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间接荧光抗体法快速诊断海兰褐蛋鸡J亚群禽白血病的研究 被引量：49
1
作者 徐镔蕊 董卫星 +6 位作者 何召庆 冯小宇 余春明 张丽 任艳丽 L F LEE Mao-xiang LI 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2002年第9期7-9,共3页
某地区海兰褐蛋鸡发生肿瘤性传染病 ,经临床症状和病理学检查 ,在肝、脾、肾、卵巢、输卵管、肺、骨髓、腺胃、肠道等可见胞浆内充满球形嗜酸性颗粒的骨髓瘤细胞 ,呈灶状或弥漫性的分布。该变化是禽骨髓细胞瘤病病理学的特征性变化 ,具... 某地区海兰褐蛋鸡发生肿瘤性传染病 ,经临床症状和病理学检查 ,在肝、脾、肾、卵巢、输卵管、肺、骨髓、腺胃、肠道等可见胞浆内充满球形嗜酸性颗粒的骨髓瘤细胞 ,呈灶状或弥漫性的分布。该变化是禽骨髓细胞瘤病病理学的特征性变化 ,具有证病意义。经用特异性抗 J亚群白血病病毒囊膜蛋白 gp85的单克隆抗体的免疫组化方法 ,在病料组织切片上检出病毒抗原 ,从而确诊为蛋鸡 J亚群禽白血病。本研究是尝试用间接荧光抗体法来快速诊断该病。采用特异性抗 J亚群禽白血病病毒囊膜蛋白 gp85单克隆抗体对组织触片作间接荧光抗体试验 ,检测 J亚群禽白血病病毒抗原。在骨髓、食管、肌肉、输卵管、肾都出现了范围广而且很明亮的荧光 ;肝、肺、脾的荧光较为明亮 ;心脏的荧光较弱 ,但清晰可见。表明在病料组织中存在特异性病毒抗原。 展开更多
关键词 诊断 蛋鸡 J亚群禽白血病 间接荧光试验 单克隆抗体 抗体检测
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猪瘟病毒保护性抗原E2蛋白单抗的制备及其抗原表位的初步分析 被引量：27
2
作者 马刚 李作生 +2 位作者 余兴龙 刘思国 涂长春 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第2期121-124,共4页
应用大肠杆菌表达的猪瘟病毒主要保护性 E2抗原决定簇蛋白和全长 E2基因构建的 DNA疫苗免疫 BAL B/c小鼠。取免疫小鼠脾细胞与 SP2 /0骨髓瘤细胞进行融合 ,经克隆和间接 EL ISA筛选 ,获得了 A11、B2、E3、H6、D5、D86株稳定分泌抗猪瘟病... 应用大肠杆菌表达的猪瘟病毒主要保护性 E2抗原决定簇蛋白和全长 E2基因构建的 DNA疫苗免疫 BAL B/c小鼠。取免疫小鼠脾细胞与 SP2 /0骨髓瘤细胞进行融合 ,经克隆和间接 EL ISA筛选 ,获得了 A11、B2、E3、H6、D5、D86株稳定分泌抗猪瘟病毒 E2蛋白单克隆抗体 (Mc Ab)的杂交瘤细胞株。它们的腹水效价在 1∶ 80 0～ 1∶ 2 10 0 0 0之间。抗体类型鉴定结果表明 ,A11、E3、H6、D5和 D8为 Ig M类型 ,B2为 Ig G类型。随后用蛋白 A凝胶层析法和 PEG沉淀法分别纯化了 Ig G和 Ig M单抗。对纯化单抗进行的抗原识别表位研究结果初步表明 ,6株单抗可能识别 3种不同的E2抗原表位。 展开更多
关键词 猪瘟病毒 mcab 纯化 表位分析 保护性抗原E2 蛋白 单抗
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胶体金试纸条检测H9亚型禽流感病毒的研究 被引量：28
3
作者 彭伏虎 王政 +5 位作者 张进良 张文通 张展英 胡思顺 肖运才 毕丁仁 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第8期1081-1086,共6页
对禽流感病毒H9亚型血凝素单克隆抗体4C4进行胶体金标记,喷涂于玻璃纤维上制成金标垫,鸡抗AIVIgG和羊抗鼠IgG分别包被于硝酸纤维素(NC)膜上作为检测线和质控线,制作禽流感H9亚型免疫层析检测试纸条。验证结果表明,试纸条操作简单,肉眼于... 对禽流感病毒H9亚型血凝素单克隆抗体4C4进行胶体金标记,喷涂于玻璃纤维上制成金标垫,鸡抗AIVIgG和羊抗鼠IgG分别包被于硝酸纤维素(NC)膜上作为检测线和质控线,制作禽流感H9亚型免疫层析检测试纸条。验证结果表明,试纸条操作简单,肉眼于10 min内可判定结果,对H9亚型禽流感病毒及其标准血凝抗原具有高度特异性,与其它亚型禽流感病毒标准抗原及其它禽类病毒没有交叉反应,检测灵敏度比HA试验高4倍以上。试纸条在室温保存6个月、4℃保存12个月,其特异性及灵敏度没有明显变化。对实验室送检及临床采集的共311份喉头拭子进行检测,结果与本室研制的禽流感ELISA试剂盒总符合率为92%,随机选取10份阳性样品经病毒分离证实无一误检。结果证明,本研究建立的H9亚型禽流感病毒免疫层析检测方法具有特异、敏感、稳定、操作简单快捷等特点,适合用于H9亚型禽流感病毒的现场检测及鉴别诊断。 展开更多
关键词 禽流感病毒 H9亚型 免疫层析试纸条 单克隆抗体
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IL-13和IL-4在哮喘发病中的作用及相互关系 被引量：24
4
作者 朱晓萍 杨锡强 +3 位作者 符州 蒋利萍 王莉佳 李欣 《中华微生物学和免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第7期519-522,共4页
目的　探讨IL 13在哮喘发病中的作用及其与IL 4的相互关系。方法　哮喘组 2 4例 ,男 17例 ,女 7例 ;健康对照组 2 4例 ,男 12例 ,女 12例。用ELISA法检测不同时段PBMC培养上清IL 13和IL 4水平及加IL 13单克隆抗体 (McAb)和IL 4McA... 目的　探讨IL 13在哮喘发病中的作用及其与IL 4的相互关系。方法　哮喘组 2 4例 ,男 17例 ,女 7例 ;健康对照组 2 4例 ,男 12例 ,女 12例。用ELISA法检测不同时段PBMC培养上清IL 13和IL 4水平及加IL 13单克隆抗体 (McAb)和IL 4McAb干预后PBMC培养上清IL 4、IL 12、IL 13和IFN γ水平。结果　 (1)IL 13动态变化 :①对照组PBMC培养 3d、5d、7d水平均较培养 1d水平高 ,差异有显著性 ,培养 3d的水平较培养 5d、7d的高 ,差异有显著性 ;②哮喘组PBMC培养 3d、5d、7d的水平均较培养 1d的水平高 ,差异有显著性 ,培养 5d的水平均较培养 3d、7d的水平高 ,但之间差异无显著性 ;③哮喘组PBMC培养 3d、5d、7d的IL 13水平均较对照组高 ,差异有显著性。 (2 )IL 4动态变化 :①对照组和哮喘组PBMC培养 1d后 ,IL 4水平明显上升 ,第 3天仍保持较高水平 ,第 5、7天明显下降 ;②哮喘组 1d、3d、5d和 7d水平均较对照组高 ,差异有显著性。 (3)IL 4McAb干预后 ,哮喘组和正常组IL 13水平与对应小鼠IgG组相比有显著性降低 ,哮喘组IFN γ水平与对应小鼠IgG组相比有显著性增高。 (4)IL 13McAb干预后IL 12水平在哮喘组和正常组均提高 ,与对应小鼠IgG组相比差异有显著性。 (5 )IL 13McAb和IL 展开更多
关键词 IL-13 IL-4 哮喘 单克隆抗体 mcab 外周血单个核细胞 PBMC
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AFP免疫层析测试条的研制 被引量：11
5
作者 侯惠仁 吴冯波 +2 位作者 陈键 刘一兵 贺佑丰 《同位素》 CAS 2000年第3期142-146,共5页
以复合型层析材料为固相 ,用胶体金标记 AFP Mc Ab A14 C11,AFP Mc Ab A4 A14 包被于固相 ,采用双抗体夹心免疫层析技术 ,研制出 AFP免疫层析测试条。该方法敏感度为 10 μg/ L,结果显示清楚 ,具有简易、快速、灵敏、实用、省时等特点。
关键词 甲胎蛋白 胶体金 单克隆抗体 免疫层析 肝癌
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木瓜蛋白酶制备抗人肝癌单抗F（ab’）_2及Fab片段 被引量：16
6
作者 仇凯 陈志南 +6 位作者 刘智广 王茜 何风昌 曲萍 米力 隋延仿 刘彦仿 《第四军医大学学报》 1995年第6期414-417,共4页
目的：为了制备肝癌ＭｃＡｂＨＡｂ１８Ｆ（ａｂ’）＿２及Ｆａｂ片段，方法：用激活的木瓜酶分别在偏酸性（ｐＨ５．５）和偏碱性（ｐＨ８．０）条件下消化１８ｈ和１ｈ得到Ｆ（ａｂ’）＿２和Ｆａｂ片段，经ＤＥＡＥ－４０ＨＲ阴离子... 目的：为了制备肝癌ＭｃＡｂＨＡｂ１８Ｆ（ａｂ’）＿２及Ｆａｂ片段，方法：用激活的木瓜酶分别在偏酸性（ｐＨ５．５）和偏碱性（ｐＨ８．０）条件下消化１８ｈ和１ｈ得到Ｆ（ａｂ’）＿２和Ｆａｂ片段，经ＤＥＡＥ－４０ＨＲ阴离子交换色谱柱在Ｗａｔｅｒｓ６５０Ｅ快速蛋白液相色谱系统（ＥＰＬＣ）上建立其相应的纯化方法。结果：该法制备Ｆ（ａｂ’）＿２得率为４３％～６２％，制备Ｆａｂ得率４２％，其活性用免疫荧光法测定均为１．３６×１０￣（－９）ｍｏｌ／Ｌ。结论：本法操作简单，实用性强，尤其制备Ｆ（ａｂ’）＿２产率及活性均优于胃蛋白酶法。 展开更多
关键词 单克隆抗体 木瓜酶 色谱法 肝肿瘤 制备
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脑囊虫病人血清特异IgG4测定 被引量：18
7
作者 徐凤全 李桂萍 +3 位作者 赵中平 葛凌云 张佃波 蔺心敬 《中国人兽共患病杂志》 CSCD 北大核心 1999年第1期50-51,49,共3页
应用ＭｃＡｂ－ＥＬＩＳＡ检测脑囊虫病人血清特异性ＩｇＧ４抗体，检出率为９３．８３％（１５２／１６２），ＧＭＲＴ为１∶１４２４。其中重度囊虫感染病人的特异ＩｇＧ４检出率为１００％（２９／２９），ＧＭＲＴ为１∶２０９５；... 应用ＭｃＡｂ－ＥＬＩＳＡ检测脑囊虫病人血清特异性ＩｇＧ４抗体，检出率为９３．８３％（１５２／１６２），ＧＭＲＴ为１∶１４２４。其中重度囊虫感染病人的特异ＩｇＧ４检出率为１００％（２９／２９），ＧＭＲＴ为１∶２０９５；中度感染病人为９５．４５％（６３／６６），ＧＭＲＴ为１∶１５１０；轻度感染病人为８９．５５％（６０／６７），ＧＭＲＴ为１∶４００。显示血清特异ＩｇＧ４抗体水平与囊虫感染度有关。经药物治疗后，脑囊虫病人血清特异ＩｇＧ４抗体水平逐渐下降，４个疗程后的特异ＩｇＧ４检出率降为３８．４６％（１０／２６），ＧＭＲＴ为１∶２４６。ＩｇＧ４测定具有高特异性和敏感性。 展开更多
关键词 脑囊虫病 IGG4 mcab 血清诊断
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抗人VEGF受体Ⅱ胞外Ⅲ区单克隆抗体的制备 被引量：14
8
作者 李容 熊冬生 +4 位作者 邵晓枫 李长辉 许元富 刘嘉 杨纯正 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第3期193-197,共5页
目的　制备人血管内皮细胞生长因子受体Ⅱ (Kinaseinsertdomaintontainingreceptor,KDR)胞外Ⅲ区的单克隆抗体 (McAb) ,探讨其抑制VEGF诱导的体外活性。方法　在大肠杆菌中表达重组KDR胞外Ⅲ区融合蛋白。融合蛋白经抗E tag柱分离纯化后... 目的　制备人血管内皮细胞生长因子受体Ⅱ (Kinaseinsertdomaintontainingreceptor,KDR)胞外Ⅲ区的单克隆抗体 (McAb) ,探讨其抑制VEGF诱导的体外活性。方法　在大肠杆菌中表达重组KDR胞外Ⅲ区融合蛋白。融合蛋白经抗E tag柱分离纯化后免疫Balb/c小鼠 ,采用传统杂交瘤技术制备抗KDR胞外Ⅲ区McAb ,采用ELISA和Western免疫印迹鉴定其亚类和抗原结合特异性 ,并测定单克隆抗体对VEGF1 65刺激脐静脉内皮细胞株ECV30 4增殖的中和活性。结果　成功筛选出一株能稳定分泌抗KDR胞外Ⅲ区单克隆抗体的杂交瘤细胞株 (1D3) ,其分泌抗体亚类为IgG1。该McAb可明显阻断VEGF1 65对脐静脉内皮细胞株ECV30 4的刺激增生作用。结论　抗人血管内皮细胞生长因子受体KDR胞外Ⅲ区McAb可通过封闭KDR而抑制VEGF活性 ,McAb 展开更多
关键词 单克隆抗体 制备 血管内皮细胞生长因子受体 杂交瘤
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滴金免疫测定法用于检测囊虫病患者循环抗原的研究 被引量：14
9
作者 刘玉冰 张洪花 +4 位作者 徐洪秀 贾凤菊 江洪涛 韩广东 葛凌云 《中国人兽共患病杂志》 CSCD 北大核心 2002年第2期84-86,共3页
目的　建立一种敏感、快速、简便的囊虫病诊断方法。方法　应用两株抗猪囊尾蚴囊液抗原的单克隆抗体(McAb) ,一株滴于硝酸纤维素膜上 ,另一株与胶体金结合为探针 ,建立了检测囊虫病患者血清中循环抗原 (CA)的滴金免疫测定法 ,抗原、抗... 目的　建立一种敏感、快速、简便的囊虫病诊断方法。方法　应用两株抗猪囊尾蚴囊液抗原的单克隆抗体(McAb) ,一株滴于硝酸纤维素膜上 ,另一株与胶体金结合为探针 ,建立了检测囊虫病患者血清中循环抗原 (CA)的滴金免疫测定法 ,抗原、抗体通过渗滤在膜上进行反应 ,10min内即可用肉眼观察结果。对不同稀释度的猪囊尾蚴囊液抗原进行检测 ,确定本法的最低抗原检出量 (0 .4 5ng/ml)。将本法与ELISA作了比较。 结果　对 78例囊虫病患者血清进行检测 ,循环抗原阳性率为 87.18%。其中活动型脑囊虫病患者 5 2例 ,循环抗原阳性率为 98.0 8% ;非活动型脑囊虫病患者 2 0例 ,循环抗原阳性率为 6 5 .0 0 % ;单纯皮肌型囊虫病患者 6例 ,循环抗原阳性率为 6 6 .6 7%。 4 0份健康人血清仅有 1例 (2 .5 0 % )出现假阳性 ,与10例华支睾吸虫病患者血清、15例血吸虫病患者血清及 2 3例非囊虫病的脑部疾病患者血清均无交叉反应。该方法检出最低猪囊尾蚴囊液抗原量为 0 .4 5ng/ml。本法与ELISA的符合率为 98.19%。结论　DIGFA简便、快速 ,结果客观 ,对囊虫病特别是活动型脑囊虫病敏感性高 ,特异性强 ,值得进一步推广应用。 展开更多
关键词 囊虫病 滴金免疫测定法 单克隆抗体 循环抗原 诊断
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McAb共激活T细胞介导肝癌细胞前后的膜分子与TCRVβ基因的表达 被引量：12
10
作者 黄树林 肖兰凤 +1 位作者 罗利琼 陈红清 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 1998年第5期334-337,共4页
Ｔ淋巴细胞活化是一个涉及多种膜表面分子和受体以及一系列相关多肽的复杂过程，为了使Ｔ细胞发挥更好的识别和杀伤癌细胞的功能，采用抗ＣＤ３、ＣＤ２８、ＣＤ８０（Ｂ７１）、ＣＤ２、ＣＤ５８ＭｃＡｂ分别刺激健康人ＰＢＬｓ后作... Ｔ淋巴细胞活化是一个涉及多种膜表面分子和受体以及一系列相关多肽的复杂过程，为了使Ｔ细胞发挥更好的识别和杀伤癌细胞的功能，采用抗ＣＤ３、ＣＤ２８、ＣＤ８０（Ｂ７１）、ＣＤ２、ＣＤ５８ＭｃＡｂ分别刺激健康人ＰＢＬｓ后作用肝癌细胞，对作用前后ＰＢＬｓ用ＦＡＣＳ进行表型分析，结果发现：作用后ＣＤ３和ＣＤ８分子表达比作用前明显增高，而ＣＤ４分子无显著变化，同时基因家族采用ＲＴＰＣＲＳｏｕｔｈｅｒｎ印迹分析ＴＣＲＶβ基因１～２０亚家族表达水平与特征，健康人ＰＢＬｓ分别加入ＩＬ２、ＰＨＡ、抗ＣＤ３和ＣＤ３＋ＣＤ２８、ＣＤ２８＋ＣＤ８０、ＣＤ２＋ＣＤ５８作用肝癌细胞（ＢＥＬ７４０２）前表达水平平均约为５％，作用ＢＥＬ７４０２后表达水平约为１３％～２５％，其特征为Ｖβ７增高，这提示在癌抗原的参与下ＭｃＡｂ共刺激的Ｔ细胞活化，ＴＣＲ接受ＡＰＣ相应抗原的刺激，具有该ＴＣＲ的淋巴细胞迅速增殖而成为针对抗原的Ｔ细胞克隆，发挥其识别和杀伤癌细胞的作用，这将为肿瘤生物治疗的研究提供分子免疫学依据。 展开更多
关键词 肝肿瘤 肝癌细胞 T细胞介导 膜分子 mcab
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马立克氏病病毒MEQ蛋白单克隆抗体的制备及应用研究 被引量：9
11
作者 韦平 崔治中 +2 位作者 龙进学 金文杰 刘岳龙 《广西大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 2002年第1期5-9,共5页
基因表达与病毒感染细胞及致瘤能力之间关系的阐明 ,将有助于我们对马立克氏病病毒 (MDV) meq基因功能的了解 .该研究利用通过杆状病毒载体在昆虫细胞系 SF9上高度表达的 MEQ蛋白免疫 BALB/ c小鼠 ,然后收获其免疫脾细胞与肿瘤细胞系 SP... 基因表达与病毒感染细胞及致瘤能力之间关系的阐明 ,将有助于我们对马立克氏病病毒 (MDV) meq基因功能的了解 .该研究利用通过杆状病毒载体在昆虫细胞系 SF9上高度表达的 MEQ蛋白免疫 BALB/ c小鼠 ,然后收获其免疫脾细胞与肿瘤细胞系 SP2 / 0通过 PEG于体外融合 .获得的杂交瘤细胞被克隆并通过与MDV感染的鸡胚成纤维细胞 (CEF)做免疫荧光试验 (FA) ,进行其分泌抗 MEQ单克隆抗体 (Mc Ab)能力的筛选 .获得 4株稳定产生抗 MEQ蛋白 Mc Ab的杂交瘤细胞 ,其中 3 G1 2 E6通过 FA和免疫酶组化技术能够检测到 MDV致瘤株感染的 CEF及自然 MD肿瘤细胞中表达的 meq基因产物 .研究的结果首次发现 ,MDV致瘤株 GA、RB1 B感染的 CEF及自然 MD肿瘤细胞中均有 meq基因的表达 ,但在弱毒疫苗株 CVI988感染的 CEF和免疫鸡组织细胞中则未检测到 MEQ.作者认为这是由于 meq基因在致瘤株中表达水平高 ,而在非致瘤株中表达水平低所致 ,这可能是决定 MDV毒力 (virulence)或致瘤性(oncogenicity)的关键因素之一 . 展开更多
关键词 马立克氏病病毒 MEQ 蛋白 单克隆抗体 制备 应用研究 功能分析 免疫酶组化技术 鸡疾病 基因表达
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抗猪口蹄疫病毒单克隆抗体的抗原识别位点分析 被引量：9
12
作者 何永强 盛祖恬 +1 位作者 杜青云 倪征 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第5期433-434,共2页
用 EL ISA叠加试验 ,对 5株具有 EL ISA反应特性的抗猪口蹄疫病毒 (FMDV)单克隆抗体 (Mc Ab- A6、F9、G17、G5 2、S2 5 )的抗原识别位点进行检测。抗体反应增值结果表明 ,5株单抗分别针对 4个不同抗原位点 ,Mc Ab- G17、G5 2、S2 5识别... 用 EL ISA叠加试验 ,对 5株具有 EL ISA反应特性的抗猪口蹄疫病毒 (FMDV)单克隆抗体 (Mc Ab- A6、F9、G17、G5 2、S2 5 )的抗原识别位点进行检测。抗体反应增值结果表明 ,5株单抗分别针对 4个不同抗原位点 ,Mc Ab- G17、G5 2、S2 5识别的位点各不相同 ,其中 Mc Ab- G7、G5 2识别的位点有部分重叠 ,Mc Ab- A6、F9识别同一位点 ,位于 G17、G5 2位点的重叠区内。 展开更多
关键词 猪口蹄疫病毒 单克隆抗体 抗原位点 ELISA叠加试验
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抗猪流行性腹泻病毒N蛋白单克隆抗体制备及部分特性鉴定 被引量：13
13
作者 裴敦国 葛俊伟 +2 位作者 马广鹏 姜艳萍 李一经 《东北农业大学学报》 CAS CSCD 2008年第7期84-89,共6页
以原核表达系统pGEX-6p-1-N/BL21经IPTG诱导表达的重组PEDV N-GST融合蛋白作为免疫抗原,免疫BALB/c小鼠,运用淋巴细胞杂交瘤技术,制备单克隆抗体,用原核表达系统T12-pPROHTa/BL21经IPTG诱导表达的PEDV N蛋白做筛选抗原,通过间接ELISA进... 以原核表达系统pGEX-6p-1-N/BL21经IPTG诱导表达的重组PEDV N-GST融合蛋白作为免疫抗原,免疫BALB/c小鼠,运用淋巴细胞杂交瘤技术,制备单克隆抗体,用原核表达系统T12-pPROHTa/BL21经IPTG诱导表达的PEDV N蛋白做筛选抗原,通过间接ELISA进行筛选,获得两株抗PEDV N蛋白杂交瘤细胞,命名为2E3、4C6。亚类鉴定为IgG1和IgG2a型,均为к链抗体,染色体数平均为(91±7)对。用制备的单抗与pGEX-6p-1-N/BL21、T12-pPROHTa/BL21诱导表达后的菌体裂解物做Western Blot试验,在不同载体表达的N蛋白处出现明显的特异性条带;通过间接ELISA做病原检测,这两株单抗不与TGEV、PRV和PrV发生交叉反应,而与PEDV显示良好的特异性反应。 展开更多
关键词 猪流行性腹泻病毒 单克隆抗体 WESTERNBLOT 间接ELISA
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血管内皮细胞生长因子受体KDR胞外配基结合区单抗对内皮细胞增殖及血管形成的抑制 被引量：10
14
作者 宋述梅 吴健 寿成超 《中华微生物学和免疫学杂志》 CSCD 北大核心 2000年第4期327-330,共4页
目的　研制能封闭血管内皮生长因子 (VEGF)受体KDR的单克隆抗体 (McAb) ,探讨其抑制VEGF诱导的体内外活性。方法　以原核表达的KDRⅠ～Ⅳ区融合蛋白免疫BALB/c小鼠 ,用杂交瘤技术制备抗KDRⅠ～Ⅳ的McAb ,并用免疫双扩、ELISA和Western... 目的　研制能封闭血管内皮生长因子 (VEGF)受体KDR的单克隆抗体 (McAb) ,探讨其抑制VEGF诱导的体内外活性。方法　以原核表达的KDRⅠ～Ⅳ区融合蛋白免疫BALB/c小鼠 ,用杂交瘤技术制备抗KDRⅠ～Ⅳ的McAb ,并用免疫双扩、ELISA和Western免疫印迹鉴定其亚类和抗原结合特异性 ,用VEGF刺激内皮细胞增殖及鸡胚血管形成实验检测该抗体的中和活性。结果　通过筛选和鉴定获得了 2株KDRⅠ～Ⅳ区McAbs(3G9、1E4) ,其分泌抗体亚类分别为IgG1和IgM。 2株McAb均能明显抑制VEGF诱导的内皮细胞 (EC)增殖 ,经纯化的McAb 3G9能明显抑制经VEGF刺激的鸡胚血管形成。结论　KDRⅠ～Ⅳ区McAb可能通过封闭内源性KDR而抑制VEGF活性 ,McAb 3G9具有潜在治疗肿瘤的应用前景。 展开更多
关键词 VEGF VEGFR 单克隆抗体 内皮细胞增殖 肿瘤 治疗
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抗犬瘟热病毒单克隆抗体的制备及初步应用 被引量：11
15
作者 陈万荣 付少才 刘树玲 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第5期455-456,共2页
采用 B淋巴细胞杂交瘤技术 ,通过免疫荧光法筛选 ,获得 4株能稳定分泌抗犬瘟热病毒的单克隆抗体杂交瘤细胞株。 4株单克隆抗体均属 Ig G1亚类 ,其腹水效价在 1∶ 10 - 4 ～ 1∶ 10 - 5,细胞培养上清液效价为 1∶ 10 - 2 ～ 1∶ 10 - 3 ... 采用 B淋巴细胞杂交瘤技术 ,通过免疫荧光法筛选 ,获得 4株能稳定分泌抗犬瘟热病毒的单克隆抗体杂交瘤细胞株。 4株单克隆抗体均属 Ig G1亚类 ,其腹水效价在 1∶ 10 - 4 ～ 1∶ 10 - 5,细胞培养上清液效价为 1∶ 10 - 2 ～ 1∶ 10 - 3 。用微量细胞培养中和试验筛选到 2株具有中和活性的特异性单克隆抗体 ,其中和效价为 1∶ 32和 1∶ 12 8,并初步应用于治疗中早期犬瘟热病毒感染犬 ,取得了较好的结果。 展开更多
关键词 抗犬瘟热 病毒 单克隆 抗体 应用 免疫荧光试验 治疗
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猪繁殖与呼吸综合征病毒S1株单克隆抗体的制备及生物学特性研究 被引量：4
16
作者 祁贤 张婉华 +1 位作者 叶向阳 朱永军 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第3期189-191,共3页
通过差速离心和蔗糖密度梯度离心法对猪繁殖与呼吸综合征病毒沪 1(PRRSV_S1)株进行抗原纯化。免疫BALB/c小鼠 ,取脾细胞与SP2 / 0融合 ,用间接ELISA和有限稀释法 ,获得 2株稳定分泌抗PRRSV单抗的杂交瘤细胞株 ,分别命名为AG1、BD3。ELIS... 通过差速离心和蔗糖密度梯度离心法对猪繁殖与呼吸综合征病毒沪 1(PRRSV_S1)株进行抗原纯化。免疫BALB/c小鼠 ,取脾细胞与SP2 / 0融合 ,用间接ELISA和有限稀释法 ,获得 2株稳定分泌抗PRRSV单抗的杂交瘤细胞株 ,分别命名为AG1、BD3。ELISA交叉试验和阻断试验表明 ,2株单抗具有高度特异性。AG1可与PRRSV_S1,欧洲株LV ,美洲株VR_2 332反应 ,而BD3与美洲株VR_2 332反应较弱 ,2株单抗对猪细小病毒 (PPV)、猪伪狂犬病病毒 (PRV)、猪乙型脑炎病毒 (JEV)均不反应。阳性杂交瘤细胞的上清液效价是 1∶2 5 6～ 1∶5 12 ,腹水效价分别在 1∶10 3 ～ 1∶10 5之间。AG1和BD3各有 10 0条染色体 ,琼脂双扩散试验结果表明AG1属于IgG2b ,BD2属于IgM。 展开更多
关键词 猪繁殖 呼吸综合征病毒S1株 单克隆抗体 生物学特性
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猪伪狂犬病病毒单抗双夹心ELISA的构建 被引量：10
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作者 祁小乐 崔保安 +2 位作者 牛春玲 王莉娟 刘占通 《河南农业大学学报》 CAS CSCD 2004年第4期387-393,共7页
建立了检测猪伪狂犬病病毒(Pseudorabiesvirus,PRV)的单克隆抗体双夹心酶联免疫吸附试验(Enzyme linkedimmunosor bentassay,ELISA)方法,为该病的快速诊断奠定了基础.作者对其组装条件进行了筛选,认为兔抗PRVIgG最佳包被质量浓度为4.59m... 建立了检测猪伪狂犬病病毒(Pseudorabiesvirus,PRV)的单克隆抗体双夹心酶联免疫吸附试验(Enzyme linkedimmunosor bentassay,ELISA)方法,为该病的快速诊断奠定了基础.作者对其组装条件进行了筛选,认为兔抗PRVIgG最佳包被质量浓度为4.59mg·L-1;抗PRV的单克隆抗体(Monoclonalantibodies,McAb)的最佳质量浓度为6.45mg·L-1;最佳封闭剂为10g·L-1BSA(牛血清白蛋白),封闭时间为60min,制定了科学的结果判定标准,最低病毒检出量为200μg·L-1.与病毒分离、动物试验和中和试验相比较,该方法特异、灵敏、可靠、方便. 展开更多
关键词 猪 伪狂犬病病毒 双夹心ELISA 单克隆抗体 诊断 组装条件
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抗重组日本血吸虫P38抗原单克隆抗体的制备与鉴定 被引量：6
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作者 吴锦雅 周晓红 陈晓光 《中国寄生虫学与寄生虫病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第2期110-113,共4页
目的在大肠埃希菌中可溶性表达日本血吸虫P38(SjP38)抗原分子,并以其纯化产物为抗原,制备抗SjP38单克隆抗体(McAb)。方法将pET32(a)-P38重组质粒转化大肠埃希菌BL21(DE3),在1mmol/L异丙基-β-D-硫代半乳糖苷诱导下表达,超声破菌后获得... 目的在大肠埃希菌中可溶性表达日本血吸虫P38(SjP38)抗原分子,并以其纯化产物为抗原,制备抗SjP38单克隆抗体(McAb)。方法将pET32(a)-P38重组质粒转化大肠埃希菌BL21(DE3),在1mmol/L异丙基-β-D-硫代半乳糖苷诱导下表达,超声破菌后获得可溶性表达产物,通过镍柱一步法纯化,以纯化的重组SjP38为抗原,免疫BALB/c小鼠,采用杂交瘤技术制备McAb,用ELISA和有限稀释法筛选出高分泌滴度McAb杂交瘤细胞株,测定其免疫球蛋白亚类及其效价,蛋白质印迹法(Westernblotting)分析其特异性。结果筛选出能稳定分泌抗重组SjP38单克隆抗体的8株杂交瘤细胞株,均为IgG1;Westernblotting分析显示8株单抗能与日本血吸虫虫卵抗原中的天然P38发生特异性结合。结论制备的抗P38杂交瘤细胞株能分泌高滴度、高特异性的McAb。 展开更多
关键词 单克隆抗体 重组日本血吸虫 制备 38抗原 BL21(DE3) 杂交瘤细胞株 BALB/c小鼠 blotting 免疫球蛋白亚类 Western 大肠埃希菌 鉴定 mcab 蛋白质印迹法 可溶性表达 mol/L 有限稀释法 ELISA 杂交瘤技术 特异性结合 抗原分子
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交叉反应性抗类脂A单克隆抗体的制备及初步鉴定 被引量：8
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作者 鲍永利 富宁 +2 位作者 于春雷 王莉 杨贵贞 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 1998年第1期22-24,共3页
应用杂交瘤技术得到２株可稳定分泌高效价抗鼠伤寒杆菌类脂Ａ单克隆抗体的杂交瘤细胞株，二株均为ＩｇＧ１，且与大肠杆菌类脂Ａ以及绿脓杆菌、布氏杆菌均有较好的交叉反应，并对大肠杆菌的致死性攻击具有一定的保护效应。
关键词 类脂A 单克隆抗体 草兰氏阴性菌 制备 鉴定
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单克隆抗体对肾综合征出血热病毒感染乳鼠保护作用的研究 被引量：8
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作者 卫立辛 汪美先 +1 位作者 徐志凯 汪力亚 《单克隆抗体通讯》 CSCD 1989年第2期5-10,共6页
HFRS病毒陈株100LD_(50)腹腔感染新生乳鼠后24小时,腹腔分别接种24株抗HFRS病毒McAb,观察McAb对感染新生乳鼠的保护作用。结果发现,有5株McAb保护率为100％,1株McAb保护率为17％,另有7株McAb可使感染乳鼠的发病死亡时间推迟。取有明显... HFRS病毒陈株100LD_(50)腹腔感染新生乳鼠后24小时,腹腔分别接种24株抗HFRS病毒McAb,观察McAb对感染新生乳鼠的保护作用。结果发现,有5株McAb保护率为100％,1株McAb保护率为17％,另有7株McAb可使感染乳鼠的发病死亡时间推迟。取有明显保护作用的5株McAb分别接种感染后不同时间的乳鼠,结果在48小时内接种保护率均达100％;但随接种时间推后,保护率逐渐下降,感染后10天接种几乎无保护作用。此5株McAb保护作用均优于多克隆的免疫血清。应用不同稀释的McAb 3D8进行保护试验,发现保护效果与接种剂量密切相关。采用固定抗体,稀释病毒方法测得McAb 3D8对HFRS病毒陈株感染乳鼠的保护指数为5.8。 展开更多
关键词 肾综合征出血热病毒 保护作用 感染乳鼠 单克隆抗体 mcab 抗HFRS病毒 新生乳鼠 保护率 腹腔感染 死亡时间 不同时间 接种时间 免疫血清 保护效果 病毒方法 保护指数 感染后 3D8 多克隆 稀释
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