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性类固醇激素E_2、MT对尼罗罗非鱼(Oreochromis niloticus)雌、雄生长差异的影响 被引量:11
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作者 马细兰 张勇 +1 位作者 陈勇智 周立斌 《海洋与湖沼》 CAS CSCD 北大核心 2015年第6期1487-1493,共7页
性类固醇激素对动物生长有一定的影响,但其对鱼类雌、雄生长差异的影响机理尚不清楚。为进一步了解动物雌雄生长差异的内在原因,本文通过在体注射和荧光定量PCR方法,比较了性类固醇激素(E_2、MT)对尼罗罗非鱼雌鱼和雄鱼的生长及对垂体G... 性类固醇激素对动物生长有一定的影响,但其对鱼类雌、雄生长差异的影响机理尚不清楚。为进一步了解动物雌雄生长差异的内在原因,本文通过在体注射和荧光定量PCR方法,比较了性类固醇激素(E_2、MT)对尼罗罗非鱼雌鱼和雄鱼的生长及对垂体GH、肝脏GHR1、IGF-I m RNA表达的影响。结果表明:性类固醇激素E2和MT对尼罗罗非鱼的生长及生长轴相关基因的表达均有显著的影响,并且这种影响存在明显的性别二态性。E_2明显促进雌鱼的生长但不显著影响雄鱼的生长,MT显著促进雄鱼和雌鱼的生长;E2可使雌鱼垂体GH和肝脏GHR1、IGF-I的m RNA水平显著升高(P<0.05),但降低雄鱼垂体GH和肝脏GHR1的m RNA表达;MT显著提高雄鱼垂体GH和肝脏GHR1、IGF-I m RNA水平(P<0.05),但降低雌鱼垂体GH的m RNA表达,促进雌鱼肝脏GHR1 m RNA的表达,但对雄鱼肝脏GHR1的促进作用明显大于雌鱼(P<0.05)。上述结果表明,性类固醇激素对不同性别尼罗罗非鱼的生长及生长轴相关基因的m RNA表达有不同的影响,表现出明显的性别二态性,提示不同性别鱼体内性类固醇激素水平的不同可能是导致尼罗罗非鱼雌雄生长二态性的另一内在原因。 展开更多
关键词 尼罗罗非鱼 E2 mt 雌雄生长差异 基因表达
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重复性注射镉金属硫蛋白诱导小鼠肾脏金属硫蛋白基因的表达 被引量:7
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作者 逄兵 金泰廙 +2 位作者 胡云平 蒋学之 Nordberg Gunnar 《中华劳动卫生职业病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2001年第1期40-42,共3页
目的 探讨重复性注射镉金属硫蛋白 (CdMT)对小鼠肾脏金属硫蛋白 (MT)基因表达的影响。方法 以 β actin为内参照 ,采用半定量RT PCR方法检测重复性CdMT染毒后小鼠肾脏MT1和MT2基因的表达水平及与染镉剂量和肾皮质镉含量之间的相关性... 目的 探讨重复性注射镉金属硫蛋白 (CdMT)对小鼠肾脏金属硫蛋白 (MT)基因表达的影响。方法 以 β actin为内参照 ,采用半定量RT PCR方法检测重复性CdMT染毒后小鼠肾脏MT1和MT2基因的表达水平及与染镉剂量和肾皮质镉含量之间的相关性。结果 随着CdMT剂量的增加 ,MT1、MT2基因的表达水平都相应升高 ,当CdMT染毒总剂量达到 0 .6 0mg/kg时 ,肾皮质中MT1、MT2基因的表达水平分别为 1.6 0± 0 .12及 1.44± 0 .0 5 ,与相应的对照组 (1.2 2± 0 .16及 0 .92± 0 .12 )相比 ,均明显升高 ,差异有显著性 (P <0 .0 5 ,P <0 .0 1) ;肾皮质中MT1及MT2基因表达水平分别与肾皮质中镉的含量呈正相关 ,其相关系数分别为r=0 .72 (P <0 .0 1)及r=0 .71(P <0 .0 1)。结论 镉对MT1及MT2基因表达具有较强的诱导能力 ; 展开更多
关键词 镉金属硫蛋白 mt基因表达 RT-PCR 重复性注射 肾毒性
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Claudin-7、β-catenin和MT1-mmp在乳腺癌中的表达及意义 被引量:7
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作者 鲜于丽 代凌云 +3 位作者 吴毅平 郭华雄 韩昌洪 刘静 《肿瘤》 CAS CSCD 北大核心 2009年第9期864-867,共4页
目的:探讨Claudin-7、β-catenin和MT1-mmp在乳腺癌中的表达及其相关性。方法:应用免疫组织化学方法检测55例乳腺癌组织和20例乳腺良性病变组织中Claudin-7、β-catenin和MT1-mmp的表达情况,并分析3者表达之间的相关性,以及与乳腺癌临... 目的:探讨Claudin-7、β-catenin和MT1-mmp在乳腺癌中的表达及其相关性。方法:应用免疫组织化学方法检测55例乳腺癌组织和20例乳腺良性病变组织中Claudin-7、β-catenin和MT1-mmp的表达情况,并分析3者表达之间的相关性,以及与乳腺癌临床病理参数的关系。结果:Claudin-7在乳腺癌组织的表达明显下调(P<0.01),阳性表达率为18.6%,与肿瘤临床分期和淋巴结转移相关(P<0.05,P<0.01);β-catenin在乳腺癌组织的表达明显上调(P<0.01),阳性表达率为79.1%,与肿瘤分级、临床分期及淋巴结转移显著相关(P<0.01);MT1-mmp在乳腺良恶性病变中表达差异无统计学意义(P>0.05)。Claudin-7和β-catenin表达呈显著负相关(rs=-0.813,P(0.001),Claudin-7或β-catenin与MT1-mmp表达之间无相关性。结论:Claudin-7可能是潜在的肿瘤抑制剂,与β-catenin表达呈显著负相关。β-catenin可能间接调控Claudin-7的表达。推测Claudin-7和β-catenin联合检测对乳腺癌的治疗和预后判断有指导作用。 展开更多
关键词 乳腺肿瘤 基因表达 肿瘤浸润 肿瘤转移 免疫组织化学 Claudin-7 Β-CATENIN mt1-MMP
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实验性肝纤维化形成及逆转过程中膜性基质金属蛋白酶1mRNA表达的动态研究 被引量:6
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作者 游绍莉 赵景民 +3 位作者 辛绍杰 王松山 刘平 尹铁勇 《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2001年第6期407-409,F003,共4页
应用原位杂交观察基质金属蛋白酶 (MT1 MMP)mRNA在肝纤维化形成及逆转过程中的动态表达。采用CCl4 皮下注射Wistar大鼠建立肝纤维化模型 ,并让其自然恢复以使纤维化逆转。结果显示 ,MT1 MMPmRNA主要表达在间质细胞 (肝星状细胞等 ) ,部... 应用原位杂交观察基质金属蛋白酶 (MT1 MMP)mRNA在肝纤维化形成及逆转过程中的动态表达。采用CCl4 皮下注射Wistar大鼠建立肝纤维化模型 ,并让其自然恢复以使纤维化逆转。结果显示 ,MT1 MMPmRNA主要表达在间质细胞 (肝星状细胞等 ) ,部分肝细胞也有表达 ;随着肝纤维化的进展 ,MT1 MMPmRNA表达逐渐增强 ;而在肝纤维化的逆转过程中 ,MT1 MMPmRNA表达逐渐减弱。提示MT1 展开更多
关键词 基质金属蛋白酶 肝纤维化 基因表达 MRNA mt1-MMP
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枣金属硫蛋白基因原核表达载体的构建 被引量:6
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作者 韩彩云 曹秋芬 +1 位作者 马青兰 孟玉平 《太原理工大学学报》 CAS 北大核心 2009年第4期388-390,共3页
以从枣树生长早期结果枝cDNA小规模测序获得的含2型金属硫蛋白基因的重组质粒pSPORT1-MT为模板,用PCR方法扩增出MT基因241bp特异片段,将其亚克隆入pBlue-scriptⅡSK-T载体,用限制性内切酶BamHⅠ和HindⅢ分别酶切重组pBluescriptⅡSK-T... 以从枣树生长早期结果枝cDNA小规模测序获得的含2型金属硫蛋白基因的重组质粒pSPORT1-MT为模板,用PCR方法扩增出MT基因241bp特异片段,将其亚克隆入pBlue-scriptⅡSK-T载体,用限制性内切酶BamHⅠ和HindⅢ分别酶切重组pBluescriptⅡSK-T质粒和原核表达载体pET28a,然后将MT基因片段和表达载体pET28a通过T4DNA连接酶进行定向连接,用限制性内切酶BamHⅠ和HindⅢ酶切和PCR方法双重鉴定重组表达质粒。以pSPORT1-MT为模板扩增出大小为241 bp的片段,此片段与pBluescriptⅡSK-T载体连接后得到了亚克隆pBluescriptIⅡSK-MT载体,酶切回收了目的片段MT后,再次pET28a连接,得到了pET28a-MT原核表达载体。该重组表达载体经BamHⅠ和HindⅢ双酶切后,切出了235bp的目的片段,证明MT基因原核表达载体构建成功。 展开更多
关键词 金属硫蛋白基因 原核表达载体 构建
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养殖水域Cu^(2+)胁迫对虹鳟MT2基因表达模式的影响
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作者 周静 卢军浩 +4 位作者 赵映灿 徐永辉 李湘茹 巫佳俊 权金强 《环境科学与技术》 CAS CSCD 北大核心 2024年第2期96-103,共8页
为了探究水体中铜离子胁迫对虹鳟(Oncorhynchus mykiss)MT2基因表达模式的影响,开发Metallothioneins作为检测水域生态中重金属铜污染的分子标志,该研究利用TA克隆法获得了虹鳟MT2基因的CDS序列,检测了MT2基因在虹鳟不同组织中的表达模... 为了探究水体中铜离子胁迫对虹鳟(Oncorhynchus mykiss)MT2基因表达模式的影响,开发Metallothioneins作为检测水域生态中重金属铜污染的分子标志,该研究利用TA克隆法获得了虹鳟MT2基因的CDS序列,检测了MT2基因在虹鳟不同组织中的表达模式,以及Cu^(2+)胁迫(Cu^(2+)浓度75、150和300μg/L)后1、2、3和4 d和胁迫恢复1、2 d时间点的MT2基因表达动态。结果表明,虹鳟MT2基因CDS区长186 bp,编码62个氨基酸,具有典型的半胱氨酸(Cys)-X(1~3个)-半胱氨酸结构,属不稳定亲水性蛋白。虹鳟MT2基因序列与大西洋鲑的同源性最高且在肝脏中表达量最高,其次是脑和肠道。胁迫试验结果显示,MT2基因在肝脏和鳃中呈现先升高后降低的趋势,在头肾、脾脏和脑中呈现逐渐升高的趋势,且呈现一定的剂量依赖性,肠道MT2基因在胁迫2、3和4 d被显著抑制。胁迫恢复后,处理组肝脏、头肾、鳃、脑MT2基因表达量仍显著升高。综上,虹鳟MT2基因能在不同组织中被Cu^(2+)诱导表达,推测MT2基因在虹鳟抗重金属毒性中可能发挥着重要作用,且MT2基因表达量与铜离子的浓度相关,可以作为分子生物标志检测水域生态中的重金属铜污染。 展开更多
关键词 虹鳟 mt2基因 铜离子胁迫 基因克隆 表达模式
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C端带His标签重组MT1G真核表达载体构建及其在EC9706中的表达 被引量:4
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作者 侯新芳 王居峰 +2 位作者 臧凯 杨树军 陆士新 《中华肿瘤防治杂志》 CAS 2009年第8期596-599,共4页
目的:构建含MT1GcDNA的重组真核表达载体,并观察在人食管癌细胞EC9706中表达情况。方法:用PCR法从含MT1G基因cDNA质粒pACT2-MT1G中扩增获得目的基因片段,正向克隆入C端带Myc和6×His标签的真核表达质粒pcD-NA3.1/Myc-His(-)中。经... 目的:构建含MT1GcDNA的重组真核表达载体,并观察在人食管癌细胞EC9706中表达情况。方法:用PCR法从含MT1G基因cDNA质粒pACT2-MT1G中扩增获得目的基因片段,正向克隆入C端带Myc和6×His标签的真核表达质粒pcD-NA3.1/Myc-His(-)中。经酶切及测序鉴定后,以脂质体法转染EC9706细胞,经G418加压筛选获得阳性单克隆细胞,用RT-PCR和蛋白质印迹法技术检测MT1G mRNA和蛋白的表达。结果:成功构建了真核表达载体pcDNA3.1/Myc-His(-)-MT1G,转染pcDNA3.1/Myc-His(-)-MT1G的EC9706细胞内有带His标签MT1G融合蛋白表达。结论:获得了人MT1G重组载体和稳定表达带His标签MT1G融合蛋白的EC9706细胞株,为进一步研究MT1G的功能奠定了基础。 展开更多
关键词 食管肿瘤 基因 mt1G DNA 重组 基因表达 遗传载体
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Relative bioavailability of tribasic zinc sulfate for broilers fed a conventional corn-soybean meal diet 被引量:2
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作者 LI Wen-xiang MA Xin-yan +2 位作者 LU Lin ZHANG Li-yang LUO Xu-gang 《Journal of Integrative Agriculture》 SCIE CAS CSCD 2015年第10期2042-2049,共8页
An experiment was carried out to investigate the relative bioavailability of tribasic zinc(Zn) sulfate relative to Zn sulfate for broilers fed a conventional corn-soybean meal diet. A total of 504 1-d-old Arbor Acre... An experiment was carried out to investigate the relative bioavailability of tribasic zinc(Zn) sulfate relative to Zn sulfate for broilers fed a conventional corn-soybean meal diet. A total of 504 1-d-old Arbor Acres commercial male chicks were randomly assigned by body weight of birds to one of seven treatments involving a 2×3 factorial arrangement with three levels of added Zn(30, 60, or 90 mg of Zn kg–1) and two Zn sources(tribasic Zn sulfate and Zn sulfate) plus a control with no added Zn for an experimental phase of 14 d. Plasma Zn, tibia ash Zn, pancreas Zn, and pancreas metallothionein(MT) messenger RNA(m RNA) were analyzed at 6 or 14 d of age post-hatching. The results showed that plasma Zn, tibia ash Zn, pancreas Zn, and pancreas MT m RNA increased linearly(P〈0.002) as dietary Zn concentration increased at 6 or 14 d of age. The R2 for a linear model was greater on d 6 than on d 14 for the above 4 responsive criteria, and among these indices, the fitting of the tibia ash Zn concentration was the best(R2=0.99). Therefore, based on slope ratios from the multiple linear regressions of the above 4 indices of the birds at 6 d of age on daily intake of dietary Zn, the bioavailabilities of tribasic Zn sulfate relative to Zn sulfate(100%) were 95.6%(P=0.18), 83.5%(P=0.01), 87.9%(P=0.53), and 75.9%(P=0.38) for the tibia ash Zn, pancreas Zn, plasma Zn, and pancreas MT m RNA, respectively. The results indicated that generally, Zn from tribasic Zn sulfate was as available as Zn from Zn sulfate for broilers. 展开更多
关键词 tribasic zinc sulfate BIOAVAILABILITY Zn concentration mt gene expression BROILERS
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MT1E在肝癌细胞中的作用及不同中医治法对其表达调控的差异研究 被引量:2
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作者 管冬元 方肇勤 +4 位作者 代小平 梁超 胡卫 吴中华 高必峰 《中国中医基础医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第11期828-831,共4页
目的:比较常用不同中医治法对MT1E表达调控作用的差异,以及初步探讨MT1E在肝癌细胞中的生物学功能。方法:(1)以DEN诱发大鼠肝癌形成为模型,应用基因芯片检测健脾益气、清热解毒、活血化瘀等常用中医治法对MT1E基因表达的差异;(2)针对MT1... 目的:比较常用不同中医治法对MT1E表达调控作用的差异,以及初步探讨MT1E在肝癌细胞中的生物学功能。方法:(1)以DEN诱发大鼠肝癌形成为模型,应用基因芯片检测健脾益气、清热解毒、活血化瘀等常用中医治法对MT1E基因表达的差异;(2)针对MT1E基因mRNA序列设计2个siRNA靶点,分别经质粒重组后电转入SMMC-7721肝癌细胞株中,用实时荧光定量PCR技术检测MT1E基因的表达情况,用MTT法检测细胞生长增殖情况。结果:(1)芯片结果显示,MT1E基因在肝癌形成后表达明显增加,不同中医治法对其具有不同程度的调控作用,其中健脾益气法的下调作用最明显;(2)成功筛选到MT1E基因RNA干扰的1个有效靶序列,经实时荧光定量PCR技术检测到电转染72h后,该基因的表达水平明显降低;(3)MTT的结果显示,有效干扰靶点电转染144h后细胞的生长增殖得到了明显的抑制。讨论:MT1E基因是中医健脾益气法防治原发性肝癌的有效靶点之一,经生物学功能研究表明,该基因的高表达与肿瘤细胞的恶性增殖有关。 展开更多
关键词 治则治法 mt1E 基因表达 生物芯片 肝癌 RNA干扰
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小鼠金属硫蛋白基因-I在CHO细胞中稳定表达及其在医疗方面的应用
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作者 殷慎敏 李令媛 茹炳根 《北京大学学报(自然科学版)》 CSCD 北大核心 1996年第4期481-487,共7页
将小鼠的MT-Ⅰ基因插入pSV2-dhfr质粒的EcoRI位点,构建了具有SV40和MT双启动子并正向插入MT-Ⅰ基因的表达载体。用改良的磷酸钙/DNA沉淀法将表达载体导入CHO-dhfr-细胞内,用不含次黄嘌呤(H... 将小鼠的MT-Ⅰ基因插入pSV2-dhfr质粒的EcoRI位点,构建了具有SV40和MT双启动子并正向插入MT-Ⅰ基因的表达载体。用改良的磷酸钙/DNA沉淀法将表达载体导入CHO-dhfr-细胞内,用不含次黄嘌呤(H)和胸腺嘧啶(T)的选择培养基筛选出稳定表达MT阳性克隆D-22,经检测106细胞的MT表达量约为1.8μg,D-22细胞对Cd2+浓度抗性较之CHO-dhfr-细胞高14倍。为了研究金属硫蛋白对正常细胞所具有的保护作用,将不同浓度的顺铂分别处理无MT表达的CHO-dhfr-细胞和有MT表达的D-22细胞。实验发现顺铂对D-22细胞和CHO-dhfr-细胞50%生长抑制浓度(IC50)分别是0.145μmol/L和0.04μmol/L。上述研究表明MT对正常细胞有一定的保护作用,因而通过诱导正常细胞提高MT的表达量,同时使用MT阻断剂阻断肿瘤组织的MT合成。 展开更多
关键词 金属硫蛋白 细胞转染 基因表达 CHO细胞 医疗
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饲粮纤维水平对高黎贡山仔猪与杜洛克仔猪生产性能、小肠形态学、小肠黏膜金属硫蛋白1及组织急性期蛋白基因表达影响的比较研究 被引量:2
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作者 李美荃 信爱国 +5 位作者 张春勇 安清聪 王荣蛟 潘洪彬 陈克嶙 郭荣富 《动物营养学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第6期1759-1768,共10页
本试验旨在比较饲粮纤维水平对杜洛克仔猪、高黎贡山仔猪生产性能、小肠形态学、小肠黏膜金属硫蛋白1(MT1)和组织急性期蛋白(APPs)基因表达的影响。选用35日龄高黎贡山断奶仔猪和杜洛克断奶仔猪各24头(公母各占1/2)为研究对象,试验设对... 本试验旨在比较饲粮纤维水平对杜洛克仔猪、高黎贡山仔猪生产性能、小肠形态学、小肠黏膜金属硫蛋白1(MT1)和组织急性期蛋白(APPs)基因表达的影响。选用35日龄高黎贡山断奶仔猪和杜洛克断奶仔猪各24头(公母各占1/2)为研究对象,试验设对照组和试验组(每组12个重复,每个重复1头猪),分别饲喂纤维水平为3.53%和7.04%饲粮,饲养至60日龄结束。考察仔猪生产性能,观察小肠形态学变化,检测十二指肠、空肠、回肠黏膜MT1 mRNA相对表达量以及肝脏、胰脏、脾脏、肾脏、十二指肠、空肠、回肠7种组织中4种APPs[C-反应蛋白(CRP)、触珠蛋白(HP)、α1-酸性糖蛋白(AGP)和血清淀粉样蛋白A(SAA)]mRNA相对表达量。结果表明:饲粮纤维水平为7.04%时,高黎贡山仔猪日增重、日采食量显著高于杜洛克仔猪(P<0.05),料重比显著低于杜洛克仔猪(P<0.05);高黎贡山仔猪十二指肠、空肠、回肠的绒毛长度极显著大于杜洛克仔猪(P<0.01);十二指肠、空肠隐窝深度极显著低于杜洛克仔猪(P<0.01);十二指肠、空肠、回肠绒毛长度/隐窝深度极显著大于杜洛克仔猪(P<0.01)。饲喂纤维水平为7.04%饲粮的高黎贡山仔猪十二指肠黏膜中MT1 mRNA相对表达量极显著高于饲喂纤维水平为3.53%饲粮的高黎贡山仔猪及饲喂纤维水平为7.04%或3.53%饲粮的杜洛克仔猪(P<0.01)。被测组织中均能检测出CRP、HP、AG P、SAA mRNA的表达。饲粮纤维水平为7.04%时,绝大部分组织的APPs mRNA相对表达量均为高黎贡山仔猪显著高于杜洛克仔猪(P<0.05)。上述结果表明,高黎贡山仔猪相对杜洛克仔猪更加适应高纤维水平饲粮;高黎贡山仔猪通过上调MT1及APPs mRNA的表达,增加仔猪的抗病能力,从而改善仔猪的生产性能。 展开更多
关键词 高黎贡山仔猪 杜洛克仔猪 纤维水平 mt1 APPS 基因表达
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水稻新型MT基因的鉴定及其基因家族分子特征分析 被引量:2
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作者 徐玉凤 李一勤 刘进元 《安徽农业科学》 CAS 北大核心 2009年第26期12440-12442,12461,共4页
[目的]探讨水稻MT基因家族各成员在基因结构上的差异及相互间的进化关系。[方法]从经重金属处理的水稻幼苗中分离到3个新的植物MT,对其进行RT-PCR和Northern杂交分析以及水稻和拟南芥MT基因家族的序列比对和进化分析。[结果]RT-PCR和Nor... [目的]探讨水稻MT基因家族各成员在基因结构上的差异及相互间的进化关系。[方法]从经重金属处理的水稻幼苗中分离到3个新的植物MT,对其进行RT-PCR和Northern杂交分析以及水稻和拟南芥MT基因家族的序列比对和进化分析。[结果]RT-PCR和Northern杂交分析表明,水稻中3个MT基因的表达均受重金属的诱导,在幼苗根部进行特异性表达。由水稻和拟南芥MT基因家族的序列比对提出植物MT的新分类方式。水稻I类OsMT基因家族的所有10个成员,定位到6条染色体上。同一类型的OsMT有高度的氨基酸序列保守性,相似的Cys排列方式。新发现的3个OsMT家族在单子叶植物水稻中独有,属4型MT。[结论]水稻和拟南芥MT基因家族进化分析显示,植物MT至少发生在种子植物出现前,而4型MT可能发生于单子叶植物和双子叶植物分离后。 展开更多
关键词 金属硫蛋白 水稻 NORTHERN杂交 基因表达
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BIV在人源细胞MT-4中的活性研究
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作者 王书晖 熊鲲 +7 位作者 杨怡姝 朱义鑫 夏秋雨 陈国敏 王金忠 陈启民 耿运琪 曾毅 《中国病毒学》 CAS CSCD 2002年第4期354-357,共4页
牛免疫缺陷病毒 (Bovineimmunodeficiencyvirus,BIV)在分类上属于反转录病毒科的慢病毒属 ,目前尚未见BIV感染人的报道。为进一步确定BIV对人源细胞的感染性 ,我们用BIV12 7cDNA转染人源细胞MT 4 ,通过RT PCR检测到BIVgag基因的转录 ,IF... 牛免疫缺陷病毒 (Bovineimmunodeficiencyvirus,BIV)在分类上属于反转录病毒科的慢病毒属 ,目前尚未见BIV感染人的报道。为进一步确定BIV对人源细胞的感染性 ,我们用BIV12 7cDNA转染人源细胞MT 4 ,通过RT PCR检测到BIVgag基因的转录 ,IFA则显示BIV12 7的 gag或 gag pol基因在MT 4细胞中得到了翻译 ,而RT值的测定也有力地说明BIV12 7cDNA已经在MT 4细胞内表达出有活性的反转录酶 ,但细胞传代实验表明BIV不能在MT 展开更多
关键词 IBV 人源细胞 牛免疫缺陷病毒 mt-4细胞 基因表达 感染
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锌对小鼠组织MT-1基因转录及MT蛋白表达的影响 被引量:1
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作者 范才 叶飞 鞠桂芝 《白求恩医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第5期478-482,共5页
目的 :研究锌对小鼠各脏器金属硫蛋白 (MT)基因表达的影响。方法 :将小鼠随机分为注锌组和对照组 ,注锌后不同时间或不同剂量锌注射后 16 h断头处死动物 ,取一定量肝、脑、胸腺及脾脏组织制成匀浆 ,采用 Northern blot及 10 9Cd- hem饱... 目的 :研究锌对小鼠各脏器金属硫蛋白 (MT)基因表达的影响。方法 :将小鼠随机分为注锌组和对照组 ,注锌后不同时间或不同剂量锌注射后 16 h断头处死动物 ,取一定量肝、脑、胸腺及脾脏组织制成匀浆 ,采用 Northern blot及 10 9Cd- hem饱和法测定组织 MT基因转录及蛋白表达的变化。结果 :时程研究表明 ,锌 10 mg/ kg腹腔注射后 2 h,小鼠肝脏及脾脏 MT- 1m RNA水平明显升高 ,4 h达峰值 ,分别为对照组的 5 .30和 2 .92倍 ,2 4 h恢复至正常水平 ;其 MT蛋白表达迟于 MT- 1m RNA水平升高 ,注锌后 8~ 2 4 h肝脏及脾脏 MT蛋白含量均比对照组明显升高 (P<0 .0 5或 P<0 .0 0 1) ,2 4 h达峰值 ,72 h恢复至正常水平。注射不同剂量锌后小鼠肝脏及脾脏 MT- 1m RNA水平 (4h)和 MT蛋白含量 (16 h)均呈剂量依赖性增加。小鼠腹腔注射锌 2 .5~ 10 mg/ kg 16 h,小鼠肝脏或脾脏 MT含量或锌5~ 10 mg/ kg注射后脾脏 MT含量均显著高于对照组 (P<0 .0 1或 P<0 .0 0 1)。但注射锌后脑及胸腺MT- 1m RNA水平及 MT蛋白含量均无明显变化经。结论 :锌诱导小鼠组织 MT合成具有明显的组织器官特异性。 展开更多
关键词 金属硫蛋白 基因表达 小鼠 mt蛋白 基因转录
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oleosin-MT融合蛋白在拟南芥中的表达及鉴定 被引量:1
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作者 官丽莉 陈昱 +5 位作者 朱栋 韩怡来 崔琪 李海燕 李校堃 姜潮 《西北农林科技大学学报(自然科学版)》 CSCD 北大核心 2015年第10期155-161,共7页
【目的】获得转金属硫蛋白(MT)基因的拟南芥植株,为利用植物生物反应器规模化生产MT奠定基础。【方法】利用融合PCR方法,扩增拟南芥MT基因与油体蛋白oleosin基因的融合基因,将融合基因克隆至表达载体pOP上,构建重组质粒pOP-oleosin-MT... 【目的】获得转金属硫蛋白(MT)基因的拟南芥植株,为利用植物生物反应器规模化生产MT奠定基础。【方法】利用融合PCR方法,扩增拟南芥MT基因与油体蛋白oleosin基因的融合基因,将融合基因克隆至表达载体pOP上,构建重组质粒pOP-oleosin-MT。采用冻融法将质粒pOP-oleosin-MT转入根癌农杆菌EHA105中,通过农杆菌介导法转化拟南芥,用PCR检测并筛选转基因拟南芥阳性植株,采用SDS-PAGE法检测oleosin-MT融合蛋白的表达,用邻苯三酚自氧化法和结晶紫法测定融合蛋白的体外抗氧化活性。【结果】成功构建了植物油体特异表达载体pOP-oleosin-MT,融合蛋白oleosin-MT在拟南芥种子中成功表达,其分子质量为26ku;总蛋白质量浓度达到50μg/μL时,超氧阴离子的清除率最高,为58.5%;总蛋白质量浓度为10μg/μL时,羟自由基清除率可达69.7%。【结论】成功获得转MT基因的拟南芥株系,并证明融合蛋白oleosin-MT在拟南芥中具有良好的体外抗氧化活性。 展开更多
关键词 金属硫蛋白 拟南芥 油体蛋白 基因表达
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蚯蚓MT基因的克隆及其在大肠杆菌中的表达 被引量:1
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作者 刘兰芳 李继刚 米国桥 《河北农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第1期84-87,92,共5页
为了研究蚯蚓金属硫蛋白的生物学功能,采用RT-PCR方法从镉诱导后的赤子爱胜蚓(Eisenia foetida)中克隆到蚯蚓金属硫蛋白基因cDNA。将其克隆入原核表达载体pET-DsbA中,然后转化至大肠杆菌表达受体菌BL21(DE3)中进行表达。产物经SDS-PAGE... 为了研究蚯蚓金属硫蛋白的生物学功能,采用RT-PCR方法从镉诱导后的赤子爱胜蚓(Eisenia foetida)中克隆到蚯蚓金属硫蛋白基因cDNA。将其克隆入原核表达载体pET-DsbA中,然后转化至大肠杆菌表达受体菌BL21(DE3)中进行表达。产物经SDS-PAGE进行分析,可见约32.4 kD的融合蛋白。Zn2+抗性测定表明含pET-DsbA-efMT的重组菌较含空载体pET-DsbA的对照菌重金属抗性有所提高。 展开更多
关键词 mt基因 克隆 原核表达 抗性
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小鼠肾脏中金属硫蛋白基因诱导表达的时程变化
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作者 逄兵 金泰虞 蒋学之 《中国公共卫生》 CAS CSCD 北大核心 2002年第1期42-44,共3页
目的 探讨重复性注射CdMT诱导小鼠肾脏MT基因表达的时程变化。方法 采用RT -PCR方法半定量检测重复性短时间间隔皮下注射镉金属硫蛋白 (CdMT)染毒后小鼠肾皮质金属硫蛋白 (MT1、MT2 )基因表达的时程变化。结果 自CdMT染毒后 12h ,与... 目的 探讨重复性注射CdMT诱导小鼠肾脏MT基因表达的时程变化。方法 采用RT -PCR方法半定量检测重复性短时间间隔皮下注射镉金属硫蛋白 (CdMT)染毒后小鼠肾皮质金属硫蛋白 (MT1、MT2 )基因表达的时程变化。结果 自CdMT染毒后 12h ,与对照组相比肾皮质MT1基因表达有增强的趋势 ,染毒后 12h及 2 4h ,肾皮质MT2基因表达明显增强 ,其表达高峰均出现在CdMT染毒后 2 4h ,至 16 8hMT1与MT2基因表达均恢复到基准水平。结论 重复性短时间间隔皮下注射CdMT能够诱导小鼠肾皮质MT1及MT2基因的表达 ,并且MT1及MT2基因表达的时程变化基本一致。 展开更多
关键词 镉金属硫蛋白 mt基因表达 RT-PCR 小鼠 肾脏
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激光显微切割技术在肾脏学研究中的应用
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作者 许辉 唐荣 +1 位作者 陶立坚 Margetts J Peter 《中国医师杂志》 CAS 2009年第3期302-304,共3页
目的探讨应用激光显微切割技术(LCM)切割肾小球和肾小管。方法应用LCM采集肾小球和肾小管,real-time PCR(实时PCR,real-time polymerase chain reaction)检测肾小球特异性基因nephrin在肾小球和肾小管的表达。并采用LCM技术采集... 目的探讨应用激光显微切割技术(LCM)切割肾小球和肾小管。方法应用LCM采集肾小球和肾小管,real-time PCR(实时PCR,real-time polymerase chain reaction)检测肾小球特异性基因nephrin在肾小球和肾小管的表达。并采用LCM技术采集肾小球,蛋白质免疫印迹法(Western-blotting)检测Actin基因在肾小球的表达。结果Nephrin在肾小球的表达明显高于肾小管(P〈0.05);Western-blotting能清晰地检测Actin基因在肾小球的表达。结论应用LCM能快速、单一、完整地采集肾小球,其采集的样品质量符合real-time PCR和Western-blotting的要求。 展开更多
关键词 激光 显微切割/方法 膜糖蛋白类/生物合成 肌动蛋白类/生物合成 肾小球 肾小管 基因表达
原文传递
蚯蚓MT基因植物表达载体的构建及烟草转化
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作者 黎亚丽 李继刚 刘兰芳 《天津农业科学》 CAS 2011年第1期50-54,共5页
为了提高植物对重金属的耐受力和富集能力,从而减少重金属对土壤的污染,本研究将克隆的赤子爱胜蚓(Eiseniafoetia)MT基因,装入植物表达载体pPZP111,构建了植物表达载体pPZP-efMT。然后用三亲法将其导入根瘤农杆菌EHA105中,通过叶盘法转... 为了提高植物对重金属的耐受力和富集能力,从而减少重金属对土壤的污染,本研究将克隆的赤子爱胜蚓(Eiseniafoetia)MT基因,装入植物表达载体pPZP111,构建了植物表达载体pPZP-efMT。然后用三亲法将其导入根瘤农杆菌EHA105中,通过叶盘法转化烟草。经PCR检测,efMT基因已整合到烟草基因组中,为进一步验证转基因烟草的抗重金属能力奠定了基础。 展开更多
关键词 mt基因 表达载体构建 根瘤农杆菌 烟草转化
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重组质粒pLMP1-p53mt的构建与表达 被引量:4
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作者 何迎春 田道法 +1 位作者 刘书静 唐发清 《中国医学工程》 2005年第3期243-246,共4页
目的构建含突变型p53基因和EB病毒LMP1基因的双基因真核表达质粒,为研究突变型p53基因和EB病毒LMP1基因在鼻咽癌发生中的相互作用奠定基础。方法通过分子克隆技术,构建含突变型p53基因和EB病毒LMP1基因的真核表达载体pLMP1-p53mt;培养H... 目的构建含突变型p53基因和EB病毒LMP1基因的双基因真核表达质粒,为研究突变型p53基因和EB病毒LMP1基因在鼻咽癌发生中的相互作用奠定基础。方法通过分子克隆技术,构建含突变型p53基因和EB病毒LMP1基因的真核表达载体pLMP1-p53mt;培养HeLa细胞,采用脂质体lipofectAMINETM2000将该质粒转入HeLa细胞中,转染后48h,利用免疫细胞化学法研究突变型p53基因和EB病毒LMP1基因的表达情况。结果重组质粒限制性内切酶酶切及PCR鉴定结果与预期一致;观察到转染细胞中突变型p53基因和EB病毒LMP1基因的高效表达。结论成功构建了含突变型p53基因和EB病毒LMP1基因的双基因真核表达质粒。 展开更多
关键词 突变型P53基因 LMP1基因 基因重组 基因表达 pLMP1-p53mt 转基因
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