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麦芽糖酶-葡萄糖淀粉酶D246A异源表达及性质表征
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作者 高雨晴 董钢印 +3 位作者 张洪瑞 马占山 方丽 詹冬玲 《吉林大学学报(理学版)》 CAS 北大核心 2024年第3期742-749,共8页
以大型真菌灵芝中的麦芽糖酶-葡萄糖淀粉酶(MGAM)为研究对象,采用同源序列比对、同源模建、底物对接和定点突变等方法成功构建酶活力显著降低的突变体D246A.酶学性质表征结果表明:最适反应温度由野生型(wild type,WT)的65℃减少至60℃,... 以大型真菌灵芝中的麦芽糖酶-葡萄糖淀粉酶(MGAM)为研究对象,采用同源序列比对、同源模建、底物对接和定点突变等方法成功构建酶活力显著降低的突变体D246A.酶学性质表征结果表明:最适反应温度由野生型(wild type,WT)的65℃减少至60℃,突变体耐热能力下降;最适pH值由WT的6.0升高至7.0,有利于工程菌生长;半衰期由WT的2.0 h下降至1.5 h,酶稳定性降低.酶动力学结果表明:突变体D246A酶动力学曲线符合Michaelis方程,与WT相比,K_(m)值变大,表明酶与底物亲和力下降;V_(max)约降低至原来的1/4. 展开更多
关键词 定点突变 异源表达 性质表征 麦芽糖酶-葡萄糖淀粉酶
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Antidiabetic potential of methanol extracts from leaves of Piper umbellatum L. and Persea americana Mill.
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作者 Guy Sedar Singor Njateng Sumera Zaib +6 位作者 Larissa Yetenge Chimi Cesaire Feudjio Raymond Simplice Mouokeu Donatien Gatsing Jules-Roger Kuiate Ezekiel Adewole Jamshed Iqbal 《Asian Pacific Journal of Tropical Biomedicine》 SCIE CAS 2018年第3期160-165,共6页
Objective: To determine inhibitory activity of methanolic leaf extract of Piper umbellatum and Persea americana(P. americana)(traditionally used in Cameroon against diabetes) on β-glucosidase, β-glucosidase, maltase... Objective: To determine inhibitory activity of methanolic leaf extract of Piper umbellatum and Persea americana(P. americana)(traditionally used in Cameroon against diabetes) on β-glucosidase, β-glucosidase, maltase-glucoamylase, aldose reductase and aldehyde reductase activities, enzymes involved in starch digestion or diabetic complications. Methods: The methanol extracts from Piper umbellatum and P. americana were prepared by maceration. To assess relative efficacy of these extracts, the determination of concentrations that were needed to inhibit 50% of enzyme activity was done, whereas, gas chromatography-mass spectrum was used to identify components from extracts that may be responsible for the activities. Results:The tested extracts strongly inhibited β-glucosidase, maltase-glucoamylase, aldose reductase and aldehyde reductase activities with IC50 ranging from(1.07 ± 0.03) to(31.77 ± 1.17) μg/mL.Among the tested extracts, P. americana was the most active against sensitive enzymes(IC50 of1.07 ± 0.03 to 15.63 ± 1.23). But, none of the extracts showed interesting inhibitory effect against β-glucosidase as their percentage inhibitions were less than 16%. From gas chromatographymass spectrum analysis, 10 and 8 compounds were identified in Piper umbellatum and P.americana extracts respectively, using NIST library 2014. Conclusions: Results of this study provide the scientific credential for a prospective usage of these plants to treat diabetes. 展开更多
关键词 Piper umbellatum Persea americana GLUCOSIDASE maltase-glucoamylase Aldose reductase Aldehyde reductase
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α-葡萄糖苷酶抑制剂高通量筛选模型的建立及其应用 被引量:10
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作者 孟鹏 齐西珍 +3 位作者 郑芳 任丽梅 白芳 白钢 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第8期1080-1086,共7页
【目的】针对人α-麦芽糖苷酶这个糖代谢途径中重要的靶蛋白,建立α-糖苷酶抑制剂高通量筛选模型。【方法】采用毕赤酵母表达系统克隆和表达人α-麦芽糖苷酶。利用酶的催化特性建立α-糖苷酶抑制剂筛选模型。应用该模型对放线菌代谢产... 【目的】针对人α-麦芽糖苷酶这个糖代谢途径中重要的靶蛋白,建立α-糖苷酶抑制剂高通量筛选模型。【方法】采用毕赤酵母表达系统克隆和表达人α-麦芽糖苷酶。利用酶的催化特性建立α-糖苷酶抑制剂筛选模型。应用该模型对放线菌代谢产物库进行高通量筛选。通过构建16SrRNA系统发育树分析阳性菌株的分类地位。【结果】首次成功克隆、表达了具催化活性的人α-麦芽糖苷酶N端结构域。针对人α-麦芽糖苷酶N端催化结构域,建立α-糖苷酶抑制剂的筛选模型。对包含近2000株放线菌代谢产物的天然产物库进行高通量筛选,最终得到20株α-麦芽糖苷酶抑制剂生产菌株。其中19株放线菌为链霉菌属,且在分类学上具有丰富的多样性。【结论】本研究建立的α-糖苷酶抑制剂高通量筛选模型具有很强的实用价值,可用于新型糖苷酶抑制剂类降糖药物的开发。 展开更多
关键词 Α-糖苷酶抑制剂 毕赤酵母表达系统 α-麦芽糖苷酶 放线菌 高通量药筛
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