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微小RNA-1258靶向调控Wnt7b对肝癌细胞迁移侵袭和Wnt/β-catenin通路的影响 被引量:6
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作者 马燕 戴科军 +2 位作者 恽一飞 董华洁 杨丹 《临床肿瘤学杂志》 CAS 2021年第4期329-334,共6页
目的探讨微小RNA-1258(miR-1258)调控Wnt/β-连环蛋白(Wnt/β-catenin)通路对肝癌SMMC-7721细胞增殖、侵袭和迁移的影响。方法基于Ualcan数据库分析肝癌组织的miR-1258水平。将SMMC-7721细胞分为4组:空白对照组、阴性对照组、miR-1258... 目的探讨微小RNA-1258(miR-1258)调控Wnt/β-连环蛋白(Wnt/β-catenin)通路对肝癌SMMC-7721细胞增殖、侵袭和迁移的影响。方法基于Ualcan数据库分析肝癌组织的miR-1258水平。将SMMC-7721细胞分为4组:空白对照组、阴性对照组、miR-1258模拟物(miR-1258-M)组(转染miR-1258 mimics)和miR-1258-M+SKL2001组(转染miR-1258 mimics和Wnt/β-catenin通路激动剂SKL2001),采用实时荧光定量PCR(qPCR)检测miR-1258水平,CCK-8实验、划痕实验和Transwell小室实验评估细胞增殖、迁移和侵袭能力,qPCR和Western blotting检测Wnt/β-catenin通路相关蛋白Wnt7b、β-catenin、磷酸化糖原合成酶激酶-3β(p-GSK-3β)和基质金属蛋白酶(MMP)-9的水平,双荧光素酶报告系统验证miR-1258与Wnt7b间的靶向关系。结果Ualcan数据库分析显示369例原发肝癌组织的miR-1258中位水平为0.156,低于49例正常肝组织的14.113(P<0.05)。与空白对照组和阴性对照组比较,miR-1258-M组转染48、72 h时的增殖活力降低(P<0.05),而miR-1258-M+SKL2001组的增殖活力较miR-1258-M组升高(P<0.05)。miR-1258-M组的划痕愈合率为(18.774±0.462)%,低于空白对照组的(77.597±2.535)%、阴性对照组的(73.576±1.921)%和miR-1258-M+SKL2001组的(69.349±3.136)%(P<0.05),穿膜细胞数为(101.425±4.631)个,少于空白对照组的(144.876±4.807)个、阴性对照组的(165.532±15.235)个和miR-1258-M+SKL2001组的(152.026±3.172)个(P<0.05)。与其余三组相比,MiR-1258-M组的Wnt7b、β-catenin和MMP-9水平降低,而p-GSK-3β水平升高,差异有统计学意义(P<0.05)。空白对照组、阴性对照组和miR-1258-M+SKL2001组上述指标的差异无统计学意义(P>0.05)。MiR-1258 mimics明显降低野生型Wnt7b转染细胞的荧光素酶活性(P<0.05),而对突变型Wnt7b转染细胞的荧光素酶活性影响无统计学意义(P>0.05)。结论miR-1258在肝癌中发挥抑癌作用且可能通过抑制Wnt/β-catenin信号抑制肝癌细胞的增殖和迁移侵袭能力,可作为肝癌治疗的潜� 展开更多
关键词 肝癌 微小RNA-1258 迁移侵袭 WNT/Β-CATENIN通路
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胃癌组织中miR-1258的表达水平及其对胃癌细胞侵袭转移能力的调节机制研究 被引量:4
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作者 舒仕龙 张发强 兰柯 《临床和实验医学杂志》 2019年第18期1937-1940,共4页
目的研究胃癌组织中微小RNA-1258(miR-1258)的表达水平及其对胃癌细胞侵袭转移能力的调节机制。方法采用回顾性研究,收集108例胃癌组织标本及其对应的癌旁正常组织,采用实时荧光定量PCR对miR-1258在两组中的表达水平进行检测。采集胃癌... 目的研究胃癌组织中微小RNA-1258(miR-1258)的表达水平及其对胃癌细胞侵袭转移能力的调节机制。方法采用回顾性研究,收集108例胃癌组织标本及其对应的癌旁正常组织,采用实时荧光定量PCR对miR-1258在两组中的表达水平进行检测。采集胃癌细胞,将其分为空白对照组(未转染的SGC-7901细胞)、阴性对照组(转移阴性miRNA模拟物)及实验组(转染miR-1258模拟物)。采用MTT实验检测miR-1258对三组细胞增殖能力的影响,并通过Transwell小室实验检测miR-1258对三组细胞侵袭能力的影响;建立裸鼠胃癌肺转移的动物模型,分析miR-1258对三组细胞转移能力的调节机制。结果相比癌旁正常组织,miR-1258低表达于胃癌组织(P <0. 01)。空白对照组细胞增殖能力明显升高,其次为阴性对照组,而实验组细胞增殖能力明显减缓(P <0. 05)。相比空白对照组和阴性对照组,实验组SGC-7901细胞侵袭能力明显下降(P <0. 01)。相比空白对照组和阴性对照组,实验组小鼠肺部转移癌灶数量明显减少(P <0. 01)。结论 miR-1258低表达于胃癌组织,促使miR-1258高表达具有阻滞胃癌细胞侵袭和转移的作用,提示其可能具有肿瘤抑制剂的作用,有望成为胃癌的新型肿瘤标志物,在临床治疗中可作为潜在靶点,具有重要的临床意义。 展开更多
关键词 胃癌 微小RNA-1258 细胞增殖 细胞侵袭 细胞转移
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