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马关无角山羊卵巢颗粒细胞INHA基因siRNA的筛选与鉴定 被引量：2
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作者 富国文 王绍卿 +3 位作者 祁会彩 滕晓红 达永仙 樊月圆 《中国草食动物科学》 CAS 2016年第1期15-18,共4页
为了研究INHA基因在马关无角山羊卵泡发育中的作用,设计并化学合成了3条针对INHA基因的si RNA,脂质体法转染至马关无角山羊的卵巢颗粒细胞,Real-time PCR技术和WesternBlot技术对其干扰效率进行了筛选。结果表明:si RNA-2对INHA基因m RN... 为了研究INHA基因在马关无角山羊卵泡发育中的作用,设计并化学合成了3条针对INHA基因的si RNA,脂质体法转染至马关无角山羊的卵巢颗粒细胞,Real-time PCR技术和WesternBlot技术对其干扰效率进行了筛选。结果表明:si RNA-2对INHA基因m RNA表达抑制率达到了94.3%,对蛋白表达的抑制率达到了93.4%,是INHA基因沉默的最佳干扰质粒,可为今后研究INHA基因的功能提供基础。 展开更多
关键词 马关无角山羊 INHA基因 SI RNA
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INHA基因干扰对马关无角山羊卵巢颗粒细胞的影响
2
作者 富国文 王绍卿 +2 位作者 滕晓红 达永仙 樊月圆 《家畜生态学报》 北大核心 2016年第8期12-15,49,共5页
为了揭示INHA基因在马关无角山羊卵泡发育过程中的作用,为山羊多胎性状的研究提供理论依据,以高繁殖力地方品种--马关无角山羊的卵巢颗粒细胞为研究对象,采用siRNA技术,对卵巢颗粒细胞所分泌的糖蛋白激素基因INHA进行了干扰,Western blo... 为了揭示INHA基因在马关无角山羊卵泡发育过程中的作用,为山羊多胎性状的研究提供理论依据,以高繁殖力地方品种--马关无角山羊的卵巢颗粒细胞为研究对象,采用siRNA技术,对卵巢颗粒细胞所分泌的糖蛋白激素基因INHA进行了干扰,Western blot法检验了干扰后INHA蛋白的表达量,Real-time PCR法检测了干扰后凋亡家族主要基因、主要生长因子及激素受体的mRNA表达量变化。Western blot结果显示,干扰48h后的INHA蛋白的表达量极显著低于正常组和阴性对照组(negative control,NC)(P<0.01);Real-time PCR结果显示,凋亡促进基因Bax在转染后,表达量极显著低于正常组和NC组(P<0.01),凋亡抑制基因bcl-2和bcl-xl基因在转染后,表达量极显著高于正常组和NC组(P<0.01);主要生长因子IGF-1和IGF-2基因在转染后,mRNA的表达量明显减少(P<0.01),其中IGF-1的表达量降低最为明显;激素受体FSHR和LHR基因mRNA的表达量极显著低于正常组和NC组(P<0.01)。由此推测,INHA基因可能是通过影响卵巢颗粒细胞凋亡/增殖,进而影响了卵泡的发育。 展开更多
关键词 INHA基因 卵巢颗粒细胞 SIRNA技术 马关无角山羊
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