海洋弧菌碱性蛋白酶的分离纯化及部分性质研究 被引量：20

1

作者 刘成圣 刘晨光 +2 位作者 刘万顺 贺君 陈西广 《青岛海洋大学学报（自然科学版）》 CSCD 北大核心 2002年第5期734-740,共7页

采用硫酸铵沉淀、Sephadex- 75 ,Sephadex- 10 0凝胶过滤层析等方法纯化海洋弧菌 (Vibriop acini) X4 B- 7菌株产生的碱性蛋白酶 ,得到电泳纯酶制品 ,并对纯化酶的性质进行了研究。结果显示 :纯酶的分子量为 2 7KD,等电点 p I=8.7,最适... 采用硫酸铵沉淀、Sephadex- 75 ,Sephadex- 10 0凝胶过滤层析等方法纯化海洋弧菌 (Vibriop acini) X4 B- 7菌株产生的碱性蛋白酶 ,得到电泳纯酶制品 ,并对纯化酶的性质进行了研究。结果显示 :纯酶的分子量为 2 7KD,等电点 p I=8.7,最适反应 p H9.0～ 10 .5 ,最适反应温度 5 0～ 6 0℃。ED-TA对酶活力没有影响 ,高酶浓度可以降低 SDS对酶的抑制作用 ,该酶可用于解聚组蛋白。 DNA琼脂糖凝胶电泳证明 :酶对 DNA酶有降解作用 ,而对 DNA没有降解作用 。 展开更多

关键词 海洋弧菌 碱性蛋白酶 分离纯化 硫酸胺 抑制作用 降解作用

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从海洋中分离的弧菌QY102褐藻胶裂解酶的纯化和性质研究 被引量：12

2

作者 李京宝 于文功 +2 位作者 韩峰 韩文君 宋凯 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第6期753-757,共5页

从马尾藻 (Sargassum)表面分离到一株产生高效胞外褐藻胶裂解酶的海洋弧菌 (Vibriosp .)QY1 0 2。以褐藻胶为唯一碳源发酵培养后 ,发酵液上清通过 0 2 2 μm滤膜过滤、DEAE Sepharose离子交换和Superdex75凝胶过滤得到电泳纯的褐藻胶... 从马尾藻 (Sargassum)表面分离到一株产生高效胞外褐藻胶裂解酶的海洋弧菌 (Vibriosp .)QY1 0 2。以褐藻胶为唯一碳源发酵培养后 ,发酵液上清通过 0 2 2 μm滤膜过滤、DEAE Sepharose离子交换和Superdex75凝胶过滤得到电泳纯的褐藻胶裂解酶。酶的性质研究表明 :其分子量约为 2 8 5kD(SDS PAGE) ,反应最适温度为 40℃ ,最适pH为 7 1 ,Ca2 +、Mg2 +对酶活有促进作用 ,而Ni2 +、Al3+、Zn2 +、Ba2 +对酶活有抑制作用。该酶的活性明显高于已报道的褐藻胶裂解酶 ,pH稳定范围广 ( 5～ 1 0 ) ,并且对聚甘露糖醛酸的活性高于对聚古罗糖醛酸的活性。 展开更多

关键词 海洋 弧菌 褐藻胶裂解酶 纯化 性质

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九香止泻肠溶片对副溶血弧菌活性及小鼠小肠功能亢进模型的影响 被引量：9

3

作者 彭芝配 滕久祥 +1 位作者 伍参荣 尹进 《湖南中医药大学学报》 CAS 2007年第4期23-25,共3页

目的探讨九香止泻肠溶片对副溶血弧菌活性以及对新斯的明所致的小鼠小肠功能亢进的影响。方法采用琼脂扩散法测定抑菌圈直径,液体培基测定法与平皿倾注法测定最低抑菌浓度(MIC)和最低杀菌浓度(MBC);给小鼠皮下注射甲硫酸新斯的明0.15 mg... 目的探讨九香止泻肠溶片对副溶血弧菌活性以及对新斯的明所致的小鼠小肠功能亢进的影响。方法采用琼脂扩散法测定抑菌圈直径,液体培基测定法与平皿倾注法测定最低抑菌浓度(MIC)和最低杀菌浓度(MBC);给小鼠皮下注射甲硫酸新斯的明0.15 mg/kg造成小肠功能亢进造模,灌胃10%炭末生理盐水,测定小肠推进率。结果九香止泻肠溶片在50 mg/mL浓度对副溶血弧菌表现出较强的抗菌作用,其作用优于肠康片,MIC为50 mg/mL,MBC为500 mg/mL;与模型组比较,九香止泻肠溶片各剂量组小肠推进率显著降低,差异有统计学意义(P<0.05);其中高剂量组明显优于肠康组差异有统计学意义(P<0.05)。结论九香止泻肠溶片具有显著的抗副溶血弧菌活性、抑制小肠功能亢进作用。 展开更多

关键词 九香止泻肠溶片 海洋弧菌 抗菌 新斯的明 小肠推进率 小鼠 秦皮 香椿皮

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海洋弧菌QJH-12发酵产琼胶酶条件的优化 被引量：12

4

作者 王静雪 江晓路 +1 位作者 牟海津 管华诗 《海洋科学》 CAS CSCD 北大核心 2007年第7期8-14,共7页

从中国南海海域分离到了一株具有较高琼胶降解活性的弧菌Vibrio sp.QJH-12,该菌株为革兰氏阴性菌,呈弯曲杆状,极生单根鞭毛,氧化酶阳性,过氧化氢酶阳性,O/129试验阳性。在琼胶平板上生长可软化琼胶,并在菌落周围产生凹陷。通过单因子实... 从中国南海海域分离到了一株具有较高琼胶降解活性的弧菌Vibrio sp.QJH-12,该菌株为革兰氏阴性菌,呈弯曲杆状,极生单根鞭毛,氧化酶阳性,过氧化氢酶阳性,O/129试验阳性。在琼胶平板上生长可软化琼胶,并在菌落周围产生凹陷。通过单因子实验和正交实验确定了培养基的最佳组成:琼胶2.0‰,柠檬酸三铵1.0‰,K2HPO41.0‰,NaCl1.0%。确定该菌株的最适发酵产酶条件:装液量为250mL的三角瓶中装入125mL的液体发酵培养基,培养基起始pH6.5,摇瓶转速150r/min,30℃发酵培养26h,发酵液的酶活力达到332U/mL。结果表明,该菌株从产酶活力和发酵特点等各方面具备工业化开发的潜力。 展开更多

关键词 海洋弧菌 琼胶酶 培养基 发酵条件

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鲍鱼来源褐藻胶裂解酶菌株的筛选及发酵条件优化 被引量：8

5

作者 李云涛 汪立平 +1 位作者 张孟 张宇 《大连海洋大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第5期574-583,共10页

为筛选得到高效产褐藻胶裂解酶(Alginate lyase)微生物菌株,实现其商业化应用,采用平板透明圈法从皱纹盘鲍Haliotis discus hannai肠道中筛选得到1株高效产胞外褐藻胶裂解酶的菌株SS-1,在扫描电子显微镜下观察菌株形态和平板菌落特征,... 为筛选得到高效产褐藻胶裂解酶(Alginate lyase)微生物菌株,实现其商业化应用,采用平板透明圈法从皱纹盘鲍Haliotis discus hannai肠道中筛选得到1株高效产胞外褐藻胶裂解酶的菌株SS-1,在扫描电子显微镜下观察菌株形态和平板菌落特征,并根据其16S rRNA基因序列分析结果,鉴定该菌株为弧菌Vibrio sp.SS-1。对SS-1菌株的发酵条件进行优化,结果显示,该菌株最适发酵温度为30℃,初始p H值为7.2,培养28 h后酶活力可达38.6 U/m L;通过响应面法优化最佳发酵培养基配方,结果为麦芽糖11.86g/L、酵母粉16.72 g/L、K2HPO41.36 g/L、Mg SO4·7H2O 1.5 g/L、Fe SO4·7H2O 0.1 g/L、Na Cl 6.75 g/L;在最佳培养条件下,酶活力可达191.8 U/m L,较优化前提高了4.97倍。研究表明:该菌株具有生长快速、酶活较高的特点,可为褐藻寡糖的制备提供技术积累。 展开更多

关键词 褐藻胶裂解酶 褐藻寡糖 海洋弧菌 筛选与鉴定 响应面法

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病原性海洋弧菌致病机理及其快速检测方法研究进展 被引量：8

6

作者 夏凡 杨丽君 +2 位作者 王静 李兆杰 刘玉敏 《食品工业科技》 CAS CSCD 北大核心 2011年第1期366-370,376,共6页

病原性海洋弧菌是引起我国特别是沿海地区细菌性食物中毒危害的首要食源性致病菌。本文重点综述了病原性海洋弧菌中能引发人类重要疾病的副溶血弧菌、霍乱弧菌和创伤弧菌的致病机理以及目前国内外关于其的各种检测方法、原理、应用及研... 病原性海洋弧菌是引起我国特别是沿海地区细菌性食物中毒危害的首要食源性致病菌。本文重点综述了病原性海洋弧菌中能引发人类重要疾病的副溶血弧菌、霍乱弧菌和创伤弧菌的致病机理以及目前国内外关于其的各种检测方法、原理、应用及研究进展。 展开更多

关键词 病原性 海洋弧菌 快速检测 研究进展

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不同来源海洋弧菌微生物被膜对厚壳贻贝稚贝附着的影响 被引量：7

7

作者 黄道芬 梁箫 +3 位作者 彭莉华 郭行磐 张德民 杨金龙 《水产学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第7期1140-1147,共8页

为探讨广泛存在于近海环境中海洋弧菌和贝类附着的相互作用关系,实验从自然微生物被膜和厚壳贻贝成体肠道内分离了海洋弧菌,测定其种属及亲缘性,调查了这些不同来源弧菌形成的微生物被膜与厚壳贻贝稚贝附着的调控作用。结果显示,测试弧... 为探讨广泛存在于近海环境中海洋弧菌和贝类附着的相互作用关系,实验从自然微生物被膜和厚壳贻贝成体肠道内分离了海洋弧菌,测定其种属及亲缘性,调查了这些不同来源弧菌形成的微生物被膜与厚壳贻贝稚贝附着的调控作用。结果显示,测试弧菌形成的微生物被膜密度随着初始细菌密度的增加呈现不同程度的增加。源于自然微生物被膜和贻贝肠道内的10株弧菌均能显著促进厚壳贻贝稚贝的附着,不同菌株形成微生物被膜的诱导活性存在显著差异,附着率变化范围为17%~67%,其中稚贝在Vibrio sp.17微生物被膜上的附着率为67%±2%。微生物被膜对稚贝附着诱导活性与被膜密度呈显著相关性,其中弧菌V.crassostreae ECSMB14106的相关性系数最高,为0.8992。此外,微生物被膜的诱导活性与弧菌的来源无关。本实验初步探明了海洋弧菌对厚壳贻贝稚贝附着的影响,有助于进一步理解微生物被膜调控厚壳贻贝的附着分子机理。 展开更多

关键词 厚壳贻贝 稚贝 附着 海洋弧菌 微生物被膜

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创伤弧菌毒力因子研究进展 被引量：1

8

作者 张磊 刘剑飞 +1 位作者 周丽君 马慧 《解放军医学院学报》 CAS 北大核心 2023年第2期168-172,共5页

创伤弧菌是一种革兰阴性、嗜盐性海洋弧菌,是弧菌科弧菌属的一类重要机会致病菌,多于夏季经消化道、创口等途径造成宿主感染。免疫受损或低下人群感染创伤弧菌后,病情进展迅速,易诱发感染性休克、多器官功能衰竭等进而导致死亡,病死率高... 创伤弧菌是一种革兰阴性、嗜盐性海洋弧菌,是弧菌科弧菌属的一类重要机会致病菌,多于夏季经消化道、创口等途径造成宿主感染。免疫受损或低下人群感染创伤弧菌后,病情进展迅速,易诱发感染性休克、多器官功能衰竭等进而导致死亡,病死率高达50%。经由毒力因子协同作用促进多途径致病引发宿主严重感染是创伤弧菌独特的致病机制,其机制复杂,至今未完全阐明。本文就创伤弧菌各毒力因子作用及其机制进行系统综述,以期为创伤弧菌感染及其防治策略提供新思路。 展开更多

关键词 海洋弧菌 创伤弧菌 致病机制 毒力因子 感染

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广西北部湾海洋弧菌多样性研究进展

9

作者 覃欣怡 赵华显 +5 位作者 杨恕 黄炯清 廖能健 李晓丽 姜宫凌侠 李楠 《现代食品科技》 CAS 北大核心 2024年第1期325-331,共7页

海洋弧菌在生物地球化学循环中发挥重要作用,但部分致病性海洋弧菌可危害人类健康和造成水产养殖业重大经济损失。近年来,广西北部湾海洋弧菌多样性研究取得了众多科研成果。然而,关于广西北部湾海洋弧菌多样性系统总结的报道仍较为缺... 海洋弧菌在生物地球化学循环中发挥重要作用,但部分致病性海洋弧菌可危害人类健康和造成水产养殖业重大经济损失。近年来,广西北部湾海洋弧菌多样性研究取得了众多科研成果。然而,关于广西北部湾海洋弧菌多样性系统总结的报道仍较为缺乏。为了更好地了解广西北部湾海洋弧菌物种组成、群落分布特点及其驱动机制,该文从广西北部湾海洋弧菌群落结构特征、环境驱动因子、群落构建机制等方面对广西北部湾海洋弧菌多样性研究进行综述。结果表明,广西北部湾海洋弧菌多样性在不同海域和季节存在显著差异,其主要驱动因子为总溶解氮、溶解性无机氮、总溶解磷等营养盐。广西北部湾海洋弧菌群落构建过程由随机过程主导。此外,该研究对广西北部湾海洋弧菌多样性研究前景进行了展望,以期为致病性海洋弧菌防控提供新思路,并为海洋弧菌生态功能多样性研究及生物资源高值化利用提供理论参考。 展开更多

关键词 海洋弧菌 16SRRNA基因 多样性 构建机制 广西北部湾

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一株产胞外多糖海洋弧菌的分离鉴定及其多糖抗肿瘤活性初步研究 被引量：5

10

作者 龙寒 陈盛峰 +5 位作者 陈佳 杨迪 李晓燕 黄玉油 何秀苗 禤金彩 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第12期166-171,共6页

为初步探究广西北部湾海洋细菌所产胞外多糖(Extracellular polysaccharide,EPS)的生物学活性,通过LB-苯胺蓝培养基分离产EPS的海洋细菌,苯酚-硫酸法测定EPS产量,16S r DNA法鉴定多糖产量较高的菌株,通过凝胶渗透色谱测定多糖分子量,红... 为初步探究广西北部湾海洋细菌所产胞外多糖(Extracellular polysaccharide,EPS)的生物学活性,通过LB-苯胺蓝培养基分离产EPS的海洋细菌,苯酚-硫酸法测定EPS产量,16S r DNA法鉴定多糖产量较高的菌株,通过凝胶渗透色谱测定多糖分子量,红外光谱分析该多糖的结构;最后运用MTT(噻唑蓝)法测定该EPS对Vero细胞的毒性,以及对He La细胞的抑制作用。结果显示,从海水及红树林泥样中共分离获得167株产EPS的海洋细菌,其中一株BHc-09 EPS产量较高,达0.306 mg/m L,通过16S r DNA序列分析鉴定BHc-09为弧菌属,其EPS分子量约为184.5 k D,结构中含有糖醛酸;该胞外多糖对正常Vero细胞无毒性而对肿瘤细胞的生长具有明显的抑制作用。 展开更多

关键词 海洋弧菌 胞外多糖 分离鉴定 抗肿瘤

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产碱蛋白酶海洋弧菌的筛选 及其培养条件的研究 被引量：4

11

作者 刘万顺 刘成圣 +4 位作者 刘晨光 陈西广 邹松涛 郎刚华 贺君 《中国海洋大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 2000年第z1期-,共7页

运用酪蛋白平板法从海水中筛选分离出一株分泌高活性碱性蛋白酶的 海洋弧菌。对其产酶最适条件进行了优化试验。结果表明：在pH8，含2%NaCl,含蛋白胨、蔗 糖和酵母膏，接种量2%，23℃，培养35h条件下，产酶活性最高。发酵液中酶的活性可... 运用酪蛋白平板法从海水中筛选分离出一株分泌高活性碱性蛋白酶的 海洋弧菌。对其产酶最适条件进行了优化试验。结果表明：在pH8，含2%NaCl,含蛋白胨、蔗 糖和酵母膏，接种量2%，23℃，培养35h条件下，产酶活性最高。发酵液中酶的活性可达719 μ/mL。 展开更多

关键词 海洋弧菌 海洋碱性蛋白酶 培养条件

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重组LTB蛋白在水弧菌VSP60中的高效表达与纯化 被引量：4

12

作者 王静 李琳琳 +6 位作者 孔令洪 于军 郑瑾 韩俊宏 来宝长 司履生 王一理 《中华微生物学和免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第6期432-435,共4页

目的　优化重组大肠杆菌热不稳定肠毒素B亚单位 (rLTB)工程菌 (VSP6 0 )高效表达的条件。方法　以UVP凝胶照相系统扫描以及改良Lowry′s法检测rLTB表达量并分析各种因素对其影响。利用SephacrylS 10 0凝胶层析纯化rLTB蛋白。结果　工程... 目的　优化重组大肠杆菌热不稳定肠毒素B亚单位 (rLTB)工程菌 (VSP6 0 )高效表达的条件。方法　以UVP凝胶照相系统扫描以及改良Lowry′s法检测rLTB表达量并分析各种因素对其影响。利用SephacrylS 10 0凝胶层析纯化rLTB蛋白。结果　工程菌 30℃振荡培养至吸光度 (A6 0 0 )值达0 .2～ 0 .3时加IPTG(终浓度为 0 .5mmol L) ,诱导培养 18～ 2 2h为rLTB蛋白表达的最佳条件。SephacrylS 10 0凝胶柱一步层析后 ,rLTB蛋白纯度可达 98.1%。结论　本研究所用的培养和纯化工艺简单易行 ,可获得高产量、高纯度的rLTB蛋白。 展开更多

关键词 重组大肠杆菌热不稳定肠毒素B亚单位 高效表达 纯化 水弧菌

原文传递

基于16S rDNA和看家基因序列分析技术的鲍鱼养殖水体弧菌种类的鉴定 被引量：3

13

作者 龚婷 骆祝华 +1 位作者 于艳萍 JOST Gunter 《应用海洋学学报》 CAS CSCD 2014年第4期531-538,共8页

采用TCBS选择性培养基从厦门某鲍鱼养殖场的养殖水体中分离到19株细菌.经16S rDNA序列分析,所有菌株均属于弧菌属(Vibrio),且与最近似的弧菌模式种的同源性都在98.99%以上.由于弧菌种间16S rDNA序列相似度极高,无法仅靠16S rDNA序列比... 采用TCBS选择性培养基从厦门某鲍鱼养殖场的养殖水体中分离到19株细菌.经16S rDNA序列分析,所有菌株均属于弧菌属(Vibrio),且与最近似的弧菌模式种的同源性都在98.99%以上.由于弧菌种间16S rDNA序列相似度极高,无法仅靠16S rDNA序列比对来鉴定这些菌株到种的水平.16S rDNA序列的系统发育分析也显示,大多数菌株与弧菌模式种无法归为一簇,表明16S rDNA基因在弧菌种的分类鉴定上分辨率不高.进一步采用基于4种看家基因(rpo A、pyr H、gap A和top A)的多位点序列分析技术(MLSA)对分离到的弧菌菌株进行分类鉴定,结果显示19株海洋弧菌归于溶藻弧菌(Vibrio alginalyticus)与魔鬼弧菌(Vibrio diabolicus)2个种,表明这两种弧菌是该鲍鱼养殖场水体环境中的优势弧菌种,在鲍鱼养殖弧菌病害防治方面需要重点关注.此外,看家基因与16S rDNA基因的多态性分析表明,4种看家基因的多态位点比率均高于16S rDNA.4种看家基因串联后的多态位点比率高达41.1%,远高于16S r DNA基因的13.4%,表明看家基因相较于16S rDNA基因有着更高的分辨率,更适合于海洋弧菌的分类鉴定. 展开更多

关键词 海洋生物学 鲍鱼 海洋弧菌 16S RDNA 看家基因 多位点序列分析

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焦磷酸测序快速检测3种海洋性弧菌的方法学建立及创伤弧菌16S rRNA基因分型的研究 被引量：3

14

作者 张丽娜 郑妍 +2 位作者 胡成进 周月霞 陈英剑 《临床检验杂志》 CAS CSCD 2017年第7期481-485,共5页

目的建立一种海洋致病性弧菌的快速诊断方法,为海洋性弧菌感染的临床检测构建新的技术平台。方法分别针对创伤弧菌vvh A,副溶血弧菌和溶藻弧菌的toxR基因设计扩增引物和测序引物,并PCR扩增特异性DNA片段,制备单链模板,进行焦磷酸测序,... 目的建立一种海洋致病性弧菌的快速诊断方法,为海洋性弧菌感染的临床检测构建新的技术平台。方法分别针对创伤弧菌vvh A,副溶血弧菌和溶藻弧菌的toxR基因设计扩增引物和测序引物,并PCR扩增特异性DNA片段,制备单链模板,进行焦磷酸测序,得到的碱基序列经NCBI比对验证;对创伤弧菌16S rRNA基因进行分型。结果创伤弧菌的扩增引物和测序引物均表现出较好的特异性,4株创伤弧菌均扩增出167 bp大小的DNA片段,并且测序结果与NCBI比对达到100%匹配度,而其他菌株未见扩增条带,测序结果为阴性;11株副溶血弧菌和溶藻弧菌均分别扩增出105 bp和134 bp大小的DNA片段,并且经测序得到与预期相符的DNA碱基序列。4株创伤弧菌中1株属于16S rRNA-A型,其余3株均属于16S rRNA-B型。结论本研究建立的PCR-焦磷酸测序方法是一种短核苷酸序列实时测定的新方法,具有高通量、精确、简单易行的优点,适用于海洋性致病菌及陆地感染细菌的快速精准鉴定。 展开更多

关键词 海洋性弧菌 焦磷酸测序 快速诊断 聚合酶链式反应

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鲍肠道弧菌YBCH1(_8)褐藻胶裂解酶基因val1的表达及酶学性质研究 被引量：2

15

作者 陈琳 邵宗泽 +2 位作者 易恩 杨江科 周梅先 《生物技术》 CAS 2021年第2期121-128,207,共9页

[目的]对来自羊鲍肠道中弧菌(Vibrio sp. YBCH18)的褐藻胶裂解酶基因val1进行异源表达并研究其酶学性质。[方法]采用PCR技术获得褐藻胶裂解酶基因val1,分析基因序列,构建重组质粒pET-VAL1并在大肠杆菌中实现异源表达,经纯化后对其酶学... [目的]对来自羊鲍肠道中弧菌(Vibrio sp. YBCH18)的褐藻胶裂解酶基因val1进行异源表达并研究其酶学性质。[方法]采用PCR技术获得褐藻胶裂解酶基因val1,分析基因序列,构建重组质粒pET-VAL1并在大肠杆菌中实现异源表达,经纯化后对其酶学性质进行研究。[结果]重组酶rVAL1最适温度为30℃;最适pH为8.5,在pH 4.5~10.0范围内保温30 min仍能保持50%以上的相对酶活力;对海藻酸钠具有良好的底物特异性;Mn^(2+)和Co^(2+)对rVAL1酶活具有明显促进作用,而Fe^(2+)、Fe^(3+)、SDS和EDTA对rVAL1活性抑制作用明显;rVAL1动力学参数Km值为2.23 mg/mL,Kcat为3.28 s^(-1),Vmax为21.70 mg/(mL·min);薄层层析分析显示,VAL1降解终产物主要是单糖组分,推测其属于外切型褐藻胶裂解酶。[结论]成功对褐藻胶裂解酶基因val1进行外源表达,研究发现VAL1是一个PL7家族中具有适冷性的外切型褐藻胶裂解酶,最适条件下比酶活为6.6 U/mg。 展开更多

关键词 外切型褐藻胶裂解酶 海洋弧菌 异源表达 酶学性质

原文传递

海洋弧菌B2817的抗肿瘤活性成分研究 被引量：2

16

作者 李俊华 吴晓鹏 +4 位作者 方哲 黄惠琴 王龙星 肖红斌 鲍时翔 《中国海洋药物》 CAS CSCD 2008年第5期8-10,共3页

目的对海洋弧菌B2817的抗肿瘤活性成分进行分离纯化和结构鉴定。方法采用溶剂萃取、制备HPLC等分离手段,对该菌株所产的活性成分进行了活性追踪分离,通过现代波谱学手段进行化学结构鉴定,以MTT法评价了化合物的抗肿瘤活性。结果从中分... 目的对海洋弧菌B2817的抗肿瘤活性成分进行分离纯化和结构鉴定。方法采用溶剂萃取、制备HPLC等分离手段,对该菌株所产的活性成分进行了活性追踪分离,通过现代波谱学手段进行化学结构鉴定,以MTT法评价了化合物的抗肿瘤活性。结果从中分离得到4个化合物,分别鉴定为灵菌红素(1)、肉豆蔻酸(2)、7-十六碳烯酸(3)、7,10-十八碳二烯酸(4)。化合物1对肿瘤细胞SM7721、S180具有强细胞毒活性,IC50分别为6.3、5.6μg.mL-1,而对人正常肝细胞HL-02无毒性。结论4个化合物均为首次从该菌株中得到,而且弧菌B2817为灵菌红素的生产提供了新的来源。 展开更多

关键词 海洋弧菌 抗肿瘤活性 分离纯化 结构鉴定

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海洋弧菌HN897β-琼脂糖酶基因vas1-1339异源表达及活性分析

17

作者 喻飞 金兴坤 +5 位作者 雷天影 曹海航 陈锵辉 阳耀帆 李佳航 赵哲 《热带海洋学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第2期170-176,共7页

海洋弧菌HN897株是一株高产琼脂糖酶的Vibrio astriarenae菌,前期功能缺失实验证明其β-琼脂糖酶基因vas1-1339的缺失可显著降低弧菌HN897株的琼脂水解活性。文章在大肠杆菌中异源表达Vas1-1339基因编码蛋白,分析该基因的表达及蛋白功... 海洋弧菌HN897株是一株高产琼脂糖酶的Vibrio astriarenae菌,前期功能缺失实验证明其β-琼脂糖酶基因vas1-1339的缺失可显著降低弧菌HN897株的琼脂水解活性。文章在大肠杆菌中异源表达Vas1-1339基因编码蛋白,分析该基因的表达及蛋白功能活性。首先,构建含vas1-1339基因开放阅读框全长的表达载体pET28a-1339,利用原核表达技术在大肠杆菌中成功地异源表达了Vas1-1339琼脂糖酶;然后,利用卢戈氏碘液染色分析发现异源表达Vas1-1339琼脂糖酶的大肠杆菌能够高效水解琼脂,且异丙基硫代半乳糖苷(IPTG)最优诱导浓度为10μmol·L^(-1);免疫印迹分析发现胞内基因表达产物羧基端可能存在切割现象,推测Vas1-1339琼脂糖酶存在复杂的成熟过程。对纯化的琼脂糖酶活性分析发现海洋弧菌HN897株β-琼脂糖酶Vas1-1339能够独立发挥琼脂糖降解功能。 展开更多

关键词 β-琼脂糖酶 海洋弧菌 琼脂糖酶解 异源蛋白表达

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24种中药成分对海战伤病原菌的抑制作用研究

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作者 胡波 孔君南 +3 位作者 翟祥宁 刘小宇 于豪冰 刘李娜 《海军医学杂志》 2022年第10期1094-1097,共4页

目的 筛选24种中药单体中有效抑制海洋弧菌的成分。方法 采用纸片法对中药单体进行初筛,采用微量肉汤稀释法对初筛阳性的成分进行复筛和抗菌谱研究。结果 石吊兰素、芹菜素、盐酸白屈菜红碱和雷公藤红素对创伤弧菌(Vibrio vulnificus,VV... 目的 筛选24种中药单体中有效抑制海洋弧菌的成分。方法 采用纸片法对中药单体进行初筛,采用微量肉汤稀释法对初筛阳性的成分进行复筛和抗菌谱研究。结果 石吊兰素、芹菜素、盐酸白屈菜红碱和雷公藤红素对创伤弧菌(Vibrio vulnificus,VV)和副溶血弧菌(Vibrio parahaemolyticus,VP)有不同程度的抑制作用,雷公藤红素抑菌作用最强,其抑制VV和VP的最低抑菌浓度(minimum inhibitory concentration,MIC)分别为2.2μmol/L和1.1μmol/L;其次为盐酸白屈菜红碱,其抑制VV和VP的MIC均为2.6μmol/L。这2种化合物对粪肠球菌均具有很强的抑制作用,雷公藤红素和盐酸白屈菜红碱的MIC分别为4.4μmol/L和10.4μmol/L。盐酸白屈菜红碱还对金黄色葡萄球菌有抑制作用,MIC为41.6μmol/L。24种中药单体对溶藻弧菌(Vibrio alginolyticus,VA)均无抑制作用。结论 雷公藤红素和盐酸白屈菜红碱能够特异性抑制海洋弧菌的成分,为治疗海洋弧菌类感染提供了研究基础。 展开更多

关键词 海洋弧菌 雷公藤红素 白屈菜红碱 抑菌作用 中药

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海洋弧菌B2817合成抗肿瘤活性物质条件的研究 被引量：1

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作者 吕家森 黄惠琴 +2 位作者 丛明 方哲 鲍时翔 《中国海洋药物》 CAS CSCD 2005年第4期5-9,共5页

目的为了提高海洋弧菌B2817抗肿瘤活性物质的产量.方法对其发酵条件进行优化,包括对发酵培养基的组成、初始pH值,培养温度,装液量,种龄和接种量等条件的研究.结果发现其最佳培养基为:葡萄糖15g·L-1、甘油5g·L-1,蛋白胨10g... 目的为了提高海洋弧菌B2817抗肿瘤活性物质的产量.方法对其发酵条件进行优化,包括对发酵培养基的组成、初始pH值,培养温度,装液量,种龄和接种量等条件的研究.结果发现其最佳培养基为:葡萄糖15g·L-1、甘油5g·L-1,蛋白胨10g·L-1,黄豆粉5g·L-1,未纯化的日晒海盐30g·L-1,pH6.0～6.5.最佳培养条件:29℃,180r·min-1振荡培养;种子液种龄和接种量分别为24h和5%;装液量为150mL(500mL三角瓶中);培养时间为2d.结论在此优化条件下,B2817的生物量为3.0g·L-1,发酵液在稀释400倍后对人肝癌细胞抑制率可达85%. 展开更多

关键词 海洋弧菌 抗肿瘤活性物质 发酵 优化

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检测海洋弧菌的酶联免疫吸附试验研究 被引量：16

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作者 张晓华 徐怀恕 《青岛海洋大学学报（自然科学版）》 CSCD 1997年第3期326-332,共7页

研究建立中国对虾病原菌┐副溶血弧菌（Ｖｉｂｒｉｏｐａｒａｈａｅｍｏｌｙｔｉｃｕｓ）的间接酶联免疫吸附试验（ＥＬＩＳＡ）快速检测技术。间接ＥＬＩＳＡ技术中的副溶血弧菌的特异抗血清由家兔制备，羊抗兔ＩｇＧ用碱性磷酸酶标记... 研究建立中国对虾病原菌┐副溶血弧菌（Ｖｉｂｒｉｏｐａｒａｈａｅｍｏｌｙｔｉｃｕｓ）的间接酶联免疫吸附试验（ＥＬＩＳＡ）快速检测技术。间接ＥＬＩＳＡ技术中的副溶血弧菌的特异抗血清由家兔制备，羊抗兔ＩｇＧ用碱性磷酸酶标记，酶的底物为对磷酸基硝基苯。将该技术标准化后，测定了抗血清与１３株其它副溶血弧菌菌株及２９株其它弧菌标准菌株的交叉反应。 展开更多

关键词 中国对虾 病原菌 海洋弧菌 酶联免疫 吸附试验

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