mir-130a-3p及smad 4在肝细胞癌组织中的表达及临床意义 被引量：12

1

作者 周争光 汪蕊 +5 位作者 李玉梅 杨燕 苏方 赵福友 吴穷 孙国平 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2017年第3期383-387,共5页

目的考察mir-130a-3p及靶基因smad 4在肝细胞癌(HCC)组织中表达及相关性,并分析两者表达与肝癌临床病理特征和预后的关系。方法从石蜡组织包埋的51例肝癌组织及相应癌旁组织中提取总RNA,应用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)方法检测mir-130a-3... 目的考察mir-130a-3p及靶基因smad 4在肝细胞癌(HCC)组织中表达及相关性,并分析两者表达与肝癌临床病理特征和预后的关系。方法从石蜡组织包埋的51例肝癌组织及相应癌旁组织中提取总RNA,应用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)方法检测mir-130a-3p的表达,并采用免疫组织化学Eli Vision(IHC)法测定肝癌组织及癌旁组织中smad 4表达,分析两者相关性、与临床病理参数及总生存时间(OS)之间的关系。结果 mir-130a-3p在肝癌组织中的表达水平(1.38±0.15)显著低于癌旁组织(2.48±0.16)(P<0.001)。在肝癌组织中,smad 4阳性表达率为72.5%(37/51),明显高于癌旁组织51.0%(26/51)(P<0.05)。mir-130a-3p和smad 4在肝癌组织中的表达呈负相关性(rs=-0.431,P<0.05)。mir-130a-3p和smad 4的表达水平与肝癌患者TNM分期有关(P<0.05),与年龄、性别、有无淋巴结转移、有无脉管癌栓及病理分级无关。肝癌组织中mir-130a-3p高表达患者中位OS(25.6个月)较低表达组(23.1个月)延长,但差异无统计意义;smad 4阴性表达组中位OS(26.7个月)较阳性表达组(20.0个月)显著延长(P<0.05)。结论 mir-130a-3p在肝癌组织中表达下调,可能通过调控smad 4的表达参与了肝癌的发生发展,mir-130a-3p有望成为肝癌潜在的治疗靶点及预后判断因子。 展开更多

关键词 mir-130a-3p SMAD 4 肝细胞肝癌

下载PDF 职称材料

LncRNA HOTAIR调控miR-130a-3p对骨关节炎软骨细胞增殖和分化的影响 被引量：10

2

作者 孙强 赵轶男 +1 位作者 王远瑞 张大伟 《中国骨与关节杂志》 CAS 2019年第12期931-937,共7页

目的探讨长链非编码RNA(lncRNA)HOX转录物反义RNA(HOTAIR)对骨关节炎(osteo-arthritis,OA)软骨细胞增殖和分化的影响及机制。方法采用RT-PCR检测OA患者和半月板损伤患者膝关节软骨组织中HOTAIR的表达水平;在OA软骨细胞中转染siRNA-HOTAI... 目的探讨长链非编码RNA(lncRNA)HOX转录物反义RNA(HOTAIR)对骨关节炎(osteo-arthritis,OA)软骨细胞增殖和分化的影响及机制。方法采用RT-PCR检测OA患者和半月板损伤患者膝关节软骨组织中HOTAIR的表达水平;在OA软骨细胞中转染siRNA-HOTAIR(si-HOTAIR)或过表达HOTAIR的慢病毒载体(LV-HOTAIR),采用CCK8法检测细胞增殖情况,RT-PCR和western blot检测BMP2、BMP4、BMP6和RUNX2 mRNA和蛋白表达水平。结果HOTAIR在OA患者膝关节软骨组织中的表达水平明显高于半月板损伤患者[(3.217±0.650)vs.(1.161±0.316),P=0.000];同时在OA软骨细胞的表达水平明显高于正常软骨细胞[(1.467±0.121)vs.(1.030±0.119),P=0.012]。在OA软骨细胞转染si-HOTAIR后,OA软骨细胞增殖能力增加[(1.190±0.099)vs.(0.83±0.057),P=0.005],分化相关分子BMP2、BMP4、BMP6、RUNX2 mRNA和蛋白表达水平明显升高[(1.805±0.078)vs.(1.050±0.132),(1.635±0.092)vs.(1.023±0.068),(1.715±0.064)vs.(1.053±0.119),(1.702±0.068)vs.(1.003±0.075),P=0.001,0.000,0.001,0.000]。在OA软骨细胞转染LV-HOTAIR后,OA软骨细胞增殖[(0.645±0.064)vs.(0.890±0.028),P=0.004]和分化[(0.704±0.071)vs.(1.009±0.088),(0.636±0.074)vs.(1.003±0.031),(0.645±0.068)vs.(1.014±0.068),(0.693±0.071)vs.(0.994±0.044),P=0.009,0.001,0.003,0.003]明显抑制。miR-130a-3p在OA软骨细胞的表达水平明显低于正常软骨细胞[(0.463±0.104)vs.(0.990±0.092),P=0.003],同时HOTAIR和miR-130a-3p在OA患者膝关节软骨组织中的表达呈负相关(R=-0.977,P=0.000),双荧光素酶结果显示HOTAIR能够靶向结合miR-130a-3p[(0.970±0.065)vs.(0.560±0.038),P=0.001]。在共转染si-HOTAIR和miR-130a-3p inhibitors后能够逆转低表达HOTAIR对OA软骨细胞增殖和分化的影响(P均>0.05),然而在共转染si-HOTAIR和miR-130a-3p mimics后能够进一步加强低表达HOTAIR对OA软骨细胞增殖[(1.505±0.078)vs.(1.190±0.099),P=0.000]和分化[(2.510±0.085)vs.(1.820±0.085),(2.175±0.134)vs.(1.660±0.113),(2.050±0.212)vs.(1.690±0.05 展开更多

关键词 骨关节炎 细胞增殖 细胞分化 软骨细胞 lncRNA HOTAIR mir-130a-3p

原文传递

miR-130a-3p对膀胱癌细胞侵袭、迁移和凋亡的影响及对SPOCK1的调控作用 被引量：9

3

作者 宋歌 董彪 朱照伟 《郑州大学学报（医学版）》 CAS 北大核心 2020年第4期541-546,共6页

目的:探讨微小RNA-130a-3p(miR-130a-3p)对膀胱癌细胞侵袭、迁移和凋亡的影响及其分子机制。方法:采用qRT-PCR和Western blot法检测膀胱癌组织、癌旁正常组织以及人正常膀胱上皮细胞SV-HUC-1、膀胱癌细胞5637中miR-130a-3p和细胞外基质... 目的:探讨微小RNA-130a-3p(miR-130a-3p)对膀胱癌细胞侵袭、迁移和凋亡的影响及其分子机制。方法:采用qRT-PCR和Western blot法检测膀胱癌组织、癌旁正常组织以及人正常膀胱上皮细胞SV-HUC-1、膀胱癌细胞5637中miR-130a-3p和细胞外基质蛋白多糖(SPOCK1)mRNA及蛋白的表达。取5637细胞,分别转染miR-130a-3p mimics或si-SPOCK1,同时设阴性对照和空白对照,用MTT法检测细胞存活,Transwell小室法测定细胞侵袭和迁移,AnnexinV-FITC/PI双染法检测细胞凋亡,Western blot法检测MMP-2和Caspase-3蛋白的表达;用生物学信息预测和双荧光素酶报告实验分析miR-130a-3p和SPOCK1的靶向关系。结果:与癌旁组织和SV-HUC-1细胞相比,膀胱癌组织和细胞中miR-130a-3p的表达下调,SPOCK1 mRNA和蛋白的表达上调(P<0.05)。转染miR-130a-3p或沉默SPOCK1均可抑制膀胱癌细胞存活、侵袭和迁移,诱导其凋亡,并抑制MMP-2蛋白表达,促进Caspase-3蛋白表达(P<0.05)。经验证SPOCK1是miR-130a-3p的靶基因。结论:miR-130a-3p可能通过靶向调控SPOCK1的表达来抑制膀胱癌细胞侵袭、迁移,诱导其凋亡。 展开更多

关键词 膀胱癌 凋亡 mir-130a-3p SpOCK1

下载PDF 职称材料

miR-130a-3p调控SOX4对骨关节炎软骨细胞增殖、分化和炎症因子释放的影响 被引量：8

4

作者 赵轶男 孙强 +2 位作者 毕龙 陈小超 程建岗 《现代生物医学进展》 CAS 2019年第22期4201-4207,共7页

目的:探讨miR-130a-3p对骨关节炎(osteoarthritis, OA)软骨细胞增殖、分化和炎症因子释放的影响及作用机制。方法:收集我院住院的40例半月板损伤患者和40例OA患者,采用RT-PCR检测半月板损伤患者和OA患者膝关节软骨组织中miR-130a-3p的... 目的:探讨miR-130a-3p对骨关节炎(osteoarthritis, OA)软骨细胞增殖、分化和炎症因子释放的影响及作用机制。方法:收集我院住院的40例半月板损伤患者和40例OA患者,采用RT-PCR检测半月板损伤患者和OA患者膝关节软骨组织中miR-130a-3p的表达。在OA软骨细胞中分别转染miR-NC、miR-130a-3p mimics、miR-130a-3p inhibitors、si RNA-SOX4(si-SOX4)或过表达SOX4的慢病毒载体(LV-SOX4),采用CCK8法检测细胞增殖情况;RT-PCR和western blot检测细胞分化相关分子BMP2和BMP4;RT-PCR检测炎症因子IFN-γ和TNF-α的表达。结果:半月板损伤患者软骨组织和软骨细胞中miR-130a-3p的表达明显高于OA患者(P均<0.05),而SOX4的表达水平明显低于OA患者(P<0.05)。OA患者膝关节软骨组织中miR-130a-3p和SOX4的表达呈显著负相关(P<0.05)。miR-130a-3p mimics能够明显促进OA软骨细胞增殖(P<0.05)、增加分化相关分子BMP2和BMP4的表达(P均<0.05)以及抑制炎症因子IFN-γ和TNF-α的表达(P均<0.05)。miR-130a-3p inhibitors能够明显抑制OA软骨细胞增殖(P<0.05)、分化相关分子BMP2和BMP4的表达(P均<0.05)以及促进炎症因子IFN-γ和TNF-α的表达(P均<0.05)。OA软骨细胞在转染miR-130a-3p mimics后,SOX4 mRNA和蛋白的表达水平明显降低(P均<0.05),在转染miR-130a-3p inhibitors后,SOX4 mRNA和蛋白的表达水平明显升高(P均<0.05)。双荧光素酶结果显示miR-130a-3p能够靶向结合SOX4。在OA软骨细胞中,采用si RNA低表达SOX4后,明显促进细胞增殖和分化以及抑制炎症因子的释放。共转染miR-130a-3p mimics和LV-SOX4能够逆转过表达miR-130a-3p对OA软骨细胞增殖、分化和炎症因子释放的影响(P均>0.05),而共转染miR-130a-3p inhibitors和LV-SOX4能够进一步加强低表达miR-130a-3p对OA软骨细胞增殖、分化和炎症因子的影响(P均<0.05)。结论:miR-130a-3p在OA中明显低表达,并能够通过靶向抑制SOX4促进OA软骨细胞增殖、分化和炎症因子释放。 展开更多

关键词 mir-130a-3p 骨关节炎 SOX4 增殖 分化 炎症因子

原文传递

LncRNA HOTAIR通过miR-130a-3p/ABCC5调控乳腺癌细胞紫杉醇耐药的分子机制研究 被引量：2

5

作者 何宇 袁志鹏 +2 位作者 卢志斌 廖景升 贾筠 《医学分子生物学杂志》 CAS 2023年第4期316-323,共8页

目的探讨长链非编码RNA(long noncoding RNA,LncRNA)HOTAIR调控乳腺癌细胞紫杉醇耐药的潜在分子机制。方法筛选出乳腺癌紫杉醇抗性细胞系(MCF7/TR细胞),并且检测MCF7/TR细胞以及亲代细胞的HOTAIR的表达水平以及紫杉醇耐药指标(增殖水平... 目的探讨长链非编码RNA(long noncoding RNA,LncRNA)HOTAIR调控乳腺癌细胞紫杉醇耐药的潜在分子机制。方法筛选出乳腺癌紫杉醇抗性细胞系(MCF7/TR细胞),并且检测MCF7/TR细胞以及亲代细胞的HOTAIR的表达水平以及紫杉醇耐药指标(增殖水平、凋亡水平、细胞周期、细胞内紫杉醇浓度)。结果敲低HOTAIR后,紫杉醇处理可以显著抑制MCF7/TR细胞的增殖和诱导细胞凋亡,并且诱导MCF7/TR细胞停滞于G_(1)期。敲低HOTAIR后MCF7/TR细胞内紫杉醇浓度升高。miR-130a-3p与HOTAIR存在相互作用。过表达miR-130a-3p时MCF7/TR细胞内紫杉醇浓度明显升高,敲低HOTAIR后,MCF/TR细胞中miR-130a-3p的表达水平升高。miR-130a-3p靶向ABCC5 mRNA的3′端非翻译区。过表达ABCC5时MCF7/TR细胞内紫杉醇浓度明显升高。结论LncRNA HOTAIR通过miR-130a-3p/ABCC5轴减少了紫杉醇耐药细胞中紫杉醇细胞内水平,促进了乳腺癌细胞对紫杉醇的耐药。 展开更多

关键词 HOTAIR mir-130a-3p ABCC5 乳腺癌 紫杉醇

下载PDF 职称材料

miR-130a-3p通过抑制CXCL12抑制鼻咽癌细胞增殖与侵袭 被引量：4

6

作者 刘春丽 张洁 +3 位作者 齐志伟 梁媛 黄跃雁 张淑君 《中国实验诊断学》 2017年第12期2168-2170,共3页

目的探讨miR-130a-3p对人鼻咽癌细胞CNE-1功能的影响及其可能的靶向基因。方法采用脂质体介导方法将miR-130a-3p模拟物(实验组)或对照模拟物(对照组)转染CNE-1细胞,分别用CCK-8法和Transwell试验检测细胞增殖侵袭和迁移能力变化,Western... 目的探讨miR-130a-3p对人鼻咽癌细胞CNE-1功能的影响及其可能的靶向基因。方法采用脂质体介导方法将miR-130a-3p模拟物(实验组)或对照模拟物(对照组)转染CNE-1细胞,分别用CCK-8法和Transwell试验检测细胞增殖侵袭和迁移能力变化,Western Blot检测趋化因子CXCL12蛋白表达。结果相较对照组,实验组CNE-1细胞的增殖,侵袭和迁移能力增强(P<0.05),细胞中CXCL12蛋白表达水平明显下调(P<0.05)。结论 miR-130a-3p可能通过调节CXCL12蛋白表达抑制人鼻咽癌细胞CNE-1细胞的增殖、侵袭和迁移。 展开更多

关键词 鼻咽癌 趋化因子 CXCL12 mir-130a-3p CNE-1细胞

下载PDF 职称材料

miR-130a-3p在HCC致病机制中的作用及作为预后标志物的评估

7

作者 张凯楠 温雯 +3 位作者 赵辉 叶建蔚 冉博 伏建峰 《联勤军事医学》 CAS 2023年第5期383-387,共5页

目的分析miR-130a-3p是否参与肝细胞癌(hepatocellalar carcinoma,HCC)疾病演进并抑制转移,评估其作为预后标志物的可能。方法基于癌症基因组图谱(The Cancer Genome Atlas,TCGA)数据库中miR-130a-3p的表达量和HCC患者生存信息,综合分析... 目的分析miR-130a-3p是否参与肝细胞癌(hepatocellalar carcinoma,HCC)疾病演进并抑制转移,评估其作为预后标志物的可能。方法基于癌症基因组图谱(The Cancer Genome Atlas,TCGA)数据库中miR-130a-3p的表达量和HCC患者生存信息,综合分析miR-130a-3p的表达分布以及对HCC诊断和预后价值的评估;通过抑制miR-130a-3p的表达,进而检测HepG2细胞增殖活力、细胞的迁移和侵袭能力;利用LncBase 3.0预测miR-130a-3p的靶基因,并通过Western blot检测V-maf肌骨神经纤维肉瘤肿瘤基因同源物B(V-maf musculoaponeurotic fibrosarcoma oncogene homolog B,MAFB)蛋白质表达水平,明确miR-130a-3p对MAFB的调控作用。结果miR-130a-3p在HCC组织中显著低表达(t=-13.556,P<0.001),且表达量与患者的总生存时间密切相关(Log-rank=4.675,HR=0.681,P=0.031),此外,其表达量还可以有效区分HCC患者和健康对照(AUC=0.891);抑制miR-130a-3p的表达后,HepG2细胞的增殖(t=24.950,P<0.001)、迁移(t=7.503,P=0.012)及侵袭(t=6.350,P=0.011)能力显著增强;MAFB是miR-130a-3p的靶基因之一,并且抑制miR-130a-3p后,其表达量上调(t=130,P<0.001)。结论miR-130a-3p可以作为HCC的预后评估标志物并抑制其转移。 展开更多

关键词 肝细胞癌 mir-130a-3p V-maf肌骨神经纤维肉瘤肿瘤基因同源物B 致病机制

下载PDF 职称材料

LncRNA PVT1靶向miR-130a-3p对肺炎链球菌感染的肺泡上皮细胞损伤的影响 被引量：4

8

作者 明是非 康秉南 程建敏 《毒理学杂志》 CAS CSCD 2020年第6期454-459,465,共7页

目的探究LncRNA PVT1靶向miR-130a-3p对肺炎链球菌感染的肺泡上皮细胞损伤的影响。方法本研究首先探究PVT1在肺炎链球菌坏死性肺炎肺组织和正常肺组织中的表达情况;然后构建PVT1敲减载体,转染肺泡上皮细胞A549,采用比色MTT测定法检测细... 目的探究LncRNA PVT1靶向miR-130a-3p对肺炎链球菌感染的肺泡上皮细胞损伤的影响。方法本研究首先探究PVT1在肺炎链球菌坏死性肺炎肺组织和正常肺组织中的表达情况;然后构建PVT1敲减载体,转染肺泡上皮细胞A549,采用比色MTT测定法检测细胞的增殖,流式细胞术检测细胞的凋亡,ELISA检测细胞因子IL-6和TGF-β的表达,qRT-PCR检测肺组织中PVT1的表达,以及A549细胞中PVT1和miR-130a-3p的表达,使用双荧光素酶实验和qRT-PCR试验测定PVT1和miR-130a-3p的靶向调控关系。结果与正常肺组织相比,肺炎链球菌坏死性肺炎肺组织中PVT1表达上调(P<0.05);肺炎链球菌感染可增加肺泡上皮细胞PVT1的表达(P<0.05),敲减PVT1后,可增加肺炎链球菌诱导的肺泡上皮细胞A549的增殖(P<0.05),减少A549的凋亡和炎性因子IL-6和TGF-β的表达(P<0.05)。进一步双荧光素酶实验证实PVT1可靶向负调控miR-130a-3p表达(P<0.05)。Anti-miR-130a-3p共转染A549细胞后,与SP+si-PVT1+anti-miR-con组相比,SP+si-PVT1+anti-miR-130a-3p组miR-130a-3p的表达明显降低(P<0.05),细胞增殖明显降低(P<0.05),凋亡增加(P<0.05),炎症因子TGF-β和IL-6表达明显升高(P<0.05)。结论LncRNA PVT1可靶向负调控miR-130a-3p,并减轻肺炎链球菌感染的肺泡上皮的损伤。 展开更多

关键词 LncRNA pVT1 mir-130a-3p 肺泡上皮细胞 肺炎链球菌 炎症

原文传递

低氧经miR-130a-3p靶向Sirt7对人滋养细胞迁移、侵袭及上皮-间质转化的影响

9

作者 杨春芬 钟黎黎 盛莹 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2023年第6期935-940,共6页

目的探究低氧条件下miR-130a-3p靶向去乙酰化酶7(Sirt7)对人绒毛膜滋养层细胞HTR-8/SVneo迁移、侵袭及上皮-间质转化(EMT)的影响及其作用机制。方法以HTR-8/SVneo细胞为研究对象,将miR-130a-3p inhibitor及其阴性对照inhibitor-NC转染... 目的探究低氧条件下miR-130a-3p靶向去乙酰化酶7(Sirt7)对人绒毛膜滋养层细胞HTR-8/SVneo迁移、侵袭及上皮-间质转化(EMT)的影响及其作用机制。方法以HTR-8/SVneo细胞为研究对象,将miR-130a-3p inhibitor及其阴性对照inhibitor-NC转染至细胞中或联合Sirt7抑制剂97491干预,采用低氧(1%O 2)处理48 h,qRT-PCR检测细胞中miR-130a-3p及Sirt7 mRNA表达水平;Transwell检测细胞迁移和侵袭能力;Western blot检测细胞中Sirt7、HIF-1α、MMP-2、MMP-9、E-cadherin、N-cadherin和Vimentin蛋白表达水平;TargetScan Human 7.1在线软件和双荧光素酶报告基因实验预测并验证miR-130a-3p与Sirt7的靶向关系。结果低氧可上调HTR-8/SVneo细胞中miR-130a-3p表达水平,下调Sirt7 mRNA和蛋白表达水平;miR-130a-3p低表达可升高Sirt7 mRNA表达水平;提高细胞迁移及侵袭能力;下调HIF-1α和E-cadherin蛋白表达水平,上调Sirt7、MMP-2、MMP-9、N-cadherin和Vimentin蛋白表达水平。然而,联合Sirt7抑制剂97491处理可逆转miR-130a-3p低表达对低氧细胞迁移、侵袭及上皮-间质转化的促进作用。结论miR-130a-3p在低氧诱导的滋养细胞中高表达,抑制miR-130a-3p表达可促进低氧条件下HTR-8/SVneo细胞迁移、侵袭及上皮-间质转化,其可能通过靶向Sirt7调控HIF-1α实现的。 展开更多

关键词 低氧 mir-130a-3p 去乙酰化酶7 滋养细胞 迁移 侵袭 上皮-间质转化

下载PDF 职称材料

过表达miR-130a-3p对心肌细胞肥大的缓解作用研究 被引量：4

10

作者 王晓姣 曲径 +3 位作者 李东旭 李君丽 吴文超 刘小菁 《生物医学工程学杂志》 EI CAS CSCD 北大核心 2020年第2期340-348,共9页

本研究旨在探索miR-130a-3p对心肌细胞肥大的作用及其可能机制。通过胸主动脉缩窄法(TAC)构建压力超负荷所致心肌肥厚小鼠模型。使用去甲肾上腺素(NE)刺激SD乳鼠原代心肌细胞(NRCMs)及H9c2大鼠心肌细胞系,诱导这两种心肌细胞发生肥大表... 本研究旨在探索miR-130a-3p对心肌细胞肥大的作用及其可能机制。通过胸主动脉缩窄法(TAC)构建压力超负荷所致心肌肥厚小鼠模型。使用去甲肾上腺素(NE)刺激SD乳鼠原代心肌细胞(NRCMs)及H9c2大鼠心肌细胞系,诱导这两种心肌细胞发生肥大表型转变。检测miR-130a-3p的表达变化,并进一步探索其对心肌细胞肥大是否有调控作用。结果表明,miR-130a-3p在肥厚心肌组织、肥大NRCMs及H9c2细胞中的表达均明显降低。给予miR-130a-3p mimics使其过表达后,H9c2细胞中肥大标志基因心房利钠肽(ANP)、脑利钠肽(BNP)和肌球蛋白重链β(β-MHC)的表达较对照组(mimics N.C.+NE组)明显下调,且细胞面积明显减小。而给予miR-130a-3p inhibitor抑制其表达后,肥大心肌细胞中ANP、BNP、β-MHC的表达进一步上升,且细胞面积进一步增加。Western blot检测发现,过表达miR-130a-3p后心肌细胞中磷酸化Akt和磷酸化mTOR的表达水平下调。以上结果提示,miR-130a-3p mimics可缓解心肌细胞肥大的程度;其inhibitor则可使心肌细胞肥大进一步加剧。过表达miR-130a-3p可能通过影响Akt通路来缓解H9c2心肌细胞肥大的程度。 展开更多

关键词 mir-130a-3p 心肌肥厚 心肌细胞肥大 压力超负荷 AKT

原文传递

LncRNA H19通过调控心肌纤维化进程促进急性心肌梗死 被引量：1

11

作者 苏兵 刘娟 +2 位作者 高晓峰 李硕 左莉莉 《中国老年学杂志》 CAS 北大核心 2023年第18期4529-4534,共6页

目的通过人源心肌成纤维细胞分析长链非编码RNA(LncRNA)H19对纤维化进程的影响,并探讨其在纤维化进程中的分子调控机制。方法通过血管紧张素(Ang)Ⅱ诱导人源心脏成纤维细胞(HCFs)纤维化,转染si-H19、miR-130a-3p inihibitor、pcDNA3.1-... 目的通过人源心肌成纤维细胞分析长链非编码RNA(LncRNA)H19对纤维化进程的影响,并探讨其在纤维化进程中的分子调控机制。方法通过血管紧张素(Ang)Ⅱ诱导人源心脏成纤维细胞(HCFs)纤维化,转染si-H19、miR-130a-3p inihibitor、pcDNA3.1-Ⅰ型TGF-β受体(TGFBR1)至细胞,以转染NC为对照。实时荧光定量-聚合酶链反应(qRT-PCR)检测H19、miR-130a-3p和TGFBR1的表达。通过CCK-8检测细胞的增殖活力变化;细胞划痕实验检测细胞的迁移能力变化;Western印迹检测纤维化相关蛋白胶原蛋白(Collagen)Ⅰ、CollagenⅢ和α-平滑肌肌动蛋白(SMA)的表达。通过生物信息学网站(http://www.csbio.sjtu.edu.cn/)预测及RNA-FISH、核质分离实验验证H19的亚细胞定位。Starbase数据库双荧光素酶切报告实验与RNA pull-down实验验证H19和miR-130a-3p与miR-130a-3p和TGFBR1的结合。结果AngⅡ处理的HCFs中H19主要表达于细胞质中,高表达的H19通过结合miR-130a-3p抑制其表达,促进TGFBR1的表达。AngⅡ处理后,HCFs增殖活力及迁移能力显著增加,CollagenⅠ、CollagenⅢ和α-SMA表达显著上调(P<0.001)。敲低H19的表达后,miR-130a-3p表达显著增加,TGFBR1表达显著减少,HCFs增殖活力及迁移能力显著降低,CollagenⅠ、CollagenⅢ和α-SMA表达显著下调(P<0.001)。抑制miR-130a-3p的表达或上调TGFBR1的表达均能部分逆转敲低H19后细胞增殖、迁移能力及纤维化蛋白的变化。结论LncRNA H19通过竞争性结合miR-130a-3p,调节TGFBR1的表达,促进心肌纤维化进程。 展开更多

关键词 急性心肌梗死 心肌纤维化 LncRNA H19 mir-130a-3p TGFBR1 增殖活力 迁移能力 纤维化蛋白

下载PDF 职称材料

miR-130a-3p通过下调CPEB4增加胶质母细胞瘤替莫唑胺的敏感性 被引量：2

12

作者 魏志豪 刘洪超 +2 位作者 史康克 张雨 李佳琼 《华南国防医学杂志》 CAS 2022年第9期683-688,共6页

目的探索miR-130a-3p对胶质母细胞瘤(glioblastoma,GBM)替莫唑胺(temozolomide,TMZ)化疗敏感性的影响与机制。方法采用实时荧光逆转录定量聚合酶链反应(real-time reverse transcription quantitative polymerase chain reaction,RT-qP... 目的探索miR-130a-3p对胶质母细胞瘤(glioblastoma,GBM)替莫唑胺(temozolomide,TMZ)化疗敏感性的影响与机制。方法采用实时荧光逆转录定量聚合酶链反应(real-time reverse transcription quantitative polymerase chain reaction,RT-qPCR)检测胶质瘤细胞T98G细胞和TMZ耐药T98G-R细胞中miR-130a-3p以及胞质多聚腺苷酸化元件结合蛋白4(cytoplasmic polyadenylation element binding protein 4,CPEB4)的相对表达水平。四甲基偶氮唑盐(methylthiazolyldiphenyl-tetrazolium bromide,MTT)实验检测胶质瘤细胞的增殖能力,流式细胞术检测细胞凋亡情况,荧光素酶报告实验检测miR-130a-3p与CPEB4的结合。结果T98G-R耐药细胞中miR-130a-3p表达水平较T98G细胞降低(0.25±0.08 vs.1.00±0.05,P<0.01),CPEB4表达水平较T98G细胞升高(1.37±0.17 vs.1.00±0.05,P<0.01)。MTT实验及流式细胞术结果表明,miR-130a-3p过表达可抑制胶质瘤细胞的增殖,促进TMZ诱导的细胞凋亡,但其可以被CPEB4过表达所逆转。荧光素酶报告实验显示,miR-130a-3p可以与CPEB4的3′-非翻译区结合,过表达miR-130a-3p抑制CPEB4的表达。结论miR-130a-3p通过靶向抑制CPEB4表达,促进胶质瘤细胞凋亡,增加GBM对TMZ的敏感性。 展开更多

关键词 胶质母细胞瘤 mir-130a-3p 替莫唑胺 细胞凋亡 胞质多聚腺苷酸化元件结合蛋白4

原文传递

沉默LncRNA H19通过调节miR-130a-3p促进顺铂诱导的卵巢癌细胞凋亡的机制研究 被引量：3

13

作者 茅诺娜 郑志莲 陈超庭 《中国性科学》 2021年第10期40-44,共5页

目的探讨LncRNA H19(H19)通过调节miR-130a-3p对顺铂诱导的卵巢癌细胞凋亡的影响。方法qRT-PCR用于分析基因表达;细胞转染建立基因过表达或沉默细胞模型;RNA免疫沉淀和双荧光素酶活性分析实验检测基因或蛋白之间的相互作用;流式细胞术... 目的探讨LncRNA H19(H19)通过调节miR-130a-3p对顺铂诱导的卵巢癌细胞凋亡的影响。方法qRT-PCR用于分析基因表达;细胞转染建立基因过表达或沉默细胞模型;RNA免疫沉淀和双荧光素酶活性分析实验检测基因或蛋白之间的相互作用;流式细胞术用于分析细胞凋亡率;Western blot(蛋白质印迹法)实验用于分析蛋白的表达。结果在顺铂耐药的卵巢癌组织和细胞中,H19与SRY-Box转录因子4(SOX4)高表达,而miR-130a-3p低表达。荧光素酶活性分析实验显示,miR-130a-3p与H19、SOX4存在靶向关系。沉默H19和过表达miR-130a-3p,可抑制SOX4蛋白表达,促进PA-1/DDP细胞凋亡。下调miR-130a-3p表达,可逆转H19对PA-1/DDP细胞的SOX4蛋白表达及细胞凋亡的影响;上调SOX4表达,可逆转miR-130a-3p对PA-1/DDP细胞凋亡的影响。结论在PA-1/DDP细胞中,沉默H19通过调节miR-130a-3p,进而抑制SOX4的表达,促进PA-1/DDP细胞凋亡。 展开更多

关键词 LncRNA H19 mir-130a-3p SRY-Box转录因子4 顺铂敏感性 卵巢癌

下载PDF 职称材料

miR-130a-3p靶向TRIM37蛋白缓解H2O2诱导的心肌损伤 被引量：2

14

作者 许德星 王伟 +2 位作者 张静怡 万发银 戴若竹 《华中科技大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2021年第1期14-20,共7页

目的研究微小RNA-130a-3p(miR-130a-3p)在H2O2损伤的HL-1细胞中的作用及其机制。方法建立H2O2诱导的HL-1心肌细胞氧化应激损伤模型,miR-130a-3p模拟物或TRIM37过表达载体被单独/共转染至H2O2诱导的HL-1细胞。荧光定量PCR检测miR-130a-3... 目的研究微小RNA-130a-3p(miR-130a-3p)在H2O2损伤的HL-1细胞中的作用及其机制。方法建立H2O2诱导的HL-1心肌细胞氧化应激损伤模型,miR-130a-3p模拟物或TRIM37过表达载体被单独/共转染至H2O2诱导的HL-1细胞。荧光定量PCR检测miR-130a-3p水平,Western blot检测TRIM37表达;双荧光素酶报告基因实验确定miR-130a-3p和TRIM37的靶向关系。CCK8法检测HL-1细胞活力;TUNEL染色检测HL-1细胞凋亡;比色法检测细胞培养上清中乳酸脱氢酶(LDH)的含量;Western blot检测凋亡相关蛋白的表达。结果H2O2刺激后HL-1细胞miR-130a-3p表达下调,TRIM37表达上调,miR-130a-3p过表达可抑制H2O2诱导的HL-1细胞活力下降,抑制细胞凋亡,减少LDH释放量。starBase网站预测和双荧光素酶报告基因实验结果证实了TRIM37是miR-130a-3p的下游靶点。miR-130a-3p上调可抑制TRIM37的表达。同时,TRIM37过表达逆转了miR-130a-3p对H2O2诱导的心肌细胞损伤的作用,降低了细胞活力,增加了LDH释放,促进了细胞凋亡。结论miR-130a-3p可通过抑制TRIM37表达从而减轻H2O2诱导的心肌损伤。 展开更多

关键词 mir-130a-3p TRIM37 心肌损伤

下载PDF 职称材料

LncRNA H19对肺炎链球菌诱导的肺泡上皮细胞的影响及其机制 被引量：2

15

作者 赵炎 叶飞 《内蒙古医学杂志》 2021年第8期906-910,共5页

目的研究LncRNA H19对肺炎链球菌(SP)诱导的肺泡上皮细胞的细胞活性、炎性因子及凋亡的影响及其作用机制。方法用1×10^(8)CFU/ml的肺炎链球菌(SP)培养A549细胞作为SP组,正常培养细胞作对照(control)组;将si-con、si-H19质粒转染至A... 目的研究LncRNA H19对肺炎链球菌(SP)诱导的肺泡上皮细胞的细胞活性、炎性因子及凋亡的影响及其作用机制。方法用1×10^(8)CFU/ml的肺炎链球菌(SP)培养A549细胞作为SP组,正常培养细胞作对照(control)组;将si-con、si-H19质粒转染至A549细胞中作为si-con组、si-H19组;再用1×10^(8)CFU/ml的SP培养,作为SP+si-con组和SP+si-H19组;si-H19分别与anti-miR-con、anti-miR-130a-3p共转染至A549细胞中,再用1×10^(8)CFU/mL的SP培养,作为SP+si-H19+anti-miR-con组和SP+si-H19+anti-miR-130a-3p组。qRT-PCR检测miR-130a-3p和H19表达水平;Western Blot检测IL-1β、IL-6和TNF-α蛋白表达水平;细胞计数试剂盒8(CCK-8)法检测肺泡上皮细胞A549增殖活性;流式细胞术检测细胞凋亡;荧光素酶报告基因检测实验检测H19和miR-130a-3p的靶向关系。结果SP诱导的A549细胞中H19、IL-1β、IL-6和TNF-α表达水平显著升高,细胞活性显著降低,凋亡率显著升高(P<0.05);敲减H19后SP诱导的A549细胞中IL-1β、IL-6和TNF-α表达水平显著降低,细胞活性显著升高,凋亡率显著降低(P<0.05)。与miR-con组相比,miR-130a-3p组转染H19野生型表达载体的A549细胞的荧光素酶活性显著降低(P<0.05);而转染H19突变型表达载体的A549细胞的荧光素酶活性差异不显著。相较于si-con组,si-H19组miR-130a-3p表达水平显著升高,与SP+si-H19+anti-miR-con组相比,SP+si-H19+anti-miR-130a-3p组miR-130a-3p表达水平显著降低,IL-1β、IL-6、TNF-α表达水平显著升高,细胞活性显著降低,细胞凋亡率显著升高(P<0.05)。结论敲减LncRNA H19可通过上调miR-130a-3p提高肺炎链球菌(SP)诱导的A549细胞活性,抑制炎性因子的表达,抑制细胞凋亡。 展开更多

关键词 LncRNA H19 mir-130a-3p 肺炎链球菌 肺泡上皮细胞 炎性因子

下载PDF 职称材料

miR-130a-3p通过HGF/MET信号通路抑制乳腺癌细胞MCF-7侵袭 被引量：2

16

作者 刘海旺 张宏旭 +2 位作者 李春辉 郝美玲 王军 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第11期1243-1248,共6页

目的:探究miR-130a-3p通过HGF/MET信号通路调控上皮间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)影响乳腺癌细胞侵袭转移的分子机制。方法:收集承德医学院附属医院2018年1月至10月收治的22例乳腺癌患者癌组织和配对癌旁组织标本,... 目的:探究miR-130a-3p通过HGF/MET信号通路调控上皮间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)影响乳腺癌细胞侵袭转移的分子机制。方法:收集承德医学院附属医院2018年1月至10月收治的22例乳腺癌患者癌组织和配对癌旁组织标本,乳腺癌细胞系(MCF-7、MDA-MB-231和MDA-MB-453)和正常乳腺上皮细胞MCF10A来自承德医学院基础研究所,然后采用q PCR检测组织和细胞系中miR-130a-3p的表达情况;将实验分为对照组、miR-130a-3p mimics组、miR-130a-3p inhibitor组、PHA665752(MET小分子抑制剂)转染组及共转PHA665752+miR-130a-3p inhibitor组,然后采用CCK-8法和Transwell实验分别检测MCF-7细胞增殖活力、侵袭和迁移能力;WB实验检测MCF-7细胞EMT和HGF/MET信号通路相关蛋白的表达情况;此外,采用双荧光素酶报告基因检测miR-130a-3p与MET之间的靶向关系。结果:miR-130a-3p在乳腺癌组织和细胞系中呈低表达;过表达miR-130a-3p可抑制MCF-7细胞增殖、侵袭、迁移和EMT;而抑制miR-130a-3p出现相反的结果。双荧光素酶报告基因结果证实miR-130a-3p靶向下调MET的表达水平,且miR-130a-3p负调控HGF/MET信号通路的表达;进一步实验证明,miR-130a-3p通过阻断HGF/MET信号通路抑制MCF-7细胞增殖、侵袭、迁移和EMT。结论:miR-130a-3p通过阻断HGF/MET信号通路抑制MCF-7细胞EMT过程,进而抑制MCF-7细胞侵袭转移。 展开更多

关键词 乳腺癌 上皮间质转化 侵袭 转移 mir-130a-3p HGF/MET信号通路

下载PDF 职称材料

MiR-130a-3p通过抑制BACH2抑制鼻咽癌细胞增殖和转移 被引量：3

17

作者 刘春丽 张洁 +3 位作者 齐志伟 梁媛 黄跃雁 张淑君 《中国地方病防治》 北大核心 2017年第12期1355-1357,共3页

目的探究对鼻咽癌细胞的作用及其靶向基因在鼻咽癌细胞中的相互作用机制.方法应用脂质法将MiR-130a-3p模拟物或pCMV-BACH2重组质粒转染进NPC细胞中,用MTT法检测细胞增殖情况,用划痕试验检测细胞转移功能,用Western bloting检测相关蛋白... 目的探究对鼻咽癌细胞的作用及其靶向基因在鼻咽癌细胞中的相互作用机制.方法应用脂质法将MiR-130a-3p模拟物或pCMV-BACH2重组质粒转染进NPC细胞中,用MTT法检测细胞增殖情况,用划痕试验检测细胞转移功能,用Western bloting检测相关蛋白表达水平.结果 (1)NP9细胞株中miR130a-3p表达量显著低于NPC细胞株,BACH2的mRNA和蛋白质表达量在NPC细胞株明显高于NP9细胞组.(2)miR130a-3p过度表达抑制细胞增殖和转移.(3)miR130a-3p在NPC细胞中靶向作用于BACH2.(4)下调BACH2抑制NPC细胞增殖和迁移.(5)过表达BACH2降低miR130a-3p在NPC细胞的抑制作用.结论 miR130a-3p是一种NPC肿瘤抑制基因,抑制BACH2抑制鼻炎癌细胞增殖和转移. 展开更多

关键词 mir-130a-3p BACH2 鼻咽癌 EMT

原文传递

长非编码RNA ILF3-AS1通过调控miR-130a-3p/PTEN轴抑制宫颈癌细胞的增殖 被引量：1

18

作者 胡盈盈 毛蕾蕾 +1 位作者 潘镏镏 屈王蕾 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第4期524-532,共9页

ILF3反义RNA 1(ILF3 antisense RNA 1,ILF3-AS1)是一条定位于染色体19p13.2的lncRNA,它是白介素增强子结合因子3(interleukin enhancer binding factor 3,ILF3)的反义RNA。ILF3-AS1在多种肿瘤发生发展中发挥关键作用,但其在宫颈癌中的... ILF3反义RNA 1(ILF3 antisense RNA 1,ILF3-AS1)是一条定位于染色体19p13.2的lncRNA,它是白介素增强子结合因子3(interleukin enhancer binding factor 3,ILF3)的反义RNA。ILF3-AS1在多种肿瘤发生发展中发挥关键作用,但其在宫颈癌中的作用尚无研究探讨。本文利用TCGA及GTEx数据库进行生物信息学分析提示,ILF3-AS1在宫颈癌组织中低表达(P<0.001)并与良好预后相关(P=0.045)。qRT-PCR结果显示,ILF3-AS1在宫颈癌组织及SiHa、HeLa、CaSki宫颈癌细胞系中表达较对照组均呈下降趋势。过表达ILF3-AS1可明显抑制宫颈癌细胞增殖活力及促进宫颈癌细胞凋亡。Star Base v3.0数据库分析提示,ILF3-AS1可靶向吸附miR-130a-3p;而miR-130a-3p可靶向结合PTEN。qRT-PCR检测显示,miR-130a-3p在宫颈癌中的表达量明显高于正常宫颈组织(P<0.01)。荧光素酶报告基因结果显示,ILF3-AS1可以与miR-130a-3p特异性结合(P<0.01)。HeLa细胞过表达ILF3-AS1后,miR-130a-3p表达量明显下调(P<0.01);在过表达ILF3-AS1细胞中,同时转染miR-130a-3p mimics,能部分逆转LF3-AS1对于细胞增殖的抑制作用(P<0.001)。HeLa细胞在过表达ILF3-AS1后,磷酸酶及张力蛋白同源物基因(phosphatase and tensin homolog deleted on chromosome ten,PTEN)mRNA(P<0.001)及蛋白质(P<0.001)表达量显著升高;当同时转染miR-130a-3p mimics,PTEN的mRNA(P<0.001)及蛋白质(P<0.001)的表达升高被明显抑制。综上,ILF3-AS1可以作为miR-130a-3p的吸附海绵靶向调控PTEN表达,从而抑制宫颈癌细胞的增殖。 展开更多

关键词 长非编码RNA ILF3反义RNA mir-130a-3p 内源竞争RNA 宫颈癌

下载PDF 职称材料

miR-130a-3p下调STAT3对恶性黑素瘤细胞增殖、凋亡、迁移和侵袭的影响 被引量：1

19

作者 孙耀辉 宋继权 柯锦 《河北医药》 CAS 2020年第9期1301-1305,1310,共6页

目的探讨miR-130a-3p对黑素瘤细胞的增殖、凋亡、迁移和侵袭的影响以及潜在的作用机制。方法运用实时定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)检测黑色素瘤细胞A2058、WM239和正常人黑色素细胞HEMn中miR-130a-3p和STAT3 mRNA的表达水平;将miR-NC组... 目的探讨miR-130a-3p对黑素瘤细胞的增殖、凋亡、迁移和侵袭的影响以及潜在的作用机制。方法运用实时定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)检测黑色素瘤细胞A2058、WM239和正常人黑色素细胞HEMn中miR-130a-3p和STAT3 mRNA的表达水平;将miR-NC组(转染miR-NC)、miR-130a-3p组(转染miR-130a-3p mimics)、anti-miR-NC组(转染anti-miR-NC)、anti-miR-130a-3p组(转染anti-miR-130a-3p)、miR-130a-3p+pcDNA3.1组(共转染miR-130a-3p和pcDNA3.1)、miR-130a-3p+pcDNA3.1-STAT3组(共转染miR-130a-3p和pcDNA3.1-STAT3)、miR-NC+WT-STAT3组(共转染miR-NC和WT-STAT3)、miR-NC+MUT-STAT3组(共转染miR-NC和MUT-STAT3)、miR-130a-3p+WT-STAT3组(共转染miR-130a-3p和WT-STAT3)、miR-130a-3p+MUT-STAT3组(共转染miR-130a-3p和MUT-STAT3)均用脂质体法转染至黑素瘤A2058细胞中;采用CCK-8法检测细胞增殖;Transwell检测各组细胞迁移和侵袭;流式细胞术检测各组细胞的凋亡;Western Blot检测蛋白表达;双荧光素酶报告基因检测实验检测荧光活性。结果相较于正常人黑色素细胞HEMn,黑色素瘤细胞A2058、WM239中miR-130a-3p的表达水平显著降低(P<0.05);过表达miR-130a-3p可抑制A2058细胞增殖、迁移和侵袭,促进细胞凋亡;抑制Bcl-2、MMP-2蛋白的表达,促进Bax蛋、E-cadherin蛋白的表达。miR-130a-3p靶向调控STAT3的表达。过表达STAT3能逆转miR-130a-3p对A2058细胞增殖、迁移、侵袭的抑制和凋亡的促进作用。结论miR-130a-3p可抑制恶性黑素瘤细胞增殖、迁移和侵袭,促进其凋亡,其机制可能与靶向下调STAT3的表达有关,将可为恶性黑素瘤的预防和治疗提供新靶点。 展开更多

关键词 mir-130a-3p STAT3 恶性黑素瘤 增殖 凋亡 迁移 侵袭

下载PDF 职称材料

miR-130a-3p通过调控PDK1影响肝癌细胞糖代谢的研究

20

作者 李海龙 石杰 +2 位作者 郭林池 戚琪 于晓光 《医学分子生物学杂志》 CAS 2022年第3期206-212,共7页

目的探讨miR-130a-3p通过靶向糖代谢关键酶PDK1对肝癌细胞糖代谢以及增殖迁移的影响,为肝癌的诊断及治疗提供新的方向。方法qRT-PCR技术检测肝癌的临床组织和细胞中miR-130a-3p的表达,克隆形成、CCK-8、Transwell和细胞划痕实验检测细... 目的探讨miR-130a-3p通过靶向糖代谢关键酶PDK1对肝癌细胞糖代谢以及增殖迁移的影响,为肝癌的诊断及治疗提供新的方向。方法qRT-PCR技术检测肝癌的临床组织和细胞中miR-130a-3p的表达,克隆形成、CCK-8、Transwell和细胞划痕实验检测细胞的增殖和迁移;Western印迹检测相关蛋白的表达;乳酸检测试剂盒,ATP检测试剂盒和PDH活性检测试剂盒分别检测细胞中乳酸的生成、ATP的生成和PDH的活性;双荧光素酶报告基因实验验证miR-130a-3p与PDK13′UTR靶向结合。结果在肝癌组织和细胞中miR-130a-3p呈低表达,并与患者肿瘤组织的大小和TNM分期有关;过表达miR-130a-3p能够增强肝癌细胞中PDH活性,抑制乳酸和ATP的生成,从而抑制肝癌细胞的增殖和迁移;miR-130a-3p可以靶向调控PDK1;抑制PDK1的表达,能够逆转miR-130a-3p过表达对细胞增殖和迁移能力的增强,此外对PDH活性、乳酸和ATP的影响也被逆转。结论miR-130a-3p通过靶向调控PDK1影响肝癌细胞糖酵解及恶性进展。 展开更多

关键词 mir-130a-3p pDK1 肝癌 糖代谢

下载PDF 职称材料