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人MAGE-3真核表达载体的构建与表达 被引量:2
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作者 吴金民 孙晓东 刘杏娥 《实用肿瘤杂志》 CAS 北大核心 2003年第4期271-274,共4页
目的 克隆人黑色素瘤特异性抗原 MAGE- 3基因 ,构建真核表达载体 ,建立 MAGE- 3阳性细胞株 ,制备肿瘤核酸疫苗。方法 用 RT- PCR方法扩增 MAGE- 3c DNA,以 pc DNA3.1+为载体 ,构建重组表达质粒pc DNA3.1/ MAGE- 3。重组质粒用脂质体... 目的 克隆人黑色素瘤特异性抗原 MAGE- 3基因 ,构建真核表达载体 ,建立 MAGE- 3阳性细胞株 ,制备肿瘤核酸疫苗。方法 用 RT- PCR方法扩增 MAGE- 3c DNA,以 pc DNA3.1+为载体 ,构建重组表达质粒pc DNA3.1/ MAGE- 3。重组质粒用脂质体转染鼠 B16细胞 ,经 RT- PCR、细胞免疫染色及免疫印迹法鉴定转化细胞中 MAGE- 3的表达。结果 正确构建了 pc DNA3.1/ MAGE- 3重组质粒 ,并且在转化细胞中检测到了 MAGE- 3的表达。结论 成功构建了 pc DNA3.1/ MAGE- 3真核表达质粒 ,建立了稳定表达人 MAGE- 3的鼠 展开更多
关键词 MAGE-3 真核表达载体 构建 表达 黑色素瘤
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人葡萄膜黑色素瘤组织中差异表达基因及相关代谢通路的分析 被引量:2
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作者 杜葵芳 顼晓琳 +2 位作者 李洋 王盈之 魏文斌 《中华实验眼科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第11期996-1003,共8页
背景人葡萄膜黑色素瘤(UM)组织与正常组织中存在差异表达基因,但国外不同文献报道的结果不尽一致,而国内对人UM基因表达的改变及其相关的作用通路的研究较少。目的应用基因芯片技术探讨人UM中差异表达的基因,分析差异基因参与的重... 背景人葡萄膜黑色素瘤(UM)组织与正常组织中存在差异表达基因,但国外不同文献报道的结果不尽一致,而国内对人UM基因表达的改变及其相关的作用通路的研究较少。目的应用基因芯片技术探讨人UM中差异表达的基因,分析差异基因参与的重要信号通路。方法收集在北京同仁医院因原发性UM行眼球摘除并经组织病理学证实为梭形细胞型UM的组织标本4例,以正常供体葡萄膜组织作为对照组。利用HumanGenomeU133Plus2.0芯片技术筛查2种组织中基因表达的差异,并使用GOEAST富集分析软件对差异基因的重要生物学功能及参与的通路进行分析。结果与正常的葡萄膜组织对比,人UM中有4165个差异基因,占12.50%,其中包含1236个上调基因和2929个下调基因,分别占3.71%和8.79%。人UM组织中上调5倍或以上基因为113个,下调50%的基因为1053个;上调10倍或以上的基因为21个,下调90%或以上的基因为422个;上调50倍或以上的基因为1个,下调98%或以上的基因为33个;上调100倍或以上的基因为1个,下调99%或以上的基因为5个。按功能学分类表明,差异表达基因中包括细胞分化与增生基因、发育相关基因、细胞黏附相关基因、免疫应答基因、调节转录基因、信号转导相关基因、凋亡以及抗凋亡相关基因等;差异表达基因参与的代谢通路涉及血管形成过程的代谢通路、细胞周期相关的蛋白激酶通路以及B淋巴细胞或T淋巴细胞的代谢通路等。结论人UM组织与正常人葡萄膜组织中基因表达谱明显不同,这些差异表达的基因除参与血管生成、激酶通路等已知的UM发育有关的代谢通路外,还涉及免疫系统的变化。人UM的发生和进展是多种基因、多种通路共同作用的结果。 展开更多
关键词 黑色素瘤/基因 葡萄膜肿瘤 基因表达谱 肿瘤基因表达调控 基因组学/方法 聚类分析 表达谱芯片
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