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The Evaluation of Vision Related Quality of Life in Patients with Retinitis Pigmentosa after Suprachoroidal Umbilical Cord Derived Mesenchymal Stem Cell Treatment
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作者 Neslihan Sinim Kahraman Ayse Oner 《Open Journal of Ophthalmology》 2021年第3期203-213,共11页
<strong>Background:</strong> The aim of this study was to evaluate vision related quality of life (VRQoL) in patients with retinitis pigmentosa (RP) after suprachoroidal umbilical cord derived mesenchymal ... <strong>Background:</strong> The aim of this study was to evaluate vision related quality of life (VRQoL) in patients with retinitis pigmentosa (RP) after suprachoroidal umbilical cord derived mesenchymal stem cell (UC-MSC) treatment. <strong>Methods:</strong> The patients were evaluated regarding to the VRQoL before the treatment and at the end of the first year. The study was performed in an affiliated hospital of a university between 2018 and 2020. The patients were operated by a single surgeon and evaluated at baseline and at first, sixth and twelfth month after stem cell implantation. To assess patients’ subjective visual situation, we used Impact of Vision Impairment (IVI) Profile 28-item questionnaire. It basically evaluated vision-related activities in three subscales: “reading and accessing information”, “mobility and independence” and “emotional well-being”. This test is established to assess VRQoL in low vision patients. <strong>Results:</strong> A total of 123 people, ranging in age from 18 to 48 years, participated in the study and 43.9% (n = 54) were women. The study patients were followed up for one year and the questionnaire was filled by patients at baseline and one year after surgery. In all groups, no difficulty was observed in understanding the questionnaire. The results showed significant improvements in VRQoL after stem cell treatment (p < 0.05). The analysis of each subscale score including “reading and accessing information”, “mobility and independence” and “emotional well-being” before and after treatment showed significant improvements in all subscale scores (p < 0.05). <strong>Conclusions:</strong> IVI 28 item questionnaire seems to be an effective test for the assessment of VRQoL in low vision patients. The suprachoroidal implantation of UC-MSC for the treatment of RP can improve the quality of life of these patients. 展开更多
关键词 Stem Cell Therapy Retinitis Pigmentosa Umbilical Cord Derived mesenchy-mal Stem Cells Vision Related Quality of Life
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慢性缺氧应激可能通过EMT增强乳腺癌MCF-7细胞恶性生物学行为 被引量:7
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作者 陈坚 何咏竟 +1 位作者 汪思应 胡敏 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第10期1831-1836,共6页
目的:探讨慢性缺氧应激对人乳腺癌MCF-7细胞恶性生物学行为的影响及可能机制。方法:将人乳腺癌MCF-7细胞分为缺氧组(1%O_2、5%CO_2和94%N_2)和正常对照组(常氧)进行培养。利用MTT法、CCK-8实验、细胞直接计数法及细胞侵袭和迁移实验对MC... 目的:探讨慢性缺氧应激对人乳腺癌MCF-7细胞恶性生物学行为的影响及可能机制。方法:将人乳腺癌MCF-7细胞分为缺氧组(1%O_2、5%CO_2和94%N_2)和正常对照组(常氧)进行培养。利用MTT法、CCK-8实验、细胞直接计数法及细胞侵袭和迁移实验对MCF-7细胞活力、增殖及侵袭和迁移能力进行检测;用软琼脂集落形成实验及Matrigel 3D培养技术检测MCF-7细胞非锚定生长能力及极性改变情况;利用MCF-7细胞构建裸鼠皮下种植瘤模型,检测慢性缺氧应激对体内肿瘤生长及肺转移的影响;利用倒置显微镜观察MCF-7细胞形态改变;Western blot检测低氧诱导因子1(hypoxia-inducible factor-1,HIF-1)和磷酸化的糖原合成酶激酶3β(glycogen synthase kinase-3β,GSK-3β)在缺氧环境下表达水平的改变,以及E-钙黏连蛋白(E-cadherin)、N-钙黏连蛋白(Ncadherin)、波形蛋白(vimentin)、基质金属蛋白酶3(matrix metalloproteinase-3,MMP-3)、MMP-9等上皮-间充质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)相关蛋白的表达水平。结果:与正常对照组相比较,慢性缺氧组MCF-7细胞活力、增殖能力及侵袭迁移能力增强,细胞非锚定生长能力提高且在3D培养系统更容易发生极性改变,呈现侵袭样生长,体内生长及转移能力增强;除了HIF-1被缺氧诱导表达升高外,GSK-3β呈现活化趋势,且上皮样标志物E-cadherin蛋白表达水平明显下降,而间充质样标志物N-cadherin、vimentin、MMP-3和MMP-9蛋白表达水平明显升高。结论:慢性缺氧应激促进了乳腺癌细胞恶性生物学行为,且其机制可能与EMT有关。 展开更多
关键词 乳腺癌 缺氧 肿瘤转移 肿瘤微环境 上皮-间充质转化
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第三方骨髓间充质干细胞治疗异基因造血干细胞移植后继发性植入功能不良的疗效及安全性 被引量:7
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作者 刘晓丹 范志平 +8 位作者 彭延文 黄芬 江千里 张贤 余国攀 赵婕 孙竞 项鹏 刘启发 《中华血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第2期98-102,共5页
目的评价第三方骨髓来源的间充质干细胞(Msc)对异基因造血干细胞移植(allo-HSCT)后继发性植入功能不良(PGF)的治疗效果及安全性。方法2007年4月至2010年9月入组5例allo-HSCT后发生继发性PGF的患者,分别在继发性PGF发生后中位第47... 目的评价第三方骨髓来源的间充质干细胞(Msc)对异基因造血干细胞移植(allo-HSCT)后继发性植入功能不良(PGF)的治疗效果及安全性。方法2007年4月至2010年9月入组5例allo-HSCT后发生继发性PGF的患者,分别在继发性PGF发生后中位第47(35-61)天接受体外扩增的第三方供者骨髓来源的Msc,以1×10^6细胞/kg的剂量单独治疗,若中性粒细胞绝对值(ANc)和PLT分别未达到〉1.5×10^9/L和〉50.0×10^9/L的造血恢复标准则于28-30d后接受第2次同等剂量的Msc输注。结果1例患者接受1次、4例患者接受2次Msc治疗,所有患者ANC和PLT均达到恢复标准,其达到恢复的中位时间在第1次MSC输注后的34(25-49)d与47(26-54)d。中位随访761(204-1491)d未见不良反应。3例患者分别在Msc治疗后第42、48、108天出现EBV血症,其中2例转化为EBV相关的移植后淋巴细胞增殖性疾病。结论第三方供者骨髓来源MSC对移植后继发性PGF有效,MSC是否会增加EBV感染及EBV相关性淋巴细胞增殖性疾病的发生率有待于进一步研究。 展开更多
关键词 植入功能不良 继发性 造血干细胞移植 间质干细胞 第三方
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幽门螺杆菌诱导上皮-间质转化在胃癌中的作用机制 被引量:2
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作者 孙振灿 周举坤 +4 位作者 许云鹏 王军 郑亚 王玉平 姬瑞 《协和医学杂志》 CSCD 北大核心 2024年第1期160-165,共6页
幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,Hp)是一种单极、微需氧、多鞭毛、螺旋形的革兰氏阴性菌,可在人胃黏膜上存活并定植。Hp作为与胃癌相关的Ⅰ类致癌物,其对胃黏膜的长期刺激可导致萎缩性胃炎、消化性溃疡、胃癌和胃黏膜相关淋巴组织淋巴... 幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,Hp)是一种单极、微需氧、多鞭毛、螺旋形的革兰氏阴性菌,可在人胃黏膜上存活并定植。Hp作为与胃癌相关的Ⅰ类致癌物,其对胃黏膜的长期刺激可导致萎缩性胃炎、消化性溃疡、胃癌和胃黏膜相关淋巴组织淋巴瘤等多种疾病。研究表明,Hp感染可诱导胃上皮细胞发生上皮-间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT),而EMT的异常调控则会导致胃癌发生。本文就Hp诱导胃上皮细胞发生EMT致胃癌的相关机制研究展开综述,为胃癌的早期诊断和靶向治疗提供新思路。 展开更多
关键词 幽门螺杆菌 上皮-间质转化 胃癌 细胞毒素相关基因A 间充质干细胞
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E盒结合锌指蛋白2对AsPC-1细胞增殖和EMT的影响
5
作者 王璐瑶 周静 +5 位作者 张荣花 于笑涵 熊亚南 王梅梅 章广玲 刘志勇 《医学研究与战创伤救治》 CAS 北大核心 2024年第8期798-805,共8页
目的探讨E盒结合锌指蛋白2(ZEB2)对AsPC-1胰腺癌细胞增殖、迁移、侵袭和上皮间充质转化(EMT)的影响。方法按照胰腺癌细胞中转染物不同,将细胞分为4组,分别是si-NC、si-ZEB2、pcDNA3.1、pcDNA3.1-ZEB2。TCGA数据库分析ZEB2在胰腺癌组织... 目的探讨E盒结合锌指蛋白2(ZEB2)对AsPC-1胰腺癌细胞增殖、迁移、侵袭和上皮间充质转化(EMT)的影响。方法按照胰腺癌细胞中转染物不同,将细胞分为4组,分别是si-NC、si-ZEB2、pcDNA3.1、pcDNA3.1-ZEB2。TCGA数据库分析ZEB2在胰腺癌组织与癌旁胰腺组织中的表达差异及其与胰腺癌患者预后的关系,并利用Westernblot检测ZEB2在AsPC-1胰腺癌细胞和正常胰腺上皮细胞HPNE中的表达差异。采用qRT-PCR、Westernblot检测ZEB2小干扰RNA(si-ZEB2)及过表达质粒(pcDNA3.1-ZEB2)的转染效率。CCK-8、克隆形成、划痕和Transwell实验检测ZEB2对AsPC-1细胞增殖、克隆形成、迁移和侵袭的影响。qRT-PCR和免疫荧光实验检测ZEB2对AsPC-1细胞中EMT标志物表达的影响。利用生物信息学网站预测与ZEB2有靶定作用的miRNAs并构建ZEB2的蛋白-蛋白互作网络(PPI)。结果ZEB2在胰腺癌组织和AsPC-1胰腺癌细胞中高表达(P<0.05),且其高表达与胰腺癌患者的较差预后相关。qRT-PCR、Westernblot结果表明si-ZEB2和pcDNA3.1-ZEB2能够有效的转染到AsPC-1胰腺癌细胞中(P<0.05)。与si-NC组相比,si-ZEB2组中AsPC-1细胞的增殖、克隆形成、迁移和侵袭能力受到抑制,EMT上皮标志物E-cadherin表达增加、间质标志物Vimentin表达减少(P<0.05)。pcDNA3.1-ZEB2组中AsPC-1细胞的增殖、克隆形成、迁移、侵袭和EMT标志物得到了与上述相反的结果(P<0.05)。共预测到与ZEB2有靶定作用的miRNAs 77个,与ZEB2作用密切的蛋白有10个。结论ZEB2在胰腺癌组织和细胞中高表达且其高表达与胰腺癌患者的较差预后相关,ZEB2作为一种促癌因子,能够促进AsPC-1胰腺癌细胞的增殖、克隆形成、迁移、侵袭和EMT进程。 展开更多
关键词 E盒结合锌指蛋白2 胰腺癌 AsPC-1细胞 增殖 上皮间充质转化
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AEG-1介导上皮-间质转化调控头颈部鳞状细胞癌的侵袭转移 被引量:4
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作者 余长云 刘勇 +6 位作者 谭浩蕾 朱刚才 李果 粟忠武 田勇泉 邱元正 张欣 《中国耳鼻咽喉颅底外科杂志》 CAS 2013年第3期183-187,共5页
目的分析星形胶质细胞上调基因-1(astrocyte elevated gene-1,AEG-1)可介导上皮-间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)调控头颈鳞癌侵袭转移的分子机制。方法采用慢病毒介导AEG-1的上调载体上调AEG-1在头颈鳞癌Tu686细胞中... 目的分析星形胶质细胞上调基因-1(astrocyte elevated gene-1,AEG-1)可介导上皮-间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)调控头颈鳞癌侵袭转移的分子机制。方法采用慢病毒介导AEG-1的上调载体上调AEG-1在头颈鳞癌Tu686细胞中的表达,划痕愈合实验、Transwell侵袭小室实验检测其体外迁移侵袭能力的改变,同时Western blot检测EMT分子标志物E-cadherin及Vimentin的表达情况。结果 Tu686细胞中AEG-1表达上调后,细胞划痕愈合率增加,穿过Transwell聚碳酸酯膜的细胞明显增多,且Tu686细胞上皮细胞标志物E-cadherin的表达量显著下调,间质细胞标志物Vimen-tin表达显著上调。结论 AEG-1表达上调可显著提高头颈部鳞癌细胞的体外侵袭能力,且该侵袭能力的增强可能与AEG-1介导的EMT改变密切相关。 展开更多
关键词 头颈部肿瘤 鳞状细胞 星形胶质细胞上调基因-1 上皮-间质转化 转移
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突变型低氧诱导因子1α加速骨缺损部位新血管生成的实验观察 被引量:4
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作者 王皓 李谌 郜玉忠 《西安交通大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2015年第4期455-461,共7页
目的通过突变低氧诱导因子1α(hypoxia inducible factor 1,HIF1α)基因的3个氨基酸位点研究该基因在常氧条件下骨缺损区域对血管新生效应的影响。方法定点突变HIF1α编码区(coding sequence,CDS)402、564和803位3个氨基酸后将基因重组... 目的通过突变低氧诱导因子1α(hypoxia inducible factor 1,HIF1α)基因的3个氨基酸位点研究该基因在常氧条件下骨缺损区域对血管新生效应的影响。方法定点突变HIF1α编码区(coding sequence,CDS)402、564和803位3个氨基酸后将基因重组入腺病毒pAdEasy-1系统并测定滴度,同理包装未突变组和空病毒组;以3种病毒液连同空白组共分4组进行后续实验(A组:含突变HIF1α基因病毒液,B组:含未突变HIF1α基因病毒液,C组:空病毒液,D组:空白组);将病毒液转染入兔骨髓间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)内,通过示踪因子人源化绿色荧光蛋白(human renilla reniformis green fluorescent protein,hrGFP)观察病毒转染效率,检测各组转染细胞中HIF1α基因mRNA和蛋白表达情况;制作兔桡骨缺损动物模型,将含目的基因的病毒液按上述分组转染MSCs后作为种子细胞移植到多孔纳米磷灰石-硅灰石生物活性玻璃陶瓷(apatite-wollastonite magnetic bioactive glass-ceramic,A-W MGC)载体中搭建人工组织工程骨架载体并植入体内,于术后8周处死各组动物,取植入区域组织做新血管生成检测。结果 CDS区第402、564和803位氨基酸均定点突变为丙氨酸;3种腺病毒重组体构建成功并鉴定完毕;A、B两组HIF1αmRNA表达量明显高于C、D两组,差异具有统计学意义(P<0.05),而A、B两组之间及C、D两组之间比较,差异无统计学意义(P>0.05);A组HIF1α蛋白表达量明显高于其他3组,差异具有统计学意义(P<0.05),而B、C、D 3组之间比较差异无统计学意义(P>0.05);A组转染到动物体内后可见明显成血管效果,其他3组未见缺损区域有血管新生。结论 13点突变后HIF1α基因能够在常氧条件下大量且高效表达;23点突变后HIF1α基因能够在体内局部形成有效的血管网络。 展开更多
关键词 低氧诱导因子lα 基因突变 重组腺病毒载体 骨髓间充质干细胞 血管生成 骨缺损
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唑来膦酸通过调节SIRT3/P53的表达影响成骨分化和骨形成
8
作者 韩洁 乔乐天 +3 位作者 王晓依 陈慧慧 褚娜英 陈培莉 《中华内分泌外科杂志》 CAS 2024年第1期130-137,共8页
目的按探讨唑来膦酸(zoledronic acid,ZOL)通过调节沉默调节蛋白3(sirtuin3,SIRT3)/P53的表达影响成骨分化与骨形成的机制。方法诱导骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stemcells,BMSCs)向成骨分化,检测细胞中SIRT3表达,分析SI... 目的按探讨唑来膦酸(zoledronic acid,ZOL)通过调节沉默调节蛋白3(sirtuin3,SIRT3)/P53的表达影响成骨分化与骨形成的机制。方法诱导骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stemcells,BMSCs)向成骨分化,检测细胞中SIRT3表达,分析SIRT3与P53的靶向调控关系。干预SIRT3、P53在细胞内的表达并使用ZOL处理细胞,分别采用MTT法、Westernblot法、试剂盒检测细胞活性、成骨相关基因Osteo-protegerin(Osteoprotegerin,OPG)、Runt相关转录因子2(runt-related transcription factor 2,Runx2)表达、碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)活性与茜素红S(alizarin red SARS)染色情况。使用卵巢切除术(ovariecto-my,OVX)构建大鼠模型,探讨ZOL对体内骨质疏松症(osteoporosis,OP)进展的影响。结果Z ZOL能促进BMSCs成骨分化。与健康人血清相比,SIRT3在OP患者血清中表达下调(1.00±0.26vs.0.78±0.23.t=3.85,P<0.001)。在BMSCs成骨分化过程中,SIRT3表达水平随着诱导成骨时间延长而逐渐升高。与对照组p53蛋白表达和BMSCs活性相比,敲减SIRT3能提高P53蛋白表达水平,分别为0.59±0.05vs.1.01±0.11(t=6.02,P=0.004),但抑制BMSCs的活性,分别为100.00±8.41vs.51.26±5.59(t=8.36P=0.001)。ZOL处理后,敲减SIRT3后细胞活性,分别为49.61±5.11vs.87.61±7.31(t=7.38,P=0.002),对成骨的抑制作用被解除,且P53水平被抑制分别为1.10±0.10 vs.0.69±0.04(t=6.59,P=0.003)。P53过表达部分抵消ZOL对细胞活性的促进作用,分别为84.61±6.52 vs.66.54±5.47(t=3.68,P=0.021)。与假手术组相比,0VX组大鼠成骨受到抑制,ZOL治疗后显著改善成骨抑制。ZOL治疗提高OVX大鼠骨组织中SIRT3蛋白表达水平,但抑制P53的表达水平。结论ZOL通过促进SIRT3对P53泛素化降解作用来促进BMSCs成骨分化与骨形成。 展开更多
关键词 唑来膦酸 骨质疏松 P53 泛素化 沉默调节蛋白3 骨髓间充质干细胞
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二烯丙基二硫下调TGF-β1/Rac1通路抑制人胃癌细胞β-catenin表达 被引量:3
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作者 苏波 丁恩 +3 位作者 曾颖 夏红 刘芳 苏琦 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第3期393-398,共6页
目的研究二烯丙基二硫(diallyl disulfide,DADS)是否通过下调TGF-β1/Rac1通路抑制人胃癌MGC803细胞β-catenin表达。方法实验组分为6组,对照组(Control),DADS处理组,TGF-β1处理组,TGF-β1+SB431542组,TGF-β1+DADS组,TGF-β1+NSC2376... 目的研究二烯丙基二硫(diallyl disulfide,DADS)是否通过下调TGF-β1/Rac1通路抑制人胃癌MGC803细胞β-catenin表达。方法实验组分为6组,对照组(Control),DADS处理组,TGF-β1处理组,TGF-β1+SB431542组,TGF-β1+DADS组,TGF-β1+NSC23766组。RT-PCR、Western blot分别检测TGF-β1、Rac1、β-catenin、E-cadherin和vimentin mRNA和蛋白水平。结果DADS下调TGF-β1、Rac1、β-catenin和vimentin,上调E-cadherin表达。TGF-β1受体阻断剂SB431542和Rac1抑制剂NSC23766下调β-catenin和vi-mentin,上调E-cadherin表达。结论DADS通过下调TGF-β1/Rac1通路抑制人胃癌MGC803细胞β-catenin表达。 展开更多
关键词 二烯丙基二硫 转化生长因子Β1 RAC1 Β-CATENIN 人胃癌细胞 上皮细胞向间质细胞转化
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红景天苷联合HGF对脐血间充质干细胞向肝样细胞分化的诱导作用观察 被引量:3
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作者 黄伟 钱海鑫 +1 位作者 苗宗宁 张学光 《山东医药》 CAS 2012年第34期8-10,共3页
目的观察红景天苷联合肝细胞生长因子(HGF)诱导脐血间充质干细胞(MSCs)向肝样细胞分化的作用。方法将第5代脐血MSCs随机分成4组,A组不处理,B组分别加入5(B1)、10(B2)、20μmol/L(B3)的红景天苷5μL,C组分别加入5(C1)、10(C2)、20 ng/mL(... 目的观察红景天苷联合肝细胞生长因子(HGF)诱导脐血间充质干细胞(MSCs)向肝样细胞分化的作用。方法将第5代脐血MSCs随机分成4组,A组不处理,B组分别加入5(B1)、10(B2)、20μmol/L(B3)的红景天苷5μL,C组分别加入5(C1)、10(C2)、20 ng/mL(C3)的HGF 5μL,D组分别加入B1+C1(D1)、B2+C2(D2)、B3+C3(D3)的红景天苷和HGF。分别于培养第1、7、14、21天,光镜下观察细胞形态变化,并计数肝样细胞的数量;采用全自动生化仪检测细胞上清液中的谷丙转氨酶(ALT),溴甲酚绿法检测上清液中的白蛋白(ALB),观察肝样细胞的分泌功能。结果 A组细胞均呈长梭形,各时点无明显变化;B、C、D组第7天梭形细胞两端逐渐变短,第14、21天细胞由长梭形变为三角形、多角形或类圆形(肝样细胞)。A组高倍镜下均未见肝样细胞,B、C、D组在第7、14、21天均可见肝样细胞(P均<0.05),数量随时间延长而增加(P均<0.05);D组肝样细胞数量高于同时点的B、C组(P均<0.05),并随药物浓度增加而增加;D2、D3与D1比较,P均<0.05,而D3与D2比较,P>0.05。A组各时点细胞上清液中均未检测到ALT、ALB,B、C、D组第14、21天均检测到ALT、ALB(P均<0.05),并随时间延长而升高(P均<0.05);D组ALT、ALB水平均高于同时点的B、C组,且随药物浓度的增加而升高(P均<0.05),D2、D3与D1比较,P均<0.05,而D3与D2比较,P>0.05。结论与单用HGF、红景天苷相比,二者联合应用可增强脐血MSCs向肝样细胞分化的诱导作用,其中以10μmol/L红景天苷联合10 ng/mL HGF的诱导效果最佳。 展开更多
关键词 红景天苷 肝细胞生长因子 谷丙转氨酶 白蛋白 肝样细胞 间充质干细胞 脐血
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转化生长因子β信号通路在肝癌患者中的作用机制 被引量:3
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作者 郑涛 杨甲梅 《中华肝胆外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第6期425-428,共4页
转化生长因子β( TGF-β)在调节细胞增殖、分化和凋亡中起着重要作用,也是癌症的关键细胞因子。与其在正常组织中的抑癌作用不同,在炎症微环境及癌组织中TGF-β信号通路的持续活化具有促进肝癌发生和发展的作用。 Smad4的失活和上... 转化生长因子β( TGF-β)在调节细胞增殖、分化和凋亡中起着重要作用,也是癌症的关键细胞因子。与其在正常组织中的抑癌作用不同,在炎症微环境及癌组织中TGF-β信号通路的持续活化具有促进肝癌发生和发展的作用。 Smad4的失活和上皮间质转化( EMT)可能是TGF-β由抑癌因子转变为促癌因子的重要机制。因此,进一步深入研究TGF-β信号通路的调控机制,可为肝癌的防治提供新的治疗依据。 展开更多
关键词 转化生长因子Β 信号通路 肝癌 上皮间质转化
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多孔钛/间充质干细胞/富血小板血浆修复骨缺损 被引量:2
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作者 舒涛 项舟 +6 位作者 杨婧 高宇 高博 段鑫 郑晓佐 范红松 朱向东 《中华实验外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第1期129-131,共3页
目的 制备多孔钛/间充质干细胞(MSCs)/富血小板血浆(PRP)材料,探讨其对兔股骨远端骨缺损修复.方法 多孔钛、成骨诱导MSCs、PRP复合成多孔钛/MSCs/PRP和多孔钛/MSCs,体外分别培养4、9d,扫描电镜观察.新西兰大白兔随机分成4组:A组:... 目的 制备多孔钛/间充质干细胞(MSCs)/富血小板血浆(PRP)材料,探讨其对兔股骨远端骨缺损修复.方法 多孔钛、成骨诱导MSCs、PRP复合成多孔钛/MSCs/PRP和多孔钛/MSCs,体外分别培养4、9d,扫描电镜观察.新西兰大白兔随机分成4组:A组:多孔钛移植;B组:多孔钛/MSCs复合物移植;C组:多孔钛/MSCs/PRP复合物移植;空白组:未填充材料.术后6周行大体观察、甲苯胺蓝染色、Micro-CT检测和生物力学实验.结果 体外培养4、9d,电镜下多孔钛/MSCs/PRP组微孔内MSCs数量比多孔钛/MSCs组多.动物实验术后6周材料孔隙内骨组织生长,新生骨量(NBV,%):A组:4.66±3.01,B组:10.08±2.55,C组:15.40±3.71,差异均有统计学意义(P<0.05).结合强度:A组:(1.49±0.55) mPa,B组:(3.29 ±0.55) mPa,C组:(5.31±1.01) mPa,差异均有统计学意义(P<0.05).结论 多孔钛/MSCs/PRP材料具有良好生物相容性,对骨缺损修复效果良好. 展开更多
关键词 骨缺损 组织工程 富血小板血浆 间充质干细胞
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头颈部鳞状细胞癌组织中Smad7、Smad4蛋白的表达变化及意义 被引量:2
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作者 张峰 《山东医药》 CAS 2014年第31期44-46,共3页
目的观察Smad7及Smad4蛋白在头颈部鳞状细胞癌组织中的表达变化,并探讨其意义。方法采用免疫组化SP法分别对头颈部鳞状细胞癌组织、癌旁组织、活检留取的正常头颈部组织中的Smad7蛋白、Smad4蛋白、TGF-β1表达进行检测,分析三者间表达... 目的观察Smad7及Smad4蛋白在头颈部鳞状细胞癌组织中的表达变化,并探讨其意义。方法采用免疫组化SP法分别对头颈部鳞状细胞癌组织、癌旁组织、活检留取的正常头颈部组织中的Smad7蛋白、Smad4蛋白、TGF-β1表达进行检测,分析三者间表达及其与肿瘤临床病理参数的关系。结果 1 TGF-β1和Smad7蛋白在肿瘤组织中的表达水平明显高于癌旁组织和正常组织(F分别为5.71、7.31),而Smad4蛋白在肿瘤组织中的表达明显低于癌旁组织和正常组织(F为14.92),P均<0.05。2随肿瘤分化程度增高,TGF-β1及Smad7蛋白表达呈降低趋势(F分别为11.2、12.8)、Smad4蛋白呈升高趋势(F为7.91),P均<0.05;Smad4蛋白表达与肿瘤直径呈负相关、Smad7蛋白表达与肿瘤直径呈正相关(P均<0.05),TGF-β1表达与肿瘤直径无明显相关(P>0.05);Smad4蛋白表达在淋巴结转移者明显低于无转移者(P<0.05),有无淋巴结转移者Smad7蛋白及TGF-β1表达无显著差异(P>0.05)。3 Smad4蛋白表达与TGF-β1呈负相关(r=-0.32),与Smad7蛋白呈正相关(r=0.39),P均<0.05。结论头颈部鳞状细胞癌组织中Smad7、Smad4蛋白表达异常,且可能通过调控上皮—间质转化参与肿瘤的侵袭、分化;检测两者(尤其是Smad4蛋白)可为临床分期、预后评估提供依据。 展开更多
关键词 头颈部肿瘤 鳞状细胞癌 SMAD7蛋白 SMAD4蛋白 上皮-间质转化
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姜黄素联合MSCs对大鼠溃疡性结肠炎的影响及机制 被引量:2
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作者 易金霞 费素娟 +1 位作者 庞迅雷 吴克俭 《世界华人消化杂志》 CAS 北大核心 2014年第12期1642-1650,共9页
目的:观察姜黄素联合骨髓间充质干细胞(marrow mesenchymal stem cell,MSCs)对大鼠溃疡性结肠炎(ulcerative colitis,UC)的疗效,并探讨辅助性T细胞17(T help cell 17,Th17)及调节性T细胞(regulatory T cell,Treg)平衡在其中的作用机制.... 目的:观察姜黄素联合骨髓间充质干细胞(marrow mesenchymal stem cell,MSCs)对大鼠溃疡性结肠炎(ulcerative colitis,UC)的疗效,并探讨辅助性T细胞17(T help cell 17,Th17)及调节性T细胞(regulatory T cell,Treg)平衡在其中的作用机制.方法:采用三硝基苯磺酸(trinitro-benzenesulfonic acid,TNBS)灌肠制备大鼠UC模型,将动物分为5组,分别为正常对照组(A组)、模型组(B组),MSCs组(C组),姜黄素组(D组),姜黄素联合MSCs组(E组).观察各组大鼠的行为、粪便性状及血便情况,计算结肠大体形态评分(gross morphological score,GMS)及病理损伤评分(histopathologic damage score,HDS),并通过流式细胞术(flow cytometer,FCM)检测各组Th17及Treg占CD4+T细胞的数量百分比;免疫组织化学(immunohistochemistry,IHC)检测白介素-17、Foxp3在结肠组织的表达.结果:(1)与正常组比较,模型组大鼠GMS、HDS均明显升高(0.00±0.00 vs 4.63±0.74;0.25±0.46 vs 4.00±0.53,P<0.01),Treg细胞在外周血及结肠组织的表达均下调,Th17的表达均上调,差异均有统计学意义(8.01±0.29 vs1.16±0.18;9.50±1.60 vs 0.88±0.64;0.63±0.13 vs 4.56±0.21;0.88±0.64 vs 7.75±1.16,P<0.01);(2)与模型组相比,各治疗组GMS、HDS均明显降低,差异有统计学意义(4.63±0.74 vs 2.12±0.64,2.00±0.53,1.00±0.53;4.00±0.53 vs 2.00±0.53,1.88±0.83,1.25±0.46,P<0.01);各治疗组Treg细胞表达均明显上调,而Th17细胞的表达均明显下调,差异有统计学意义(1.16±0.18 vs 3.29±0.18,3.19±0.20,5.00±0.19;0.88±0.64 vs 3.75±0.46,4.00±0.92,6.88±1.25;4.56±0.21 vs 2.60±0.15,2.59±0.23,1.52±0.21;0.88±0.64 vs3.75±0.46,4.00±0.92,6.88±1.25,P<0.01);(3)联合治疗组GMS、HDS较单药物治疗组降低(1.00±0.53 vs 2.12±0.64,2.00±0.53;1.25±0.46 vs 2.00±0.53,1.88±0.83,P<0.05),且Treg细胞表达均显著上调,而Th17细胞表达均显著下调,差异有统计学意义(5.00±0.19vs 3.29±0.18,3.19±0.20;6.88±1.25 vs 3.75±0.46,4.00±0.92;1.52±0.21 vs 2.60±0.15,2.59±0.23;2.38±0.92 vs 5.00 展开更多
关键词 溃疡性结肠炎 姜黄素 骨髓间充质干细胞 辅助性17细胞 调节性T细胞
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功能性自组装纳米多肽水凝胶负载脂肪间充质干细胞的研究 被引量:2
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作者 刘占鳌 黄文柏 +4 位作者 周冠洲 范鲁峰 邵闻冲 胡三元 孙念峰 《中华实验外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第12期3007-3009,共3页
目的观察功能性自组装多肽的理化性质、自组装成水凝胶特性及对细胞进行三维培养。方法合成RADA、RGD、KLT3种多肽并制备RAD/KLT!RGD多肽混合溶液,盐溶液诱发多肽溶液自组装成水凝胶。原代培养脂肪间充质干细胞并对其进行鉴定,使用... 目的观察功能性自组装多肽的理化性质、自组装成水凝胶特性及对细胞进行三维培养。方法合成RADA、RGD、KLT3种多肽并制备RAD/KLT!RGD多肽混合溶液,盐溶液诱发多肽溶液自组装成水凝胶。原代培养脂肪间充质干细胞并对其进行鉴定,使用水凝胶对其三维培养来观察其在水凝胶中的生长,并设置RAD/KLT水凝胶组做对比。结果多肽溶液成功自组装成水凝胶,干细胞在三维培养中迁移、分化并有成管腔的趋势,RAD/KLT/RGD水凝胶[(87.75±4.79)个细胞/视野]较对比组[(65.50±6.25)个细胞/视野]黏附生长了更多的细胞(P〈0.05)。结论RAD/KLT/RGD功能性自组装纳米多肽水凝胶是一种更为优良的组织工程框架材料。 展开更多
关键词 功能性自组装多肽 水凝胶 脂肪来源的间充质干细胞 组织工程
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lncRNA NKILA对鼻咽癌细胞放射抵抗和上皮间质转化的影响及其机制
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作者 张永涛 唐雪娣 徐枫钞 《山东医药》 CAS 2023年第25期37-41,共5页
目的探讨长链非编码RNA(lncRNA)NKILA对鼻咽癌细胞放射抵抗和上皮间质转化的影响及其机制。方法体外传代培养鼻咽癌细胞CNE2并构建放射抵抗细胞模型。将放射抵抗CNE2细胞随机分为空白组、NC组、转染组,转染组和NC组分别转染NKILA-mimic... 目的探讨长链非编码RNA(lncRNA)NKILA对鼻咽癌细胞放射抵抗和上皮间质转化的影响及其机制。方法体外传代培养鼻咽癌细胞CNE2并构建放射抵抗细胞模型。将放射抵抗CNE2细胞随机分为空白组、NC组、转染组,转染组和NC组分别转染NKILA-mimic、NKILA-NC质粒,空白组不予转染。收集细胞,采用RT-qPCR法检测lncRNA NKILA、miR-21表达,采用MTT法检测细胞增殖能力,采用Transwell小室实验检测细胞侵袭和迁移能力,采用Western blotting法检测E-cadherin、N-cadherin表达;通过TargetScan预测lncRNA NKILA与miR-21的靶向调控关系,并通过双荧光素酶报告基因实验验证lncRNA NKILA与miR-21的靶向调控关系。取SD裸鼠10只,随机分为观察组和对照组各5只,分别于右前肢腋下注射转染lncRNA NKILA的放射抵抗CNE2细胞、单纯放射抵抗CNE2细胞,常规饲养4周处死,分离并测量移植瘤体积。结果转染组lncRNA NKILA表达、E-cadherin表达均高于空白组和NC组,miR-21表达及细胞增殖、侵袭、迁移能力和N-cadherin表达均低于空白组和NC组(P均<0.05);而空白组与NC组上述指标比较差异均无统计学意义(P均>0.05)。TargetScan预测显示,lncRNA NKILA与miR-21存在靶向结合位点;双荧光素酶报告基因实验结果显示,共转染NKILA-mimic质粒与miR-21-3′-UTR-WT的CNE2细胞荧光素酶活性低于共转染NKILA-NC质粒与miR-21-3′-UTR-WT的CNE2细胞(P<0.05),而共转染NKILA-mimic质粒、miR-21-3′-UTR-MUT与共转染NKILA-NC质粒、miR-21-3′-UTR-MUT的CNE2细胞荧光素酶活性比较差异无统计学意义(P>0.05)。观察组移植瘤体积小于对照组(P<0.05)。结论lncRNA NKILA可能通过靶向抑制miR-21表达而抑制鼻咽癌细胞的增殖、侵袭和迁移,继而抑制鼻咽癌细胞的放射抵抗和上皮间质转化。 展开更多
关键词 鼻咽癌 长链非编码RNA NKILA 微小RNA-21 放射抵抗 上皮间质转化
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关节骨软骨仿生支架浸提液对种子细胞生物学特性的影响
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作者 刘伟 王晨昱 +4 位作者 常旭东 欧阳成伟 董燕 戴刚 李敏 《兰州大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2023年第6期838-845,共8页
为了观测自制胶原涂层羟基磷灰石纳米晶/聚磷酸钙纤维/L-聚乳酸基含“界层结构”仿生一体化关节骨软骨复合组织工程支架材料对种子细胞增殖活性及相关分化功能的影响,采用CCK-8、流式细胞仪检测及体外分化诱导培养,分别检测新型支架材... 为了观测自制胶原涂层羟基磷灰石纳米晶/聚磷酸钙纤维/L-聚乳酸基含“界层结构”仿生一体化关节骨软骨复合组织工程支架材料对种子细胞增殖活性及相关分化功能的影响,采用CCK-8、流式细胞仪检测及体外分化诱导培养,分别检测新型支架材料浸提液对人骨髓间充质干细胞(hBMSCs)及人脐带间充质干细胞(hUCMSCs)的增殖活性、凋亡及成骨、成软骨分化能力的影响;通过实时荧光定量PCR和Western blot检测细胞成骨及成软骨分化诱导后ALP、Osterix、Runx2、COL1A1及COL2A1的mRNA和蛋白表达水平.结果显示,新型支架材料浸提液对hBMSCs及hUCMSCs的增殖活性及凋亡均无显著影响;体外分化诱导后均可呈现成骨及成软骨分化表型,5种基因的mRNA和蛋白表达均显著上调;支架材料浸提液处理后,其成骨及成软骨分化能力更明显,5种基因的mRNA和蛋白表达上调更显著.提示自制新型仿生一体化支架材料可保持hBMSCs及hUCMSCs种子细胞良好的增殖活性及成骨、成软骨分化功能. 展开更多
关键词 复合组织工程 关节软骨 仿生支架材料 人间充质干细胞 增殖分化
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microRNA-1271-5p靶向FOXQ1抑制宫颈鳞状细胞癌细胞的迁移和侵袭
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作者 朱梦月 丁燕 胡明 《医学分子生物学杂志》 CAS 2019年第6期562-568,574,共8页
目的 探究miR-1271-5p对宫颈鳞状细胞癌 ( cervical squamous cell carcinoma, CSCC) 细胞迁移和侵袭能力的影响, 初步阐明miR-1271-5p对癌基因叉头框蛋白Q1 ( forkhead box Q1, FOXQ1) 的靶向调控机制.方法 收集2018年1月至2018年10月... 目的 探究miR-1271-5p对宫颈鳞状细胞癌 ( cervical squamous cell carcinoma, CSCC) 细胞迁移和侵袭能力的影响, 初步阐明miR-1271-5p对癌基因叉头框蛋白Q1 ( forkhead box Q1, FOXQ1) 的靶向调控机制.方法 收集2018年1月至2018年10月在华中科技大学同济医学院附属武汉中心医院行手术切除的41例CSCC患者的癌和癌旁组织标本, 应用RT-qPCR检测组织中miR-1271-5p和FOXQ1 mRNA的表达水平, 分析miR-1271-5p和FOXQ1 mRNA表达的相关性;RT-qPCR检测 miR-1271-5p和 FOXQ1 mRNA在人CSCC细胞株 (SiHa和CaSki) 及人宫颈永生化鳞状细胞株 ( End1/E6E7) 中的表达水平;应用miR-1271-5p模拟物转染SiHa细胞, 分别采用划痕实验和Transwell小室检测miR-1271-5p对细胞迁移和侵袭能力的影响;采用Western印迹检测miR-1271-5p对FOXQ1、 E-cadherin和Vimentin蛋白表达水平的影响;最后, 应用双荧光素酶报告基因验证miR-1271-5p对FOXQ1的靶向调控作用.结果 miR-1271-5p在CSCC组织中的表达水平显著低于癌旁组织 (P<0.001), 在人CSCC细胞株 (SiHa和CaSki) 中的表达水平也均低于人宫颈永生化鳞状细胞株 (End1/E6E7) (P<0.001);与转染阴性对照细胞比较, 转染miR-1271-5p模拟物的SiHa细胞的迁移和侵袭能力明显受到抑制 (P<0.05). FOXQ1 mRNA和蛋白在CSCC组织中的表达水平均显著高于癌旁组织 (P<0.001), 相关性分析显示, FOXQ1 mRNA的表达水平与miR-1271-5p呈负相关 (r = -0.612, P<0.001).在转染miR-1271-5p模拟物后, SiHa中FOXQ1和Vimentin蛋白表达水平均降低, 而E-cadherin蛋白表达增高.双荧光素酶报告基因试验确认miR-1271-5p可通过与FOXQ1 mRNA的3′-非翻译区 (3′-untranslated re-gion, 3′UTR) 直接结合, 靶向调控FOXQ1的表达.结论 miR-1271-5p在CSCC中表达下调, 其可通过靶向抑制FOXQ1的表达调节细胞的上皮间质转化状态, 从而抑制CSCC细胞的迁移和侵袭. 展开更多
关键词 宫颈鳞状细胞癌 miR-1271-5p FOXQ1 上皮间质转化 迁移 侵袭
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人脐带血清合用胎牛血清培养人脐血间充质干细胞
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作者 王爽 范振海 +4 位作者 王钰莹 喻皇飞 刘祖林 胡锡阶 余丽梅 《遵义医学院学报》 2013年第3期203-206,共4页
目的探讨人脐带血清与胎牛血清合用培养人脐血间充质干细胞(hUCB-MSCs)的形态学、表面标志和胞内标志蛋白的变化。方法密度梯度离心分离脐带血单个核细胞后,应用含10%胎牛血清完全培养基原代培养,分别以3%人脐血清加7%胎牛血清(CBS组)和... 目的探讨人脐带血清与胎牛血清合用培养人脐血间充质干细胞(hUCB-MSCs)的形态学、表面标志和胞内标志蛋白的变化。方法密度梯度离心分离脐带血单个核细胞后,应用含10%胎牛血清完全培养基原代培养,分别以3%人脐血清加7%胎牛血清(CBS组)和10%胎牛血清(FBS组)完全培养基传代培养。P5内细胞,进行细胞形态学观察,流式细胞术检测细胞表面分子,免疫细胞化学染色检测细胞内标志蛋白。结果 P5内细胞,两组hUCB-MSCs均为梭型细胞,细胞大小无明显改变,均表达CD44、CD105、CD90、CD73和波形蛋白,不表达CD45、CD34、CD11b、CD19和HLA-DR;其中表达CD44、CD73阳性细胞百分率高达99%。结论 3%人脐血清加7%胎牛血清可成功地培养出形态与表型特征良好的hUCB-MSCs。 展开更多
关键词 人脐血清 胎牛血清 脐血间充质干细胞
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癌相关成纤维细胞促进胃癌细胞迁移与侵袭
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作者 周畅 陈伟强 +4 位作者 王宇恒 杨晓夏 涂幸 刘靖 罗利 《中山大学学报(医学科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2020年第4期501-508,共8页
【目的】本研究旨在探讨癌相关成纤维细胞(CAFs)对胃癌细胞迁移与侵袭能力的影响及作用机制。【方法】采用酶消化法分离培养正常成纤维细胞(NFs)及癌相关成纤维细胞(CAFs)并进行特征指标鉴定。收集两种细胞的条件培养基(NFs-CM、CAFs-C... 【目的】本研究旨在探讨癌相关成纤维细胞(CAFs)对胃癌细胞迁移与侵袭能力的影响及作用机制。【方法】采用酶消化法分离培养正常成纤维细胞(NFs)及癌相关成纤维细胞(CAFs)并进行特征指标鉴定。收集两种细胞的条件培养基(NFs-CM、CAFs-CM),分别作用于胃癌细胞系AGS及MGC803,利用细胞划痕实验检测胃癌细胞迁移能力;Transwell小室迁移及侵袭实验评价胃癌细胞迁移与侵袭能力;光学显微镜观察胃癌细胞形态变化;荧光定量PCR检测胃癌细胞中“上皮-间质”转化(EMT)相关指标的表达变化。【结果】我们成功分离培养NFs及CAFs;与NFs-CM组相比,CAFs-CM组胃癌细胞的迁移与侵袭能力均增强(P<0.05),胃癌细胞形态由扁圆的上皮细胞形态演变为梭形的间质细胞形态,胃癌细胞中上皮细胞标志E-钙粘蛋白(E-cadherin)表达降低,间质细胞标志波形蛋白(Vimentin)和N-钙粘蛋白(N-cadherin)表达上升(P<0.05)。【结论】CAFs可通过调节EMT进程促进胃癌细胞迁移与侵袭。 展开更多
关键词 癌相关成纤维细胞 胃癌 迁移 侵袭 “上皮-间质”转化
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