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高通量测序技术在食品微生物检测中的应用 被引量:18
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作者 李桂澜 匡华 《食品安全质量检测学报》 CAS 2019年第15期5091-5097,共7页
微生物超标及食源性致病菌引发的生物污染是影响国家公共卫生的主要因素.新一代的高通量测序技术因其高覆盖度、高灵敏度、高准确性和低成本等特点,已经作为食品安全检测最重要技术逐渐替代常规DNA诊断和微生物分型方法.本文通过综述测... 微生物超标及食源性致病菌引发的生物污染是影响国家公共卫生的主要因素.新一代的高通量测序技术因其高覆盖度、高灵敏度、高准确性和低成本等特点,已经作为食品安全检测最重要技术逐渐替代常规DNA诊断和微生物分型方法.本文通过综述测序的发展历史和二代测序原理及流程,着重论述以高通量测序为基础的16S rRNA、全基因组、宏基因组以及宏转录组分析在现代食品安全实验室中的应用,展现了高通量测序技术在食品微生物检测、食源性致病菌监控及食品发酵工艺等方面的巨大优势. 展开更多
关键词 高通量测序技术 食品微生物检测 16S RRNA 全基因组测序 宏基因组测序 宏转录组测序
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酱香型白酒发酵过程中核心酵母的鉴别及其功能 被引量:9
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作者 宋哲玮 杜海 +1 位作者 聂尧 徐岩 《微生物学通报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第11期3504-3514,共11页
【背景】酵母是酱香型白酒发酵过程中最重要的微生物,但酵母群落中核心酵母的种类和功能尚不清晰。【目的】通过探索酱香型白酒发酵微生物群落中核心酵母的种类和功能,为揭示酱香型白酒酿造机制以及提升白酒品质提供理论支撑。【方法】... 【背景】酵母是酱香型白酒发酵过程中最重要的微生物,但酵母群落中核心酵母的种类和功能尚不清晰。【目的】通过探索酱香型白酒发酵微生物群落中核心酵母的种类和功能,为揭示酱香型白酒酿造机制以及提升白酒品质提供理论支撑。【方法】联合使用未培养(内转录间隔区扩增子和宏转录组高通量测序技术)和可培养(菌种筛选和模拟发酵实验)技术对酱香型白酒发酵过程中核心酵母的结构和功能进行定性和定量分析。【结果】内转录间隔区扩增子和宏转录组测序结果显示,酱香型白酒发酵过程中涉及10个属的酵母微生物,其中在发酵过程中平均相对丰度大于0.2%的酵母有13种,有2种核心酵母分别为库德威兹氏毕赤酵母(Pichia kudriavzevii)和粟酒裂殖酵母(Schizosaccharomyces pombe)。在发酵过程中,P.kudriavzevii占总量的89%以上,Schi.pombe表达了占总量21%以上的功能基因。模拟发酵实验结果显示P.kudriavzevii在酵母群落中发挥耐受乳酸积累的作用,而Schi.pombe在酵母群落中发挥耐受乙醇积累的作用,这两种作用保证了酱香型白酒发酵过程中酵母群落的结构和功能的稳定性。【结论】P.kudriavzevii和Schi.pombe是酱香型白酒发酵过程中的优势酵母,这两种酵母在生产中发挥了各自不同的作用。本研究进一步加深了核心酵母对于整个生产过程贡献的认识,有助于研究者认识到白酒发酵过程中对核心微生物进行调控的重要性。 展开更多
关键词 微生物群落 核心酵母 内转录间隔区扩增子测序 宏转录组测序 模拟发酵 群落结构和功能
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Full genomic sequence characterization of the chikungunya virus from an imported case with serum viral concentration below culturable level
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作者 Mengling Jiang Muchun Wan +9 位作者 Qinghong Fan Yuyi Min Guofang Tang Yingfen Wen Yaqing Lin Ruiying He Jiaojiao Li Yue Tang Yun Lan Feng Li 《Biosafety and Health》 CAS CSCD 2024年第5期304-309,共6页
Chikungunya virus(CHIKV)infection,responsible for chikungunya fever and occasionally severe symptoms,has emerged as an increasing global health concern following several large-scale outbreaks from Africa,Asia,Europe,a... Chikungunya virus(CHIKV)infection,responsible for chikungunya fever and occasionally severe symptoms,has emerged as an increasing global health concern following several large-scale outbreaks from Africa,Asia,Europe,and America.Over the past two decades,South and Southeast Asia regions have gradually become hot spots for outbreaks involving multiple CHIKV lineages.In China,most CHIKV infections are imported,making it crucial to trace the origins and transmission routes for effective prevention and control.In January 2024,a case of imported chikungunya fever was confirmed in Guangzhou City,Guangdong Province,China.However,the serum CHIKV viral concentration was too low for cultivation[reverse transcription-polymerase chain reaction(RT-PCR)detection,cycle threshold=32.62].Despite this,we suc-cessfully obtained the viral genome sequence directly from the whole blood sample using an optimized meta-transcriptomic sequencing strategy,achieving a full-length viral genome with an average depth of 54.3x.Further analysis confirmed that the CHIKV virus belonged to the Asian lineage,traced to Timor-Leste,where an endemic CHIKV outbreak had been reported in January 2024,consistent with the patient's travel history.Finally,we analyzed genetic evolutionary trends and amino acid site variations.This study highlights the iden-tification of a CHIKV infection origin using direct whole-blood metatranscriptomic sequencing,a valuable method for rapidly sequencing low viral-load samples. 展开更多
关键词 Chikungunya virus(CHIKV) Viral sequencing metatranscriptomic sequencing Phylogenetic analysis
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宏转录组测序揭示褐土脲酶基因的表达丰度和细菌来源 被引量:2
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作者 胡利伟 轩贝贝 +9 位作者 戴华鑫 郭建华 牟文君 刘阳 翟振 闫鼎 蔡宪杰 奚家勤 薛超群 宋纪真 《烟草科技》 EI CAS CSCD 北大核心 2020年第11期7-14,共8页
为明确褐土中脲酶编码基因的表达丰度,通过土壤RNA提取和宏转录组测序法,筛选RNA水平上表达较高的脲酶基因,共筛选到122个脲酶结构基因(93个ureC、16个ureB和13个ureA)和脲酶辅助基因115个(29个ureD、12个ureE、36个ureF、29个ureG、5个... 为明确褐土中脲酶编码基因的表达丰度,通过土壤RNA提取和宏转录组测序法,筛选RNA水平上表达较高的脲酶基因,共筛选到122个脲酶结构基因(93个ureC、16个ureB和13个ureA)和脲酶辅助基因115个(29个ureD、12个ureE、36个ureF、29个ureG、5个ureH和4个ureJ)。其中ureB、ureA、ureG、ureH和ureJ所有转录本TPM值都小于2,而ureC、ureD、ureE和ureF丰度最高的转录本TPM值分别为3.17、5.37、2.01和2.71。细菌来源的芽孢杆菌属Bacillus、芽孢八叠球菌属Sporosarcina、节杆菌属Arthrobacter、链霉属Streptomyces和类芽孢杆菌属Paenibacillus等在褐土脲酶活性的发挥中贡献度较大。 展开更多
关键词 褐土 宏转录组测序 脲酶结构基因 脲酶辅助基因 细菌
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侵染贵州火龙果的仙人掌X病毒基因组序列分离与变异分析 被引量:1
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作者 郑乾明 柏自琴 +3 位作者 王小柯 林乾 王彬 马玉华 《贵州农业科学》 CAS 2022年第4期1-7,共7页
【目的】分析侵染贵州火龙果的仙人掌X病毒(Cactus virus X,CVX)及其NTU株系的基因组序列遗传变异,为建立分子检测和防控体系奠定理论基础。【方法】对感染病毒的样品采用宏转录组测序和生物信息学分析,分离病毒基因组序列并分析分子变... 【目的】分析侵染贵州火龙果的仙人掌X病毒(Cactus virus X,CVX)及其NTU株系的基因组序列遗传变异,为建立分子检测和防控体系奠定理论基础。【方法】对感染病毒的样品采用宏转录组测序和生物信息学分析,分离病毒基因组序列并分析分子变异和系统进化。【结果】获得4条CVX(CVX-LW、CVX-RF、CVX-ZNS和CVX-ZYP)和5条CVX-NTU(CVX-NTU-LW、CVX-NTU-RF、CVX-NTU-ZNF、CVX-NTU-ZNS和CVX-NTU-ZYP)贵州火龙果分离物近全长基因组序列,长度为6494~6603 bp,覆盖参考基因组96.2%~99.6%;CVX贵州分离物之间的基因组序列一致性为98.3%~98.6%,与已报道的其他分离物基因组序列一致性为97.1%~98.0%;CVX-NTU贵州分离物之间的基因组序列一致性为98.1%~98.8%,与已报道的其他分离物基因组序列一致性为97.6%~99.1%;CVX和CVX-NTU群体未出现明显的遗传分化。【结论】研究获得的CVX和CVX-NTU贵州火龙果分离物近全长基因组序列表现较高的一致性,未发生明显遗传变异。 展开更多
关键词 仙人掌X病毒 宏转录组测序 遗传变异 序列一致性
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基于高通量测序技术检测草地贪夜蛾病毒多样性 被引量:3
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作者 徐瑶 TAJDAR Alia +2 位作者 李向永 石旺鹏 曹川 《植物保护学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第4期807-814,共8页
为探索草地贪夜蛾Spodoptera frugiperda病毒的多样性,通过宏转录组和小RNA测序技术手段分析鉴定了自云南省采集的草地贪夜蛾田间自然种群携带的病毒类型。结果显示,宏转录组测序数据分析可比对得到14个病毒科,包括5个昆虫相关的病毒科,... 为探索草地贪夜蛾Spodoptera frugiperda病毒的多样性,通过宏转录组和小RNA测序技术手段分析鉴定了自云南省采集的草地贪夜蛾田间自然种群携带的病毒类型。结果显示,宏转录组测序数据分析可比对得到14个病毒科,包括5个昆虫相关的病毒科,5个植物病毒科和4个细菌病毒科。昆虫相关的病毒分别属于杆状病毒科Baculoviridae、呼肠孤病毒科Reoviridae、分体RNA病毒科Partitiviridae、传染性软腐病病毒科Iflaviridae和弹状病毒科Rhabdoviridae,其中传染性软腐病病毒和分体RNA病毒为首次在草地贪夜蛾中报道。同时利用小RNA深度测序技术从草地贪夜蛾样品中检测到鳞翅目杆状病毒、分体RNA病毒和传染性软腐病病毒的序列,进一步验证了宏转录组的分析结果。表明利用高通量测序技术可初步揭示存在于草地贪夜蛾自然种群的昆虫病毒多样性。 展开更多
关键词 草地贪夜蛾 病毒 高通量测序 宏转录组 小RNA测序
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