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5种苹果野生资源果实香气物质的分析 被引量：7
1
作者 杜薇 陈丽娟 +3 位作者 李瑞 田晓宁 刘翠华 任小林 《西北农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第10期1547-1555,共9页
以苹果系楸子(Malus prunifolia)、海棠花(Malus spectabilis)、西府海棠(Malus micromalus)、花红(Malus asiatica)和新疆野苹果(Malus sieversii)5个野生苹果种为材料,以甲基叔丁基醚(MTBE)为溶剂,进行香气物质的提取,并基于气相色谱... 以苹果系楸子(Malus prunifolia)、海棠花(Malus spectabilis)、西府海棠(Malus micromalus)、花红(Malus asiatica)和新疆野苹果(Malus sieversii)5个野生苹果种为材料,以甲基叔丁基醚(MTBE)为溶剂,进行香气物质的提取,并基于气相色谱质谱联用(GC-MS)技术对香气物质进行分离和鉴定。结果表明:5种材料中共鉴定出27种香气物质,其中醇类6种、醛类7种、酯类4种、有机酸4种、萜烯2种和苯衍生物4种。其中反式-2-己烯醛、辛酸、α-法呢烯、苯酚以及对甲苯酚是5个野生苹果果实中共有的香气物质。这5种苹果野生资源果实的香气物质主要是以清香型的反式-2-己烯醛等醛类物质为主,但酯类和醇类也是构成不同种苹果特异香气的重要呈香物质。从特征香气组分来看,有8种是5个野生苹果种果实香气成分共有的特征香气,分别是法呢醇、己醛、反式-2-己烯醛、辛醛、壬醛、反式-2-癸烯醛、乙酸丁酯、己酸己酯。其中海棠花的特征香气物质有6种,西府海棠的特征香气物质有5种,新疆野苹果和楸子的特征香气物质有4种,花红苹果的特征香气物质有2种。 展开更多
关键词 野生苹果 香气物质 GC-MS 特征香气
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利用酵母双杂交筛选与苹果褪绿叶斑病毒MP互作的寄主因子 被引量：3
2
作者 何乙坤 钟敏 +2 位作者 张瑜 王亚南 曹克强 《病毒学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第2期124-131,共8页
为了找到与苹果褪绿叶斑病毒(Apple chlorotic leaf spot virus,ACLSV)运动蛋白(Movement protein,MP)互作的寄主因子,首先构建了ACLSV MP酵母双杂交诱饵载体,然后通过顺序转化的方法自前期已构建好的苏俄苹果(Malus sylvestris cv.R127... 为了找到与苹果褪绿叶斑病毒(Apple chlorotic leaf spot virus,ACLSV)运动蛋白(Movement protein,MP)互作的寄主因子,首先构建了ACLSV MP酵母双杂交诱饵载体,然后通过顺序转化的方法自前期已构建好的苏俄苹果(Malus sylvestris cv.R12740-7A)cDNA文库中筛选互作基因;在GenBank中对互作寄主基因进行BLAST分析,根据基因注释推测其在病毒与寄主互作过程中可能发挥的作用。结果表明,构建的酵母双杂交诱饵载体pGBKT7-MP无自激活性、无毒性。筛选到69个与ACLSV MP互作的苏俄苹果寄主因子,包括水解酶活性、病程相关蛋白、氧化还原酶活性、磷酸酶活性、催化活性、连接酶活性、苯丙氨酸解氨酶活性、过氧化物酶活性、DNA结合功能和未知蛋白,共10类不同功能的蛋白。通过生物信息学分析,推断蛋白磷酸酶、病程相关蛋白及3-磷酸甘油醛脱氢酶可能在互作过程中起重要作用。该研究为深入了解ACLSV致病特征及病原与寄主互作机制奠定基础。 展开更多
关键词 苹果褪绿叶斑病毒 苏俄苹果 酵母双杂交 互作基因
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利用酵母双杂交筛选与苹果褪绿叶斑病毒CP互作的寄主因子 被引量：3
3
作者 何乙坤 钟敏 +5 位作者 胡同乐 王树桐 段豪 丁丽 王亚南 曹克强 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2014年第24期4821-4829,共9页
[目的]利用酵母双杂交系统筛选与苹果褪绿叶斑病毒(Apple chlorotic leaf spot virus,ACLSV)外壳蛋白(coat protein,CP)互作的寄主因子,利用生物信息学方法分析其在病毒与寄主互作过程中可能发挥的作用。[方法]首先构建ACLSV CP的酵母... [目的]利用酵母双杂交系统筛选与苹果褪绿叶斑病毒(Apple chlorotic leaf spot virus,ACLSV)外壳蛋白(coat protein,CP)互作的寄主因子,利用生物信息学方法分析其在病毒与寄主互作过程中可能发挥的作用。[方法]首先构建ACLSV CP的酵母双杂交诱饵载体p GBKT7-CP,转化至酵母菌株Y2H gold中,测定转化菌在SD/-Trp、SD/-Trp/-His和SD/-Trp/-Ade-X-α-Gal平板上的生长情况,从而判断其在酵母双杂交过程中对报告基因的自激活活性。将p GBKT7-CP及p GBKT7分别转化至酵母菌株Y2H gold,培养不同时间后,用紫外分光光度计测定OD600值,分析p GBKT7-CP对酵母菌生长的影响;然后通过顺序转化的方法自前期已构建好的苏俄苹果(Malus sylvestris cv.R12740-7A)c DNA文库中钓取与ACLSV CP互作的因子,最终在SD/-Ade/-His/-Leu/-Trp/X-α-Gal平板上筛选生长良好的蓝色阳性菌落,测定序列,并在Gen Bank中对其进行BLAST分析,根据基因注释推断其在病毒与寄主互作过程中可能发挥的作用。[结果]成功构建了酵母双杂交诱饵载体p GBKT7-CP,转化至酵母菌株Y2H gold后,转化菌只能在SD/-Trp平板上正常生长,不能在SD/-Trp/-His和SD/-Trp/-Ade-X-α-Gal平板上生长,表明重组质粒自身不能激活报告基因His及Ade的表达,没有自激活活性。酵母双杂诱饵载体p GBKT7-CP与对照空质粒转化菌生长情况相似,证明诱饵载体对酵母菌没有毒性;筛选到了69个互作寄主基因,包括转录因子活性、碳固定活性、细胞内铁离子平衡、防御反应、水解酶活性、氧化酶活性、氧化还原酶活性、光系统II组件、绑定蛋白等10类蛋白,经生物信息学分析,其中8个寄主基因(Malus3-1、Malus4-2、Malus4q1、Malus31-3、Malus49q2、Malus15-1、Malus6-2、Malus91-4)可能在病毒与寄主互作过程中起重要作用。[结论]分析筛选到的重要寄主蛋白功能,推测ACLSV CP与BZIP类、MYB类转录因子、病程相关蛋白(PR-5、PR-8、PR-10)互作,可� 展开更多
关键词 苹果褪绿叶斑病毒 苏俄苹果 酵母双杂交 互作基因
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负载马桑叶提取物纳米纤维膜的制备及其研究
4
作者 李茹冰 赵月 +5 位作者 李宇璐 魏照星 谷小红 于丽娟 刘文婷 万华印 《今日药学》 CAS 2023年第2期120-122,共3页
目的本研究主要对制备的新型负载马桑叶提取物的静电纺丝膜进行性能评价,为该敷料的进一步开发研究奠定基础。方法采用静电纺丝技术制备了负载马桑叶提取物的PCL纳米纤维膜,观察了纳米纤维表面形貌和结构,并评价其抗菌性及其生物相容性... 目的本研究主要对制备的新型负载马桑叶提取物的静电纺丝膜进行性能评价,为该敷料的进一步开发研究奠定基础。方法采用静电纺丝技术制备了负载马桑叶提取物的PCL纳米纤维膜,观察了纳米纤维表面形貌和结构,并评价其抗菌性及其生物相容性。结果负载马桑提取物的纳米纤维复合膜的制备符合要求并显示良好的形貌;负载马桑提取物的PCL/马桑叶提取物纳米纤维膜对L929细胞无毒害作用。结论负载马桑叶提取物的PCL纳米纤维膜具有良好的抗菌性,可作为一种新型伤口敷料。 展开更多
关键词 静电纺丝 马桑叶提取物 直径 抗菌
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苏俄苹果酵母双杂交cDNA文库的构建与评价 被引量：1
5
作者 段豪 赵绪生 +6 位作者 钟敏 胡同乐 王树桐 张瑜 张珣 王亚南 曹克强 《河北农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第1期69-73,共5页
以苏俄苹果(Malus sylvestris cv.R12740-7A)组培苗为试材,构建了以真核表达载体pGADT7为基础的苹果酵母双杂交cDNA文库。通过异硫氰酸胍法提取总RNA,Oligotex-dT30<Super>mRNA Purification Kit分离纯化mRNA,利用SMART法反转录... 以苏俄苹果(Malus sylvestris cv.R12740-7A)组培苗为试材,构建了以真核表达载体pGADT7为基础的苹果酵母双杂交cDNA文库。通过异硫氰酸胍法提取总RNA,Oligotex-dT30<Super>mRNA Purification Kit分离纯化mRNA,利用SMART法反转录合成双链cDNA(dscDNA),酶切纯化后的dscDNA与库载体pGADT7连接电转大肠杆菌,经涂板检测,初始文库滴度为2.67×105 cfu/mL,库容量为4.0×106 cfu,随后将文库进行了百万扩增,扩增文库滴度为1.0×108 cfu/mL,库容为1.5×1010 cfu,在文库中随机挑取46个克隆,利用PCR方法测得文库插入片段75%大于1kb,重组率为100%,文库质量较高,符合文库构建的标准,为后续苹果分子生物学研究以及病毒与寄主互作研究奠定了基础。 展开更多
关键词 苏俄苹果 酵母双杂交cDNA文库 构建
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