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内嗅皮层-海马投射末梢基于光纤技术的钙活动记录 被引量:1
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作者 卢建 金文均 +1 位作者 覃涵 谌小维 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第11期1229-1234,共6页
目的运用光纤探测系统建立轴突末梢Ca^(2+)活动的光学记录方法,并初步探究麻醉和自由活动状态下小鼠皮层-海马通路的活动规律。方法向8~10周龄雄性C57BL/6小鼠内侧内嗅皮层(medial entorhinal cortex,MEC)浅层(Ⅱ层)注射神经元特异并携... 目的运用光纤探测系统建立轴突末梢Ca^(2+)活动的光学记录方法,并初步探究麻醉和自由活动状态下小鼠皮层-海马通路的活动规律。方法向8~10周龄雄性C57BL/6小鼠内侧内嗅皮层(medial entorhinal cortex,MEC)浅层(Ⅱ层)注射神经元特异并携带Ca^(2+)荧光指示蛋白基因的腺相关病毒(AAV-Syn-GCa MP5G),继续饲养1个月后将光纤植入到海马齿状回(dentate gyrus,DG)分子层上沿,记录麻醉和自由活动状态下轴突末梢的Ca^(2+)活动;相同方法记录AAV-Syn-增强绿色荧光蛋白(e GFP)小鼠作为对照。向MEC浅层注射河豚毒素(tetrodotoxin,TTX),同步记录轴突末梢Ca^(2+)活动,注射人工脑脊液(artificial cerebrospinal fluid,ACSF)作为对照。结果内嗅皮层Ⅱ层神经元投射至海马DG的轴突纤维密集表达GCa MP5G。在麻醉和自由活动的小鼠中均能稳定记录到轴突末梢Ca^(2+)信号,e GFP对照小鼠未记录到类似Ca^(2+)信号。MEC浅层注射TTX后,轴突末梢Ca^(2+)信号100 s内最高幅度降至注射前的12.6%。与ACSF比较,TTX对轴突末梢Ca^(2+)活动有明显阻断作用(P<0.01)。内嗅皮层投射至DG的轴突末梢处Ca^(2+)活动在麻醉状态下以一定节律同步发放,自由活动状态下则表现为无节律非同步发放,且Ca^(2+)信号幅度有所增强。结论通过GCa MP5G特异标记了内侧内嗅皮层Ⅱ层投射至DG的轴突纤维,并运用光纤探测系统建立了长远投射轴突末梢Ca^(2+)活动的光学记录方法。与麻醉状态相比,自由活动状态下内嗅-海马通路呈现更强的Ca^(2+)活动发放。 展开更多
关键词 内嗅皮层 海马 光纤 钙活动 轴突末梢 gCA mp5g
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