)中的作用及机制。方法选择40只C57BL/6J小鼠随机分为常氧组、高氧组、高氧+miR21-5p组及高氧+空载体组,吸入90%以上浓度氧气建立HALI小鼠模型。常氧组饲养于正常空气中;高氧+miR21-5p组及高氧+空载体组分别经气管导管滴入miR21-5p AAV6或空载体,饲养3周后建立HALI小鼠模型。高氧暴露48 h后,取肺组织采用ELISA试剂盒检测炎症因子(TNF-α、IL-6、IL-1β)和氧化应激标志物(SOD、MDA、ROS)水平;计算肺水含量;行HE染色观察形态学变化并行病理学评分;Tunel法检测肺组织细胞凋亡率;RT-PCR检测miR21-5p表达水平;Western blot检测STAT3、p-STAT3、Bax及Bcl-2蛋白相对表达水平。结果与常氧组比较,高氧组肺损伤病理评分、肺水含量及肺组织细胞凋亡率升高(P<0.05),炎症因子TNF-α、IL-6及IL-1β水平升高(P<0.05),MDA和ROS水平升高(P<0.05),SOD水平降低(P<0.05),STAT3、p-STAT3及Bax蛋白表达升高(P<0.05),Bcl-2蛋白表达下降(P<0.05);与高氧组比较,高氧+miR21-5p组肺损伤病理评分、肺水含量及肺组织细胞凋亡率降低(P<0.05),炎症因子TNF-α、IL-6及IL-1β水平降低(P<0.05),MDA和ROS水平降低(P<0.05),SOD水平升高(P<0.05),STAT3、p-STAT3及Bax蛋白表达降低(P<0.05),高Bcl-2蛋白表达升高(P<0.05)。高氧组HE染色可见肺泡结构紊乱、间隔增厚,大量炎症细胞浸润,透明膜形成及肺泡萎陷,高氧+miR21-5p组HE染色结果显示肺损伤程度明显减轻。结论miR21-5p靶向转录激活蛋白STAT3活性抑制炎症反应及凋亡并维持氧化还原平衡减轻HALI。 展开更多

关键词 微小RNA-21-5p 高氧性急性肺损伤 转录激活蛋白STAT3 急性呼吸窘迫综合征 凋亡

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菟丝子乙醇提取物灌胃对大鼠绝经后骨质疏松症的改善作用及其机制

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作者 孟卓然 赵梓铭 +5 位作者 贾壮壮 刘韦兵 谭丽萍 朱晓松 武俊紫 石安华 《山东医药》 CAS 2024年第17期29-32,共4页

目的观察菟丝子乙醇提取物灌胃对大鼠绝经后骨质疏松症的改善作用并探讨其机制。方法雌性SD大鼠随机分为正常组、假手术组、模型组、雌激素对照组、菟丝子低剂量组、菟丝子高剂量组,每组10只。除正常组、假手术组外,各组均采用双侧去卵... 目的观察菟丝子乙醇提取物灌胃对大鼠绝经后骨质疏松症的改善作用并探讨其机制。方法雌性SD大鼠随机分为正常组、假手术组、模型组、雌激素对照组、菟丝子低剂量组、菟丝子高剂量组,每组10只。除正常组、假手术组外,各组均采用双侧去卵巢手术建立大鼠绝经后骨质疏松症模型;假手术组在暴露卵巢后切除卵巢周围脂肪组织,不切除卵巢;正常组正常喂养不做任何处理。于建模后两周起开始给药,菟丝子低剂量组、菟丝子高剂量组分别按0.7 g/kg、1.4 g/kg给予菟丝子乙醇提取物灌胃,雌激素对照组给予非甾体雌激素己烯雌酚灌胃,正常组、假手术组及模型组给予等容积生理盐水灌胃,连续给药12周。采用双能X线检测大鼠股骨骨密度,HE染色观察股骨组织病理形态,RT-PCR法检测股骨组织miR-21-5p,Western blotting法检测股骨组织Fas配体(FasL)蛋白。结果模型组股骨骨密度小于正常组、假手术组,雌激素对照组、菟丝子低剂量组、菟丝子高剂量组股骨骨密度大于模型组(P均<0.05)。正常组及假手术组骨皮质骨膜及骨内膜光滑,骨小梁形态粗细基本一致,皮质区仅出现轻微的松质骨改变;模型组骨小梁明显变薄,间隔增宽,互不相连,排列不齐,皮质区出现严重的松质骨改变;雌激素对照组、菟丝子低剂量组、菟丝子高剂量组骨小梁间距较模型组均有不同程度的减小,且皮质区松质骨改变变轻。模型组股骨组织miR-21-5p表达高于正常组、假手术组,雌激素对照组、菟丝子低剂量组、菟丝子高剂量组miR-21-5p表达低于模型组(P均<0.05)。模型组股骨组织FasL蛋白表达低于正常组、假手术组,雌激素对照组、菟丝子低剂量组、菟丝子高剂量组FasL蛋白表达高于模型组(P均<0.05)。结论菟丝子乙醇提取物灌胃对大鼠绝经后骨质疏松症具有改善作用,其机制可能与调控miR-21-5p及其下游蛋白FasL有关� 展开更多

关键词 菟丝子 菟丝子乙醇提取物 绝经后骨质疏松症 微小RNA-21-5p FAS配体

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miRNA-21-5p对食管癌的诊断价值及其与STAT3的相关性研究 被引量：5

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作者 王燕忠 丁丽敏 +1 位作者 陈一瑞 王永斌 《检验医学》 CAS 2020年第6期531-534,共4页

目的分析微小RNA(miRNA)-21-5p在食管癌中的潜在诊断价值,并探索其可能的作用机制。方法选取2016年1月-2018年6月在浙江大学医学院附属邵逸夫医院下沙院区治疗的食管癌患者78例(病例组)以及体检健康者69名(对照组)。采集患者治疗前血液... 目的分析微小RNA(miRNA)-21-5p在食管癌中的潜在诊断价值,并探索其可能的作用机制。方法选取2016年1月-2018年6月在浙江大学医学院附属邵逸夫医院下沙院区治疗的食管癌患者78例(病例组)以及体检健康者69名(对照组)。采集患者治疗前血液及术中癌组织、癌旁组织,通过实时聚合酶链反应(PCR)检测血清中miRNA-21-5p的表达,通过picTar、TagetScan、Tarbase 3个数据库分别预测miRNA-21-5p的靶基因;利用Draw venn diagram选取3个数据库预测靶基因交集;采用实时PCR检测食管癌患者癌组织和癌旁组织中信号传导和转录激活子3(STAT3)mRNA的表达情况。结果实时PCR结果显示,miRNA-21-5p在食管癌患者血清中高表达,且显著高于对照组(P<0.01);STAT3 mRNA在食管癌患者癌组织中高表达,显著高于癌旁组织(P<0.01);Spearman相关性分析发现两者呈正相关。结论在食管癌患者血清中miRNA-21-5p呈高表达,同时在癌组织中miRNA-21-5p的预测靶基因STAT3 mRNA也呈高表达,并且两者呈正相关。 展开更多

关键词 微小RNA-21-5p 食管癌 诊断价值

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Ⅱ型肺泡上皮细胞来源外泌体miR-21-5p调控上皮钠离子通道减轻高氧性急性肺损伤 被引量：1

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作者 冯帮海 任颖聪 +4 位作者 袁平 刘君亚 王炜鑫 覃松 陈淼 《陆军军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第21期2222-2230,共9页

目的探讨Ⅱ型肺泡上皮细胞(typeⅡalveolar epithelial cells,AEC-Ⅱ)来源外泌体(exosomes,Exos)-miR-21-5p(miR-21)调控上皮钠离子通道(epithelial sodium channel,ENaC)对高氧性急性肺损伤(hyperoxia-induced acute lung injury,HALI... 目的探讨Ⅱ型肺泡上皮细胞(typeⅡalveolar epithelial cells,AEC-Ⅱ)来源外泌体(exosomes,Exos)-miR-21-5p(miR-21)调控上皮钠离子通道(epithelial sodium channel,ENaC)对高氧性急性肺损伤(hyperoxia-induced acute lung injury,HALI)的保护效应及可能机制。方法6~8周龄雄性C57BL/6J小鼠60只,其中20只使用差速贴壁离心法提取原代AEC-Ⅱ并培养,采用密度梯度离心法提取AEC-Ⅱ来源外泌体,透射电镜鉴定外泌体形态。余40只小鼠按随机数字表法分为(n=10):常氧(Control)组、高氧(HALI)组、高氧+Exos-miR-21(HALI+miR-21)组和高氧+siPI3K+Exos-miR-21(HALI+siPI3K+miR-21)组。除Control组外,余3组小鼠暴露于95%O 2的自制高氧饲养箱中构建HALI模型。72 h后RT-qPCR检测肺组织及外泌体miR-21表达;HE染色观察肺组织形态学变化并行肺损伤病理评分,计算肺组织湿/干质量比及肺泡液体清除率(alveolar fluid clearance,AFC);可见分光光度法测定超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)、丙二醛(malondialdehyde,MDA)及总抗氧化能力(total antioxidant capacity,T-AOC)水平;荧光分光光度法测定活性氧簇(reactive oxygen species,ROS)水平;Western blot检测PTEN、AKT、p-AKT、PI3K及α-ENaC、β-ENaC、γ-ENaC蛋白表达水平。双荧光素酶报告基因实验验证miR-21与PTEN靶向关系。结果原代AEC-Ⅱ提取的囊泡状物质经鉴定为外泌体,外泌体中miR-21表达显著增高(P<0.05),PTEN为miR-21靶基因。与Control组比较,HALI组HE染色可见肺组织肺间隔增厚、大量炎症细胞浸润及肺泡萎陷,HALI组、HALI+miR-21组及HALI+siPI3K+miR-21组肺损伤病理评分、肺湿/干质量比、MDA及PTEN蛋白表达升高(P<0.05);SOD、T-AOC、AFC、miR-21及p-Akt、α-ENaC、β-ENaC、γ-ENaC蛋白表达水平降低(P<0.05),以HALI+siPI3K+miR-21组最明显。与HALI组比较,HALI+miR-21组HE染色可见肺间隔增厚、炎症细胞浸润明显减少,肺泡萎陷显著减轻;肺损伤病理评分、肺湿/干质量比、MDA及PTEN� 展开更多

关键词 Ⅱ型肺泡上皮细胞 外泌体 微小RNA-21-5p 上皮钠离子通道 高氧性急性肺损伤 pI3K/Akt信号通路

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白藜芦醇通过调节miR-21-5p/PDCD4通路抑制血管平滑肌细胞增殖与迁移 被引量：4

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作者 梁戎 李兰英 +2 位作者 张国珍 苏布道 雷文秀 《南京医科大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2020年第1期26-31,共6页

目的:探讨白藜芦醇治疗高血压的作用靶点及相关作用机制。方法:利用血管紧张素Ⅱ诱导大鼠胸大动脉平滑肌细胞A7r5模拟高血压时平滑肌细胞增殖细胞模型,并使用白藜芦醇与miR-21-5p mimic进行干预。利用CCK-8实验检测A7r5细胞活力;利用细... 目的:探讨白藜芦醇治疗高血压的作用靶点及相关作用机制。方法:利用血管紧张素Ⅱ诱导大鼠胸大动脉平滑肌细胞A7r5模拟高血压时平滑肌细胞增殖细胞模型,并使用白藜芦醇与miR-21-5p mimic进行干预。利用CCK-8实验检测A7r5细胞活力;利用细胞划痕实验检测A7r5细胞的迁移能力;利用real-time PCR技术检测miR-21-5p的表达;利用Western blot技术检测细胞增殖相关蛋白PCNA、Cyclin D1、CDK4与细胞迁移相关蛋白MMP2、MMP9、PDCD4的表达。此外,选取对数生长期293T细胞,利用双荧光素酶报告基因检测技术验证miR-21-5p与PDCD4的靶向关系。结果:与正常对照组相比,模型组细胞活力、迁移能力及增殖和迁移相关蛋白PCNA、Cyclin D1、CDK4、MMP2、MMP9与miR-21-5p的表达水平显著上调,PDCD4蛋白的表达水平显著下降,且差异具有统计学意义(P <0.01);与模型组相比,白藜芦醇处理组的细胞活力、迁移能力及增殖和迁移相关蛋白PCNA、Cyclin D1、CDK4、MMP2、MMP9与miR-21-5p的表达水平显著下调,PDCD4蛋白的表达水平显著上调,且差异具有统计学意义(P<0.001);而miR-21-5p mimic转染后细胞活力、迁移能力及增殖和迁移相关蛋白PCNA、Cyclin D1、CDK4、MMP2、MMP9与miR-21-5p的表达水平显著上调,PDCD4蛋白的表达水平显著下降且差异具有统计学意义(P<0.001),双荧光素酶检测显示miR-21-5p可显著抑制野生型PDCD4 3’UTR报告基因载体的荧光素酶活性(P <0.01)。结论:白藜芦醇通过调节miR-21-5p/PDCD4通路,抑制血管平滑肌细胞增殖与迁移,进而对高血压起到一定的治疗作用。 展开更多

关键词 高血压 血管平滑肌细胞 白藜芦醇 微小RNA-21-5p 程序性细胞死亡因子4

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MicroRNA-21-5p调控丝裂原活化蛋白激酶p38信号通路 被引量：3

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作者 李志辉 邓旭 《中华实用儿科临床杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第5期375-379,共5页

目的验证microRNA（miR）-21-5p与丝裂原活化蛋白激酶激酶3（MKK3）的靶向调控关系。方法构建MKK33＇UTR报告载体（MKK3-3U）及突变载体（MKK3-3U-M）；化学合成miR．21-5p模拟物（mimics）、miR-21-5p抑制剂（inhibitor）、无意义miR... 目的验证microRNA（miR）-21-5p与丝裂原活化蛋白激酶激酶3（MKK3）的靶向调控关系。方法构建MKK33＇UTR报告载体（MKK3-3U）及突变载体（MKK3-3U-M）；化学合成miR．21-5p模拟物（mimics）、miR-21-5p抑制剂（inhibitor）、无意义miR（NC）。分别用NC（NCl组）、mimics（mimicl组）、inhibitor（inhibitorl组）与MKK3-3U共转染人胚肾（HEK293）细胞。分别用空载体（NC2组）、MKK3-3U（Wt组）、MKK3-3U-M（Mut组）与mimics共转染HEK293。双荧光素酶检测仪检测细胞荧光比值。予NC（对照组）、mimics（mimic2组）、inhibitor（inhibitor2组）分别干预人肾小管上皮（HK-2）细胞，反转录PCR、Westernblot法检测HK-2细胞中MKK3的mRNA及蛋白表达水平。结果1．NCl组、mimicl组、inhibitorl组荧光比值分别为100．00％、67．99％、133．17％，mimicl组与NCl组比较，差异有统计学意义（t=19．93，P〈0．01）。2．NC2组、Mt组、Mut组荧光比值分别为100．00％、65．30％、98．48％，Mt组与NC2组比较，差异有统计学意义（t=14．39，P〈0．01），而Mut组与NC2组间荧光比值差异无统计学意义（t=0．63，P〉0．05）。3．对照组、mimic2组、inhibi-tor2组MKK3mRNA相对表达量为1．36±0．02、1．01±0．04、1．43±0．06；蛋白质相对表达量为0．97±0．05、0．62±0．06、1．36±0．32，mimic2组较对照组MKK3的mRNA和蛋白表达均明显降低，差异均有统计学意义（F=85．98、118．26，P均〈0．01）。结论MKK3是miR-21-5p的靶基因，miR-21．5p在mRNA和蛋白质水平调控MKK3表达，miR-21-5p可能是调控p38丝裂原活化蛋白激酶信号通路的重要分子。 展开更多

关键词 microrna-21-5p 丝裂原活化蛋白激酶激酶3 p38丝裂原活化蛋白激酶 靶基因 调控

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间充质干细胞来源的外泌体通过microRNA-21-5p调节心脏自噬并影响心肌缺血大鼠的心脏功能 被引量：3

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作者 孙理华 王娟 +2 位作者 张岳 张颖 幸世峰 《中国比较医学杂志》 CAS 北大核心 2020年第5期88-96,共9页

目的探讨间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)分泌的外泌体(exosome,Exos)是否通过miR-21-5p调节心脏自噬并影响心肌缺血大鼠的心脏功能。方法在体外,观察MSCs-Exos对H2O2刺激H9C2s的影响;通过CCK-8测定法检测细胞活力;流式细胞... 目的探讨间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)分泌的外泌体(exosome,Exos)是否通过miR-21-5p调节心脏自噬并影响心肌缺血大鼠的心脏功能。方法在体外,观察MSCs-Exos对H2O2刺激H9C2s的影响;通过CCK-8测定法检测细胞活力;流式细胞术检测细胞凋亡;荧光显微镜检测细胞中活性氧(reactive oxygen species,ROS)的产生;免疫印迹分析自噬相关蛋白和荧光GFP-LC3测定自噬体形成。在大鼠MI/RI模型中,通过TUNEL测定、免疫组织化学染色及超声心动图分别检查了MSCs-Exos对细胞凋亡、心肌LC3B表达和心脏功能影响。结果在体外实验中,MSCs-Exos显著提高了H2O2刺激的H9C2细胞活力(P<0.05),降低了ROS的产生和细胞凋亡率(P<0.05)。而与H2O2+MSCs-Exos组相比,H2O2+MSC-ExossimiR-21-5p组细胞活力显著降低(P<0.01),ROS的产生和细胞凋亡率显著增加(P<0.01)。Western blot检测显示:与H2O2组相比,H2O2+MSCs-Exos组LC3B-Ⅱ/LC3B-Ⅰ和LC3B-Ⅱ的表达显著增强(P<0.01),p62的表达显著降低(P<0.01);与H2O2+MSCs-Exos组相比,H2O2+MSC-ExossimiR-21-5p组的LC3B-Ⅱ/LC3B-Ⅰ和LC3B-Ⅱ的表达显著降低(P<0.05),p62的表达显著增强(P<0.05)。自噬通量结果:与H2O2组比较,H2O2+MSCs-Exos组细胞中存在的GFP-LC3点数增加;而与H2O2+MSCs-Exos组相比,H2O2+MSC-ExossimiR-21-5p组细胞中存在的GFP-LC3点数显著降低(P<0.05)。在体内,RT-qPCR分析结果显示:在MSCs-Exos中和MI/RI后心肌组织中miR-21-5p的表达均呈正相关性。与其他各组相比,MI/RI+MSCs-Exos组的LC3B表达显著增强(P<0.01);心肌细胞凋亡显著减少(P<0.01);分数缩短率(FS%)和左心室射血分数(LVEF)均显著提高(P<0.05)。结论MSCs-Exos可通过调节心肌自噬改善MI/RI大鼠的心脏功能,其作用机制可能与miR-21-5p转移有关。 展开更多

关键词 间充质干细胞 外泌体 microrna-21-5p 心脏自噬 心肌缺血/再灌注损伤

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MicroRNA-21-5p和MicroRNA-18b-5p在大肠癌中的表达及意义 被引量：1

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作者 刘日旭 王乙 +1 位作者 曹岩 刘明开 《中国实验诊断学》 2021年第1期103-105,共3页

目的研究MicroRNA-21-5p和MicroRNA-18b-5p在大肠癌中的表达和临床意义。方法选取大肠癌组织和癌旁正常组织50例,应用qPCR法,检测MicroRNA-21-5p和MicroRNA-18b-5p表达水平;应用免疫组化法,检测PI3K表达水平。结果 MicroRNA-21-5p、Micr... 目的研究MicroRNA-21-5p和MicroRNA-18b-5p在大肠癌中的表达和临床意义。方法选取大肠癌组织和癌旁正常组织50例,应用qPCR法,检测MicroRNA-21-5p和MicroRNA-18b-5p表达水平;应用免疫组化法,检测PI3K表达水平。结果 MicroRNA-21-5p、MicroRNA-18b-5p和PI3K在大肠癌组织中的的表达量显著高于癌旁正常组织(P<0.05),且MicroRNA-21-5p、MicroRNA-18b-5p均和PI3K具有明显正相关性(P<0.05)。结论 MicroRNA-21-5p和MicroRNA-18b-5p通过PI3K/AKT信号通路在大肠癌的发生、发展过程中起重要作用。 展开更多

关键词 大肠癌 microrna-21-5p microrna-18b-5p

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微RNA-21-5p靶向调控程序性死亡蛋白4对系统性红斑狼疮患者外周血B细胞增殖与凋亡的影响 被引量：3

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作者 魏晓颖 魏新平 +1 位作者 王军涛 王学珍 《中华风湿病学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第3期186-191,共6页

目的 探讨微RNA(RNA-21-5p)通过靶向程序性死亡蛋白4(PDCD4)对SLE患者外周血B细胞增殖与凋亡的调控作用.方法 选择我院经临床确诊的SLE患者30例,采用梯度离心法提取外周血淋巴细胞(PBL),磁珠法分选B细胞后流式细胞术检测外周血B细胞比例... 目的 探讨微RNA(RNA-21-5p)通过靶向程序性死亡蛋白4(PDCD4)对SLE患者外周血B细胞增殖与凋亡的调控作用.方法 选择我院经临床确诊的SLE患者30例,采用梯度离心法提取外周血淋巴细胞(PBL),磁珠法分选B细胞后流式细胞术检测外周血B细胞比例;采用电转染法将细胞分为空白对照组、miRNA-21-5p阴性对照组、miRNA-21-5p Inhibitor组、PDCD4阴性对照组、PDCD4 siRNA组.于转染后48 h收集细胞.采用实时荧光定量(RT)-PCR法检测各组细胞miRNA-21-5p及PDCD4 mRNA的表达水平;采用蛋白质印迹法检测各组细胞PDCD4的蛋白表达;采用双荧光素酶靶标实验验证miR-21-5p和PDCD4的靶向关系;采用流式细胞仪检测各组细胞凋亡情况、采用CCK-8法检测各组细胞的增殖情况;采用蛋白质印迹法和RT-PCR法分别检测各组细胞Fas、FasL、CD40和CD40L的表达水平.采用独立样本t检验对2组间数据进行比较;采用单因素方差分析对多样本实验结果进行统计分析;抗dsDNA抗体阳性率比较采用χ^2检验.结果 SLE患者血清补体[C3 (0.85±0.11)g/L、C4 (0.54±0.09)g/L]较健康对照组[C3(1.16±0.17) g/L、C4(1.57±0.09) g/L]降低(t=7.524,P<0.05;t=38.471,P<0.05),而抗dsDNA抗体(47%)、IgG(15.46±0.75) g/L、IgA (2.68±0.20) g/L较健康对照组抗dsDNA抗体(17%)、IgG(11.95±0.80) g/L、IgA (2.16±0.11) g/L均升高(χ^2=4.427,P<0.05;t=15.218,P<0.05;t=10.125,P<0.05);SLE患者外周血B细胞比例[(6.78±0.29)%]、miRNA-21-5p表达水平(7.52±0.59)%较健康对照外周血B细胞比例[(2.03±0.24)%]、miRNA-21-5p表达水平(3.60±0.62)均升高(t=59.064,P<0.05;t=19.317,P<0.05),而SLE患者外周血PDCD4基因表达水平(1.54±0.35)较健康对照(4.42±0.42)降低(t=19.126,P<0.05);与空白对照组和miRNA-21-5p NC组相比,miRNA-21-5p Inhibitor组细胞增殖受到抑制,细胞凋亡比例升高(F=5.244,P<0.05;F=37.903,P<0.05);与空白对照组和PDCD4 NC组相比,PDCD4 siRNA组细胞增殖能力增强,细胞凋亡比例减少(F=5.956,P< 展开更多

关键词 红斑狼疮 系统性 B淋巴细胞 微RNA-21-5p 程序性死亡蛋白4 增殖 细胞凋亡

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microRNA-21-5p在缺氧缺血新生大鼠脑组织中的表达及对其生物学功能研究 被引量：3

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作者 孙永 孙辉 +2 位作者 姚凯华 李志锋 李永文 《中国临床药理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第10期1244-1247,共4页

目的探讨microRNA-21-5p(miRNA-21-5p)在缺血缺氧性脑损伤(HIBD)的新生大鼠脑组织中的表达及其作用机制。方法将7 d龄SD大鼠双重结扎左侧颈总动脉后并从双线中间离断血管,构建大鼠HIBD模型,并随机分为模型组、对照组和实验组,每组20只;... 目的探讨microRNA-21-5p(miRNA-21-5p)在缺血缺氧性脑损伤(HIBD)的新生大鼠脑组织中的表达及其作用机制。方法将7 d龄SD大鼠双重结扎左侧颈总动脉后并从双线中间离断血管,构建大鼠HIBD模型,并随机分为模型组、对照组和实验组,每组20只;另取20只大鼠不做血管离断作为空白组。在造模后第2天,大鼠麻醉并对脑组织进行微量注射,实验组及对照组分别给予稀释后的miRNA-21-5p agomir和miRNA-21-5p NC 10μL,空白组和模型组均给予等体积0.9%NaCl。造模后第7天,用神经功能缺损程度(NDS)评分法评价神经功能损伤程度,用实时荧光定量聚合酶链反应检测大鼠脑组织中miRNA-21-5p的表达,用生物信息学预测miRNA-21-5p与PI3K的关系,用蛋白质印迹法检测PI3K、p-Akt和Cleaved Caspase 3蛋白表达。结果模型组、实验组和对照组的NDS评分分别为(4.70±0.71),(2.45±0.50)和(4.40±0.49)分,miRNA-21-5p相对表达量分别为(0.24±0.02),(0.71±0.10)和(0.25±0.01),模型组的上述指标与实验组相比,差异均有统计学意义(均P<0.05)。经Target Scan数据库预测PI3K与miRNA-21-5p存在结合位点,推测两者可能具有靶向调控关系。模型组、实验组和对照组的PI3K相对表达量分别为(0.37±0.01),(0.65±0.02)和(0.37±0.01),p-Akt相对表达量分别为(0.42±0.04),(0.74±0.01)和(0.41±0.03),Cleaved Caspase 3相对表达量分别为(2.02±0.04),(1.40±0.03)和(2.02±0.04),模型组的上述指标与实验组相比,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论miRNA-21-5p在新生HIBD大鼠脑组织中低表达,其可能通过PI3K/Akt/Cleaved Caspase 3信号通路参与神经细胞凋亡过程。 展开更多

关键词 microrna-21-5p 缺血缺氧性脑损伤 pI3K/Akt/Cleaved Caspase 3信号通路

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