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lncRNA CCAT1通过miR-490-3p对膀胱癌细胞化疗耐药的影响
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作者 张慧明 乔庆东 +1 位作者 李志慧 常海青 《实用癌症杂志》 2024年第7期1050-1053,共4页
目的 探讨lncRNA CCAT1通过miR-490-3p对膀胱癌细胞化疗耐药的影响。方法 构建膀胱癌细胞T24耐顺铂细胞株。荧光素酶报告实验检测lncRNA CCAT1与miR-490-3p的结合、miR-490-3p与KDM7A mRNA-UTR的结合。敲低lncRNA CCAT1或敲低KDM7A或过... 目的 探讨lncRNA CCAT1通过miR-490-3p对膀胱癌细胞化疗耐药的影响。方法 构建膀胱癌细胞T24耐顺铂细胞株。荧光素酶报告实验检测lncRNA CCAT1与miR-490-3p的结合、miR-490-3p与KDM7A mRNA-UTR的结合。敲低lncRNA CCAT1或敲低KDM7A或过表达miR-490-3p后,检测耐顺铂细胞株的凋亡水平。结果 顺铂处理后,相对于对照膀胱癌细胞系T24,膀胱癌顺铂耐药细胞系T24的凋亡水平显著下降(P<0.05)。敲低LncRNA CCAT1后顺铂使膀胱癌顺铂耐药细胞系T24的凋亡水平显著上升(P<0.05)。过表达miR-490-3p后,相比于LncRNA CCAT1突变型,荧光素酶报告实验发现LncRNA CCAT1野生型的荧光素酶活性下降(P<0.05)。过表达miR-490-3p后,顺铂使膀胱癌顺铂耐药细胞系T24的凋亡水平显著上升(P<0.05)。过表达miR-490-3p后,相比于KDM7A-3'UTR突变型,荧光素酶报告实验发现KDM7A-3'UTR野生型的荧光素酶活性下降(P<0.05)。过表达miR-490-3p后,膀胱癌顺铂耐药细胞系T24中KDM7A的mRNA和蛋白表达水平均下降(P<0.05);敲低miR-490-3p后,膀胱癌顺铂耐药细胞系T24中KDM7A的mRNA和蛋白表达水平均上升(P<0.05)。敲低KDM7A后,顺铂使膀胱癌顺铂耐药细胞系T24的凋亡水平显著上升(P<0.05)。结论 lncRNA CCAT1/miR-490-3p/KDM7A促进了膀胱癌细胞对化疗药物的抵抗。 展开更多
关键词 lncRNA CCAT1 mir-490-3p KDM7A 膀胱癌 耐药
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lncRNA FIRRE靶向miR-490-3p对H_(2)O_(2)诱导的心肌细胞损伤的影响 被引量:1
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作者 张雅文 韩伟东 赵青 《国际检验医学杂志》 CAS 2023年第9期1095-1100,1104,共7页
目的探讨长链非编码RNA(lncRNA)FIRRE对过氧化氢(H_(2)O_(2))诱导的心肌细胞损伤的影响。方法将H9c2细胞分别转染si-lncRNA FIRRE、miR-490-3p mimics或共转染si-lncRNA FIRRE与anti-miR-490-3p,然后采用200μmol/L H_(2)O_(2)处理24 h... 目的探讨长链非编码RNA(lncRNA)FIRRE对过氧化氢(H_(2)O_(2))诱导的心肌细胞损伤的影响。方法将H9c2细胞分别转染si-lncRNA FIRRE、miR-490-3p mimics或共转染si-lncRNA FIRRE与anti-miR-490-3p,然后采用200μmol/L H_(2)O_(2)处理24 h,实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法检测细胞lncRNA FIRRE和miR-490-3p的相对表达量,CCK-8检测细胞增殖抑制率,流式细胞术检测细胞凋亡,试剂盒检测细胞丙二醛(MDA)、氢酶(LDH)水平及超氧化物歧化酶(SOD)活性,双荧光素酶报告实验验证lncRNA FIRRE和miR-490-3p的靶向关系,免疫印迹法检测裂解的半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(Cleaved-caspase-3)的蛋白表达水平。结果经200μmol/L H_(2)O_(2)处理24 h后,H9c2细胞lncRNA FIRRE相对表达量升高(P<0.05),细胞增殖抑制率、凋亡率、Cleaved-caspase-3蛋白水平、细胞培养上清液中LDH及MDA水平均升高(P<0.05),miR-490-3p水平、SOD活性降低(P<0.05)。沉默lncRNA FIRRE或过表达miR-490-3p可降低细胞增殖抑制率、凋亡率、Cleaved-caspase-3蛋白水平、细胞培养上清液中LDH和MDA水平(P<0.05),升高miR-490-3p水平、SOD活性(P<0.05)。结论沉默lncRNA FIRRE可能通过靶向上调miR-490-3p抑制H_(2)O_(2)诱导的H9c2细胞凋亡和氧化应激。 展开更多
关键词 心肌细胞 lncRNA FIRRE mir-490-3p 细胞凋亡 氧化应激
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Novel miR-490-3p/hnRNPA1-b/PKM2 axis mediates the Warburg effect and proliferation of colon cancer cells via the PI3K/AKT pathway
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作者 Xiang-Hui Wan Guo-Bing Jin +8 位作者 Qun Yang Ji-Long Hu Zhi-Liang Liu Jun Rao Can Wen Peng-Ling Li Xi-Mei Yang Bo Huang Xiao-Zhong Wang 《World Journal of Gastrointestinal Oncology》 SCIE 2024年第5期2038-2059,共22页
BACKGROUND Heterogeneous ribonucleoprotein A1(hnRNPA1)has been reported to enhance the Warburg effect and promote colon cancer(CC)cell proliferation,but the role and mechanism of the miR-490-3p/hnRNPA1-b/PKM2 axis in ... BACKGROUND Heterogeneous ribonucleoprotein A1(hnRNPA1)has been reported to enhance the Warburg effect and promote colon cancer(CC)cell proliferation,but the role and mechanism of the miR-490-3p/hnRNPA1-b/PKM2 axis in CC have not yet been elucidated.AIM To investigate the role and mechanism of a novel miR-490-3p/hnRNPA1-b/PKM2 axis in enhancing the Warburg effect and promoting CC cell proliferation through the PI3K/AKT pathway.METHODS Paraffin-embedded pathological sections from 220 CC patients were collected and subjected to immunohistochemical analysis to determine the expression of hnRNPA1-b.The relationship between the expression values and the clinicopathological features of the patients was investigated.Differences in mRNA expression were analyzed using quantitative real-time polymerase chain reaction,while differences in protein expression were analyzed using western blot.Cell proliferation was evaluated using the cell counting kit-8 and 5-ethynyl-2’-deoxyuridine assays,and cell cycle and apoptosis were detected using flow cytometric assays.The targeted binding of miR-490-3p to hnRNPA1-b was validated using a dual luciferase reporter assay.The Warburg effect was evaluated by glucose uptake and lactic acid production assays.RESULTS The expression of hnRNPA1-b was significantly increased in CC tissues and cells compared to normal controls(P<0.05).Immunohistochemical results demonstrated significant variations in the expression of the hnRNPA1-b antigen in different stages of CC,including stage I,II-III,and IV.Furthermore,the clinicopathologic characterization revealed a significant correlation between hnRNPA1-b expression and clinical stage as well as T classification.HnRNPA1-b was found to enhance the Warburg effect through the PI3K/AKT pathway,thereby promoting proliferation of HCT116 and SW620 cells.However,the proliferation of HCT116 and SW620 cells was inhibited when miR-490-3p targeted and bound to hnRNPA1-b,effectively blocking the Warburg effect.CONCLUSION These findings suggest that the novel miR-49 展开更多
关键词 Heterogeneous ribonucleoprotein A1-b mir-490-3p Colon cancer Alternative splicing Warburg effect
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LncRNA LINC00958通过靶向miR-490-3p促进甲状腺乳头状癌细胞增殖、侵袭和迁移
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作者 袁宁 王晓娟 +2 位作者 白亚君 何明海 王凤 《现代肿瘤医学》 CAS 北大核心 2023年第10期1785-1793,共9页
目的:研究LncRNA LINC00958对甲状腺乳头状癌细胞的影响及其作用机制。方法:TPC-1和K-1细胞分别分成Control、shRNA-NC、shRNA-LINC00958-1、shRNA-NC+inhibitor-NC、shRNA-LINC00958-1+inhibitor-NC和shRNA-LINC00958-1+miR-490-3p inh... 目的:研究LncRNA LINC00958对甲状腺乳头状癌细胞的影响及其作用机制。方法:TPC-1和K-1细胞分别分成Control、shRNA-NC、shRNA-LINC00958-1、shRNA-NC+inhibitor-NC、shRNA-LINC00958-1+inhibitor-NC和shRNA-LINC00958-1+miR-490-3p inhibitor组。TPC-1和K-1细胞移植的荷瘤鼠分别分为shRNA-NC、shRNA-LINC00958-1、shRNA-NC+inhibitor-NC、shRNA-LINC00958-1+inhibitor-NC和shRNA-LINC00958-1+miR-490-3p inhibitor组。用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测LINC00958和miR-490-3p的表达水平;CCK-8检测细胞活力;Western blot检测蛋白表达水平;细胞划痕实验检测细胞迁移水平,Transwell小室检测细胞侵袭水平,克隆形成实验检测细胞增殖水平;双荧光素酶报告实验检测LINC00958和miR-490-3p的靶向关系。测定肿瘤质量及体积。结果:相比于正常组织,LINC00958在甲状腺癌组织中高表达;相比于Nthy-ori 3-1细胞,LINC00958在TPC-1和K-1细胞中高表达,miR-490-3p低表达。LINC00958沉默后,甲状腺乳头状癌细胞的增殖、侵袭和迁移能力显著降低。干扰miR-490-3p表达逆转LINC00958沉默对甲状腺乳头状癌细胞的增殖、迁移和侵袭效果,破坏LINC00958沉默对肿瘤生长的抑制效果。结论:抑制LINC00958表达可抑制TPC-1和K-1细胞增殖、迁移和侵袭能力,其机制与靶向miR-490-3p表达有关。 展开更多
关键词 LncRNA LINC00958 mir-490-3p 甲状腺乳头状癌 细胞迁移 细胞侵袭
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lncRNA-SNHG15 accelerates the development of hepatocellular carcinoma by targeting mi R-490-3p/histone deacetylase 2 axis 被引量:4
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作者 Wei Dai Jia-Liang Dai +2 位作者 Mao-Hua Tang Mu-Shi Ye Shuo Fang 《World Journal of Gastroenterology》 SCIE CAS 2019年第38期5789-5799,共11页
BACKGROUND Hepatocellular carcinoma(HCC)has become a great threat for people’s health.Many long noncoding RNAs are involved in the pathogenesis of HCC.SNHG15,as a tissue specific long noncoding RNAs,has been studied ... BACKGROUND Hepatocellular carcinoma(HCC)has become a great threat for people’s health.Many long noncoding RNAs are involved in the pathogenesis of HCC.SNHG15,as a tissue specific long noncoding RNAs,has been studied in many human cancers,except HCC.AIM To explore the regulatory mechanism of SNHG15 in HCC.METHODS In the present research,101 HCC patient samples,two HCC cell lines and one normal liver cell line were used.RT-qPCR and Western blot analysis were applied to detect SNHG15,miR-490-3p and histone deacetylase 2(HDAC2)expression.The regulatory mechanism of SNHG15 was investigated using CCK-8,Transwell and luciferase reporter assays.RESULTS Our research showed that up-regulation of SNHG15 was found in HCC and was related to aggressive behaviors in HCC patients.Moreover,knockdown of SNHG15 restrained HCC cell proliferation,migration and invasion.In addition,SNHG15 served as a molecular sponge for miR-490-3p.Further,miR-490-3p directly targets HDAC2.HDAC2 was involved in HCC progression by interacting with the SNHG15/miR-490-3p axis.CONCLUSION In conclusion,long noncoding RNA SNHG15 promotes HCC progression by mediating the miR-490-3p/HDAC2 axis in HCC. 展开更多
关键词 SNHG15 mir-490-3p HEpATOCELLULAR carcinoma HISTONE DEACETYLASE 2 pATHOGENESIS REGULATORY mechanism
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TTTY10调控miR-490-3p通过HMGB1信号通路对宫颈癌细胞迁移和侵袭的影响 被引量:4
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作者 杨长群 刘婷婷 +1 位作者 金志珊 熊国平 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第6期562-567,共6页
目的:探讨长链非编码RNA(long-chain non-coding RNA,lnc RNA)TTTY10对宫颈癌细胞迁移和侵袭的影响及其对mi R-490-3p及高迁移率族蛋白1(high mobility group box 1,HMGB1)信号通路的调控作用。方法:收集华中科技大学同济医学院附属武... 目的:探讨长链非编码RNA(long-chain non-coding RNA,lnc RNA)TTTY10对宫颈癌细胞迁移和侵袭的影响及其对mi R-490-3p及高迁移率族蛋白1(high mobility group box 1,HMGB1)信号通路的调控作用。方法:收集华中科技大学同济医学院附属武汉中心医院妇产科2013年8月至2014年10月14例宫颈癌患者的癌组织及相对应的癌旁组织标本,q PCR检测宫颈癌组织及不同宫颈癌细胞株中TTTY10表达情况。将编码TTTY10-si RNA的质粒或空载质粒转染至宫颈癌Cas Ki细胞中,q PCR检测质粒TTTY10-si RNA转染宫颈癌细胞的转染效率,Transwell迁移和侵袭实验检测沉默TTTY10后宫颈癌细胞迁移和侵袭能力的变化,q PCR检测沉默TTTY10后mi R-490-3p和HMGB1 m RNA的表达。双荧光素酶报告基因检测mi R-490-3p与HMGB1的相互作用,Western blotting检测沉默TTTY10后HMGB1信号通路蛋白的表达情况。结果:宫颈癌组织中TTTY10的表达显著高于癌旁组织,宫颈癌细胞株中TTTY10的表达显著高于宫颈上皮永生化细胞(P<0.01);TTTY10-si RNA质粒可以有效转染进入Cas Ki细胞内并敲减TTTY10的表达(P<0.01),沉默TTTY10可以抑制宫颈癌Cas Ki细胞的迁移和侵袭能力,促进宫颈癌细胞mi R-490-3p的表达和抑制HMGB1 m RNA的表达(P<0.05或P<0.01)。mi R-490-3p能与HMGB1 m RNA的3′-UTR特异性结合,沉默TTTY10后HMGB1信号通路蛋白表达水平下调。结论:TTTY10可以靶向调节mi R-490-3p,并且通过HMGB1信号通路影响宫颈癌Cas Ki细胞的迁移和侵袭能力;TTTY10可作为宫颈癌的诊断标志物和潜在的药物治疗靶点。 展开更多
关键词 宫颈癌 长链非编码RNA TTTY10 mir-490-3p 高迁移率族蛋白1 迁移 侵袭
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miR-490-3p在胃癌中的表达及其临床价值
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作者 陶嵩 柳亚魁 +2 位作者 时依 宋国磊 王栓虎 《中华普通外科学文献(电子版)》 CAS 2023年第1期55-58,共4页
目的探讨miR-490-3p表达水平与胃癌临床病理特征和预后的关系。方法通过实时荧光定量PCR(qPCR)方法检测80例胃癌患者的癌组织与癌旁正常组织中miR-490-3p的相对表达量,分析其与临床病理特征的关系,采用Kaplan-Meier曲线、Cox比例风险回... 目的探讨miR-490-3p表达水平与胃癌临床病理特征和预后的关系。方法通过实时荧光定量PCR(qPCR)方法检测80例胃癌患者的癌组织与癌旁正常组织中miR-490-3p的相对表达量,分析其与临床病理特征的关系,采用Kaplan-Meier曲线、Cox比例风险回归模型进行预后分析。结果miR-490-3p在癌组织中的相对表达量为(0.652±0.072),低于癌旁正常组织中的(1.259±0.069),差异有统计学意义(t=40.528,P<0.05);miR-490-3p表达与浸润深度、淋巴结转移及TMN分期显著相关(P<0.05);miR-490-3p低表达和高表达患者无进展生存期差异有统计学意义(23个月vs 30个月,χ^(2)=8.583,P=0.03);miR-490-3p、淋巴结转移及TNM分期是胃癌预后的独立影响因素(HR=2.396、0.472、0.230,均P<0.05)。结论mi R-490-3p表达降低可促进胃癌的增殖、分化和迁移,可成为胃癌诊断和预后的潜在分子标志物。 展开更多
关键词 mir-490-3p 胃肿瘤 临床病理特征 预后
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MiR-490-3p靶向HMGA2在骨肉瘤细胞凋亡中的作用 被引量:3
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作者 刘伟 刘华强 许国星 《临床骨科杂志》 2018年第2期238-241,共4页
目的以人骨肉瘤MG-63细胞为研究对象,探讨miR-490-3p诱导MG-63细胞凋亡的作用及其分子机制。方法分别设立miR-490-3p mimics组(对照组)、慢病毒lenti-sh miR-490-3p组(药物组),每组设6个复孔。采用MTT法检测miR-490-3p对细胞生长抑制作... 目的以人骨肉瘤MG-63细胞为研究对象,探讨miR-490-3p诱导MG-63细胞凋亡的作用及其分子机制。方法分别设立miR-490-3p mimics组(对照组)、慢病毒lenti-sh miR-490-3p组(药物组),每组设6个复孔。采用MTT法检测miR-490-3p对细胞生长抑制作用;采用AnnexinV-FITC/PI双染法检测不同实验条件下miR-490-3p对MG-63细胞凋亡率的影响;Western blot检测miR-490-3p对HMGA2、Bcl-2、BAX和Caspase-3蛋白表达的影响。结果 MiR-490-3p能抑制MG-63细胞增殖,药物组与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05)。经3次实验结果,药物组的早期凋亡的细胞比例为58.90%±0.89%,明显高于对照组的5.34%±0.34%,差异有统计学意义(P<0.05)。通过Western blot检测MG-63细胞中HMGA2、Bcl-2、Bax、Caspase-3、Survivin蛋白表达,结果显示miR-490-3p转染后,促进凋亡蛋白Bax表达增加,抗凋亡蛋白Bcl-2表达降低,Bax或Bcl-2比率增高,而线粒体凋亡途径下游的Caspase-3蛋白被激活,表达量降低。结论 MiR-490-3p能显著抑制肿瘤细胞增殖,诱导细胞凋亡,其作用机制可能与靶向HMGA2的表达、上调Bax/Bcl-2蛋白表达比例、激活Caspase-3蛋白级联反应和调控Survivin蛋白表达有关。 展开更多
关键词 mir-490-3p HMGA2 骨肉瘤细胞增殖 凋亡
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miR-490-3p调控SW1990胰腺癌细胞上皮间充质转化 被引量:3
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作者 李京辉 朱明 +5 位作者 曲海 李秋宇 吴玉娟 杨贺英 王郁竹 李妍平 《昆明医科大学学报》 CAS 2021年第3期10-17,共8页
目的研究miR-490-3p在分子水平上通过HMGA2蛋白对SW1990细胞上皮间充质转化的影响。方法通过实时荧光定量PCR法(RT-qPCR)检测正常胰腺导管上皮细胞HPDE和人胰腺癌细胞SW1990中miR-490-3p的表达。通过转染质粒[miR-490-3p阻遏物(inhibit... 目的研究miR-490-3p在分子水平上通过HMGA2蛋白对SW1990细胞上皮间充质转化的影响。方法通过实时荧光定量PCR法(RT-qPCR)检测正常胰腺导管上皮细胞HPDE和人胰腺癌细胞SW1990中miR-490-3p的表达。通过转染质粒[miR-490-3p阻遏物(inhibitor)和miR-490-3p模拟物(mimic)以及各自的阴性对照质粒]调控miR-490-3p在SW1990细胞中的表达并通过RT-qPCR法验证转染效率。转染48 h后,通过CCK8检测、划痕法、Transwell小室检测,流式细胞仪检测等分别检测细胞增殖、凋亡、迁移和侵袭等恶性生物学特征的影响。通过Western blot检测细胞中上皮间充质转化相关蛋白E-cadherin和N-cadherin的蛋白表达水平。同时,用数据库预测miR-490-3p及其靶基因HMGA2的靶向关系,并通过双荧光素酶报告基因实验进行验证,通过Western blot检测细胞中HMGA2的蛋白表达水平。结果(1)与HPDE正常细胞相比,SW1990癌细胞中miR-490-3p表达水平明显降低(P=0.215);(2)miR-490-3p上调后,SW1990细胞的凋亡率显著高于对照组(P<0.0001),而细胞增殖、迁移和侵袭能力显著低于对照组(P<0.0001)。miR-490-3p下调后,SW1990细胞的凋亡率显著低于对照组(P<0.0001),而细胞增殖、迁移和侵袭能力显著高于对照组(P<0.0001);(3)miR-490-3p上调后,SW1990细胞中的N-cadherin表达量显著高于对照组(P<0.0001),而E-cadherin的表达水平显著低于对照组(P<0.0001);miR-490-3p下调后,SW1990细胞中的N-cadherin表达量显著低于对照组(P<0.0001),而E-cadherin的表达水平显著高于对照组(P<0.0001);(4)HMGA2是miR-490-3p的靶向基因。结论miR-490-3p可通过靶向HMGA2抑制SW1990胰腺癌细胞EMT,从而影响胰腺癌的的发生发展进程,揭示HMGA2和miR-490-3p可能为胰腺癌诊断和治疗的靶点。 展开更多
关键词 胰腺癌 上皮间充质转化 mir-490-3p HMGA2
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miR-490-3p逆转MCF-7/ADM细胞对阿霉素耐药性的影响 被引量:2
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作者 王晓先 孔凡君 +1 位作者 李飞 张硕 《临床肿瘤学杂志》 CAS 2015年第9期780-786,共7页
目的探讨miR-490-3p在阿霉素(ADM)耐药乳腺癌细胞系MCF-7/ADM中的表达情况及其对MCF-7/ADM细胞增殖、凋亡和ADM耐药的影响。方法以野生型人乳腺癌细胞系MCF-7及其耐药型细胞系MCF-7/ADM为研究对象,用实时荧光定量PCR(q PCR)比较两... 目的探讨miR-490-3p在阿霉素(ADM)耐药乳腺癌细胞系MCF-7/ADM中的表达情况及其对MCF-7/ADM细胞增殖、凋亡和ADM耐药的影响。方法以野生型人乳腺癌细胞系MCF-7及其耐药型细胞系MCF-7/ADM为研究对象,用实时荧光定量PCR(q PCR)比较两种细胞中miR-490-3p的表达水平,将miR-490-3p的过表达载体pc DNA3.1(+)-miR-490-3p瞬时转染至MCF-7/ADM细胞(过表达组)后采用q PCR检测转染效果,同时设pc DNA3.1(-)空载体对照组和空白对照组;采用MTT法测定转染pc DNA3.1(+)-miR-490-3p对各组MCF-7/ADM细胞增殖能力的影响,测定ADM对MCF-7/ADM细胞的增殖抑制率并计算半数抑制浓度(IC50)及逆转倍数以评价对ADM敏感性的变化;分别于瞬时转染48 h后用Annexin V/FITC流式细胞术检测各组MCF-7/ADM细胞的凋亡率,Western blotting检测耐药蛋白P-糖蛋白(P-gp),乳腺癌耐药蛋白(BCRP)和多药耐药相关蛋白1(MRP1)的表达,荧光分光光度计检测胞内ADM药物浓度,流式细胞仪检测P-gp活性。结果MCF-7/ADM细胞中miR-490-3p的表达水平为0.24±0.07,显著低于野生型MCF-7细胞的1.02±0.03(P〈0.05);过表达组瞬时转染24~96 h的miR-490-3p水平持续升高,均高于空载体对照组和空白对照组(P〈0.05);过表达组的增殖抑制率随转染时间的延长而增加,转染24、48、72和96 h的增殖抑制率依次为(17.52±1.87)%、(31.67±2.79)%、(45.09±1.88)%和(61.82±2.52)%,高于空载体对照组(P〈0.05);ADM对过表达组的IC50值为(11.27±2.34)μg/ml,低于空白对照组的和空载体对照组(P〈0.05),且过表达组相对于空白对照组和空载体对照组的逆转倍数分别为3.35倍和3.39倍;与其余两组相比,过表达组的MCF-7/ADM细胞早、晚期凋亡率和细胞内药物浓度均升高,P-gp、BCRP和MRP1表达及P-gp活性均降低,差异均有统计学意义(P〈0.05)。结论上调miR-490-3p可逆转MCF-7/ADM细胞对ADM的耐药性,� 展开更多
关键词 乳腺癌 mir-490-3p 阿霉素耐药 耐药蛋白
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lncRNA CASC19靶向miR-490-3p调控骨肉瘤细胞增殖、迁移和侵袭的分子机制 被引量:2
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作者 周剑 张香 +1 位作者 刘林 梁涛 《西部医学》 2021年第2期211-216,222,共7页
目的探讨lncRNA CASC19对骨肉瘤细胞的增殖、迁移和侵袭的影响以及潜在的作用机制。方法实验设置si-con组、si-CASC19组、pcDNA组、pcDNA-CASC19组、miR-con组、miR-490-3p组、si-CASC19+anti-miR-con组、si-CASC19+anti-miR-490-3p组;q... 目的探讨lncRNA CASC19对骨肉瘤细胞的增殖、迁移和侵袭的影响以及潜在的作用机制。方法实验设置si-con组、si-CASC19组、pcDNA组、pcDNA-CASC19组、miR-con组、miR-490-3p组、si-CASC19+anti-miR-con组、si-CASC19+anti-miR-490-3p组;qRT-PCR检测miR-490-3p和CASC19的表达水平;Western blot检测蛋白表达;MTT法检测细胞活性;Transwell检测各组细胞迁移和侵袭;双荧光素酶报告基因检测实验检测荧光活性。结果骨肉瘤细胞MG63、U2-OS、OS187中miR-490-3p低表达,CASC19高表达(P<0.05);过表达miR-490-3p或干扰CASC19表达可抑制骨肉瘤细胞MG63增殖、迁移和侵袭。CASC19靶向调控miR-490-3p的表达,抑制miR-490-3p表达能逆转干扰CASC19对骨肉瘤细胞MG63增殖、迁移、侵袭的抑制作用。结论lncRNA CASC19可抑制骨肉瘤细胞的增殖、迁移和侵袭,其机制可能与靶向调控miR-490-3p有关,将可为骨肉瘤的预防和治疗提供新靶点。 展开更多
关键词 Lnc CASC19 mir-490-3p 骨肉瘤 增殖 迁移 侵袭
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hsa_circ_0006948靶向miR-490-3p调控自噬相关蛋白7对骨肉瘤细胞增殖迁移和侵袭的影响 被引量:2
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作者 代文 刘涵 张鹏 《中华肿瘤杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第4期457-465,共9页
目的探讨hsa_circ_0006948(circ_0006948)对骨肉瘤细胞增殖、迁移和侵袭的影响及其作用机制。方法120例骨肉瘤组织和40例癌旁正常组织标本来源于2009—2015年就诊于商丘市第一人民医院的骨肉瘤患者。采用微阵列分析筛选骨肉瘤细胞Saos-... 目的探讨hsa_circ_0006948(circ_0006948)对骨肉瘤细胞增殖、迁移和侵袭的影响及其作用机制。方法120例骨肉瘤组织和40例癌旁正常组织标本来源于2009—2015年就诊于商丘市第一人民医院的骨肉瘤患者。采用微阵列分析筛选骨肉瘤细胞Saos-2中差异表达的circRNA,实时荧光定量聚合酶链反应检测骨肉瘤细胞Saos-2和正常成骨细胞NHOst、骨肉瘤组织及癌旁组织中circ_0006948、miR-490-3p和自噬相关蛋白7(ATG7)mRNA的表达水平,细胞克隆形成实验检测细胞的增殖能力,Transwell实验检测细胞的侵袭能力,细胞划痕实验检测细胞的迁移能力,双荧光素酶报告基因实验检测circ_0006948与miR-490-3p、miR-490-3p与ATG7之间的相互作用,TargetScan数据库分析miR-490-3p与ATG7的相关性,Western blot法检测细胞中Bcl-2和Bax蛋白的表达水平。结果Saos-2细胞中circ_0006948、miR-490-3p和ATG7 mRNA的表达水平与NHOst细胞差异均有统计学意义(均P<0.01),骨肉瘤组织及癌旁正常组织中circ_0006948、miR-490-3p和ATG7 mRNA的表达水平差异均有统计学意义(均P<0.01)。circ_0006948-siRNA组细胞的克隆数目、迁移数目和迁移率分别为(32.78±1.76)个、(37.58±1.82)个和(36.93±1.45)%,均低于siRNA NC组[分别为(65.72±1.45)个、(78.63±1.93)个和(65.32±1.74)%,均P<0.01]。miR-490-3p mimics组细胞的克隆数目、迁移数目和迁移率分别为(20.08±1.54)个、(30.24±1.78)个和(21.15±1.68)%,均低于mimics NC组[分别为(60.36±1.83)个、(76.93±1.64)个和(40.56±1.27)%,均P<0.01]。miR-490-3p inhibitor+siRNA NC组细胞的克隆数目、迁移数目和迁移率分别为(90.34±1.72)个、(120.89±2.34)个和(70.83±1.93)%,均高于inhibitor NC+siRNA NC组[分别为(61.27±1.73)个、(75.82±1.82)个和(42.38±1.74)%,均P<0.01]。circ_0006948 siRNA+miR-490-3p inhibitor组细胞的克隆数、迁移数和迁移率分别为(58.74±1.98)个、(73.46±1.04)个和(40.35±1.72)%,均低于miR-490-3p inhibitor+siRNA NC组[分� 展开更多
关键词 骨肿瘤 hsa_circ_0006948 mir-490-3p 自噬相关蛋白7 增殖 侵袭 迁移
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lncRNA LINC00958对小细胞肺癌细胞阿帕替尼耐药性的影响 被引量:1
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作者 杨帆 荣腾浩 《中国细胞生物学学报》 CAS CSCD 2020年第11期1931-1940,共10页
研究lncRNA LINC00958对小细胞肺癌细胞的阿帕替尼(AP)耐药性的影响及其作用机制。采用逐步增加阿帕替尼浓度法建立小细胞肺癌阿帕替尼耐药细胞株H446/AP,分别用2.5μmol/L、5μmol/L、10μmol/L、20μmol/L、40μmol/L的阿帕替尼处理H... 研究lncRNA LINC00958对小细胞肺癌细胞的阿帕替尼(AP)耐药性的影响及其作用机制。采用逐步增加阿帕替尼浓度法建立小细胞肺癌阿帕替尼耐药细胞株H446/AP,分别用2.5μmol/L、5μmol/L、10μmol/L、20μmol/L、40μmol/L的阿帕替尼处理H446、H446/AP细胞,并检测阿帕替尼对其增殖抑制率的影响。然后将H446/AP细胞分为AP+si-NC组(转染LINC00958干扰载体阴性对照+5μmol/L阿帕替尼)、AP+si-LINC00958组(转染LINC00958干扰载体+5μmol/L阿帕替尼)、AP+miR-NC组(转染miR-490-3p模拟物阴性对照+5μmol/L阿帕替尼)、AP+miR-490-3p组(转染miR-490-3p模拟物+5μmol/L阿帕替尼)、AP+si-LINC00958+anti-miR-NC组(共转染LINC00958干扰载体和miR-490-3p抑制载体阴性对照+5μmol/L阿帕替尼)、AP+si-LINC00958+anti-miR-490-3p组(共转染LINC00958干扰载体和miR-490-3p抑制载体+5μmol/L阿帕替尼)。用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测LINC00958和miR-490-3p的表达水平;CCK-8检测细胞增殖抑制率;Western blot检测蛋白表达水平;细胞划痕实验检测细胞划痕愈合率;Transwell检测细胞迁移和侵袭;双荧光素酶报告实验检测LINC00958和miR-490-3p的靶向关系。结果显示,耐药和非耐药小细胞肺癌组织中LINC00958高表达,miR-490-3p低表达(P<0.05);相较于H446细胞,H446/AP细胞中LINC00958表达水平显著升高,miR-490-3p表达水平显著降低(P<0.05)。不同浓度阿帕替尼处理后,H446/AP相较于H446细胞增殖抑制率显著降低,半数抑制浓度(IC50)显著升高(P<0.05)。抑制LINC00958表达联合阿帕替尼和miR-490-3p过表达联合阿帕替尼,H446/AP细胞中CyclinD1、MMP-2、MMP-9表达水平显著降低,H446/AP细胞中p21表达水平显著升高,H446/AP细胞抑制率显著升高,划痕愈合率降低,H446/AP细胞迁移和侵袭数量显著降低(P<0.05)。LINC00958靶向调控miR-490-3p,干扰miR-490-3p表达逆转了抑制LINC00958表达对H446/AP细胞阿帕替尼耐药性的抑制作用。因此,抑制LINC00958表达联合� 展开更多
关键词 lncRNA LINC00958 mir-490-3p 小细胞肺癌 阿帕替尼 耐药性
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miR-490-3p通过抑制TGFβR1基因表达进而抑制结肠癌细胞的转移和侵袭 被引量:1
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作者 王晓凤 金红艳 《临床与病理杂志》 2016年第5期606-613,共8页
目的:研究miR-490-3p在结肠癌细胞(colorectal cance rcell,CRC)转移中的表现和生物功能,及其调控作用机制。方法:通过荧光定量PCR测定miR-490-3p在CRC细胞系的表达水平。细胞转染miR-490-3p以及shmiR-490-3p,观察miR-490-3p的过表达或... 目的:研究miR-490-3p在结肠癌细胞(colorectal cance rcell,CRC)转移中的表现和生物功能,及其调控作用机制。方法:通过荧光定量PCR测定miR-490-3p在CRC细胞系的表达水平。细胞转染miR-490-3p以及shmiR-490-3p,观察miR-490-3p的过表达或基因沉默对结肠癌细胞的转移能力是否有影响。miR-490-3p的分子靶标由双荧光素酶报告基因分析和免疫印迹技术进行实验认定。通过划痕实验,Transwell小室基质渗透实验对细胞迁移和侵袭能力进行鉴定。结果:miR-490-3p在CRC细胞系中显著低表达(P<0.05,P<0.01,P<0.001,n>3)。过表达miR-490-3p显著降低CRC细胞株的细胞迁移和侵袭能力(P<0.01,n>3)。miR-490-3p的基因沉默显著增加CRC细胞株的细胞迁移和侵袭能力(P<0.01,n>3)。结肠癌细胞细胞系中过表达miR-490-3p显著降低TGFβR1的基因表达(P<0.001,n>3),miR-490-3p基因沉默显著上调TGFβR1的基因表达(P<0.001,n>3)。过表达miR-490-3p抑制TGFβR1的萤光素酶活性(P<0.001,n>3),miR-490-3p基因沉默促进TGFβR1的萤光素酶活性(P<0.001,n>3)。TGFβR1基因沉默减弱shmiR-490介导的细胞迁移和侵袭促进效应(P<0.01,n>3)。结论:miR-490-3p通过抑制TGFβR1的基因表达从而抑制CRC细胞的转移。 展开更多
关键词 mir-490-3p 结肠癌 转移 侵袭 TGFβR1
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miR-490-3p通过靶向调控TGFBR1抑制非小细胞肺癌细胞的增殖和侵袭 被引量:1
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作者 李艳青 郭婷婷 +1 位作者 曾毅 周玉柏 《生物技术通讯》 CAS 2019年第3期315-320,共6页
目的:以非小细胞肺癌A549细胞为模型,探讨miR-490-3p在肺癌发生发展过程中的作用及其调控机制。方法:通过miRBase数据库获得miR-490-3p序列,设计miR-490-3pmimics并转染A549细胞,CCK8、细胞划痕及Transwell实验分别检测miR-490-3p过表达... 目的:以非小细胞肺癌A549细胞为模型,探讨miR-490-3p在肺癌发生发展过程中的作用及其调控机制。方法:通过miRBase数据库获得miR-490-3p序列,设计miR-490-3pmimics并转染A549细胞,CCK8、细胞划痕及Transwell实验分别检测miR-490-3p过表达对A549细胞增殖、迁移和侵袭能力的影响;使用miRwalk在线工具预测miR-490-3p可能的调控基因,通过实时荧光定量PCR及Western印迹对候选调控基因进行筛选,最后通过双萤光素酶报告基因实验验证miR-490-3p与调控基因之间的靶向关系。结果:过表达miR-490-3p可显著抑制A549细胞的增殖、侵袭和迁移能力;在预测的miR-490-3p候选靶基因中,选择与细胞增殖、迁移等表型相关的RASAL2、TGFBR1、PAPPA、HMGA2、TGFA靶基因进行实时荧光定量PCR及Western印迹筛选,结果仅TGFBR1基因在mRNA和蛋白水平的表达与miR-490-3p水平呈负相关,且双萤光素酶报告实验证实miR-490-3p可直接与TGFBR1的3'-UTR结合并抑制其表达。结论:miR-490-3p通过靶向调控TGFBR1的表达抑制非小细胞肺癌A549细胞的增殖和侵袭。 展开更多
关键词 肺癌 mir-490-3p TGFBR1 增殖 侵袭 迁移
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microRNA-490-3p抑制胶质瘤增殖及凋亡的作用研究 被引量:2
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作者 田伟 张娟 +5 位作者 王利娜 张泰民 贾万良 高岩 杨章超 马文群 《脑与神经疾病杂志》 2016年第12期762-766,共5页
目的探讨微小RNA-490-3p(miR-490-3p)对胶质瘤细胞增殖和凋亡的影响,观察miR-490-3p对胶质瘤生物学行为的影响。方法通过荧光实时定量PCR(qRT-PCR)检测16例胶质瘤样本、胶质瘤旁组织及4种胶质瘤细胞系中miR-490-3p的表达;利用人工合成mi... 目的探讨微小RNA-490-3p(miR-490-3p)对胶质瘤细胞增殖和凋亡的影响,观察miR-490-3p对胶质瘤生物学行为的影响。方法通过荧光实时定量PCR(qRT-PCR)检测16例胶质瘤样本、胶质瘤旁组织及4种胶质瘤细胞系中miR-490-3p的表达;利用人工合成miR-490-3p mimic瞬时转染脑胶质瘤细胞株,qRT-PCR检测细胞中miR-490-3p的表达水平;采用MTT比色法检测胶质瘤细胞增殖情况;流式细胞术检测胶质瘤细胞凋亡。结果胶质瘤样本及胶质瘤细胞系中miR-490-3p的表达量较瘤旁与正常胶质细胞系显著降低,miR-490-3p mimic能够显著上调胶质瘤细胞株中miR-490-3p的表达水平,并显著抑制胶质瘤细胞株U251、U87细胞的增殖能力显著增加细胞凋亡数量;结论 miR-490-3p在胶质瘤样本及胶质瘤细胞系中呈现低表达,过表达miR-490-3p有效抑制了胶质瘤细胞株的增殖,增加凋亡,提示miR-490-3p可能成为胶质瘤治疗的新靶点。 展开更多
关键词 胶质瘤 微小RNA-93 细胞增殖 细胞凋亡
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花姜酮调控miR-490-3p/Bcl-w诱导肝癌细胞凋亡和抑制细胞迁移、侵袭的机制 被引量:2
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作者 曹斌 《中国老年学杂志》 CAS 北大核心 2021年第23期5335-5340,共6页
目的探讨花姜酮对肝癌细胞增殖、凋亡、迁移及侵袭的影响及可能的作用机制。方法 MTT实验检测花姜酮对肝癌Hep3B细胞活性的影响;流式细胞术检测花姜酮对Hep3B细胞凋亡率的影响;Transwell实验检测花姜酮对Hep3B细胞迁移及侵袭能力的影响... 目的探讨花姜酮对肝癌细胞增殖、凋亡、迁移及侵袭的影响及可能的作用机制。方法 MTT实验检测花姜酮对肝癌Hep3B细胞活性的影响;流式细胞术检测花姜酮对Hep3B细胞凋亡率的影响;Transwell实验检测花姜酮对Hep3B细胞迁移及侵袭能力的影响;采用qRT-PCR与Western印迹检测花姜酮对微小RNA-490-3p(miR-490-3p)、B细胞淋巴因子(Bcl)-w表达水平的影响;双荧光素酶报告基因检测验证miR-490-3p与Bcl-w的靶向调控作用。结果花姜酮可抑制Hep3B细胞增殖(P<0.05),降低细胞凋亡率(P<0.05),减少迁移及侵袭细胞数目(P<0.05),抑制Bcl-w的表达(P<0.05);双荧光素酶报告实验证实miR-490-3p能够特异性结合Bcl-w,并可调控Bcl-w的表达及活性;miR-490-3p过表达能够抑制Hep3B细胞增殖、迁移及侵袭(P<0.05),促进细胞凋亡(P<0.05),与之相反,Bcl-w过表达可逆转miR-490-3p过表达对Hep3B细胞增殖、迁移、侵袭、凋亡的作用;Bcl-w过表达可逆转花姜酮对Hep3B细胞生物学行为的作用。结论花姜酮可通过上调miR-490-3p的表达及下调Bcl-w的表达从而抑制肝癌细胞增殖、迁移、侵袭,诱导细胞凋亡。 展开更多
关键词 花姜酮 mir-490-3p BCL-W 肝癌 迁移 侵袭 凋亡
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微小RNA-490-3p靶向FK506相关蛋白14表达抑制骨肉瘤MG63细胞侵袭和迁移的实验研究
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作者 陈夫圆 孙利平 +1 位作者 朱远见 孟猛 《安徽医药》 CAS 2022年第10期2063-2067,I0005,共6页
目的探讨微小RNA-490-3p(miR-490-3p)对骨肉瘤MG63细胞侵袭、迁移的影响及其机制。方法2019年9月至2020年4月,从中科院上海细胞库购买人骨肉瘤细胞株MG63进行体外培养,分为对照组(未转染)、miR-NC组(转染miR-NC)、miR-490-3p组(转染miR-... 目的探讨微小RNA-490-3p(miR-490-3p)对骨肉瘤MG63细胞侵袭、迁移的影响及其机制。方法2019年9月至2020年4月,从中科院上海细胞库购买人骨肉瘤细胞株MG63进行体外培养,分为对照组(未转染)、miR-NC组(转染miR-NC)、miR-490-3p组(转染miR-490-3p mimics),miR-490-3p+pcDNA组(共转染miR-490-3p mimics与空载体)和miR-490-3p+FKBP14组(共转染miR-490-3p mimics与FKBP14过表达载体),采用RT-PCR检测miR-490-3p表达,Transwell小室法检测细胞侵袭、迁移,蛋白质印迹法检测钙黏蛋白E(E-cadherin)、基质金属蛋白酶-2(MMP-2)、上皮间质转化因子Twist转录因子(Twist)和FK506相关蛋白14(FKBP14)蛋白表达,双荧光素酶报告基因实验检测miR-490-3p和FKBP14的靶向关系。结果与对照组比较,miR-490-3p组细胞中miR-490-3p表达水平明显升高(3.68±0.37比1.02±0.10,P<0.05),而侵袭细胞数(33.25±2.02比76.52±6.00,P<0.05)、迁移细胞数(45.56±3.38比97.85±6.45,P<0.05)及MMP-2、Twist和FKBP14蛋白的表达水平明显降低,E-cadherin蛋白表达水平明显升高;而miR-NC组和对照组之间差异无统计学意义(P>0.05)。双荧光素酶报告基因实验结果证实FKBP14是miR-490-3p的潜在靶基因。与miR-490-3p+pcDNA组比较,miR-490-3p+FKBP14组MG63细胞侵袭数、迁移数及MMP-2、Twist、FKBP14蛋白的表达水平明显升高,而E-cadherin蛋白的表达水平明显降低(均P<0.05)。结论miR-490-3p可通过靶向抑制FKBP14表达降低骨肉瘤MG63细胞的侵袭和迁移能力,可作为骨肉瘤治疗的分子靶点。 展开更多
关键词 骨肉瘤 骨肉瘤MG63 微小RNA-490-3p 细胞侵袭 迁移 FK506相关蛋白14
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miR-490-3p过表达对大鼠非酒精性脂肪性肝病的改善作用及其机制
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作者 龚杰 雷泽华 +3 位作者 张远威 黄雄 杜波 王志旭 《吉林大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2021年第6期1495-1501,共7页
目的:探讨miR-490-3p过表达对大鼠非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)的改善作用,并初步分析其作用机制。方法:32只雄性SD大鼠随机分为对照组、模型组、阴性对照组(mimic-NC组)和miR-490-3p模拟物组(miR-490-3p mimic组),每组8只。采用高脂饲料... 目的:探讨miR-490-3p过表达对大鼠非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)的改善作用,并初步分析其作用机制。方法:32只雄性SD大鼠随机分为对照组、模型组、阴性对照组(mimic-NC组)和miR-490-3p模拟物组(miR-490-3p mimic组),每组8只。采用高脂饲料喂养复制NAFLD大鼠模型,对照组大鼠不进行任何处理,mimic-NC组和miR-490-3p mimic组大鼠分别尾静脉注射含无意义序列和miR-490-3p mimic质粒的腺病毒。采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法检测各组大鼠肝组织中miR-490-3p表达水平,HE染色和油红O染色观察各组大鼠肝组织病理形态表现,ELISA法检测各组大鼠血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素6(IL-6)、白细胞介素1β(IL-1β)、丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)水平,RT-qPCR法检测各组大鼠肝组织中Toll样受体4(TLR4)和核因子κB(NF-κB)mRNA表达水平,Western blotting法检测各组大鼠肝组织中TLR4和NF-κB蛋白表达水平。结果:与对照组比较,模型组大鼠血清ALT、AST、TNF-α、IL-6、IL-1β和MDA水平和肝组织中TLR4 mRNA及蛋白、NF-κB mRNA表达水平均升高(P<0.05),血清SOD和GSH-Px水平及肝组织中miR-490-3p表达水平均降低(P<0.05);与模型组比较,miR-490-3p mimic组大鼠血清ALT、AST、TNF-α、IL-6、IL-1β、MDA水平和肝组织中TLR4 mRNA及蛋白、NF-κB mRNA表达水平均降低(P<0.05),血清SOD和GSH-Px水平和肝组织中miR-490-3p表达水平升高(P<0.05)。HE染色,对照组大鼠肝细胞排列均匀;模型组和mimic-NC组大鼠肝细胞中堆积大量脂肪,门管区伴有明显炎性细胞浸润,部分肝细胞呈坏死,并出现纤维化病变;miR-490-3p mimic组大鼠肝组织病变程度较模型组减轻。油红O染色,对照组大鼠肝组织中未见明显红染脂肪滴;模型组和mimic-NC组大鼠肝组织中可见明显红染的脂肪滴,数量多且体积大;miR-490-3p mimic组大鼠肝 展开更多
关键词 mir-490-3p 非酒精性脂肪性肝病 炎症反应 氧化应激 Toll样受体4/核因子κB信号通路
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