鸡RORα真核表达载体的构建及其在MSB1细胞中的表达

1

作者 尤钊 左珂朦 +5 位作者 余祖华 丁轲 王垚垚 刘彤 张梦珂 邱静静 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2018年第7期1791-1797,共7页

为构建鸡维甲酸相关孤核受体α(retinoid acid receptor related orphan receptorα,RORα)的真核表达载体,并检测其在MSB1细胞中的表达效果,本研究参照GenBank中鸡RORα基因序列(登录号:NM_001289887.1)设计特异性引物,从鸡肝脏组织中... 为构建鸡维甲酸相关孤核受体α(retinoid acid receptor related orphan receptorα,RORα)的真核表达载体,并检测其在MSB1细胞中的表达效果,本研究参照GenBank中鸡RORα基因序列(登录号:NM_001289887.1)设计特异性引物,从鸡肝脏组织中提取总RNA,经反转录合成cDNA,以此为模板进行PCR扩增,将扩增的特异性RORα基因片段连接pMD18-T载体,构建克隆载体pMD18-T-RORα,再用SalⅠ和BamHⅠ双酶切克隆载体pMD18-T-RORα和真核表达载体pEGFP-N1,将酶切回收的RORα与pEGFP-N1片段进行连接,构建重组真核表达载体pEGFP-N1-RORα,经PCR、酶切和测序验证准确性后,将其转染MSB1细胞,于转染后48h荧光显微镜下观察EGFP的表达情况,并采用实时荧光定量PCR检测鸡RORα在MSB1细胞中的表达水平。结果显示,从构建的重组质粒pEGFP-N1-RORα中可扩增出大小约1 600bp的特异性片段,用SalⅠ和BamHⅠ可切出大小约4 700和1 600bp的两条带。实时荧光定量PCR结果显示,转染MSB1细胞48h后,与对照组相比,重组真核表达载体转染组中鸡RORα基因mRNA水平显著增加(P<0.05)。表明本试验成功构建了鸡RORα的真核表达载体,该载体可在MSB1细胞中表达鸡RORα,为进一步研究鸡RORα对MSB1细胞增殖的影响奠定基础。 展开更多

关键词 鸡 甲酸相关孤核受体α(RORα)基因 真核表达载体 msb1细胞 表达

下载PDF 职称材料

MDCC-MSB1细胞酵母双杂交cDNA表达文库的构建与鉴定 被引量：5

2

作者 崔鹏鹏 高宏雷 +4 位作者 李凯 高立 高玉龙 祁小乐 王笑梅 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2013年第5期22-25,共4页

提取生长状态良好的MDCC-MSB1细胞的mRNA,以5′端标记有生物素的Oligo dT primer为引物反转录,合成双链后连接Adapter。分级纯化后,通过BP重组反应构建入门文库,滴度为1×105 CFU/mL,文库总容量为1.1×106 CFU,平均插入片段长度... 提取生长状态良好的MDCC-MSB1细胞的mRNA,以5′端标记有生物素的Oligo dT primer为引物反转录,合成双链后连接Adapter。分级纯化后,通过BP重组反应构建入门文库,滴度为1×105 CFU/mL,文库总容量为1.1×106 CFU,平均插入片段长度为1190bp,阳性重组率为100%。入门文库扩增后提取质粒,通过LR重组反应转化为表达文库,平均滴度为1×105 CFU/mL,文库总容量为1.2×106 CFU,平均插入片段长度为1087bp,重组率为100%。构建的表达文库具有较高的质量,为研究鸡传染性贫血病毒的受体及其细胞嗜性奠定了基础。 展开更多

关键词 MDCC-msb1细胞 CDNA文库 鸡传染性贫血 酵母双杂交

下载PDF 职称材料

鸡TGFβ1对MDCC-MSB1细胞增殖、凋亡、迁移与侵袭的影响 被引量：3

3

作者 余祖华 丁轲 +13 位作者 贾艳艳 郁川 何雷 廖成水 李静 张春杰 李银聚 吴庭才 程相朝 门凯凯 张瑾 余祖玲 周子誉 罗俊 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第10期2567-2575,共9页

旨在探讨鸡TGFβ1对MDCC-MSB1细胞增殖、凋亡、迁移与侵袭的影响。作者将构建的鸡TGFβ1过表达载体、干扰表达载体以及相应阴性对照转染MDCC-MSB1细胞,然后检测转染后各组细胞鸡TGFβ1的表达水平、细胞增殖能力、细胞周期与凋亡,细胞的... 旨在探讨鸡TGFβ1对MDCC-MSB1细胞增殖、凋亡、迁移与侵袭的影响。作者将构建的鸡TGFβ1过表达载体、干扰表达载体以及相应阴性对照转染MDCC-MSB1细胞,然后检测转染后各组细胞鸡TGFβ1的表达水平、细胞增殖能力、细胞周期与凋亡,细胞的迁移与侵袭能力。结果显示,与相应阴性对照相比,转染TGFβ1过表达质粒可显著上调MDCC-MSB1细胞的TGFβ1表达水平,显著抑制MDCC-MSB1细胞的增殖,且使G1期细胞增加、S和G2期细胞减少,同时增加细胞凋亡率,降低细胞的迁移与侵袭能力;转染TGFβ1干扰表达质粒可显著下调MDCC-MSB1细胞的TGFβ1表达水平,显著促进MDCC-MSB1细胞的增殖,G1期细胞减少、S和G2期细胞增加,同时降低细胞凋亡率,增加细胞的迁移与侵袭能力。结果表明,鸡TGFβ1可抑制MDCC-MSB1细胞增殖、迁移与侵袭,促进其凋亡。 展开更多

关键词 TGFΒ1 MDCC-msb1细胞 细胞增殖 细胞凋亡 迁移 侵袭

下载PDF 职称材料

gga-miR-155对MDCC-MSB1细胞生物学行为的影响 被引量：3

4

作者 余祖华 丁轲 +11 位作者 郁川 贾艳艳 何雷 廖成水 李静 张春杰 李银聚 吴庭才 程相朝 张梦珂 邱静静 罗俊 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第11期2496-2504,共9页

为了解gga-miR-155对MDCC-MSB1细胞生物学行为的影响,将人工合成的gga-miR-155模拟物、gga-miR-155抑制物以及阴性对照瞬时转染MDCC-MSB1细胞。然后采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测MDCC-MSB1细胞中gga-miR-155的表达水平,CCK-8法检测... 为了解gga-miR-155对MDCC-MSB1细胞生物学行为的影响,将人工合成的gga-miR-155模拟物、gga-miR-155抑制物以及阴性对照瞬时转染MDCC-MSB1细胞。然后采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测MDCC-MSB1细胞中gga-miR-155的表达水平,CCK-8法检测转染后细胞增殖能力的变化,流式细胞术检测MDCC-MSB1细胞的细胞周期与凋亡的变化,Transwell检测MDCC-MSB1细胞的迁移、侵袭能力的变化。结果显示,gga-miR-155模拟物可显著上调MDCC-MSB1细胞gga-miR-155表达水平,促进MDCC-MSB1细胞增殖,细胞G1期细胞减少,S和G2期细胞增加,同时凋亡减少,迁移、侵袭能力增加;gga-miR-155抑制物可显著下调MDCCMSB1细胞gga-miR-155表达水平,抑制MDCC-MSB1细胞增殖,细胞G1期细胞增加、S和G2期细胞减少,同时凋亡增加,迁移、侵袭能力下降。结果表明,gga-miR-155可促进MDCC-MSB1细胞增殖、迁移和侵袭,抑制其凋亡。 展开更多

关键词 gga-miR-155 MDCC-msb1细胞 细胞增殖 细胞凋亡 迁移 侵袭

下载PDF 职称材料

沙冬青生物碱对MDCC-MSB1细胞增殖及细胞线粒体膜电位的影响 被引量：3

5

作者 哈利 张惠英 +1 位作者 贾宁 方梅 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第2期232-236,共5页

采用体外细胞培养技术、噻唑蓝(MTT)还原法、流式细胞技术检测梯度浓度沙冬青总生物碱对体外培养鸡马立克氏病肿瘤HDCC-MSB1细胞株的增殖抑制及对线粒体膜电位的影响。结果显示,沙冬青生物碱可显著抑制HDCC-MSB1细胞增殖,且这种抑制具... 采用体外细胞培养技术、噻唑蓝(MTT)还原法、流式细胞技术检测梯度浓度沙冬青总生物碱对体外培养鸡马立克氏病肿瘤HDCC-MSB1细胞株的增殖抑制及对线粒体膜电位的影响。结果显示,沙冬青生物碱可显著抑制HDCC-MSB1细胞增殖,且这种抑制具有剂量和时间效应关系。经沙冬青生物碱作用的HDCC-MSB1细胞培养样本中有明显的DNA低含量颗粒("亚G1期"峰),细胞周期各时相分布发生改变,细胞增殖在G1被阻滞。细胞线粒体膜电位(△Ψm)明显下降,也呈现出剂量和时间效应关系。结果表明,沙冬青生物碱对HDCC-MSB1细胞增殖有显著抑制效应,且抑制依赖于诱导HDCC-MSB1细胞线粒体膜电位(△Ψm)的下降,并进一步诱导了该细胞的凋亡。 展开更多

关键词 沙冬青生物碱 HDCC-msb1细胞 线粒体膜电位(△Ψm) 增殖抑制

原文传递

三氧化二砷诱导鸡MD肿瘤细胞凋亡及对细胞内钙离子浓度的影响 被引量：3

6

作者 张久丽 王金涛 +1 位作者 肖银霞 徐世文 《中国家禽》 北大核心 2008年第10期21-24,共4页

为探讨As2O3诱导MD肿瘤细胞株凋亡的机制,采用MTT法检测As2O3对MDCC-MSB1的抑制作用,采用荧光显微镜观察细胞形态学变化,DNA Ladder法检测细胞凋亡,Fura-2/AM负载双波长荧光分光光度计检测细胞内游离钙离子浓度([Ca2+]i)变化,观察As2O3... 为探讨As2O3诱导MD肿瘤细胞株凋亡的机制,采用MTT法检测As2O3对MDCC-MSB1的抑制作用,采用荧光显微镜观察细胞形态学变化,DNA Ladder法检测细胞凋亡,Fura-2/AM负载双波长荧光分光光度计检测细胞内游离钙离子浓度([Ca2+]i)变化,观察As2O3对鸡MD肿瘤细胞株MDCC-MSB1的影响。结果显示:As2O3能抑制鸡MD肿瘤细胞株MDCC-MSB1的生长,呈剂量依赖关系(P<0.05或P<0.01);在荧光显微镜下可见As2O3作用后MDCC-MSB1细胞呈现典型的凋亡特征,并出现典型的DNA Ladder,双波长荧光分光光度计检测结果显示:As2O3作用后的MDCC-MSB1细胞内[Ca2+]i升高(P<0.05或P<0.01),呈剂量依赖关系。As2O3能明显抑制鸡MD肿瘤细胞株MDCC-MSB1细胞的生长,并诱导其发生凋亡,细胞内[Ca2+]i升高可能是其诱导细胞凋亡的机制之一。 展开更多

关键词 三氧化二砷 MDCC—msb1细胞 凋亡 钙离子浓度

下载PDF 职称材料

沙冬青生物碱对MDCC-MSB1端粒酶活性和细胞凋亡的影响 被引量：3

7

作者 亢恺 方梅 贾宁 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2011年第4期409-412,共4页

采用单管法一步完成端粒重复序列扩增(TRAP)方法检测沙冬青总生物碱(50、100、150及200μg/mL)对体外培养的鸡马立克氏病肿瘤HDCC-MSB1细胞株作用前后端粒酶活性变化的影响,并采用流式细胞仪检测细胞凋亡和周期的改变。结果显示,沙冬青... 采用单管法一步完成端粒重复序列扩增(TRAP)方法检测沙冬青总生物碱(50、100、150及200μg/mL)对体外培养的鸡马立克氏病肿瘤HDCC-MSB1细胞株作用前后端粒酶活性变化的影响,并采用流式细胞仪检测细胞凋亡和周期的改变。结果显示,沙冬青生物碱可显著抑制HDCC-MSB1细胞的端粒酶活性,且这种抑制有剂量和时间效应关系。同时,经沙冬青生物碱作用的HDCC-MSB1细胞培养样本中有明显的DNA低含量颗粒("亚G1期"峰),细胞周期各时相分布发生改变,细胞增殖在G1被阻滞。上述结果表明,沙冬青生物碱对HDCC-MSB1细胞端粒酶活性具有显著的抑制效果,并进一步诱导了细胞凋亡。 展开更多

关键词 沙冬青生物碱 HDCC-msb1细胞 端粒酶 凋亡

原文传递

硝酸镧对MDCC-MSB1细胞形态及细胞周期的影响 被引量：1

8

作者 林洪金 丁岚峰 +1 位作者 李金龙 徐世文 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2009年第1期70-74,共5页

以体外培养的MDCC-MSB1细胞为研究对象,分别经终浓度为0、8、32、64μg/mL的硝酸镧作用24、48、72 h后,采用台盼蓝染色测定细胞活性,荧光显微镜观察细胞的形态学变化,流式细胞术测定细胞周期。研究了硝酸镧对鸡MD肿瘤细胞株MDCC-MSB1细... 以体外培养的MDCC-MSB1细胞为研究对象,分别经终浓度为0、8、32、64μg/mL的硝酸镧作用24、48、72 h后,采用台盼蓝染色测定细胞活性,荧光显微镜观察细胞的形态学变化,流式细胞术测定细胞周期。研究了硝酸镧对鸡MD肿瘤细胞株MDCC-MSB1细胞形态及细胞周期的影响,进而探讨硝酸镧对MDCC-MSB1细胞的影响机制。结果表明,硝酸镧能够降低MDCC-MSB1的细胞活性,能够引起典型的凋亡形态学变化及细胞周期的改变,并呈现细胞凋亡的细胞型,变化均呈现时间-剂量效应。证实,一定浓度的硝酸镧具有诱导体外培养MDCC-MSB1细胞凋亡的作用。 展开更多

关键词 硝酸镧 MDCC—msb1细胞 细胞周期 细胞凋亡

下载PDF 职称材料

gga-miR-155对MDCC-MSB1细胞转录组的影响

9

作者 余祖华 贾艳艳 +7 位作者 何雷 廖成水 李静 魏颖 陈建 陈松彪 尚珂 丁轲 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第2期663-672,共10页

旨在探讨gga-miR-155对马立克病病毒转化的肿瘤细胞系MDCC-MSB1细胞转录组水平变化的影响。本研究以MDCC-MSB1细胞为研究对象,首先将gga-miR-155模拟物及其阴性对照转染MDCC-MSB1细胞,在转染后48 h提取总RNA,用安捷伦2100核酸检测仪分... 旨在探讨gga-miR-155对马立克病病毒转化的肿瘤细胞系MDCC-MSB1细胞转录组水平变化的影响。本研究以MDCC-MSB1细胞为研究对象,首先将gga-miR-155模拟物及其阴性对照转染MDCC-MSB1细胞,在转染后48 h提取总RNA,用安捷伦2100核酸检测仪分析各组细胞总RNA的完整性,采用RT-qPCR分析gga-miR-155在MDCC-MSB1细胞中的过表达情况;然后利用高通量测序技术,分析gga-miR-155过表达后MDCC-MSB1细胞转录水平的变化,筛选差异表达基因,结合生物信息学分析预测差异表达基因中gga-miR-155靶mRNA。结果显示:制备了gga-miR-155在MDCC-MSB1细胞过表达样本并构建了高通量测序文库;与对照组相比,gga-miR-155过表达组的差异表达基因有87个,其中,上调表达的基因有47个,下调表达的基因有40个;GO与KEGG分析显示,这些差异表达基因显著富集于代谢和蛋白结合过程/信号通路;通过Targetscan和miRada软件预测下调表达基因中鸡BACH1为gga-miR-155的靶mRNA(P<0.05)。综上,过表达gga-miR-155可调控MDCC-MSB1细胞的转录组水平,差异表达基因中BACH1基因可能在gga-miR-155的作用下参与了MDCC-MSB1细胞的代谢过程。 展开更多

关键词 gga-miR-155 马立克病 MDCC-msb1细胞 转录组

下载PDF 职称材料

牛磺酸对MDCC-MSB1细胞端粒酶表达水平及其活性的影响 被引量：1

10

作者 于洋洋 陈涛 +3 位作者 邱淑敏 林淑梅 胡建民 汉丽梅 《饲料工业》 北大核心 2014年第5期17-19,共3页

为探讨牛磺酸对鸡MDCC-MSB1肿瘤细胞系增殖的影响及其可能的作用机理,研究在牛磺酸应用适宜浓度范围内,使用添加0%、0.5%、1.0%、2.0%牛磺酸的RPMI1640培养基,培养MDCCMSB1细胞系,探讨牛磺酸对鸡MD肿瘤细胞chTERT的表达及其端粒酶活性... 为探讨牛磺酸对鸡MDCC-MSB1肿瘤细胞系增殖的影响及其可能的作用机理,研究在牛磺酸应用适宜浓度范围内,使用添加0%、0.5%、1.0%、2.0%牛磺酸的RPMI1640培养基,培养MDCCMSB1细胞系,探讨牛磺酸对鸡MD肿瘤细胞chTERT的表达及其端粒酶活性的影响。结果显示,与对照组相比,各牛磺酸组MD肿瘤细胞chTERT转录水平和端粒酶活性均降低,其中1%、2%牛磺酸浓度组的chTERT转录水平和端粒酶活性显著低于对照组(P<0.05)。牛磺酸对chTERT转录水平及端粒酶活性的下调,可能抑制肿瘤细胞的增殖。 展开更多

关键词 牛磺酸 端粒酶 MDCC—msb1细胞系

下载PDF 职称材料

gga-miRNA-155对MDCC-MSB1细胞增殖的影响

11

作者 余祖华 丁轲 +8 位作者 郁川 贾艳艳 何雷 廖成水 李静 张梦珂 邱静静 张春杰 程相朝 《西北农林科技大学学报（自然科学版）》 CSCD 北大核心 2019年第2期1-6,共6页

【目的】构建gga-miRNA-155前体基因(pre-gga-miRNA-155)真核表达载体,验证gga-miRNA-155在MDCC-MSB1细胞中的表达效果,探究其对MDCC-MSB1细胞增殖的影响。【方法】采用PCR方法从鸡肝脏基因组DNA中扩增gga-miRNA-155前体基因片段pre-gga... 【目的】构建gga-miRNA-155前体基因(pre-gga-miRNA-155)真核表达载体,验证gga-miRNA-155在MDCC-MSB1细胞中的表达效果,探究其对MDCC-MSB1细胞增殖的影响。【方法】采用PCR方法从鸡肝脏基因组DNA中扩增gga-miRNA-155前体基因片段pre-gga-miRNA-155,并将其克隆入pMD-18T载体,构建克隆载体pMD-18T-pre-gga-miRNA-155。用EcoRⅠ和XhoⅠ双酶切pcDNA6.2-GW/EmGFP-miRNA真核表达载体和pMD-18T-pre-gga-miRNA-155,将pre-gga-miRNA-155酶切回收片段与pcDNA6.2-GW/EmGFP-miRNA的酶切回收片段进行连接,构建重组真核表达载体pcDNA6.2-pre-gga-miRNA-155,对其进行PCR、EcoRⅠ和XhoⅠ双酶切及DNA测序鉴定。将重组载体转染到MDCC-MSB1细胞中,应用实时荧光定量PCR (Real-time PCR)检测gga-mi-RNA-155的表达水平,利用MTT法检测细胞增殖能力的变化。【结果】PCR扩增获得了长度约154bp的鸡pre-gga-mi-RNA-155基因。成功构建了pre-gga-miRNA-155的真核表达载体pcDNA6.2-pre-gga-miRNA-155,瞬时转染MD-CC-MSB1细胞后gga-miRNA-155表达水平显著增加,且MDCC-MSB1细胞的体外增殖能力增强。【结论】成功构建了pre-gga-miRNA-155的真核表达载体,其可在MDCC-MSB1细胞中过表达gga-miRNA-155,且可促进MDCC-MSB1细胞的体外增殖。 展开更多

关键词 gga-miRNA-155 表达载体 MDCC-msb1细胞 细胞增殖

下载PDF 职称材料

鸡传染性贫血病病毒在MDCC-MSB1细胞的传代致弱研究

12

作者 李鸿鑫 吴波良 +4 位作者 张新珩 杨瑞杰 蔺文成 陈伟国 谢青梅 《中国家禽》 北大核心 2017年第15期26-29,共4页

为研究鸡传染性贫血病(Chicken infectious anemia,CIA)减毒活疫苗,试验将鸡传染性贫血病病毒(CIAV)在鸡淋巴细胞MDCC-MSB1上进行37℃和40℃传代致弱。结果显示:40℃条件下传至60代和37℃下传至90代,病毒的VP1氨基酸分别有2个和3个突变... 为研究鸡传染性贫血病(Chicken infectious anemia,CIA)减毒活疫苗,试验将鸡传染性贫血病病毒(CIAV)在鸡淋巴细胞MDCC-MSB1上进行37℃和40℃传代致弱。结果显示:40℃条件下传至60代和37℃下传至90代,病毒的VP1氨基酸分别有2个和3个突变,两种条件下有2个突变是在同一位置;VP2和VP3很稳定,在试验中未发生氨基酸突变;致病性试验发现,突变毒株仍具有致病性,但有降低的趋势。试验表明,鸡淋巴细胞传代CIAV可以引发包含中和抗原表位的VP1突变,且提高温度能促进变异速度,为进一步研究CIAV的变异特征、弱毒疫苗研发提供了参考依据。 展开更多

关键词 鸡传染性贫血病病毒 MDCC-msb1细胞 传代致弱 疫苗

下载PDF 职称材料

沙冬青生物碱对MDCC-MSB1细胞增殖抑制与诱导凋亡的影响

13

作者 哈利 贾宁 方梅 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2011年第11期1198-1201,共4页

采用体外细胞培养技术、噻唑蓝(MTT)还原法、透射电子显微镜观察及流式细胞技术检测梯度浓度沙冬青总生物碱对体外培养鸡马立克氏病肿瘤HDCC-MSB1细胞的增殖抑制及诱导凋亡的作用。结果显示,沙冬青生物碱可显著抑制HDCC-MSB1细胞增殖,... 采用体外细胞培养技术、噻唑蓝(MTT)还原法、透射电子显微镜观察及流式细胞技术检测梯度浓度沙冬青总生物碱对体外培养鸡马立克氏病肿瘤HDCC-MSB1细胞的增殖抑制及诱导凋亡的作用。结果显示,沙冬青生物碱可显著抑制HDCC-MSB1细胞增殖,且这种抑制具有剂量和时间效应关系。经沙冬青生物碱作用的HDCC-MSB1细胞培养样本中有明显的DNA低含量颗粒("亚G1期"峰),细胞周期各时相分布发生改变,细胞增殖在G1被阻滞,并进一步诱导HDCC-MSB1细胞凋亡。电子显微镜观察也表明,经沙冬青生物碱作用的HDCC-MSB1细胞培养样本中,大量HDCC-MSB1细胞凋亡。结果表明,沙冬青生物碱对HDCC-MSB1细胞增殖有显著抑制效应,其抑制机理为诱导HDCC-MSB1细胞凋亡。 展开更多

关键词 沙冬青生物碱 HDCC-msb1细胞 增殖抑制 诱导凋亡

原文传递

人参皂苷Rh_2对MSB-1细胞的增殖抑制作用及其机理 被引量：5

14

作者 王帅玉 付本懂 +6 位作者 申海清 周晓翠 陈傲第 单提新 贺常亮 许兴业 韦旭斌 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第8期1052-1054,1061,共4页

以不同质量浓度的人参皂苷Rh2与马立克氏病肿瘤细胞系MSB-1细胞共同作用,利用改良MTT法测定了人参皂苷Rh2对MSB-l细胞的增殖抑制作用,并通过流式细胞术、荧光检测和电镜形态学观察等方法探讨其抑制机理。结果显示:人参皂苷Rh2对MSB-l细... 以不同质量浓度的人参皂苷Rh2与马立克氏病肿瘤细胞系MSB-1细胞共同作用,利用改良MTT法测定了人参皂苷Rh2对MSB-l细胞的增殖抑制作用,并通过流式细胞术、荧光检测和电镜形态学观察等方法探讨其抑制机理。结果显示:人参皂苷Rh2对MSB-l细胞的增殖存在抑制作用,并呈剂量依赖性,人参皂苷Rh2与MSB-1细胞培养72 h后的半数抑制质量浓度为0.65 mg/L;流式细胞术测定表明,人参皂苷Rh2可阻滞MSB-1细胞于S期;荧光检测和透射电镜观察表明,人参皂苷Rh2可以诱导部分MSB-1细胞发生凋亡。 展开更多

关键词 人参皂苷RH2 马立克氏病 msb-1细胞 细胞凋亡

下载PDF 职称材料

人参总皂苷对MSB-1细胞的增殖抑制作用及其机理初探 被引量：2

15

作者 付本懂 许小琴 +4 位作者 申海清 王春元 王鲁 褚秀玲 韦旭斌 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第6期471-475,共5页

以不同浓度的人参总皂苷与马立克氏病肿瘤细胞系MSB-1细胞共同作用,利用改良MTT法测定了人参总皂苷对MSB-1细胞的增殖抑制作用,并通过琼脂糖凝胶电泳、流式细胞术、荧光检测和电镜形态学观察等方法探讨其抑制机理。实验结果表明:人参总... 以不同浓度的人参总皂苷与马立克氏病肿瘤细胞系MSB-1细胞共同作用,利用改良MTT法测定了人参总皂苷对MSB-1细胞的增殖抑制作用,并通过琼脂糖凝胶电泳、流式细胞术、荧光检测和电镜形态学观察等方法探讨其抑制机理。实验结果表明:人参总皂苷对MSB-1细胞的增殖存在抑制作用,并呈剂量-时间依赖性,人参总皂苷与MSB-1细胞培养72 h后的半数抑制浓度为:340.41μg/mL,其95%可信限为:(340.41±33.7)μg/mL。流式细胞术测定表明,人参总皂苷抑制了MSB-1细胞DNA的合成。琼脂糖凝胶电泳分析、荧光检测和透射电镜观察表明,人参总皂苷可以诱导部分MSB-1细胞发生凋亡。 展开更多

关键词 人参总皂苷 马立克氏病 msb-1细胞 细胞凋亡

下载PDF 职称材料

马立克病肿瘤组织内HSP60表达及生物学作用初步研究

16

作者 王俊丽 李玉保 +6 位作者 段世豪 路建彪 丁飞 司振书 李旭勇 贾克金 张云飞 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第12期2529-2536,共8页

本试验旨在研究HSP60与马立克病肿瘤发生、发展之间的相关性。通过人工感染,建立鸡马立克病肿瘤模型,定期剖杀,利用病理组织学和免疫组织化学方法,检测HSP60与肿瘤细胞定位之间的相关性;设计HSP60 RNA干扰序列,构建重组慢病毒,转染MSB-... 本试验旨在研究HSP60与马立克病肿瘤发生、发展之间的相关性。通过人工感染,建立鸡马立克病肿瘤模型,定期剖杀,利用病理组织学和免疫组织化学方法,检测HSP60与肿瘤细胞定位之间的相关性;设计HSP60 RNA干扰序列,构建重组慢病毒,转染MSB-1细胞,利用流式细胞技术,探索降低HSP60转录表达对MSB-1细胞凋亡水平的影响。结果显示:HSP60在肿瘤细胞的细胞质内强表达;成功构建了HSP60 RNA干扰慢病毒,且5147序列干扰效果最佳;5147序列慢病毒转染48 h时,与对照序列组和空白对照组相比,HSP60转录、表达水平极显著降低(P<0.01),MSB-1细胞凋亡水平极显著升高(P<0.01)。在马立克病肿瘤发生、发展过程中,HSP60组织细胞定位与肿瘤细胞具有明显的相关性,降低HSP60表达水平能够导致MSB-1细胞凋亡升高,说明HSP60对肿瘤细胞的存活具有重要的生物学作用。 展开更多

关键词 RNA干扰 免疫组织化学 热休克蛋白60 msb-1细胞 细胞凋亡

下载PDF 职称材料

MDCC-MSB-1细胞增殖抑制机制研究进展

17

作者 张佩琪 李真诚 +3 位作者 王宜平 岑美珍 刘进辉 纪春晓 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第7期1445-1450,共6页

MDCC-MSB-1细胞是鸡马立克氏病毒（MDV）诱导产生的T淋巴细胞增生性肿瘤细胞系之一，已被作为模型广泛应用于抗肿瘤药物的研究中。本文旨在探讨与MDCC—MSB-1细胞周期被阻滞在G1期的调控因子作用机制，以及诱导MDCC-MSB-1细胞凋亡的信... MDCC-MSB-1细胞是鸡马立克氏病毒（MDV）诱导产生的T淋巴细胞增生性肿瘤细胞系之一，已被作为模型广泛应用于抗肿瘤药物的研究中。本文旨在探讨与MDCC—MSB-1细胞周期被阻滞在G1期的调控因子作用机制，以及诱导MDCC-MSB-1细胞凋亡的信号传导通路。MDV所致瘤细胞增殖抑制机制的深入研究，为人类肿瘤病的治疗研究提供良好的动物模型展望，也为新型药物的开发开辟出新的思路。 展开更多

关键词 MDCC-msb-1细胞 细胞周期 凋亡通路

原文传递

二烯丙基二硫化物对MDCC-MSB-1细胞凋亡的影响

18

作者 张佩琪 周鹏飞 +3 位作者 叶正钦 刘进辉 王宜平 纪春晓 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第7期1354-1358,1406,共6页

以50,100,150μmol/L二烯丙基二硫化物(diallyl disulfide, DADS)处理MDCC-MSB-1细胞24 h后,利用吖啶橙(acridine orange, AO)染色法对细胞凋亡的形态进行初步观察;Annexin V-FITC/PI双染法检测细胞凋亡率;JC-1染色法检测线粒体膜电位... 以50,100,150μmol/L二烯丙基二硫化物(diallyl disulfide, DADS)处理MDCC-MSB-1细胞24 h后,利用吖啶橙(acridine orange, AO)染色法对细胞凋亡的形态进行初步观察;Annexin V-FITC/PI双染法检测细胞凋亡率;JC-1染色法检测线粒体膜电位的变化;Western blot检测P53的蛋白表达;蛋白活性检测试剂盒检测Caspase-3和Caspase-9的活性变化;Q-PCR检测Caspase-3和Caspase-9 mRNA的表达情况。结果显示,与空白组相比,DADS诱导MDCC-MSB-1细胞发生凋亡形态变化,增加细胞凋亡率,同时诱导p53蛋白表达量和线粒体膜电位下降,上调Caspase-3和Caspase-9基因表达水平和蛋白活性。 展开更多

关键词 二烯丙基二硫化物 鸡马立克病 MDCC-msb-1细胞 线粒体凋亡途径

原文传递