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miR-181a-5p调控IGF2BP2表达对胎盘滋养层细胞浸润、迁移能力的影响及机制 被引量:9
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作者 万淑梅 彭萍 高妍 《山东医药》 CAS 2020年第2期22-26,共5页
目的分析microRNA-181a-5p(miR-181a-5p)靶向调控胰岛素样生长因子2 mRNA结合蛋白(IGF2BP2)的关系,以及对胎盘滋养层细胞HTR-8/SVneo浸润、迁移能力的影响和机制。方法采用Targetscan7.1预测软件及双荧光素酶报道基因试验,预测并验证miR... 目的分析microRNA-181a-5p(miR-181a-5p)靶向调控胰岛素样生长因子2 mRNA结合蛋白(IGF2BP2)的关系,以及对胎盘滋养层细胞HTR-8/SVneo浸润、迁移能力的影响和机制。方法采用Targetscan7.1预测软件及双荧光素酶报道基因试验,预测并验证miR-181a-5p对IGF2BP2基因的靶向调控作用。收集子痫前期(PE)和正常妊娠妇女胎盘组织各30例,以qRT-PCR法检测miR-181a-5p和IGF2BP2 mRNA,并分析二者表达的关系。将HTR-8/SVneo细胞分为NC组、miR-181a-5p过表达组和miR-181a-5p+IGF2BP2过表达组,用Lip2000分别转染无关序列、miR-181a-5p mimic、miR-181a-5p mimic+IGF2BP2过表达质粒12 h;qRT-PCR法检测细胞中的IGF2BP2 mRNA,Boyden实验观察细胞浸润能力,Transwell实验观察细胞迁移能力,Western blotting法检测细胞中的Wnt1和β-catenin蛋白。结果Targetscan7.1预测软件显示,miR-181a-5p与IGF2BP2 mRNA的3′UTR之间具有潜在的碱基互补结合位点;双荧光素酶报道基因试验显示,miR-181a-5p能降低野生型IGF2BP2 mRNA 3′UTR荧光素酶报告基因活性(P<0.05)。与正常妊娠妇女胎盘组织比较,PE胎盘组织中miR-181a-5p表达下降、IGF2BP2表达增加(P均<0.05),且两者表达呈负相关(r=-0.601,P<0.05)。与NC组比较,miR-181a-5p过表达组和miR-181a-5p+IGF2BP2过表达组细胞浸润和迁移的穿膜细胞数减少,细胞中IGF2BP2 mRNA、Wnt1和β-catenin蛋白表达减少(P均<0.05);与miR-181a-5p过表达组比较,miR-181a-5p+IGF2BP2过表达组细胞浸润和迁移的穿膜细胞数增多,细胞中IGF2BP2 mRNA、Wnt1和β-catenin蛋白表达增加(P均<0.05)。结论miR-181a-5p的靶基因为IGF2BP2,对其有负向调控作用;miR-181a-5p靶向调控IGF2BP2表达可能通过抑制Wnt/β-catenin信号通路降低胎盘滋养层细胞浸润和迁移能力。 展开更多
关键词 子痫前期 胎盘滋养层细胞 微小RNA-181a-5p 胰岛素样生长因子 细胞浸润 细胞迁移
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急性胰腺炎患者血清miR-181a-5p表达及与Th17/Treg免疫平衡的关系 被引量:7
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作者 张瑜 辛前有 +1 位作者 冯亚飞 郭伟 《河北医学》 CAS 2023年第1期115-120,共6页
目的:探讨急性胰腺炎(AP)患者血清微小RNA-181a-5p(miR-181a-5p)的表达及与辅助性T细胞17/调节性T细胞(Th17/Treg)免疫平衡的关系。方法:选取2020年1月至2021年12月我院收治的110例AP患者(AP组),根据病情严重程度分为轻症AP组41例、中... 目的:探讨急性胰腺炎(AP)患者血清微小RNA-181a-5p(miR-181a-5p)的表达及与辅助性T细胞17/调节性T细胞(Th17/Treg)免疫平衡的关系。方法:选取2020年1月至2021年12月我院收治的110例AP患者(AP组),根据病情严重程度分为轻症AP组41例、中度重症AP组37例、重症AP组32例,另选取同期58名体检健康者(对照组)。采用酶联免疫吸附法检测外周血白细胞介素-6(IL-6)、IL-10、IL-17、转化生长因子-β1(TGF-β1)水平,流式细胞术检测外周血Th17、Treg百分比,qPCR检测血清miR-181a-5p表达。通过Pearson/Spearman相关性分析AP患者血清miR-181a-5p表达与Th17/Treg的相关性。结果:与对照组比较,AP组血清miR-181a-5p表达和外周血Treg百分比降低,Th17百分比和Th17/Treg升高(P均<0.001)。与对照组比较,AP组外周血IL-6、IL-17水平升高,IL-10、TGF-β1水平降低(P均<0.001)。轻症、中度重症、重症AP组血清miR-181a-5p表达和外周血IL-10、TGF-β1、Treg百分比依次降低,外周血IL-6、IL-17、Th17百分比、Th17/Treg依次升高(P均<0.001)。Pearson/Spearman相关性分析显示,AP患者血清miR-181a-5p表达与IL-6、IL-17、Th17、Th17/Treg呈负相关(r/rs=-0.688、-0.652、-0.782、-0.825,P均<0.001),与IL-10、TGF-β1、Treg呈正相关(r/rs=0.743、0.667、0.739,P均<0.001)。结论:AP患者血清miR-181a-5p低表达,Th17/Treg免疫失衡,miR-181a-5p可能通过Th17/Treg免疫失衡参与AP发生发展。 展开更多
关键词 急性胰腺炎 微小RNA-181a-5p 辅助性T细胞17 调节性T细胞
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外周血单个核细胞YY1、miR-181a-5p表达水平对妊娠期糖尿病不良妊娠结局的预测价值 被引量:3
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作者 刘海霞 王丽丽 +2 位作者 魏小敏 杨玉侠 宋志慧 《国际检验医学杂志》 CAS 2024年第1期12-16,共5页
目的 探究外周血单个核细胞YY1转录因子(YY1)、微小RNA(miR)-181a-5p表达水平对妊娠期糖尿病(GDM)不良妊娠结局的预测价值。方法 纳入2020年6月至2022年6月该院收治的GDM患者200例作为GDM组,选取同期产检健康孕妇100例作为对照组。采用... 目的 探究外周血单个核细胞YY1转录因子(YY1)、微小RNA(miR)-181a-5p表达水平对妊娠期糖尿病(GDM)不良妊娠结局的预测价值。方法 纳入2020年6月至2022年6月该院收治的GDM患者200例作为GDM组,选取同期产检健康孕妇100例作为对照组。采用荧光定量PCR检测外周血单个核细胞YY1、miR-181a-5p表达水平。绘制受试者工作特征(ROC)曲线,分析YY1、miR-181a-5p表达水平对GDM患者不良妊娠结局的预测价值。结果 与对照组比较,GDM组外周血单个核细胞中YY1、miR-181a-5p表达水平均下降(P<0.05),GDM组产后出血、巨大儿、新生儿低血糖的发生率均上升(P<0.05)。多因素Logistic回归分析显示,年龄、血糖控制不良是GDM患者妊娠不良结局的独立危险因素(P<0.05),外周血单个核细胞YY1、miR-181a-5p表达水平均是GDM患者妊娠不良结局的独立保护因素(P<0.05)。ROC曲线分析结果显示,外周血单个核细胞YY1、miR-181a-5p表达水平单独及二者联合预测GDM患者不良妊娠结局的曲线下面积(AUC)分别为0.717、0.751、0.832,其中联合预测的AUC明显高于二者单独预测(P<0.05)。结论 GDM患者外周血单个核细胞YY1、miR-181a-5p表达水平降低可增加不良妊娠结局的风险,YY1、miR-181a-5p与GDM患者不良妊娠结局的关系密切,二者均可作为GDM患者不良妊娠结局的预测因子。 展开更多
关键词 妊娠期糖尿病 不良妊娠结局 YY1转录因子 微小RNA-181a-5p 预测价值
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血清miR-181a-5p、miR-132-5p水平对慢性肾小球肾炎患者预后的预测价值 被引量:1
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作者 黄其峰 童薇 +2 位作者 刘洋 江小伟 刘萍 《疑难病杂志》 CAS 2024年第2期196-201,共6页
目的探讨血清微小RNA(miR)-181a-5p、miR-132-5p水平与慢性肾小球肾炎患者3年内预后的关系。方法选取2018年1月—2020年4月中国人民解放军联勤保障部队第九〇一医院肾内科收治的慢性肾小球肾炎患者128例作为慢性肾小球肾炎组(肾炎组)和... 目的探讨血清微小RNA(miR)-181a-5p、miR-132-5p水平与慢性肾小球肾炎患者3年内预后的关系。方法选取2018年1月—2020年4月中国人民解放军联勤保障部队第九〇一医院肾内科收治的慢性肾小球肾炎患者128例作为慢性肾小球肾炎组(肾炎组)和体检健康者130例作为健康对照组(对照组)。检测2组肾功能指标、血清miR-181a-5p、miR-132-5p水平;分析血清miR-181a-5p、miR-132-5p与肾功能指标的相关性,影响慢性肾小球肾炎患者3年内预后不良的因素,血清miR-181a-5p、miR-132-5p及二者联合预测慢性肾小球肾炎患者3年内预后不良的价值。结果与对照组比较,肾炎组血清miR-181a-5p、miR-132-5p水平显著降低(t/P=47.860/<0.001、75.095/<0.001),血清尿酸(UA)、血尿素氮(BUN)、血肌酐(SCr)、胱抑素C(CysC)水平显著升高,肾小球滤过率(eGFR)水平显著降低(t=27.103、16.387、37.145、47.506、28.550,P均<0.001);血清miR-181a-5p与miR-132-5p水平呈正相关,血清miR-181a-5p和miR-132-5p均与UA、BUN、Scr、CysC水平呈负相关,与eGFR水平呈正相关(r=0.572、-0.506、-0.514、-0.493、-0.627、0.605、-0.498、-0.546、-0.481、-0.609、0.612,P均<0.001);与预后良好亚组比较,预后不良亚组血清UA、BUN、SCr、CysC水平显著升高,eGFR、血清miR-181a-5p、miR-132-5p水平显著降低(t=6.730、3.596、10.629、7.760、12.657、8.881、13.932,P均<0.001);高水平UA、高水平BUN、高水平SCr、高水平CysC、低水平eGFR、低水平miR-181a-5p、低水平miR-132-5p是影响慢性肾小球肾炎患者3年内预后不良的危险因素[OR(95%CI)=2.239(1.256~3.992)、2.768(1.237~6.194)、2.173(1.195~3.950)、1.806(1.204~2.709)、3.022(1.620~5.637)、2.565(1.349~4.879)、3.350(1.226~9.157)];血清miR-181a-5p、miR-132-5p及二者联合预测慢性肾小球肾炎患者3年内预后不良的曲线下面积(AUC)分别为0.832、0.801、0.904,其中二者联合预测的AUC显著高于各自单独预测AUC(Z/P=1.714/0.043、2.050/0.020)。结论 展开更多
关键词 慢性肾小球肾炎 微小RNA-181a-5p 微小RNA-132-5p 肾功能 预后
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微小RNA-181a-5p在甲基苯丙胺依赖大鼠血清外泌体中的表达及生物信息学分析 被引量:6
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作者 李汉成 李婵 +3 位作者 周玉婷 罗超华 区锦莹 莫志贤 《中国临床药理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第1期45-48,共4页
目的检测甲基苯丙胺依赖大鼠和健康大鼠血清外泌体中微小RNA(miR)-181a-5p的表达,并对miR-181a-5p进行靶基因预测及相关生物信息学分析。方法用甲基苯丙胺复制大鼠条件性位置偏爱(CPP)模型。按照体重将雄性SD大鼠随机分为2组(每组10只)... 目的检测甲基苯丙胺依赖大鼠和健康大鼠血清外泌体中微小RNA(miR)-181a-5p的表达,并对miR-181a-5p进行靶基因预测及相关生物信息学分析。方法用甲基苯丙胺复制大鼠条件性位置偏爱(CPP)模型。按照体重将雄性SD大鼠随机分为2组(每组10只):正常组(0.9%NaCl),实验组(2mg·kg^(-1)甲基苯丙胺)。实验组上午8:00皮下注射甲基苯丙胺,下午16:00皮下注射0.9%NaCl溶液,连续4 d。正常组同时皮下注射等体积0.9%NaCl溶液。实验组与正常组上午处置后,立即置于白箱训练1 h;下午皮下注射0.9%NaCl溶液后,立即置于黑箱训练1 h,连续训练4 d。在末次处置1 d后,进行位置偏爱测定,记录大鼠15 min内在白箱中停留时间及运动路程。用RT-qPCR技术检测大鼠血清外泌体中miR-181a-5p的表达水平;以Target Scan、miRanda及miRBD预测miR-181a-5p靶基因;用DAVID数据库对其靶基因进行功能聚类分析(GO)和生物通路(KEGG pathways)分析;以STRING在线分析软件对其靶基因蛋白进行相互作用分析。结果 CPP训练后,2组在白箱中停留时间(s)及运动路程(cm):正常组分别为202.67±28.24,3349.26±412.28;实验组分别为460.47±66.71,4475.97±585.74。实验组与正常组比较,差异均有统计学意义(均P<0.01)。正常组、实验组血清外泌体中miR-181a-5p表达分别为3.39±1.79,10.23±4.32,组间差异有统计学意义(P<0.01)。预测得到miR-181a-5p靶基因108个,其功能主要富集于神经元的生成和分化、基因表达调控及谷氨酸转运等生物学过程,涉及内质网蛋白加工信号通路。miR-181a-5p靶基因编码蛋白之间存在复杂的相互作用,其中RAD23B、PRKCD、MAP2K1、NCBP1、GABRA1等在蛋白互作网络中具有核心地位。结论miR-181a-5p可能通过调控基因表达及谷氨酸转运等生物过程,作用于内质网蛋白加工信号通路,进而调节下游靶蛋白参与甲基苯丙胺成瘾的发生过程。 展开更多
关键词 甲基苯丙胺 条件性位置偏爱 微小RNA-181a-5p 血清外泌体 生物信息学
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免疫性血小板减少症患儿 T淋巴细胞亚群、甲状腺自身抗体、微小RNA-106b-5p 和微小RNA-181a-5p表达水平检测及临床意义 被引量:2
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作者 高长俊 张晴 韩静 《陕西医学杂志》 CAS 2023年第6期741-744,749,共5页
目的:分析免疫性血小板减少症(ITP)患儿T淋巴细胞亚群、甲状腺自身抗体、微小RNA-106b-5p(miR-106b-5p)和微小RNA-181a-5p(miR-181a-5p)表达水平及临床意义。方法:以158例ITP患儿为ITP组,依据临床分型不同分为慢性ITP组(34例)、持续性IT... 目的:分析免疫性血小板减少症(ITP)患儿T淋巴细胞亚群、甲状腺自身抗体、微小RNA-106b-5p(miR-106b-5p)和微小RNA-181a-5p(miR-181a-5p)表达水平及临床意义。方法:以158例ITP患儿为ITP组,依据临床分型不同分为慢性ITP组(34例)、持续性ITP组(60例)和新诊断ITP组(64例)。另选取同期健康儿童102例为对照组。所有患儿均给予静脉滴注人免疫球蛋白及口服醋酸泼尼松片等常规治疗,均治疗5 d。比较ITP组与对照组全血T淋巴细胞亚群(CD3^(+)、CD4^(+)、CD8^(+))细胞及血清甲状腺自身抗体[甲状腺球蛋白抗体(TGAb)、甲状腺过氧化物酶抗体(TPOAb)]、miR-106b-5p、miR-181a-5p水平。比较慢性ITP组、持续性ITP组和新诊断ITP组患儿全血T淋巴细胞亚群及血清TGAb、TPOAb、miR-106b-5p、miR-181a-5p水平。比较ITP患儿治疗前、治疗5 d后全血T淋巴细胞亚群及血清TGAb、TPOAb、miR-106b-5p、miR-181a-5p水平。结果:与对照组比较,ITP组全血CD3^(+)、CD4^(+)细胞及血清miR-181a-5p水平更低,全血CD8^(+)细胞及血清TGAb、TPOAb、miR-106b-5p水平更高(均P<0.05)。慢性ITP组全血CD3^(+)、CD4^(+)细胞及血清miR-181a-5p水平低于持续性ITP组和新诊断ITP组,全血CD8^(+)细胞及血清TGAb、TPOAb、miR-106b-5p水平高于持续性ITP组和新诊断ITP组(均P<0.05)。与治疗前比较,治疗5 d后ITP患儿全血CD3^(+)、CD4^(+)细胞及血清miR-181a-5p水平升高,全血CD8^(+)细胞及血清TGAb、TPOAb、miR-106b-5p水平降低(均P<0.05)。结论:ITP患儿存在T淋巴细胞亚群失衡、甲状腺自身抗体和miR-106b-5p高表达以及miR-181a-5p低表达情况。治疗期间积极检测患儿全血T淋巴细胞亚群及血清甲状腺自身抗体、miR-106b-5p、miR-181a-5p水平,有助于患儿的疗效评估。 展开更多
关键词 免疫性血小板减少症 T淋巴细胞亚群 甲状腺球蛋白抗体 甲状腺过氧化物酶抗体 微小RNA-106b-5p 微小RNA-181a-5p 儿童
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胃癌组织微小RNA-181d-5p和三基序蛋白22表达与患者术后5年内生存相关性研究
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作者 王首星 刘院刚 +2 位作者 温进平 李欣 杨朝鑫 《陕西医学杂志》 CAS 2024年第6期848-852,857,共6页
目的:探讨胃癌组织微小RNA-181d-5p(miR-181d-5p)和三基序蛋白22(TRIM22)表达与患者术后5年内生存的关系。方法:收集110例胃癌患者(均是胃腺癌)术中切除的胃癌组织标本及癌旁组织标本。荧光定量PCR和免疫组织化学法分别检测miR-181d-5p... 目的:探讨胃癌组织微小RNA-181d-5p(miR-181d-5p)和三基序蛋白22(TRIM22)表达与患者术后5年内生存的关系。方法:收集110例胃癌患者(均是胃腺癌)术中切除的胃癌组织标本及癌旁组织标本。荧光定量PCR和免疫组织化学法分别检测miR-181d-5p和TRIM22蛋白表达。患者术后随访5年,记录生存情况。Starbase数据库预测miR-181d-5p与TRIM22结合位点,并验证miR-181d-5p与TRIM22的靶向关系。比较癌旁和胃癌组织miR-181d-5p、TRIM22表达,不同临床病理特征患者胃癌组织miR-181d-5p、TRIM22表达差异。分析胃癌组织miR-181d-5p、TRIM22表达与患者预后的关系,胃癌患者预后的影响因素,以及胃癌组织miR-181d-5p与TRIM22及它们与不同临床病理特征的相关性。结果:与癌旁组织比较,胃癌组织miR-181d-5p表达升高,TRIM22阳性率降低(均P<0.05)。肿瘤低分化、肌层或外膜浸润、有淋巴结转移、TNM分期Ⅲ期在miR-181d-5p高表达和TRIM22阴性表达患者中的比例分别高于肿瘤高分化、黏膜或膜下层浸润、无淋巴结转移、TNM分期Ⅰ-Ⅱ期(均P<0.05)。miR-181d-5p与TRIM22具有靶向结合位点,miR-181d-5p可负向调控TRIM22表达。miR-181d-5p高表达和TRIM22阴性表达患者5年总生存率分别低于miR-181d-5p低表达和TRIM22阳性表达患者(均P<0.05)。影响胃癌患者术后5年内生存的独立危险因素有miR-181d-5p高表达、TRIM22阴性表达、肿瘤低分化、肌层或外膜浸润、有淋巴结转移和TNM分期Ⅲ期(均P<0.05)。胃癌组织miR-181d-5p与TRIM22、肿瘤分化程度呈负相关,与浸润深度、淋巴结转移、TNM分期呈正相关(均P<0.05);TRIM22与肿瘤分化程度呈正相关,与浸润深度、淋巴结转移、TNM分期呈负相关(均P<0.05)。结论:胃癌组织miR-181d-5p表达升高,TRIM22阳性率降低,两者与患者临床病理特征和术后5年内生存有密切关系。 展开更多
关键词 胃癌 微小RNA-181d-5p 三基序蛋白22 预后 相关性 影响因素
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miR-181a-5p在ACS患者血清中表达及对人HCASMC细胞增殖迁移的调控作用、与ADAMTS1靶向关系
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作者 颚璐莎 易华 张艳芳 《山东医药》 CAS 2024年第6期19-23,共5页
目的观察微小RNA-181a-5p(miR-181a-5p)在急性冠脉综合征(acute coronary syndrome,ACS)患者血清中的表达及对人冠状动脉平滑肌细胞(human coronary artery smooth muscle cell,HCASMC)增殖和迁移的调控作用,探讨miR-181a-5p与血小板反... 目的观察微小RNA-181a-5p(miR-181a-5p)在急性冠脉综合征(acute coronary syndrome,ACS)患者血清中的表达及对人冠状动脉平滑肌细胞(human coronary artery smooth muscle cell,HCASMC)增殖和迁移的调控作用,探讨miR-181a-5p与血小板反应蛋白解整合素金属肽酶1(ADAMTS1)的靶向关系。方法采集100例ACS患者[ACS组,其中急性心肌梗死(AMI)患者55例、不稳定心绞痛(unstable angina pectoris,UAP)患者44例]、40例冠脉造影结果阴性者(对照组)的外周静脉血,采用实时荧光定量PCR法检测两组血清miR-181a-5p。取对数生长期HCASMC细胞,分为一、二、三、四组,采用脂质体转染法分别转染miR-181a-5p模拟物(miR-181a-5p mimics)、模拟物阴性对照(mimics-NC)、miR-181a-5p抑制物(miR-181a-5p inhibitor)及抑制物阴性对照(inhibitor-NC),培养48 h时采用CCK-8法测算细胞增殖能力、采用Transwell迁移实验测算细胞迁移能力,培养24 h时采用采用Western Blotting法检测各组细胞ADAMTS1蛋白。取对数生长期HCASMC细胞分为A、B、C、D四组,A组先后转染突变型ADAMTS1荧光素酶报告基因质粒(ADAMTS1-MUT)、miR-181a-5p mimics;B组先后转染ADAMTS1-MUT、mimics-NC;C组先后转染野生型ADAMTS1荧光素酶报告基因质粒(ADAMTS1-WT)、miR-181a-5p mimics;D组先后转染ADAMTS1-WT、mimics-NC,培养24 h时取各组细胞采用双荧光素酶报告基因实验检测各组细胞相对荧光素酶活性。结果与对照组相比,ACS组患者血清miR-181a-5p相对表达量低(P<0.01);与UAP患者相比,AMI患者血清miR-181a-5p相对表达量低(P<0.01)。与二组相比,培养48 h时一组细胞增殖能力和迁移能力降低,培养24 h时一组细胞ADAMTS1蛋白相对表达量低(P均<0.01);与四组相比,培养48 h时三组细胞增殖能力和迁移能力高,培养24 h时三组细胞ADAMTS1蛋白相对表达量高(P均<0.01)。A、B、C、D组细胞荧光素酶活性分别为1.03±0.03、1.01±0.04、0.45±0.06、1.02±0.05;与B组相比,A组细胞荧光素� 展开更多
关键词 微小RNA-181a-5p 急性冠脉综合征 细胞增殖 细胞迁移 血小板反应蛋白解整合素金属肽酶1
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MicroRNA-181d-5p通过PTEN参与睾丸支持细胞间紧密连接损伤 被引量:2
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作者 张丽虹 王锋 +1 位作者 赵小贞 王玮 《解剖学杂志》 CAS 2021年第2期95-100,共6页
目的:探讨miR-181d-5p通过与人第10号染色体缺失的磷酸酶和张力蛋白同源的基因(PTEN)mRNA 3'UTR区相互作用,参与小鼠睾丸支持细胞TM4细胞间紧密连接损伤及其可能机制。方法:通过网站预测miR-181d-5p的靶基因为PTEN mRNA,采用双荧光... 目的:探讨miR-181d-5p通过与人第10号染色体缺失的磷酸酶和张力蛋白同源的基因(PTEN)mRNA 3'UTR区相互作用,参与小鼠睾丸支持细胞TM4细胞间紧密连接损伤及其可能机制。方法:通过网站预测miR-181d-5p的靶基因为PTEN mRNA,采用双荧光素酶报告基因分析实验在293T细胞上验证其与靶基因3'UTR区的结合;在TM4细胞上采用mimic过表达miR-181d-5p,引起PTEN蛋白表达降低,再进行p-FAK-Tyr397、p-Akt-Thr308等相关信号分子检测以及细胞间跨膜电阻(TER)值的测定。结果:MiR-181d-5p能与PTEN mRNA的3'UTR区结合,并降低其表达;在TM4细胞上过表达miR-181d-5p后,致使p-FAK-Tyr397和p-Akt-Thr308水平升高,以及TER值降低。结论:MiR-181d-5p通过与PTEN mRNA 3'UTR区结合降低其表达,引起p-FAK-Tyr397水平升高,以及PI3K/Akt信号通路激活,导致睾丸支持细胞间紧密连接损伤。 展开更多
关键词 microrna-181d-5p 人第10号染色体缺失的磷酸酶和张力蛋白同源的基因 p-FAK-Tyr397 pI3K/AKT信号通路 SERTOLI细胞
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慢病毒介导miR-181a-5p过表达对慢性心力衰竭大鼠心脏重塑的影响 被引量:2
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作者 蔡卢铭 侯梅铃 +1 位作者 巢亚伟 刘双 《心脑血管病防治》 2021年第4期338-341,349,共5页
目的探究慢病毒介导微RNA-181a-5p(miR-181a-5p)过表达对慢性心力衰竭(CHF)大鼠心脏重塑的影响。方法采用随机数字表法将40只大鼠随机分为对照组、模型组、空载体组和miR-181a-5p过表达组,每组各10只。模型组、空载体组和miR-181a-5p过... 目的探究慢病毒介导微RNA-181a-5p(miR-181a-5p)过表达对慢性心力衰竭(CHF)大鼠心脏重塑的影响。方法采用随机数字表法将40只大鼠随机分为对照组、模型组、空载体组和miR-181a-5p过表达组,每组各10只。模型组、空载体组和miR-181a-5p过表达组均给予5 mg/kg·d^(-1)异丙肾上腺素腹腔注射处理。空载体组和miR-181a-5p过表达组分别尾静脉注射空载体和miR-181a-5p腺病毒载体。采用超声心动图检查大鼠心脏结构及功能,HE染色及Masson染色观察心肌组织病理及胶原纤维变化,实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法检测miR-181a-5p、转化生长因子-β1(TGF-β1)mRNA及Smad3 mRNA水平,蛋白质免疫印迹法检测TGF-β1及Smad3蛋白水平。结果(1)与模型组及空载体组比较,miR-181a-5p过表达组大鼠舒张末期左心室内径(LVIDd)、收缩末期左心室内径(LVIDs)和心室质量/体质量(VW/BW)水平均降低,射血分数(EF)、缩短分数(FS)水平均升高,差异均有统计学意义(P<0.05)。(2)模型组及空载体组心肌细胞排列不规则,且有炎性细胞浸润,胶原纤维明显增加;miR-181a-5p过表达组大鼠心肌细胞排列较整齐,炎性细胞浸润较模型组和空载体组轻,胶原纤维较模型组和空载体组明显降低。(3)与模型组及空载体组比较,miR-181a-5p过表达组TGF-β1 mRNA、Smad3 mRNA、TGF-β1及Smad3表达量降低,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论miR-181a-5p过表达对CHF大鼠心肌组织有一定保护作用,其机制可能与调控TGF-β1/Smad3通路有关。 展开更多
关键词 慢性心力衰竭 心脏重塑 微RNA-181a-5p
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miR-181a-5p和BACH2表达对白血病CCRF-CEM细胞凋亡和侵袭的影响 被引量:1
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作者 王旭颖 荆明箴 +2 位作者 余谨 付荣 杨茹 《吉林大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2023年第4期840-849,共10页
目的:探讨微小RNA-181a-5p(miR-181a-5p)靶向BTB与CNC同源基因2 (BACH2)对急性淋巴细胞白血病(ALL)细胞凋亡和侵袭的调控作用,并阐明其作用机制。方法:体外构建BACH2过表达重组质粒(overExpBACH2)、miR-181a-5p inhibitor和inhibitor-NC... 目的:探讨微小RNA-181a-5p(miR-181a-5p)靶向BTB与CNC同源基因2 (BACH2)对急性淋巴细胞白血病(ALL)细胞凋亡和侵袭的调控作用,并阐明其作用机制。方法:体外构建BACH2过表达重组质粒(overExpBACH2)、miR-181a-5p inhibitor和inhibitor-NC,转染人ALL T淋巴细胞CCRF-CEM,实时荧光定量PCR (RT-qPCR)法和免疫荧光染色检测转染效果。将CCRF-CEM细胞分为对照组、 inhibitor-NC组、 miR-181a-5pinhibitor组、 BACH2过表达(overExpBACH2)组、 miR-181a-5pinhibitor+空载体(EV)组和miR-181a-5pinhibitor+overExpBACH2组。CCK-8法检测各组细胞增殖活性,流式细胞术检测G_(2)期细胞百分率和细胞凋亡率。Western blotting法检测各组细胞中细胞周期蛋白D3 (CyclinD3)、B细胞淋巴瘤2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)和含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶3 (Caspase-3)蛋白表达水平,Transwell小室实验检测各组细胞中侵袭细胞数,RT-qPCR法检测各组细胞中基质金属蛋白酶9 (MMP-9)、基质金属蛋白酶14 (MMP-14)和BACH2 mRNA及miR-181a-5p表达水平。结果:miR-181a-5p inhibitor和overExpBACH2质粒均成功转染CCRF-CEM细胞。与对照组比较,miR-181a-5pinhibitor组、overExpBACH2组、miR-181a-5p inhibitor+EV组和miR-181a-5p inhibitor+overExpBACH2组细胞增殖活性明显降低(P<0.05),G_(2)期细胞百分率和细胞凋亡率明显升高(P<0.05),细胞中CyclinD3蛋白表达水平明显降低(P<0.05),Caspase-3蛋白表达水平和Bax/Bcl-2比值明显升高(P<0.05),侵袭细胞数明显减少(P<0.05),细胞中MMP-9和MMP-14 mRNA及miR-181a-5p表达水平明显降低(P<0.05),BACH2mRNA表达水平明显升高(P<0.05)。与miR-181a-5p inhibitor组和overExpBACH2组比较,miR-181a-5p inhibitor+overExpBACH2组细胞中上述指标变化趋势更明显。结论:miR-181a-5p可靶向BACH2进而调控ALL细胞侵袭和凋亡,为临床靶向治疗ALL提供了新的靶点。 展开更多
关键词 急性淋巴细胞白血病 微小RNA-181a-5p BTB与CNC同源基因2 细胞凋亡 细胞侵袭
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非小细胞肺癌患者血清外泌体miR-181a-5p和lncRNA CCAT1表达变化及其临床意义 被引量:2
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作者 马玲 张园 +1 位作者 杨丽菲 单莉 《山东医药》 CAS 2022年第13期18-23,共6页
目的探讨非小细胞肺癌(NSCLC)患者血清外泌体微小RNA-181a-5p(miR-181a-5p)、长链非编码RNA(lncRNA)结肠癌相关转录因子1(CCAT1)表达变化及其与患者临床病理特征和预后的关系。方法选择NSCLC患者103例(观察组)、体检健康的志愿者27例(... 目的探讨非小细胞肺癌(NSCLC)患者血清外泌体微小RNA-181a-5p(miR-181a-5p)、长链非编码RNA(lncRNA)结肠癌相关转录因子1(CCAT1)表达变化及其与患者临床病理特征和预后的关系。方法选择NSCLC患者103例(观察组)、体检健康的志愿者27例(对照组),采集两组外周静脉血,离心留取血清,提取血清外泌体。采用实时荧光定量PCR法检测两组血清外泌体miR-181a-5p、lncRNA CCAT1表达。比较两组外泌体miR-181a-5p、lncRNA CCAT1表达,分析NSCLC患者血清外泌体miR-181a-5p表达与lncRNA CCAT1表达的关系以及二者表达与患者临床病理特征的关系。采用Kaplan-Meier法分析血清外泌体miR-181a-5p、lncRNA CCAT1表达与NSCLC患者5年总体生存率的关系。采用Cox比例风险回归模型分析NSCLC患者预后不良的危险因素。结果观察组血清外泌体miR-181a-5p相对表达量明显低于对照组,血清外泌体lncRNA CCAT1相对表达量明显高于对照组(P均<0.01)。Pearson相关分析显示,NSCLC患者血清外泌体miR-181a-5p相对表达量与lncRNA CCAT1相对表达量呈负相关关系(P<0.01)。NSCLC患者血清外泌体miR-181a-5p、lncRNA CCAT1表达均与肿瘤临床分期、淋巴结转移有关(P均<0.05),而与性别、年龄、吸烟史、肿瘤直径、病理类型、组织分化程度无关(P均>0.05)。103例NSCLC患者治疗后随访2~60个月,无失访病例,随访期间死亡56例,5年总体生存率为45.63%(47/103)。分别以miR-181a-5p、lncRNA CCAT1相对表达量的均数为临界值,将NSCLC患者分为miR-181a-5p低表达者50例与miR-181a-5p高表达者53例、lncRNA CCAT1低表达者54例与lncRNA CCAT1高表达者49例。miR-181a-5p低表达者5年总体生存率明显低于其高表达者,而lncRNA CCAT1低表达者5年总体生存率明显高于其高表达者(P均<0.05)。多因素Cox比例风险回归分析显示,临床分期Ⅲ、Ⅳ期及伴淋巴结转移、血清外泌体miR-181a-5p低表达、血清外泌体lncRNA CCAT1高表达是NSCLC患者预� 展开更多
关键词 非小细胞肺癌 外泌体 微小RNA-181a-5p 长链非编码RNA结肠癌相关转录因子1 临床病理特征 预后
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乌头碱调控miR-181d-5p/DDX3轴对宫颈癌HeLa细胞增殖、凋亡的影响 被引量:1
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作者 赵丹丹 张素娥 +1 位作者 苗立业 王岩 《天津医药》 CAS 北大核心 2023年第9期922-928,共7页
目的探讨乌头碱通过调控微小RNA-181d-5p(miR-181d-5p)/DEAD-box RNA解旋酶3(DDX3)轴对宫颈癌HeLa细胞增殖、凋亡的影响。方法使用不同剂量乌头碱处理宫颈癌HeLa细胞,四甲基偶氮唑盐法检测细胞增殖确定给药剂量。将HeLa细胞分为对照组(... 目的探讨乌头碱通过调控微小RNA-181d-5p(miR-181d-5p)/DEAD-box RNA解旋酶3(DDX3)轴对宫颈癌HeLa细胞增殖、凋亡的影响。方法使用不同剂量乌头碱处理宫颈癌HeLa细胞,四甲基偶氮唑盐法检测细胞增殖确定给药剂量。将HeLa细胞分为对照组(正常培养,不进行处理),乌头碱低剂量组(4 mg/L)、中剂量组(8 mg/L)、高剂量组(16 mg/L),顺铂组(5 mg/L),乌头碱高剂量+miR-NC组[16 mg/L乌头碱+转染miR-181d-5p siRNA阴性对照(miR-NC)质粒]及乌头碱高剂量+miR-181d-5p低表达组[16 mg/L乌头碱+转染miR-181d-5p小干扰RNA(siRNA)质粒]。平板克隆形成实验及流式细胞仪分别检测各组HeLa细胞克隆形成数与凋亡情况;实时荧光定量PCR检测HeLa细胞中miR-181d-5p和DDX3 mRNA表达水平;蛋白免疫印迹法检测HeLa细胞中DDX3、细胞周期蛋白D1(Cyclin D1)、增殖细胞核抗原(PCNA)、B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、胱天蛋白酶-3(Caspase-3)蛋白表达水平;双萤光素酶报告基因实验验证miR-181d-5p与DDX3的靶向关系。结果以0.5~64 mg/L的乌头碱分别处理HeLa细胞24 h、48 h、72 h后,对HeLa细胞均有不同程度的抑制作用,选择剂量为4 mg/L、8 mg/L、16 mg/L的乌头碱用于后续实验。与对照组比较,乌头碱低、中、高剂量组及顺铂组HeLa细胞克隆形成数、DDX3 mRNA和蛋白、Cyclin D1、PCNA、Bcl-2蛋白表达水平依次降低(P<0.05),凋亡率、miR-181d-5p、Bax、Caspase-3蛋白表达水平依次升高(P<0.05);与乌头碱高剂量组和乌头碱高剂量+miR-NC组比较,乌头碱高剂量+miR-181d-5p低表达组HeLa细胞克隆形成数、DDX3 mRNA和蛋白、Cyclin D1、PCNA、Bcl-2蛋白表达水平升高(P<0.05),凋亡率、miR-181d-5p、Bax、Caspase-3蛋白表达水平降低(P<0.05);双萤光素酶报告基因检测证实miR-181d-5p与DDX3存在靶向关系。结论乌头碱可调控miR-181d-5p/DDX3轴,促进miR-181d-5p表达,抑制DDX3表达,进而抑制宫颈癌HeLa细胞增殖,促进细胞凋亡。 展开更多
关键词 乌头碱 微小RNA-181d-5p DEAD-box RNA解旋酶3 宫颈癌HELA细胞
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长链非编码RNA LINC00641通过微小RNA-181d-5p靶向真核细胞翻译起始因子4A2抑制宫颈癌细胞增殖的研究 被引量:1
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作者 张杨 王刚 +3 位作者 陈侠 张云志 秋彤 高飞 《中国性科学》 2022年第2期117-122,共6页
目的观察长链非编码RNA(LncRNA)LINC00641(LINC00641)在宫颈癌细胞中的表达特征,探讨LINC00641通过微小RNA-181 d-5p(miR-181 d-5p)/真核细胞翻译起始因子4A2(EIF4A2)对宫颈癌细胞增殖的调节作用。方法选择宫颈癌Hela细胞株,建立空白对... 目的观察长链非编码RNA(LncRNA)LINC00641(LINC00641)在宫颈癌细胞中的表达特征,探讨LINC00641通过微小RNA-181 d-5p(miR-181 d-5p)/真核细胞翻译起始因子4A2(EIF4A2)对宫颈癌细胞增殖的调节作用。方法选择宫颈癌Hela细胞株,建立空白对照组,构建转染pc-DNA3.1的无关序列组、转染pc-DNA3.1-LINC00641的pc-DNA-LINC00641组、转染pc-DNA3.1-LINC00641-siRNA的si-LINC00641组,转染miR-181 d-5p inhibitor的miR-181 d-5p inhibitor组、转染miR-181 d-5p mimic的miR-181 d-5p mimic组、转染siRNA-EIF4A2的si-EIF4A2组。采用CCK-8实验检测细胞增殖活性,采用双荧光素酶报告基因实验观察LINC00641和miR-181 d-5p、miR-181 d-5p、EIF4A2的靶向关系。选取2019年12月至2021年1月陕西中医药大学第二附属医院诊治的45例宫颈鳞癌且未行术前新辅助放、化疗的女性患者作为研究对象,留取其术后肿瘤组织(宫颈鳞癌组织)。另选取45例因子宫肌瘤行子宫全切术,且经病理确诊为慢性宫颈炎的患者,留取其宫颈组织(慢性宫颈炎组织)。采用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)法检测LINC00641和miR-181 d-5p的表达,采用免疫组化SP法检测EIF4A2和Ki67的表达,采用Pearson检验分析其相关性。结果生物信息分析显示,LINC00641与miR-181 d-5p、miR-181 d-5p、EIF4A2具有可能的结合位点。与空白对照组和无关序列组比较,pc-DNA-LINC00641组、miR-181 d-5p mimic组、si-EIF4A2组细胞增殖活性下降,si-LINC00641组、miR-181 d-5p inhibitor组细胞增殖活性升高。双荧光素酶报告基因实验显示,LINC00641与miR-181 d-5p、miR-181 d-5p、EIF4A2具有靶向关系。挽救实验显示,沉默EIF4A2可部分逆转沉默LINC00641和沉默miR-181 d-5p对细胞增殖的促进作用。与慢性宫颈炎组织比较,宫颈鳞癌组织中LINC00641、miR-181 d-5p低表达,EIF4A2高表达(P<0.05)。Pearson相关分析显示,LINC00641与miR-181 d-5p、EIF4A2、Ki67呈正相关性,miR-181 d-5p与EIF4A2呈负相关性。结论LINC00 展开更多
关键词 长链非编码RNA LINC00641 宫颈癌 增殖 微小RNA-181 d-5p 真核细胞翻译起始因子4A2 调控
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miR-181d-5p对宫颈癌细胞放射敏感性的影响及机制 被引量:1
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作者 李祥双 于海霞 +4 位作者 叶燕珍 温慧敏 杜丽苹 傅丽玲 于卫华 《山东医药》 CAS 2022年第22期42-46,共5页
目的探讨微小RNA-181d-5p(miR-181d-5p)对宫颈癌细胞放射敏感性的影响及机制。方法X射线照射构建放疗抵抗的宫颈癌细胞株HeLa-X,qRT-PCR法检测人宫颈癌细胞SiHa、HeLa、C33A、HCC-94、HeLa、HeLa-X及人正常宫颈上皮细胞HCerEpic中miR-18... 目的探讨微小RNA-181d-5p(miR-181d-5p)对宫颈癌细胞放射敏感性的影响及机制。方法X射线照射构建放疗抵抗的宫颈癌细胞株HeLa-X,qRT-PCR法检测人宫颈癌细胞SiHa、HeLa、C33A、HCC-94、HeLa、HeLa-X及人正常宫颈上皮细胞HCerEpic中miR-181d-5p表达,使用Lipofectamine^(TM)2000试剂盒对HeLa-X细胞进行转染,分别转染miR-181d-5p模拟物阴性对照、miR-181d-5p模拟物、DDX3 siRNA阴性对照、DDX3 siRNA、DDX3 siRNA和miR-181d-5p抑制物阴性对照、DDX3 siRNA和miR-181d-5p抑制物序列5μL,并用4 GyX射线照射处理,将细胞随机分为空白组、4 Gy组、4 Gy+miR-NC组、4 Gy+miR-181d-5p mimics组、4 Gy+si-NC组、4 Gy+si-DDX3组、4 Gy+si-DDX3+anti-miR-NC组、4 Gy+si-DDX3+anti-miR-181d-5p组,CCK-8法检测各组细胞增殖情况;流式细胞术检测各组细胞凋亡情况;双荧光素酶报告基因检测实验验证miR-181d-5p与DEAD盒多肽3(DDX3)的靶向关系;Westernblot⁃ting法检测各组细胞中DDX3蛋白表达。结果miR-181d-5p在人宫颈癌细胞SiHa、HeLa、C33A、HCC-94、HeLa中的表达低于人正常宫颈上皮细胞HCerEpic,且HeLa表达最低(P均<0.05);与HeLa细胞比较,HeLa-X细胞中miR-181d-5p表达降低(P<0.05)。双荧光素酶报告基因实验证实DDX3为miR-181d-5p的靶基因,且miR-181d-5p靶向负调控DDX3表达;与空白组比较,4 Gy组HeLa-X细胞OD_(450)值、DDX3蛋白表达降低、细胞凋亡率升高(P均<0.05);与4 Gy组和4 Gy+miR-NC组比较,4 Gy+miR-181d-5p mimics组细胞OD_(450)值降低、细胞凋亡率升高(P均<0.05);与4 Gy组和4 Gy+si-NC组比较,4 Gy+si-DDX3组HeLa-X细胞中DDX3蛋白表达、细胞OD_(450)值降低,细胞凋亡率升高(P均<0.05);与4 Gy+si-DDX3组和4 Gy+si-DDX3+anti-miR-NC组比较,4 Gy+si-DDX3+anti-miR-181d-5p组HeLa-X细胞中DDX3蛋白表达、细胞OD_(450)值升高,细胞凋亡率降低(P均<0.05)。结论miR-181d-5p在宫颈癌细胞中低表达,过表达miR-181d-5p通过靶向下调DDX3表达,进而增强HeLa-X细胞的放射敏感性。 展开更多
关键词 宫颈癌 微小RNA-181d-5p DEAD盒多肽3 放射敏感性
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Effects of human microRNA-181a-5p on proliferation and migration of gastric cancer cells 被引量:1
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作者 酒梦娜 《China Medical Abstracts(Internal Medicine)》 2016年第3期167-168,共2页
Objective To preliminarily explore the effects of human microRNA-181a on migration of gastric cancer cells and its mechanism.Methods The expression of miRNA-181a-5p in gastric cancer cell line GC9811 and peritoneal hi... Objective To preliminarily explore the effects of human microRNA-181a on migration of gastric cancer cells and its mechanism.Methods The expression of miRNA-181a-5p in gastric cancer cell line GC9811 and peritoneal high metastasis gastric cancer cell line GC9811-P were tested by quantitative real-time polymerase chain reaction(qRT-PCR).GC9811 cell line was 展开更多
关键词 down line GC microrna Effects of human microrna-181a-5p on proliferation and migration of gastric cancer cells
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参附注射液上调microRNA-181d-5p抑制大鼠心肌肥大及其机制
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作者 毛竹君 熊耀康 袁文俊 《中华中医药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第5期1738-1743,共6页
目的:研究参附注射液(SFI)改善大鼠心肌肥大的microRNA调控机制。方法:健康SD大鼠行腹主动脉缩窄(AAC)术建立心肌肥大模型,动物分成3组:SFI组(6.0m L·kg-1·d-1)、model组(6.0m L·kg-1·d-1)和Sham组(6.0m L·kg-... 目的:研究参附注射液(SFI)改善大鼠心肌肥大的microRNA调控机制。方法:健康SD大鼠行腹主动脉缩窄(AAC)术建立心肌肥大模型,动物分成3组:SFI组(6.0m L·kg-1·d-1)、model组(6.0m L·kg-1·d-1)和Sham组(6.0m L·kg-1·d-1),腹腔注射,连续12周。造模成功大鼠心肌作micro RNA(mi R)基因芯片筛选有显著差异表达的mi Rs,Real-time RT-PCR方法检测确认候选mi R。利用生物信息学方法分析候选mi R的候选靶基因,并用RT-PCR与Western blot方法检测靶基因m RNA及其靶蛋白表达水平。在苯肾上腺素(PE)刺激建立的培养乳鼠心肌细胞肥大模型,分别给予SFI,候选mi R模拟物mi R-mimic和抑制剂mi R-inhibitor后,检测心肌细胞表面积,候选靶基因和靶蛋白表达的变化。结果:model组大鼠HW/BW及LVW/BW显著高于Sham组和SFI组(P<0.01);而SFI组HW/BW及LVW/BW与Sham组相比无显著差异;基因芯片筛选结果显示,model组与SFI组相比共有23种mi Rs差异表达显著,其中下调的有mi R-181d-5p等13种;MHC m RNA及MHC蛋白在model组大鼠心肌中过表达,而在SFI组中的表达与Sham组接近。SFI上调PE刺激的心肌细胞mi R-181d-5p水平,抑制PE刺激所致心肌细胞表面积增大;mi R-181d-5p-mimic能抑制心肌细胞MHC蛋白表达,抑制细胞表面积增大,而mi R-181d-5p-inhibitor的作用结果相反。结论:micro RNA-181d-5p具有抑制心肌肥大的作用,SFI可能通过上调或维持mi R-181d-5p的表达从而降低MHC m RNA与MHC蛋白的表达,抑制腹主动脉缩窄大鼠心肌肥大,从而改善大鼠心功能,对心肌肥大产生治疗作用。 展开更多
关键词 参附注射液 心肌肥大 心肌细胞 microrna-181d-5p 肌球蛋白重链
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外周血IMA、CBX7 mRNA、miRNA-181c-5p对缺血性脑卒中患者预后不良的预测价值
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作者 郭晓凯 刘侠 +1 位作者 陈会霞 郭庆浩 《检验医学与临床》 CAS 2024年第18期2652-2656,共5页
目的分析外周血缺血修饰蛋白(IMA)、色素框同源蛋白7(CBX7)信使RNA(mRNA)、微小RNA(miRNA)-181c-5p对缺血性脑卒中(IS)患者预后不良的预测价值。方法选取2021年1-12月在河北省邯郸市中医院就诊的150例IS患者作为观察组,根据改良Rankin量... 目的分析外周血缺血修饰蛋白(IMA)、色素框同源蛋白7(CBX7)信使RNA(mRNA)、微小RNA(miRNA)-181c-5p对缺血性脑卒中(IS)患者预后不良的预测价值。方法选取2021年1-12月在河北省邯郸市中医院就诊的150例IS患者作为观察组,根据改良Rankin量表(mRS)评分将IS患者分为预后良好组(mRS评分≤2分)和预后不良组(mRS评分>2分),另选取同期在河北省邯郸市中医院体检的150例健康人群作为对照组。比较观察组、对照组外周血IMA、CBX7 mRNA、miRNA-181c-5p水平,比较预后良好组和预后不良组临床资料。采用Pearson相关分析IS患者外周血IMA、CBX7 mRNA、miRNA-181c-5p水平与mRS评分的相关性;采用多因素Logistic回归分析IS患者预后不良的危险因素;绘制受试者工作特征(ROC)曲线分析外周血IMA、CBX7 mRNA、miRNA-181c-5p对IS患者预后不良的预测价值。结果观察组外周血IMA、CBX7 mRNA、miRNA-181c-5p水平明显高于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。随访结果显示预后良好组有103例患者,预后不良组有47例患者。预后良好组和预后不良组性别、年龄,以及合并高血压、糖尿病患者比例比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。预后不良组外周血IMA、CBX7 mRNA、miRNA-181c-5p水平高于预后良好组,差异均有统计学意义(P<0.05)。多因素Logistic回归分析结果显示,外周血IMA、CBX7 mRNA、miRNA-181c-5p水平升高为IS患者预后不良的危险因素(P<0.05)。Pearson相关分析结果显示,IS患者外周血IMA、CBX7 mRNA、miRNA-181c-5p水平与mRS评分呈正相关(r=0.629、0.475、0.419,P<0.05)。ROC曲线分析结果显示,外周血IMA、CBX7 mRNA、miRNA-181c-5p 3项指标联合预测IS患者预后不良的曲线下面积(AUC)为0.873,高于单项指标预测的AUC(Z=3.347、3.125、2.974,P<0.05)。结论外周血IMA、CBX7 mRNA、miRNA-181c-5p水平升高为IS患者预后不良的危险因素,与其预后存在相关性,3项指标联合检测对IS患者预后不良有较高 展开更多
关键词 缺血性脑卒中 预后 缺血修饰蛋白 色素框同源蛋白 微小RNA-181c-5p 相关性
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微小RNA⁃181b⁃5p通过Sprouty 4蛋白调控骨髓间充质干细胞成骨分化的机制
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作者 李娜 李涛 +2 位作者 姚媛 李静 庄乾宇 《解剖学报》 CAS CSCD 2024年第6期708-714,共7页
目的进一步探讨微小RNA(miR)-181b-5p抑制人骨髓间充质干细胞(BMMSCs)成骨分化的调控机制。方法取5名健康成人骨髓,分离培养和鉴定人BMMSCs。通过生物信息学网站预测、双荧光素酶报告基因检测、Real-time PCR和Western blotting实验,探... 目的进一步探讨微小RNA(miR)-181b-5p抑制人骨髓间充质干细胞(BMMSCs)成骨分化的调控机制。方法取5名健康成人骨髓,分离培养和鉴定人BMMSCs。通过生物信息学网站预测、双荧光素酶报告基因检测、Real-time PCR和Western blotting实验,探究miR-181b-5p与Sprouty4(SPRY4)蛋白的靶向关系。将BMMSCs分为3组:miR-181b-5p过表达阴性对照组;miR-181b-5p过表达组;miR-181b-5p过表达+SPRY4沉默组。碱性磷酸酶(ALP)染色和ALP活性分析法鉴定早期成骨分化效果;茜素红染色检测钙结节沉积情况;Real-time PCR和Western blotting检测成骨分化标志基因的mRNA和蛋白表达水平。结果成功分离并鉴定BMMSCs;miR-181b-5p与SPRY4基因mRNA的3’UTR特异性结合,过表达miR-181b-5p后,SPRY4蛋白水平表达显著下调,但在mRNA水平无明显改变,敲降SPRY4解除内源性miR-181b-5p减少对BMMSCs成骨分化的促进作用。结论MiR-181b-5p通过下调SPRY4蛋白抑制BMMSCs成骨分化。 展开更多
关键词 微小RNA-181b-5p Sprouty 4 骨髓间充质干细胞 成骨分化 实时定量聚合酶链反应
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LncRNA COL1A2-AS1调控人瘢痕疙瘩成纤维细胞功能的研究 被引量:1
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作者 詹明峰 张文娟 +2 位作者 孙士芳 尚佩生 沈晓峰 《河北医药》 CAS 2023年第17期2565-2570,共6页
目的研究长链非编码RNA(LncRNA)Ⅰ型胶原α2自然反义转录物1(COL1A2-AS1)对人瘢痕疙瘩成纤维细胞增殖、凋亡、迁移的影响。方法在COL1A2-AS1的功能研究中将人成纤维细胞分为3组:空白组、空载组、COL1A2-AS1-过表达组。qRT-PCR检测miR-18... 目的研究长链非编码RNA(LncRNA)Ⅰ型胶原α2自然反义转录物1(COL1A2-AS1)对人瘢痕疙瘩成纤维细胞增殖、凋亡、迁移的影响。方法在COL1A2-AS1的功能研究中将人成纤维细胞分为3组:空白组、空载组、COL1A2-AS1-过表达组。qRT-PCR检测miR-181a-5p、TGF-β1、Smad7、Col-Ⅲ、COL1A2-AS1的表达。CCK-8法检测细胞增殖率,流式细胞术检测细胞凋亡,Transwell法检测细胞迁移,Western blot检测TGF-β1、Smad7、Col-Ⅲ蛋白的表达水平。双荧光素酶报告实验验证COL1A2-AS1与所预测的靶标miR-181a-5p的结合关系。结果与空载组比较,COL1A2-AS1-过表达组的人成纤维细胞增殖OD值、迁移细胞数以及Col-Ⅲ的表达都明显下调(P<0.05),而TGF-β1和Smad7的表达水平都明显升高(P<0.05)。与空载组比较,COL1A2-AS1-过表达组细胞的凋亡率增加(P<0.05)。另外,与空载组比较,COL1A2-AS1-过表达组明显抑制miR-181a-5p的表达(P<0.05),且经过双荧光素酶报告实验验证COL1A2-AS1和miR-181a-5p可直接结合。结论COL1A2-AS1直接靶向抑制miR-181a-5p的表达,并抑制人瘢痕疙瘩成纤维细胞的增殖和迁移,促进细胞的凋亡。 展开更多
关键词 COL1A2-AS1 miR-181a-5p 瘢痕疙瘩 成纤维细胞 细胞凋亡
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