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预知子种子提取物对核糖体蛋白抑制HepG2肝癌细胞增殖调控作用研究 被引量：11
1
作者 王枭宇 卢涛 +1 位作者 梁超 方肇勤 《中华肿瘤防治杂志》 CAS 北大核心 2019年第16期1156-1162,共7页
目的预知子是临床常用抗癌中药,具体作用机制仍不明确.本研究观察预知子种子提取物干预HepG2肝癌细胞后,对核糖体蛋白mRNA、蛋白水平及Mdm2-p53信号通路关键蛋白影响,部分明确预知子抑制肿瘤细胞生长的核糖体蛋白相关作用机制.方法 HepG... 目的预知子是临床常用抗癌中药,具体作用机制仍不明确.本研究观察预知子种子提取物干预HepG2肝癌细胞后,对核糖体蛋白mRNA、蛋白水平及Mdm2-p53信号通路关键蛋白影响,部分明确预知子抑制肿瘤细胞生长的核糖体蛋白相关作用机制.方法 HepG2细胞中分别给予预知子种子提取物对照组0μg/mL、低浓度组375μg/mL和高浓度组750μg/mL,观察对细胞生长活力和周期影响,实时荧光定量聚合酶链反应(quantitative real-time polymerase chain reaction,qRT-PCR)检测12个核糖体蛋白及p53 mRNA变化,蛋白质印迹法检测典型核糖体蛋白RPS26、RPSA、Mdm2、p53和细胞周期蛋白变化.结果预知子种子提取物干预后,对照组、低浓度组和高浓度组HepG2细胞活力分别为(100.000±1.509、105.060±1.000和61.130±0.700),差异有统计学意义,F=425.760,P<0.001.PCR法检测结果显示,高浓度组RPSA(F=4959.917,P<0.001)、RPS3A(F=725.900,P<0.001)、RPS8(F=350.515,P<0.001)、RPS13(F=198.316,P<0.001)、RPS16(F=41.693,P<0.001)、RPS29(F=536.835,P<0.001)、RPL6(F=119.226,P<0.001)、RPL10(F=49.339,P<0.001)、RPL15(F=35.603,P<0.001)、RPL17(F=188.221,P<0.001)和RPLP0(F=221.837,P<0.001)等11个核糖体蛋白mRNA表达下调,RPS26(F=330.023,P<0.001)mRNA表达上调.蛋白质印迹法结果显示,RPS26(t=7.365,P=0.002)、RPSA(t=4.654,P=0.010)和Mdm2(t=4.048,P=0.016)表达下调,p53蛋白水平(t=3.185,P=0.033)和mRNA水平(t=16.110,P<0.001)表达上调.干预后HepG2细胞S期比例增多,G0/G1期和G2/M期比例减少,细胞进入S期停滞.细胞周期蛋白CCND2(t=6.069,P=0.004)和CCNB1(t=5.481,P=0.005)大幅度下调,CCNE1小幅度下调(t=2.905,P=0.044).结论预知子可能通过上调或下调核糖体蛋白mRNA或蛋白表达,抑制Mdm2并激活p53,诱导HepG2细胞进入S期停滞,抑制HepG2细胞增殖. 展开更多
关键词 预知子 肝癌 HEpG2细胞 核糖体蛋白 mdm2-p53信号通路
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复方浙贝颗粒药物血清对人结肠癌HCT-116细胞增殖与凋亡的影响 被引量：6
2
作者 张喆 陈信义 郑智 《中医杂志》 CSCD 北大核心 2015年第1期55-58,共4页
目的观察复方浙贝颗粒对人结肠癌HCT-116细胞增殖、凋亡的影响及其可能作用机制。方法40只Wistar大鼠随机分为对照组和复方浙贝颗粒高、中、低剂量组,每组10只。复方浙贝颗粒高、中、低剂量组分别按8、4、2 g/(kg·d)灌胃,对照组给... 目的观察复方浙贝颗粒对人结肠癌HCT-116细胞增殖、凋亡的影响及其可能作用机制。方法40只Wistar大鼠随机分为对照组和复方浙贝颗粒高、中、低剂量组,每组10只。复方浙贝颗粒高、中、低剂量组分别按8、4、2 g/(kg·d)灌胃,对照组给予0.1 ml/10 g生理盐水灌胃,连续7天。于末次灌胃后1 h制备各组药物血清。采用MTT法检测各组血清对人结肠癌HCT-116细胞抑制率,经流式细胞仪定量检测各组血清诱导HCT-116细胞凋亡率,Western blot方法检测各组血清对HCT-116细胞双微体-2(MDM2)、p53、p21蛋白表达的影响。结果复方浙贝颗粒高、中、低剂量组对HCT-116细胞增殖抑制率分别为40.00%、42.37%和29.15%,凋亡率分别为18.75%、20.00%、15.32%,均高于对照组(P<0.05)。48 h时复方浙贝颗粒高剂量组HCT-116细胞MDM2、p53、p21蛋白,复方浙贝颗粒中剂量组MDM2蛋白,复方浙贝颗粒低剂量组MDM2、p53蛋白表达均较对照组升高(P<0.01);96 h时复方浙贝颗粒各剂量组MDM2蛋白表达较本组48 h明显降低,p53蛋白表达较本组48 h明显升高(P<0.01)。结论复方浙贝颗粒能抑制人结肠癌HCT-116细胞增殖、促进凋亡,其作用机制可能与调节增加MDM2-p53信号通路有关。 展开更多
关键词 结肠癌 复方浙贝颗粒 细胞增殖 细胞凋亡 mdm2-p53信号通路
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青蒿琥酯对吉西他滨体外抗胰腺癌活性的作用 被引量：5
3
作者 华宏军 龚道军 +3 位作者 叶晓华 陈媛 陈燕萍 韦祎 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第1期75-80,共6页
目的:探讨青蒿琥酯辅助治疗对吉西他滨抗胰腺癌活性的影响和机制。方法:分别采用分子克隆及RNA干扰方法于人胰腺癌细胞Capan-2中过表达和干扰鼠双微体蛋白2(MDM2),MTT实验检测p53野生型胰腺癌细胞系Capan-2的细胞活力。Western blot实... 目的:探讨青蒿琥酯辅助治疗对吉西他滨抗胰腺癌活性的影响和机制。方法:分别采用分子克隆及RNA干扰方法于人胰腺癌细胞Capan-2中过表达和干扰鼠双微体蛋白2(MDM2),MTT实验检测p53野生型胰腺癌细胞系Capan-2的细胞活力。Western blot实验检测Capan-2细胞中MDM2、p53、Noxa和Puma的表达水平,细胞色素C和凋亡诱导因子的释放,以及caspase-9和caspase-3的活化。流式细胞术检测Capan-2细胞的线粒体膜电位和凋亡水平。结果:吉西他滨联合青蒿琥酯组Capan-2的相对细胞活力显著低于吉西他滨单处理组(P <0. 05)。青蒿琥酯处理显著抑制Capan-2细胞中MDM2的表达水平(P <0. 05)。吉西他滨联合青蒿琥酯组的p53、Noxa及Puma表达水平均明显高于吉西他滨单处理组(P <0. 05)。青蒿琥酯明显促进吉西他滨依赖的Capan-2细胞线粒体膜电位的下降,细胞色素C和凋亡诱导因子的释放,caspase-9和caspase-3的活化,以及凋亡的发生。转染MDM2表达质粒后,青蒿琥酯联合吉西他滨对Capan-2细胞的凋亡诱导途径受到显著抑制。结论:青蒿琥酯通过MDM2/p53途径提高吉西他滨的抗胰腺癌活性。 展开更多
关键词 青蒿琥酯 吉西他滨 胰腺癌 mdm2/p53信号通路 细胞凋亡
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柠檬醛通过MDM2/p53信号通路对小鼠B细胞淋巴瘤38B9细胞增殖、细胞周期及凋亡的影响 被引量：4
4
作者 张毅 魏子辰 +2 位作者 庞磊 严莹 郁多男 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第6期1053-1060,共8页
目的:探讨柠檬醛(citral)对小鼠B细胞淋巴瘤38B9细胞的作用和机制。方法:采用不同质量浓度(0~120 mg/L)的柠檬醛处理38B9细胞,通过CCK-8法检测细胞活力,并计算柠檬醛的半数抑制浓度(IC_(50))。根据IC_(50)值设置低、中、高三个浓度(5、1... 目的:探讨柠檬醛(citral)对小鼠B细胞淋巴瘤38B9细胞的作用和机制。方法:采用不同质量浓度(0~120 mg/L)的柠檬醛处理38B9细胞,通过CCK-8法检测细胞活力,并计算柠檬醛的半数抑制浓度(IC_(50))。根据IC_(50)值设置低、中、高三个浓度(5、10、20 mg/L)处理38B9细胞,并检测柠檬醛对38B9细胞增殖的影响。采用瑞氏-吉姆萨染色观察38B9细胞形态变化。通过流式细胞术检测38B9细胞凋亡及细胞周期。利用RT-qPCR和Western blot检测38B9细胞凋亡及细胞周期相关因子的mRNA和蛋白表达水平,小鼠抑瘤实验观察柠檬醛对38B9细胞生长的作用。通过PubChem在线预测柠檬醛可能的靶点,并绘制蛋白质互作网络图。使用ClusterProfile对结果进行GO富集分析并使用ggplot2绘制可视化柱状图。利用Western blot检测38B9细胞MDM2/p53信号通路相关蛋白的表达水平。结果:柠檬醛能有效抑制小鼠B细胞淋巴瘤38B9细胞的活力,诱导其凋亡并阻滞其细胞周期,促进Puma、Noxa、Bax和p21的mRNA和蛋白表达(P<0.05或P<0.01),抑制Bcl-2和CDK2的mRNA和蛋白表达(P<0.05或P<0.01),抑制MDM2的蛋白表达(P<0.05),促进p53的蛋白表达(P<0.05)。结论:柠檬醛能够显著抑制小鼠B细胞淋巴瘤38B9细胞的增殖,同时诱导细胞凋亡并引起细胞周期阻滞,其机制可能与MDM2/p53信号通路有关。 展开更多
关键词 柠檬醛 B细胞淋巴瘤 细胞凋亡 细胞周期 mdm2/p53信号通路
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茯苓酸抑制人结肠癌细胞系HT-29增殖 被引量：3
5
作者 冯娜欣 王鹏 +1 位作者 何明璇 刘锦燕 《基础医学与临床》 2023年第11期1673-1679,共7页
目的探讨茯苓酸(PA)对人结肠癌细胞系HT-29增殖和凋亡的影响及可能的分子机制。方法将细胞分为空白组、20、40和80μmol/L PA组。MTT法检测HT-29细胞增殖;流式细胞仪测定HT-29细胞周期和凋亡;Western blot检测HT-29细胞中细胞周期、凋... 目的探讨茯苓酸(PA)对人结肠癌细胞系HT-29增殖和凋亡的影响及可能的分子机制。方法将细胞分为空白组、20、40和80μmol/L PA组。MTT法检测HT-29细胞增殖;流式细胞仪测定HT-29细胞周期和凋亡;Western blot检测HT-29细胞中细胞周期、凋亡以及Akt/MDM2/p53信号通路相关蛋白质表达。构建HT-29细胞的肿瘤异种移植模型,随后将成瘤裸鼠随机分为对照组、腹腔注射10、30和60 mg/kg PA组(每组6只),测量肿瘤体积、质量;免疫组化测定Ki-67、cleaved caspase-3蛋白表达;Western blot检测肿瘤组织中Akt/MDM2/p53信号通路相关蛋白表达。结果各剂量PA均可呈浓度依赖性显著降低HT-29细胞增殖活力,S、G_(2)/M期细胞比例,细胞中B细胞淋巴瘤基因-2(Bcl-2)、细胞周期蛋白D1(cyclin D1)、细胞周期蛋白依赖性激酶2(CDK2)蛋白表达水平和p-Akt/Akt、p-MDM2/MDM2比值(P<0.05),同时升高细胞凋亡率、G_(0)/G_(1)期细胞比例以及细胞中Bcl-2相关X蛋白(Bax)、切割型胱天蛋白酶-3(cleaved caspase-3)、p53蛋白表达水平,差异均有统计学意义(P<0.05)。各剂量PA均可显著降低裸鼠肿瘤体积、质量以及肿瘤组织中增殖细胞核抗原(Ki-67)蛋白表达水平和p-Akt/Akt、p-MDM2/MDM2比值(P<0.05),同时升高肿瘤组织中cleaved caspase-3、p53蛋白表达水平,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论PA可诱导结肠癌细胞凋亡和细胞周期阻滞并抑制细胞增殖,其机制可能与调节Akt/MDM2/p53信号通路有关。 展开更多
关键词 结肠癌 茯苓酸 凋亡 细胞周期 Akt/mdm2/p53信号通路
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桃叶珊瑚苷对前列腺癌的抑制作用及机制的体内外研究
6
作者 闫本纯 何春艳 +4 位作者 李宏伟 南锡浩 张智慧 邸彦橙 田河 《中国药房》 CAS 北大核心 2024年第13期1618-1623,共6页
目的 探讨桃叶珊瑚苷(AU)调节蛋白激酶B(Akt)/双微体同源基因2(MDM2)/p53信号通路对前列腺癌(PC)细胞增殖和肿瘤生长的影响。方法 将前列腺癌细胞PC3分为对照组、50μmol/L AU组、100μmol/L AU组、SC79(Akt激活剂)组(5μmol/L)、100μm... 目的 探讨桃叶珊瑚苷(AU)调节蛋白激酶B(Akt)/双微体同源基因2(MDM2)/p53信号通路对前列腺癌(PC)细胞增殖和肿瘤生长的影响。方法 将前列腺癌细胞PC3分为对照组、50μmol/L AU组、100μmol/L AU组、SC79(Akt激活剂)组(5μmol/L)、100μmol/L AU+SC79组,考察各组细胞的克隆能力和增殖能力,检测细胞凋亡率及细胞中Akt/MDM2/p53信号通路相关蛋白表达。建立异种移植肿瘤裸鼠模型,并将建模成功的裸鼠分为肿瘤组、AU组(80 mg/kg)、SC79组(50 mg/kg)和AU+SC79组(80mg/kg AU+50 mg/kg SC79),每组10只,每天给药1次,共21 d。末次给药后,称定肿瘤质量,检测肿瘤组织中细胞核相关抗原(Ki-67)及Akt/MDM2/p53信号通路相关蛋白表达。结果 细胞实验中,与对照组比较,50μmol/L AU组、100μmol/L AU组细胞克隆形成数、增殖率和Akt、MDM2蛋白的磷酸化水平均显著减少/降低(P<0.05),细胞凋亡率、p53蛋白表达水平均显著升高(P<0.05),但SC79组各指标变化趋势相反(P<0.05);100μmol/L AU+SC79组与100μmol/L AU组比较,克隆形成数、增殖率和Akt、MDM2蛋白的磷酸化水平均显著增加/升高(P<0.05),细胞凋亡率、p53蛋白表达水平均显著降低(P<0.05),但与SC79组比较各指标变化趋势相反(P<0.05)。体内实验中,与肿瘤组比较,AU组裸鼠的肿瘤质量及组织中Ki-67阳性表达和Akt、MDM2蛋白的磷酸化水平均显著降低(P<0.05),p53蛋白表达水平显著升高(P<0.05),但SC79组裸鼠的上述指标变化趋势相反(P<0.05);AU+SC79组与AU组比较,裸鼠的肿瘤质量及组织中Ki-67阳性表达和Akt、MDM2蛋白的磷酸化水平均显著升高(P<0.05),p53蛋白表达水平显著降低(P<0.05),但其与SC79组比较各指标变化趋势相反(P<0.05)。结论 AU可通过抑制Akt/MDM2/p53信号通路从而抑制PC细胞增殖及肿瘤生长。 展开更多
关键词 桃叶珊瑚苷 Akt/mdm2/p53信号通路 前列腺癌 细胞增殖 肿瘤生长
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巴伐奇宁调节Akt/MDM2/p53信号通路影响肝癌细胞增殖、凋亡和细胞周期
7
作者 余咸辉 占水平 +3 位作者 吴海龙 沈俊 竹梦 周锐 《现代肿瘤医学》 CAS 2024年第13期2354-2359,共6页
目的:探讨巴伐奇宁调节Akt/MDM2/p53信号通路影响肝癌细胞增殖、凋亡和细胞周期。方法:CCK-8检测巴伐奇宁对正常肝细胞和肝癌细胞的抑制作用;体外培养肝癌HepG2细胞,将HepG2细胞分为Control组,巴伐奇宁低剂量组(10μmol/L)、巴伐奇宁高... 目的:探讨巴伐奇宁调节Akt/MDM2/p53信号通路影响肝癌细胞增殖、凋亡和细胞周期。方法:CCK-8检测巴伐奇宁对正常肝细胞和肝癌细胞的抑制作用;体外培养肝癌HepG2细胞,将HepG2细胞分为Control组,巴伐奇宁低剂量组(10μmol/L)、巴伐奇宁高剂量组(20μmol/L)、巴伐奇宁高剂量(20μmol/L)+SC79(8μg/mL)组;MTT和Edu实验检测细胞增殖;采用流式细胞术检测细胞凋亡和细胞周期;Western blot检测Bcl-2、Bax、p-Akt/Akt、p-MDM2/MDM2、p-p53/p53蛋白表达;建立肝癌肿瘤裸鼠模型,观察肿瘤生长情况,检测肿瘤组织中Bcl-2、Bax、p-Akt/Akt、p-MDM2/MDM2、p-p53/p53蛋白表达。结果:巴伐奇宁对几种肝癌细胞均具有抑制作用,不影响正常肝细胞增殖;体外实验表明,与control组相比,巴伐奇宁低、高剂量组HepG2细胞OD_(490)(24 h、48 h)值、细胞增殖率、S期和G_(2)/M期细胞比例、Bcl-2、p-Akt/Akt和p-MDM2/MDM2蛋白显著降低,凋亡率、G_(0)/G_(1)期细胞比例、p-p53/p53和Bax蛋白显著升高(P<0.05);与巴伐奇宁高剂量组相比,巴伐奇宁高剂量+SC79组HepG2细胞OD_(490)(24 h、48 h)值和细胞增殖率、S期和G_(2)/M期细胞比例、Bcl-2、p-Akt/Akt、p-MDM2/MDM2蛋白表达显著升高,凋亡率、G_(0)/G_(1)期细胞比例、p-p53/p53、Bax蛋白表达显著降低(P<0.05);裸鼠移植瘤实验结果表明,与对照组相比,巴伐奇宁组和Hu7691组裸鼠肿瘤质量和肿瘤体积、Bcl-2、p-Akt/Akt、p-MDM2/MDM2蛋白表达显著降低,裸鼠肿瘤组织中p-p53/p53、Bax蛋白表达显著升高(P<0.05);与巴伐奇宁组相比,Hu7691组裸鼠各检测指标均无统计学差异(P>0.05)。结论:巴伐奇宁可能通过调节Akt/MDM2/p53信号通路来抑制肝癌细胞增殖,阻滞细胞周期,促进细胞凋亡。 展开更多
关键词 巴伐奇宁 Akt/mdm2/p53信号通路 肝癌 细胞周期
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小豆蔻明调节Akt/MDM2/p53信号通路对宫颈癌HeLa细胞恶性进展的影响
8
作者 方志南 陶甜甜 闫丽 《中国优生与遗传杂志》 2024年第1期22-27,共6页
目的探讨小豆蔻明(CAR)对宫颈癌HeLa细胞恶性进展的影响及其调控机制。方法体外培养人宫颈癌HeLa细胞并随机分为对照组(Control组)、CAR低浓度组(CAR L组,10μmol/L CAR)、CAR高浓度组(CAR H组,40μmol/L CAR)和CAR高浓度+Akt激活剂组(C... 目的探讨小豆蔻明(CAR)对宫颈癌HeLa细胞恶性进展的影响及其调控机制。方法体外培养人宫颈癌HeLa细胞并随机分为对照组(Control组)、CAR低浓度组(CAR L组,10μmol/L CAR)、CAR高浓度组(CAR H组,40μmol/L CAR)和CAR高浓度+Akt激活剂组(CAR H+SC79组,40μmol/L CAR+10μmol/L SC79),Hoechst33258染色法观察各组细胞形态;CCK-8法检测细胞活力;细胞划痕实验检测细胞迁移率;Transwell实验检测细胞侵袭数;流式细胞术检测细胞凋亡;Western blot技术检测p-Akt、Akt、p-MDM2、MDM2、p-p53、p53蛋白表达水平。结果与Control组比较,CAR L、CAR H组细胞核皱缩、裂解,细胞增殖、迁移和侵袭及p-Akt/Akt、p-MDM2/MDM2水平下降,细胞凋亡率和p-p53/p53水平升高(P<0.05);与CAR H组比较,CAR H+SC79组细胞生长状态好转,细胞增殖、迁移和侵袭及p-Akt/Akt、p-MDM2/MDM2水平升高,细胞凋亡率和p-p53/p53水平下降(P<0.05)。结论CAR通过调节Akt/MDM2/p53信号通路抑制宫颈癌HeLa细胞增殖、迁移与侵袭,诱导细胞凋亡。 展开更多
关键词 小豆蔻明 宫颈癌细胞 蛋白激酶B/mdm2/p53信号通路 增殖 凋亡
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电针对佐剂性关节炎大鼠踝关节炎症的HIF-1α/MDM2/p53信号通路的影响 被引量：1
9
作者 蒋雨晴 苏程果 +4 位作者 周海燕 姜建振 叶江南 罗芳 朱俊 《世界科学技术-中医药现代化》 CSCD 北大核心 2023年第10期3413-3419,共7页
目的观察电针对佐剂性关节炎(Adjuvant arthritis,AA)大鼠踝关节的保护作用以及HIF-1α/MDM2/p53信号通路表达的影响。方法将SD大鼠随机分为对照组、模型组、假电针组、激动剂组、电针组、电针+拮抗剂组、拮抗剂组,每组10只。大鼠注射... 目的观察电针对佐剂性关节炎(Adjuvant arthritis,AA)大鼠踝关节的保护作用以及HIF-1α/MDM2/p53信号通路表达的影响。方法将SD大鼠随机分为对照组、模型组、假电针组、激动剂组、电针组、电针+拮抗剂组、拮抗剂组,每组10只。大鼠注射弗氏完全佐剂制备AA模型,电针组和电针+拮抗剂组大鼠予以电针干预;假电针组大鼠予以电刺激处理;电针+拮抗剂组和拮抗剂组大鼠注射诱导缺氧诱导因子1α(Hypoxia-inducible factor-1α,HIF-1α)拮抗剂;激动剂组大鼠注射HIF-1α激动剂。采用关节炎指数评分评估AA大鼠的关节炎严重程度,苏木素-伊红(HE)法观察各组大鼠踝关节的关节炎症情况,酶联免疫吸附试验(ELISA)检测大鼠血清HIF-1α表达,荧光定量PCR(RT-PCR)和蛋白免疫印迹法(Western blot)分别检测各组大鼠滑膜组织HIF-1α、血管内皮生长因子(Vascular endothelial growth factor,VEGF)、细胞内鼠双微体2(Murine double minute 2,MDM2)、p53的mRNA和蛋白表达情况。结果与模型组比较,电针组、电针+拮抗剂组和拮抗剂组大鼠的关节炎指数评分、HE染色评分和血清HIF-1α表达显著降低(P<0.01),而假电针组、激动剂组大鼠的关节炎指数评分、HE染色评分和血清HIF-1α表达与模型组无显著差异(P>0.05)。RTPCR和Western blot结果显示,与模型组比较,电针组、电针+拮抗剂组和拮抗剂组大鼠的HIF-1α、VEGF、MDM2的mRNA和蛋白表达均显著降低,而p53的mRNA和蛋白表达显著提高(P<0.01)。假电针组、激动剂组大鼠的HIF-1α、VEGF、MDM2、p53的mRNA和蛋白表达无显著差异(P>0.05)。结论电针干预对AA大鼠的踝关节炎症有显著的保护作用,HIF-1α/MDM2/p53信号通路在其中起着关键的介导作用。 展开更多
关键词 电针 佐剂性关节炎 滑膜炎症 HIF-1α/mdm2/p53信号通路
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皮肤鳞状细胞癌细胞中BAG-1表达变化对细胞增殖、凋亡的影响及机制 被引量：4
10
作者 张佳音 钟咪 +1 位作者 饶美荣 曾芬 《山东医药》 CAS 2018年第45期9-12,共4页
目的观察Bcl-2结合抗凋亡基因1(BAG-1)在皮肤鳞状细胞癌(CSCC)细胞株A431中的表达水平,并探讨其对A431细胞增殖和凋亡的影响及其作用机制。方法分别采用qRT-PCR及Western blotting法检测CSCC细胞株A431和人正常永生化上皮细胞Hecate中BA... 目的观察Bcl-2结合抗凋亡基因1(BAG-1)在皮肤鳞状细胞癌(CSCC)细胞株A431中的表达水平,并探讨其对A431细胞增殖和凋亡的影响及其作用机制。方法分别采用qRT-PCR及Western blotting法检测CSCC细胞株A431和人正常永生化上皮细胞Hecate中BAG-1 mRNA、蛋白表达。常规培养CSCC细胞株A431,感染BAG-1敲减病毒(抑制组,sh-BAG-1),并设立阴性对照(对照组),培养48 h后,分别采用qRT-PCR及Western blotting法检测BAG-1 mRNA及蛋白的表达,采用MTS法检测细胞增殖活力、平板克隆试验检测细胞克隆形成能力、流式细胞术检测细胞周期和细胞凋亡率、Western blotting法检测Mdm-2、p53及其下游基因Bcl-2和p21蛋白的表达水平。结果 CSCC细胞系A431中BAG-1 mRNA相对表达量高于人正常永生化上皮细胞Hecate(P<0.05)。与对照组比较,抑制组BAG-1蛋白相对表达量下降,细胞增殖及克隆形成能力减弱,细胞阻滞在G1期,细胞凋亡增多,Mdm-2蛋白表达减少,p53、p21和Bcl-2蛋白表达均增多(P均<0.05)。结论 CSCC细胞中BAG-1高表达,其可能通过调控Mdm-2/p53信号通路增强CSCC细胞增殖、抑制其凋亡。 展开更多
关键词 皮肤鳞状细胞癌 Bcl-2结合抗凋亡基因1 mdm-2/p53信号通路 细胞增殖 细胞凋亡
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