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人MAGE-3真核表达载体的构建与表达
被引量:
2
1
作者
吴金民
孙晓东
刘杏娥
《实用肿瘤杂志》
CAS
北大核心
2003年第4期271-274,共4页
目的 克隆人黑色素瘤特异性抗原 MAGE- 3基因 ,构建真核表达载体 ,建立 MAGE- 3阳性细胞株 ,制备肿瘤核酸疫苗。方法 用 RT- PCR方法扩增 MAGE- 3c DNA,以 pc DNA3.1+为载体 ,构建重组表达质粒pc DNA3.1/ MAGE- 3。重组质粒用脂质体...
目的 克隆人黑色素瘤特异性抗原 MAGE- 3基因 ,构建真核表达载体 ,建立 MAGE- 3阳性细胞株 ,制备肿瘤核酸疫苗。方法 用 RT- PCR方法扩增 MAGE- 3c DNA,以 pc DNA3.1+为载体 ,构建重组表达质粒pc DNA3.1/ MAGE- 3。重组质粒用脂质体转染鼠 B16细胞 ,经 RT- PCR、细胞免疫染色及免疫印迹法鉴定转化细胞中 MAGE- 3的表达。结果 正确构建了 pc DNA3.1/ MAGE- 3重组质粒 ,并且在转化细胞中检测到了 MAGE- 3的表达。结论 成功构建了 pc DNA3.1/ MAGE- 3真核表达质粒 ,建立了稳定表达人 MAGE- 3的鼠
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关键词
MAGE-3
真核表达载体
构建
表达
黑色素瘤
下载PDF
职称材料
人葡萄膜黑色素瘤组织中差异表达基因及相关代谢通路的分析
被引量:
2
2
作者
杜葵芳
顼晓琳
+2 位作者
李洋
王盈之
魏文斌
《中华实验眼科杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2015年第11期996-1003,共8页
背景人葡萄膜黑色素瘤(UM)组织与正常组织中存在差异表达基因,但国外不同文献报道的结果不尽一致,而国内对人UM基因表达的改变及其相关的作用通路的研究较少。目的应用基因芯片技术探讨人UM中差异表达的基因,分析差异基因参与的重...
背景人葡萄膜黑色素瘤(UM)组织与正常组织中存在差异表达基因,但国外不同文献报道的结果不尽一致,而国内对人UM基因表达的改变及其相关的作用通路的研究较少。目的应用基因芯片技术探讨人UM中差异表达的基因,分析差异基因参与的重要信号通路。方法收集在北京同仁医院因原发性UM行眼球摘除并经组织病理学证实为梭形细胞型UM的组织标本4例,以正常供体葡萄膜组织作为对照组。利用HumanGenomeU133Plus2.0芯片技术筛查2种组织中基因表达的差异,并使用GOEAST富集分析软件对差异基因的重要生物学功能及参与的通路进行分析。结果与正常的葡萄膜组织对比,人UM中有4165个差异基因,占12.50%,其中包含1236个上调基因和2929个下调基因,分别占3.71%和8.79%。人UM组织中上调5倍或以上基因为113个,下调50%的基因为1053个;上调10倍或以上的基因为21个,下调90%或以上的基因为422个;上调50倍或以上的基因为1个,下调98%或以上的基因为33个;上调100倍或以上的基因为1个,下调99%或以上的基因为5个。按功能学分类表明,差异表达基因中包括细胞分化与增生基因、发育相关基因、细胞黏附相关基因、免疫应答基因、调节转录基因、信号转导相关基因、凋亡以及抗凋亡相关基因等;差异表达基因参与的代谢通路涉及血管形成过程的代谢通路、细胞周期相关的蛋白激酶通路以及B淋巴细胞或T淋巴细胞的代谢通路等。结论人UM组织与正常人葡萄膜组织中基因表达谱明显不同,这些差异表达的基因除参与血管生成、激酶通路等已知的UM发育有关的代谢通路外,还涉及免疫系统的变化。人UM的发生和进展是多种基因、多种通路共同作用的结果。
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关键词
黑色素瘤/基因
葡萄膜肿瘤
基因表达谱
肿瘤基因表达调控
基因组学/方法
聚类分析
表达谱芯片
人
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职称材料
题名
人MAGE-3真核表达载体的构建与表达
被引量:
2
1
作者
吴金民
孙晓东
刘杏娥
机构
浙江大学医学院附属邵逸夫医院肿瘤中心
出处
《实用肿瘤杂志》
CAS
北大核心
2003年第4期271-274,共4页
文摘
目的 克隆人黑色素瘤特异性抗原 MAGE- 3基因 ,构建真核表达载体 ,建立 MAGE- 3阳性细胞株 ,制备肿瘤核酸疫苗。方法 用 RT- PCR方法扩增 MAGE- 3c DNA,以 pc DNA3.1+为载体 ,构建重组表达质粒pc DNA3.1/ MAGE- 3。重组质粒用脂质体转染鼠 B16细胞 ,经 RT- PCR、细胞免疫染色及免疫印迹法鉴定转化细胞中 MAGE- 3的表达。结果 正确构建了 pc DNA3.1/ MAGE- 3重组质粒 ,并且在转化细胞中检测到了 MAGE- 3的表达。结论 成功构建了 pc DNA3.1/ MAGE- 3真核表达质粒 ,建立了稳定表达人 MAGE- 3的鼠
关键词
MAGE-3
真核表达载体
构建
表达
黑色素瘤
Keywords
melanoma
/
genetics
genes expression
plasmids
cloning molecular
recombination,genetic
reverse transcriptase polymerase chain reaction
分类号
R73-3 [医药卫生—肿瘤]
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职称材料
题名
人葡萄膜黑色素瘤组织中差异表达基因及相关代谢通路的分析
被引量:
2
2
作者
杜葵芳
顼晓琳
李洋
王盈之
魏文斌
机构
首都医科大学附属北京同仁医院眼科
首都医科大学附属北京同仁医院北京同仁眼科中心北京市眼科学与视觉科学重点实验室
出处
《中华实验眼科杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2015年第11期996-1003,共8页
基金
国家自然科学基金项目(81272981)
北京市自然科学基金项目(7151003)
+1 种基金
北京市卫生系统高层次卫生技术人才培养计划项目(2014-2-003)
北京市医院管弹局临床医学发展专项终费项目(ZYLX201307)
文摘
背景人葡萄膜黑色素瘤(UM)组织与正常组织中存在差异表达基因,但国外不同文献报道的结果不尽一致,而国内对人UM基因表达的改变及其相关的作用通路的研究较少。目的应用基因芯片技术探讨人UM中差异表达的基因,分析差异基因参与的重要信号通路。方法收集在北京同仁医院因原发性UM行眼球摘除并经组织病理学证实为梭形细胞型UM的组织标本4例,以正常供体葡萄膜组织作为对照组。利用HumanGenomeU133Plus2.0芯片技术筛查2种组织中基因表达的差异,并使用GOEAST富集分析软件对差异基因的重要生物学功能及参与的通路进行分析。结果与正常的葡萄膜组织对比,人UM中有4165个差异基因,占12.50%,其中包含1236个上调基因和2929个下调基因,分别占3.71%和8.79%。人UM组织中上调5倍或以上基因为113个,下调50%的基因为1053个;上调10倍或以上的基因为21个,下调90%或以上的基因为422个;上调50倍或以上的基因为1个,下调98%或以上的基因为33个;上调100倍或以上的基因为1个,下调99%或以上的基因为5个。按功能学分类表明,差异表达基因中包括细胞分化与增生基因、发育相关基因、细胞黏附相关基因、免疫应答基因、调节转录基因、信号转导相关基因、凋亡以及抗凋亡相关基因等;差异表达基因参与的代谢通路涉及血管形成过程的代谢通路、细胞周期相关的蛋白激酶通路以及B淋巴细胞或T淋巴细胞的代谢通路等。结论人UM组织与正常人葡萄膜组织中基因表达谱明显不同,这些差异表达的基因除参与血管生成、激酶通路等已知的UM发育有关的代谢通路外,还涉及免疫系统的变化。人UM的发生和进展是多种基因、多种通路共同作用的结果。
关键词
黑色素瘤/基因
葡萄膜肿瘤
基因表达谱
肿瘤基因表达调控
基因组学/方法
聚类分析
表达谱芯片
人
Keywords
melanoma
/
genetics
Uveal neoplasms
Gene expression profile
Gene expression regulation,neoplastic
Genomics/methods
Cluster analysis
Expression profiling microarray
Humans
分类号
R739.7 [医药卫生—肿瘤]
下载PDF
职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
人MAGE-3真核表达载体的构建与表达
吴金民
孙晓东
刘杏娥
《实用肿瘤杂志》
CAS
北大核心
2003
2
下载PDF
职称材料
2
人葡萄膜黑色素瘤组织中差异表达基因及相关代谢通路的分析
杜葵芳
顼晓琳
李洋
王盈之
魏文斌
《中华实验眼科杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2015
2
下载PDF
职称材料
已选择
0
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