目的通过对人视网膜母细胞瘤(RB)肿瘤干细胞(CSCs)多药耐药性的研究,探讨microRNA对肿瘤干细胞多药耐药性的影响。方法通过流式细胞仪分选Y79细胞中的ABCG2(+)与ABCG2(-)细胞,作为ABCG2(+)组与ABCG2(-)组;采用MTT比色实验比较ABCG2(+)组...目的通过对人视网膜母细胞瘤(RB)肿瘤干细胞(CSCs)多药耐药性的研究,探讨microRNA对肿瘤干细胞多药耐药性的影响。方法通过流式细胞仪分选Y79细胞中的ABCG2(+)与ABCG2(-)细胞,作为ABCG2(+)组与ABCG2(-)组;采用MTT比色实验比较ABCG2(+)组与ABCG2(-)组对抗肿瘤药物长春新碱、依托泊苷和卡铂的敏感性,得到候选microRNA。从标本库中选择RB组织切片,行LNA-原位杂交,并根据耐药性分为高耐药性组与低耐药性组,通过Real time PCR观察候选microRNA在两组中表达差异。结果 1分选阳性率:ABCG2(+)分选后(91.7%)显著高于分选前(5.7%),差异有统计学意义(P<0.05)。2两组耐药性比较:从各个浓度水平上比较,ABCG2(+)细胞的耐药性明显高于ABCG2(-)细胞,差异有统计学意义(P<0.05)。3分选细胞的凋亡率和细胞内药物蓄积比较:ABCG2(+)组的凋亡率明显低于ABCG2(-)组,差异有统计学意义(P<0.05);ABCG2(+)组的药物蓄积明显低于ABCG2(-)组,差异有统计学意义(P<0.05)。4候选microRNA在不同耐药性RB切片中的表达:高耐药组的microRNA表达率(39.3%)明显高于低耐药组的microRNA表达率低(5.2%),差异有统计学意义(P<0.05)。结论 ABCG2(+)是Y79细胞系中的耐药细胞群,microRNA与肿瘤干细胞的侵袭性和耐药性密切相关,调控microRNA可以抑制肿瘤干细胞的耐药性,提高其对化疗的敏感性。展开更多
文摘目的通过对人视网膜母细胞瘤(RB)肿瘤干细胞(CSCs)多药耐药性的研究,探讨microRNA对肿瘤干细胞多药耐药性的影响。方法通过流式细胞仪分选Y79细胞中的ABCG2(+)与ABCG2(-)细胞,作为ABCG2(+)组与ABCG2(-)组;采用MTT比色实验比较ABCG2(+)组与ABCG2(-)组对抗肿瘤药物长春新碱、依托泊苷和卡铂的敏感性,得到候选microRNA。从标本库中选择RB组织切片,行LNA-原位杂交,并根据耐药性分为高耐药性组与低耐药性组,通过Real time PCR观察候选microRNA在两组中表达差异。结果 1分选阳性率:ABCG2(+)分选后(91.7%)显著高于分选前(5.7%),差异有统计学意义(P<0.05)。2两组耐药性比较:从各个浓度水平上比较,ABCG2(+)细胞的耐药性明显高于ABCG2(-)细胞,差异有统计学意义(P<0.05)。3分选细胞的凋亡率和细胞内药物蓄积比较:ABCG2(+)组的凋亡率明显低于ABCG2(-)组,差异有统计学意义(P<0.05);ABCG2(+)组的药物蓄积明显低于ABCG2(-)组,差异有统计学意义(P<0.05)。4候选microRNA在不同耐药性RB切片中的表达:高耐药组的microRNA表达率(39.3%)明显高于低耐药组的microRNA表达率低(5.2%),差异有统计学意义(P<0.05)。结论 ABCG2(+)是Y79细胞系中的耐药细胞群,microRNA与肿瘤干细胞的侵袭性和耐药性密切相关,调控microRNA可以抑制肿瘤干细胞的耐药性,提高其对化疗的敏感性。