TGA(TGACG-binding)是一类碱性亮氨酸拉链转录因子,在SA介导的植物系统获得性抗性中发挥重要的调节作用。为探究TGA转录因子MaTGA1在桑树应答青枯菌胁迫的信号通路,本研究利用青枯菌侵染的桑树根部构建了均一化的酵母双杂交cDNA文库,库...TGA(TGACG-binding)是一类碱性亮氨酸拉链转录因子,在SA介导的植物系统获得性抗性中发挥重要的调节作用。为探究TGA转录因子MaTGA1在桑树应答青枯菌胁迫的信号通路,本研究利用青枯菌侵染的桑树根部构建了均一化的酵母双杂交cDNA文库,库容量3.2×10^(6)cfu·m L^(-1),插入片段长度500~2000bp,重组率100%。构建了pGBKT7-MaTGA1诱饵载体,经检测在酵母中无自激活和毒性活性。将诱饵载体与酵母双杂交文库共转酵母菌株,获得35个阳性克隆,Blastx比对确定包含11个候选互作蛋白,其中候选蛋白——高迁移率族蛋白MaHMGB10(High mobility group B protein 10)有13个克隆。通过酵母回转验证、双分子荧光互补和免疫共沉淀验证,确定MaHMGB10可与MaTGA1发生体内互作。展开更多
文摘TGA(TGACG-binding)是一类碱性亮氨酸拉链转录因子,在SA介导的植物系统获得性抗性中发挥重要的调节作用。为探究TGA转录因子MaTGA1在桑树应答青枯菌胁迫的信号通路,本研究利用青枯菌侵染的桑树根部构建了均一化的酵母双杂交cDNA文库,库容量3.2×10^(6)cfu·m L^(-1),插入片段长度500~2000bp,重组率100%。构建了pGBKT7-MaTGA1诱饵载体,经检测在酵母中无自激活和毒性活性。将诱饵载体与酵母双杂交文库共转酵母菌株,获得35个阳性克隆,Blastx比对确定包含11个候选互作蛋白,其中候选蛋白——高迁移率族蛋白MaHMGB10(High mobility group B protein 10)有13个克隆。通过酵母回转验证、双分子荧光互补和免疫共沉淀验证,确定MaHMGB10可与MaTGA1发生体内互作。
