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粒细胞集落刺激因子通过mTOR/p70S6K途径调节新生大鼠缺氧缺血性脑损伤后炎症反应 被引量:3
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作者 Dumbuya John Sieh 舒斯云 +6 位作者 吴政彦 马林 杜江 陈璐 罗薇 李菲 王斌 《中华实用儿科临床杂志》 CSCD 北大核心 2018年第14期1107-1111,共5页
目的观察粒细胞集落刺激因子(G-CSF)对新生大鼠缺氧缺血性脑损伤(HIBD)后炎症反应的影响及哺乳动物雷帕霉素靶蛋白/p70核糖体S6蛋白激酶(mTOR/p70S6K)信号通路在其中发挥的作用。方法7日龄新生SD大鼠90只按随机数字表法随机分为... 目的观察粒细胞集落刺激因子(G-CSF)对新生大鼠缺氧缺血性脑损伤(HIBD)后炎症反应的影响及哺乳动物雷帕霉素靶蛋白/p70核糖体S6蛋白激酶(mTOR/p70S6K)信号通路在其中发挥的作用。方法7日龄新生SD大鼠90只按随机数字表法随机分为假手术组、缺氧缺血(HI)模型组、G-CSF组、雷帕霉素组及对照组,改良Rice法建立新生大鼠HIBD模型。HI前1 h,雷帕霉素组腹腔注射雷帕霉素250 μg/kg,对照组予等体积乙醇腹腔注射。HI 1 h后,G-CSF组、雷帕霉素组及对照组腹腔注射G-CSF 50 μg/kg,HI模型组及假手术组予等体积9 g/L盐水腹腔注射。HI 48 h后,Western blot检测脑组织中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素(IL)-1β、IL-10及mTOR/p70S6K信号通路蛋白水平,尼氏染色评估海马CA1区及皮质神经元损伤情况,2,3,5-氯化三苯基四氮唑染色检测脑梗死面积。结果与HI模型组比较,G-CSF组及对照组脑梗死面积减少[(12.87±1.54)%、(11.90±1.31)%比(24.21±3.28)%],尼氏染色阳性神经元计数增多[海马CA1区:(61.00±4.90)个/视野、(61.67±6.40)个/视野比(42.67±4.46)个/视野;皮质:(92.67±6.68)个/视野、(90.17±4.45)个/视野比(70.83±6.97)个/视野],TNF-α及IL-1β水平降低(TNF-α:0.67±0.07、0.55±0.05比0.86±0.05;IL-1β:0.65±0.06、0.52±0.10比0.86±0.06),IL-10、p-mTOR/mTOR及p-p70S6K/p70S6K水平升高(IL-10:0.68±0.04、0.62±0.05比0.34±0.02;p-mTOR/mTOR:0.53±0.02、0.51±0.01比0.26±0.01;p-p70S6K/p70S6K:0.89±0.03、0.90±0.03比0.55±0.02),差异均有统计学意义(均P〈0.05)。与G-CSF组及对照组比较,雷帕霉素组脑梗死面积增加[(25.70±1.50)%],尼氏染色阳性神经元计数减少[海马CA1区:(40.67±3.50)个/视野;皮质:(68.33±8.17)个/视野],TNF-α及IL-1β水平升高(分别为0.97±0.06、0.98±0.10),IL-10、p-mTOR/mTOR及p-p7 展开更多
关键词 缺氧缺血性脑损伤 粒细胞集落刺激因子 哺乳动物雷帕霉素靶蛋白/p70核糖体S6蛋白激酶 信号通路 炎性因子 大鼠 新生
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基于mTOR/p70S6K信号通路探究紫丁香苷对高糖诱导的小鼠足细胞MPC5损伤的影响
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作者 姚春红 李国红 +1 位作者 周波 徐佳 《河北医学》 CAS 2023年第1期65-70,共6页
目的:探究紫丁香苷对高糖诱导的小鼠足细胞MPC5损伤及哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)/p70核糖体蛋白S6激酶(p70S6K)信号通路的影响。方法:将小鼠足细胞MPC5分为:对照组(5.5mmoL/L葡萄糖)、高糖诱导组(30mmoL/L葡萄糖)、紫丁香苷低浓度组(... 目的:探究紫丁香苷对高糖诱导的小鼠足细胞MPC5损伤及哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)/p70核糖体蛋白S6激酶(p70S6K)信号通路的影响。方法:将小鼠足细胞MPC5分为:对照组(5.5mmoL/L葡萄糖)、高糖诱导组(30mmoL/L葡萄糖)、紫丁香苷低浓度组(2.5μmoL/L紫丁香苷+30mmoL/L葡萄糖)、紫丁香苷中浓度组(5μmoL/L紫丁香苷+30mmoL/L葡萄糖)、紫丁香苷高浓度组(10μmoL/L紫丁香苷+30mmoL/L葡萄糖)。各组向RPMI 1640培养基中加入上述浓度的相应试剂或药物,培养72h。酶标仪测定各组MPC5细胞吸光度值,计算细胞活力;流式细胞仪测定各组MPC5细胞凋亡情况;鬼笔环肽染色观察各组MPC5细胞骨架形态;荧光定量PCR和蛋白印迹法分别测定各组MPC5细胞mTOR、p70S6K信使核糖核酸(mRNA)和蛋白表达。结果:对照组MPC5细胞骨架形态正常,细胞长轴呈线性分布,荧光染色明显;与对照组比较,高糖诱导组MPC5细胞骨架断裂,细胞萎缩,荧光染色黯淡,吸光度值、细胞活力显著降低,凋亡率、mTOR、p70S6K mRNA和蛋白表达水平显著升高(P<0.05);与高糖诱导组比较,紫丁香苷低、中、高浓度组MPC5细胞骨架结构恢复清晰,荧光强度逐渐变亮,足突趋于明显,吸光度值、细胞活力依次升高,凋亡率、mTOR、p70S6K mRNA和蛋白表达水平依次降低(P<0.05)。结论:紫丁香苷对高糖诱导的MPC5细胞损伤具有保护作用,能明显促进MPC5细胞增殖,抑制其凋亡;其机制可能与紫丁香苷抑制高糖状态下MPC5细胞中mTOR/p70S6K通路的激活有关。 展开更多
关键词 紫丁香苷 高糖 小鼠足细胞MpC5 哺乳动物雷帕霉素靶蛋白/p70核糖体蛋白S6激酶信号通路
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