长链非编码RNA NORAD过表达通过靶向调控miR-132-5p/Bcl-2改善MPP^(+)诱导的帕金森细胞模型损伤实验研究 被引量：3

1

作者 高继英 石代乐 王刚 《陕西医学杂志》 CAS 2023年第4期363-368,384,共7页

目的:探讨长链非编码RNA(lncRNA)NORAD对1-甲基-4-苯基吡啶离子(MPP^(+))诱导的帕金森(PD)细胞模型损伤的影响,及其潜在分子作用机制。方法:3 mmol/L的MPP^(+)处理MN9D细胞建立PD细胞损伤模型,MN9D细胞转染lncRNA NORAD过表达载体、miR-... 目的:探讨长链非编码RNA(lncRNA)NORAD对1-甲基-4-苯基吡啶离子(MPP^(+))诱导的帕金森(PD)细胞模型损伤的影响,及其潜在分子作用机制。方法:3 mmol/L的MPP^(+)处理MN9D细胞建立PD细胞损伤模型,MN9D细胞转染lncRNA NORAD过表达载体、miR-132-5p mimics、miR-132-5p inhibitor、Bcl-2 siRNA及相应对照,qRT-PCR检测细胞中lncRNA NORAD、miR-132-5p和Bcl-2 mRNA的表达,Western blot检测细胞中Bcl-2蛋白表达,流式细胞仪检测细胞凋亡,试剂盒法检测细胞培养液中丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素1β(IL-1β)的水平,双荧光素酶实验验证lncRNA NORAD、miR-132-5p和Bcl-2之间的靶向关系。结果:MPP^(+)诱导MN9D细胞中lncRNA NORAD、Bcl-2 mRNA和蛋白表达降低,诱导细胞中miR-132-5p表达升高;过表达lncRNA NORAD能够减轻MPP^(+)诱导的MN9D细胞凋亡、氧化应激和炎症,保护MN9D细胞;lncRNA NORAD与miR-132-5p靶向结合,过表达lncRNA NORAD抑制MN9D细胞中miR-132-5p的表达;miR-132-5p mimics共转染能够逆转lncRNA NORAD过表达对MPP^(+)诱导的MN9D细胞损伤的保护作用;miR-132-5p与Bcl-2的3’UTR靶向结合,转染miR-132-5p inhibitor下调MN9D细胞中miR-132-5p的表达,而促进Bcl-2 mRNA和蛋白表达;转染miR-132-5p inhibitor能够减轻MPP^(+)诱导的MN9D细胞凋亡、氧化应激和炎症,保护MN9D细胞,而共转染Bcl-2 siRNA则能逆转miR-132-5p inhibitor对MPP^(+)诱导的MN9D细胞损伤的保护作用。结论:lncRNA NORAD过表达可通过靶向调控miR-132-5p/Bcl-2,减轻MPP^(+)诱导的MN9D细胞凋亡、氧化应激和炎症,对MN9D细胞损伤具有保护作用。 展开更多

关键词 帕金森病 mn9D细胞 长链非编码RNA NORAD 细胞凋亡 氧化应激 炎症

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毛蕊花糖苷抑制Erastin诱导的多巴胺能神经细胞系MN9D细胞铁死亡

2

作者 张明洋 杨新玲 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2025年第7期1408-1413,共6页

背景:近年越来越多的研究证实多巴胺能神经元细胞铁死亡参与了帕金森病的发病,毛蕊花糖苷目前被证实具有抗氧化、抗炎和神经保护作用。目的:探讨毛蕊花糖苷对Erastin诱导的MN9D细胞铁死亡的保护效果及作用机制。方法:以MN9D细胞为研究对... 背景:近年越来越多的研究证实多巴胺能神经元细胞铁死亡参与了帕金森病的发病,毛蕊花糖苷目前被证实具有抗氧化、抗炎和神经保护作用。目的:探讨毛蕊花糖苷对Erastin诱导的MN9D细胞铁死亡的保护效果及作用机制。方法:以MN9D细胞为研究对象,分为对照组、模型组(20μmol/L Erastin组)、Erastin+1μg/mL毛蕊花糖苷组、Erastin+5μg/mL毛蕊花糖苷组、Erastin+10μg/mL毛蕊花糖苷组。MN9D细胞在CO_(2)恒温培养箱中培养24 h,然后用不同质量浓度毛蕊花糖苷预处理8 h,再加入20μmol/L Erastin诱导24 h后,采用ELISA法检测还原型谷胱甘肽、超氧化物歧化酶、总铁离子、丙二醛水平,免疫组织化学法检测酪氨酸羟化酶的表达,Western blot法检测酪氨酸羟化酶、核因子红细胞-2相关因子2、血红素加氧酶1、谷胱甘肽过氧化物酶4蛋白表达。结果与结论:(1)与对照组相比,模型组还原型谷胱甘肽、超氧化物歧化酶水平明显减少(P<0.05),丙二醛和总铁离子水平明显增加(P<0.05);与模型组相比,毛蕊花糖苷1,5,10μg/mL组还原型谷胱甘肽、超氧化物歧化酶水平明显增加(P<0.05),丙二醛和总铁离子水平明减少(P<0.05);(2)与对照组相比,模型组酪氨酸羟化酶阳性细胞面积明显减少(P<0.05);与模型组相比,毛蕊花糖苷1,5,10μg/mL组酪氨酸羟化酶阳性细胞面积明显增加(P<0.05);(3)与对照组相比,模型组酪氨酸羟化酶、核因子红细胞-2相关因子2、血红素加氧酶1、谷胱甘肽过氧化物酶4的蛋白表达明显减少(P<0.05);与模型组相比,毛蕊花糖苷1,5,10μg/mL组酪氨酸羟化酶、核因子红细胞-2相关因子2、血红素加氧酶1、谷胱甘肽过氧化物酶4的蛋白表达明显增加(P<0.05)。结果提示:毛蕊花糖苷对Erastin诱导的MN9D细胞铁死亡具有明显的抑制作用,其机制可能通过作用于核因子红细胞-2相关因子2/血红素加氧酶1/谷胱甘肽过氧化物酶4通路实现的。 展开更多

关键词 毛蕊花糖苷 Erastin mn9D细胞 铁死亡 核因子红细胞-2相关因子2 血红素加氧酶1 谷胱甘肽过氧化物酶4

褪黑素通过上调泛醌―细胞色素C还原酶核心蛋白1抑制MPP^(+)诱导的MN9D细胞凋亡和线粒体损伤

3

作者 李傲涵 曾炼 +4 位作者 刘颖 张振 胡鹏超 丁旭东 罗辉宇 《国际神经病学神经外科学杂志》 2023年第3期26-31,共6页

目的探讨褪黑素(melatonin,MT)在1-甲基-4-苯基-吡啶离子(1-methyl-4-phenylpyridinium ion,MPP^(+))诱导的帕金森病体外模型中的作用及分子机制。方法将MN9D细胞分为对照组、MPP^(+)组、MT组、治疗组。采用细胞计数试剂盒8检测MT和MPP^... 目的探讨褪黑素(melatonin,MT)在1-甲基-4-苯基-吡啶离子(1-methyl-4-phenylpyridinium ion,MPP^(+))诱导的帕金森病体外模型中的作用及分子机制。方法将MN9D细胞分为对照组、MPP^(+)组、MT组、治疗组。采用细胞计数试剂盒8检测MT和MPP^(+)对细胞活力的影响;采用线粒体膜电位检测试剂盒(JC-1)评价线粒体功能;Hoechst/PI双染法检测细胞凋亡;通过免疫荧光蛋白质印迹法(Western blotting)检测凋亡相关蛋白[Cleaved-Caspase 3和细胞色素C(cytochrome C,CytC)]以及泛醌―细胞色素C还原酶核心蛋白1(ubiquinol-cytochrome C reductase core protein 1,UQCRC1)蛋白的表达;采用干扰RNA技术沉默MN9D细胞中UQCRC1的表达,然后采用Western blotting检测凋亡相关蛋白表达。结果MT可以减轻MPP^(+)诱导的细胞活力下降(P<0.05);恢复MPP^(+)造成的线粒体膜电位下降(P<0.05);减少MPP^(+)诱导的凋亡细胞数量(P<0.05);抑制凋亡蛋白(CytC和Cleaved-Caspase3)的表达(P<0.05);上调UQCRC1的表达(P<0.05)。沉默UQCRC1后,MT组和治疗组的UQCRC1表达均下降(P<0.05);MT对MPP^(+)诱导细胞凋亡的保护作用下降(P<0.05);凋亡蛋白(CytC和Cleaved-Caspase3)的表达增加(P<0.05)。结论MT对MPP^(+)诱导的多巴胺能神经元损伤具有保护作用,其机制可能是通过上调UQCRC1抑制神经元凋亡。 展开更多

关键词 帕金森病 褪黑素 泛醌―细胞色素C还原酶核心蛋白1 细胞凋亡 mn9D细胞

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Nurr1在MN9D细胞中的过表达及其对酪氨酸羟化酶的影响 被引量：2

4

作者 杨秋慧 杨慧 +2 位作者 赵焕英 姜传涛 徐群渊 《中国神经科学杂志》 CSCD 2003年第3期137-141,共5页

目的 :观察MN9D细胞中Nurr1的表达和分布及Nurr1过表达对酪氨酸羟化酶的影响。 方法 :应用高压液相色谱、免疫细胞化学、转基因、Westernblot和Northernblot等方法检测了MN9D细胞中多巴胺及其代谢物的水平和Nurr1蛋白在细胞中的分布 ,... 目的 :观察MN9D细胞中Nurr1的表达和分布及Nurr1过表达对酪氨酸羟化酶的影响。 方法 :应用高压液相色谱、免疫细胞化学、转基因、Westernblot和Northernblot等方法检测了MN9D细胞中多巴胺及其代谢物的水平和Nurr1蛋白在细胞中的分布 ,建立了过表达Nurr1的细胞株并观察了Nurr1过表达对TH基因的影响。结果 :MN9D细胞裂解液中含有大量多巴胺及其代谢物 ;Nurr1蛋白主要分布在MN9D细胞的胞质中 ,尤以核周最多 ;MN9D细胞中有Nurr1的mRNA存在和蛋白质的表达 ;过表达Nurr1的MN9D细胞A1株酪氨酸羟化酶表达增高。结论 :Nurr1与多巴胺能神经元发育有关 ,有可能用于帕金森病的基因治疗。 展开更多

关键词 NURRL mn9D细胞 酪氨酸羟化酶 基因表达 检测 帕金森病 基因治疗

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FKBP38可调控多巴胺能神经元的凋亡

5

作者 刘静 谢彩婷 +4 位作者 封文斌 赵文卓 李芳红 吴晓丽 赵子建 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第1期90-96,共7页

目的研究FKBP38在鱼藤酮诱导的帕金森病(Parkinson’s disease PD)细胞模型中抑制凋亡的作用。方法体内实验:构建MPTP所致的PD体内模型,检测PD小鼠脑中α-synuclein、TH和FKBP38的表达。体外实验:使用鱼藤酮刺激多巴胺能神经元MN9D细胞... 目的研究FKBP38在鱼藤酮诱导的帕金森病(Parkinson’s disease PD)细胞模型中抑制凋亡的作用。方法体内实验:构建MPTP所致的PD体内模型,检测PD小鼠脑中α-synuclein、TH和FKBP38的表达。体外实验:使用鱼藤酮刺激多巴胺能神经元MN9D细胞构建PD体外模型;采用Western blot检测PD体外模型中α-synuclein、TH、Tom20和FKBP38的表达水平;将FKBP38慢病毒转入MN9D细胞构建稳定过表达及敲减FKBP38的细胞株;采用CCK-8法检测过表达及敲减FKBP38的细胞在受到鱼藤酮刺激后的细胞活力;通过Western blot检测PD细胞模型中抗凋亡蛋白Bcl-2和凋亡蛋白Bax的表达水平。结果在PD体内外模型中,FKBP38蛋白表达水平均明显地下调(P<0.01)。而敲减FKBP38后加剧了鱼藤酮造成的多巴胺能神经元细胞活力下降(P<0.05),而过表达FKBP38却可明显地改善鱼藤酮造成的多巴胺能神经元细胞活力下降(P<0.05),并且,Western blot结果表明,过表达FKBP38可明显地上调PD多巴胺能神经元中抗凋亡蛋白Bcl-2的表达水平及升高Bcl-2/Bax的比值(P<0.05)。结论在PD细胞模型中,调控FKBP38可改善多巴胺能神经元凋亡。 展开更多

关键词 帕金森病 鱼藤酮 mn9D细胞 细胞活力 凋亡 FKBP38

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α-突触核蛋白各结构域与MN9D细胞线粒体的关系 被引量：2

6

作者 张韬 赵焕英 +1 位作者 赵春礼 杨慧 《解剖学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第5期626-630,共5页

目的探讨α-突触核蛋白（α-synuclein）各结构域与MN9D细胞线粒体的关系。方法用PCR方法获得α-synuclein/1~65（N），α-synuclein/61~95（A）及α-synuclein/96~140（C）基因片段，克隆入真核表达质粒pLNCX2，经测序正确后以脂质体转... 目的探讨α-突触核蛋白（α-synuclein）各结构域与MN9D细胞线粒体的关系。方法用PCR方法获得α-synuclein/1~65（N），α-synuclein/61~95（A）及α-synuclein/96~140（C）基因片段，克隆入真核表达质粒pLNCX2，经测序正确后以脂质体转染PT-67细胞，挑取单克隆并扩增，收集上清感染MN9D细胞，分别用Real Time PCR检测细胞基因表达水平，免疫组织化学染色检测蛋白表达，激光扫描共焦显微镜检测蛋白与线粒体共定位，流式细胞术检测细胞状态及线粒体膜电位状态。结果成功构建了pLNCX2/N、pLNCX2/NAC及pLNCX2/C基因片段的重组真核表达质粒，获得了可稳定表达α-synuclein各基因片段的MN9D细胞株。通过激光扫描共焦显微镜观察，可见α-synuclein/N端与线粒体存在共定位关系；α-synuclein/NAC主要在核内聚集表达；α-synuclein/C端在胞质和胞核内均有表达。JC1染色流式细胞术检测显示，过表达α-synuclein/N实验组细胞线粒体膜电位降低。结论α-synuclein的N端可能定位于线粒体，并参与调节线粒体功能；α-synuclein/NAC虽具有疏水性但却能穿过核膜，聚集在核仁周围；α-synuclein的C端定位于胞质和核内可能参与多种细胞功能。 展开更多

关键词 α-突触核蛋白片段 线粒体 帕金森病 流式细胞术 免疫组织化学 mn9D细胞

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Ebselen 抑制 ONOO^- 对神经元[Ca^(2+)]_i 的影响 被引量：3

7

作者 易永 蔡东 +1 位作者 瞿安连 黄开勋 《华中理工大学学报》 CSCD 北大核心 1998年第5期20-23,共4页

Ｆｕｒａ－２显微荧光测钙技术研究发现，过氧亚硝基阴离子（ＯＮＯＯ－）作用于ＭＮ９Ｄ细胞，数ｓ内即可导致其胞内游离钙离子浓度（［Ｃａ２＋］ｉ）的急剧升高．胞外液换为无钙液或向胞外液中加入硝苯吡啶（Ｎｉｆｅｄｉｐ－ｉｎｅ... Ｆｕｒａ－２显微荧光测钙技术研究发现，过氧亚硝基阴离子（ＯＮＯＯ－）作用于ＭＮ９Ｄ细胞，数ｓ内即可导致其胞内游离钙离子浓度（［Ｃａ２＋］ｉ）的急剧升高．胞外液换为无钙液或向胞外液中加入硝苯吡啶（Ｎｉｆｅｄｉｐ－ｉｎｅ）、二硫苏糖醇（ＤＴＴ）均可抑制ＯＮＯＯ－对［Ｃａ２＋］ｉ的影响，提示Ｌ－型钙通道的激活是ＯＮＯＯ－引起［Ｃａ２＋］ｉ升高的主要原因，ＯＮＯＯ－的这种作用可能与其氧化特性有关．Ｅｂｓｅｌｅｎ（２－苯基－１，２－苯并异硒唑－３（２Ｈ）酮）明显抑制ＯＮＯＯ－对［Ｃａ２＋］ｉ的影响，并且存在一定的剂量效应关系． 展开更多

关键词 过氧亚硝基 阴离子 ONOO^- 细胞 神经元 EBSELEN

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效应性T细胞促进MN9D细胞的凋亡 被引量：1

8

作者 顾婷婷 黄彦 +1 位作者 杜中帅 彭聿平 《南通大学学报（医学版）》 2016年第4期245-248,共4页

目的:利用多巴胺合成细胞系MN9D,观察活化的效应性T(effector T,Teff)细胞对MN9D细胞活力和凋亡的影响,探讨Teff细胞对MN9D细胞的损伤作用。方法:免疫磁珠分选获得Teff细胞,经体外活化后,与MN9D细胞株共培养,然后用四甲基偶氮唑蓝(methy... 目的:利用多巴胺合成细胞系MN9D,观察活化的效应性T(effector T,Teff)细胞对MN9D细胞活力和凋亡的影响,探讨Teff细胞对MN9D细胞的损伤作用。方法:免疫磁珠分选获得Teff细胞,经体外活化后,与MN9D细胞株共培养,然后用四甲基偶氮唑蓝(methyl thiazolyl tetrazolium,MTT)检测MN9D细胞的活性;TUNEL和Hoechst染色观察MN9D细胞的凋亡及细胞数目的变化;Western Blot法检测MN9D细胞中活化的caspase-3和caspase-9的表达。结果 :经体外活化的Teff细胞与MN9D细胞共培养后,MN9D细胞的活性明显降低,MN9D细胞的数目显著降低、凋亡率明显增加;且MN9D细胞中促凋亡酶caspase-3和caspase-9的活化水平升高。结论:活化的Teff细胞促进了MN9D细胞的凋亡,具有损伤作用。 展开更多

关键词 mn9D细胞 效应性T细胞 凋亡

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褐藻多糖硫酸酯对MPP^+损伤的MN9D细胞氧化应激及凋亡的保护作用 被引量：1

9

作者 梁志刚 孙旭文 +2 位作者 刘竹丽 杨绍婉 罗鼎真 《中国医药导报》 CAS 2019年第7期20-24,共5页

目的探讨褐藻多糖硫酸酯(FUC)对帕金森病(PD)细胞模型的保护作用及机制。方法采用100μmol/L MPP+损伤的MN9D细胞制作PD模型,用MTS检测FUC预处理后PD细胞模型的细胞存活率。荧光检测法测定细胞内活性氧(ROS),荧光素酶法检测细胞内Caspas... 目的探讨褐藻多糖硫酸酯(FUC)对帕金森病(PD)细胞模型的保护作用及机制。方法采用100μmol/L MPP+损伤的MN9D细胞制作PD模型,用MTS检测FUC预处理后PD细胞模型的细胞存活率。荧光检测法测定细胞内活性氧(ROS),荧光素酶法检测细胞内Caspase-3的活性变化,Western blot检测凋亡相关蛋白Bax及Bcl-2的变化。结果 FUC 100μmol/L作用24 h明显增加了MPP+损伤的MN9D细胞存活率,差异有高度统计学意义(P<0.01);FUC预保护明显降低了MPP+损伤3 h的MN9D细胞内ROS活性及6 h时Caspase-3的表达,差异有高度统计学意义(P<0.01);FUC、司来吉兰预保护后MN9D细胞凋亡相关蛋白Bax表达明显下降,而Bcl-2表达明显增加,差异有高度统计学意义(P<0.01)。结论褐藻多糖硫酸酯可能通过抗氧化、降低Caspase-3表达、抑制细胞凋亡来保护PD细胞模型。 展开更多

关键词 褐藻多糖硫酸酯 帕金森病 mn9D细胞 氧化应激 细胞凋亡

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μ、κ、δ阿片受体及酪氨酸羟化酶在MN9D细胞中的表达

10

作者 田鹏翔 史为博 +4 位作者 王洁 刘洁 毕海涛 马春玲 丛斌 《解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第6期751-754,共4页

目的：检测多巴胺能性MN9D细胞中是否存在μ、κ、δ 3种阿片类受体及多巴胺能神经元特异性标记物酪氨酸羟化酶（TH）的表达,为建立吗啡依赖MN9D细胞模型奠定基础.方法：培养MN9D细胞后,采用免疫荧光标记观察μ、κ、δ3种受体蛋白表达... 目的：检测多巴胺能性MN9D细胞中是否存在μ、κ、δ 3种阿片类受体及多巴胺能神经元特异性标记物酪氨酸羟化酶（TH）的表达,为建立吗啡依赖MN9D细胞模型奠定基础.方法：培养MN9D细胞后,采用免疫荧光标记观察μ、κ、δ3种受体蛋白表达状态;RT-PCR检测μ、κ、δ3种阿片类受体的mRNA表达;TH免疫荧光标记,观察多巴胺能神经元的表达数量.结果：免疫荧光及PCR结果均显示MN9D细胞中存在μ、κ、δ 3种受体,并且TH阳性细胞的数目明显多于多巴胺能SH-SY5Y细胞系.结论：MN9D细胞中同时存在μ、κ、δ3种阿片受体,可作为吗啡依赖细胞模型使用. 展开更多

关键词 mn9D细胞 阿片受体 酪氨酸羟化酶 SH-SY5Y细胞

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Th17细胞对MN9D细胞凋亡的影响

11

作者 张倩 翟小润 +3 位作者 郑娜 王金今 何润超 邱一华 《南通大学学报（医学版）》 2019年第5期341-344,共4页

目的:利用多巴胺合成的MN9D细胞株,观察Th17细胞对MN9D细胞凋亡和损伤的影响。方法:免疫磁珠分选获得Th17细胞,经体外活化后,与MN9D细胞株共培养,然后用免疫荧光法检测TH阳性细胞数目;TUNEL和Hoechst染色观察MN9D细胞凋亡及细胞数目的变... 目的:利用多巴胺合成的MN9D细胞株,观察Th17细胞对MN9D细胞凋亡和损伤的影响。方法:免疫磁珠分选获得Th17细胞,经体外活化后,与MN9D细胞株共培养,然后用免疫荧光法检测TH阳性细胞数目;TUNEL和Hoechst染色观察MN9D细胞凋亡及细胞数目的变化;Western Blot法检测MN9D细胞中活化的凋亡酶3(caspase-3)的表达。结果:经体外活化的Th17细胞与MN9D细胞共培养后,MN9D细胞数目显著降低,凋亡率明显增加,且MN9D细胞中促凋亡酶caspase-3的活化水平升高。结论:活化的Th17细胞促进了MN9D细胞的凋亡,具有损伤作用。 展开更多

关键词 mn9D细胞 TH17细胞 凋亡 凋亡酶-3 损伤

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重复膜片钳法研究MPP^+对神经元钙电流作用

12

作者 蔡东 王晓民 +5 位作者 瞿安连 韩松平 于英心 周专 康华光 韩济生 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 1999年第2期158-161,共4页

细胞膜片钳技术是研究膜离子通道的有效方法．在单个细胞上反复形成多次全细胞构型从而在同一细胞上观察某些药物的长时间作用对于通道膜电流的影响．利用全细胞构型下胞浆与电极内液的连通可以方便地向胞内引入药物．以此法研究ＭＰＰ... 细胞膜片钳技术是研究膜离子通道的有效方法．在单个细胞上反复形成多次全细胞构型从而在同一细胞上观察某些药物的长时间作用对于通道膜电流的影响．利用全细胞构型下胞浆与电极内液的连通可以方便地向胞内引入药物．以此法研究ＭＰＰ＋多巴胺能神经瘤细胞（ＭＮ９Ｄ）的毒性作用表明ＭＰＰ＋导致细胞电压依赖性钙电流（ＩＣａ）显著下降；ＭＰＰ＋作用１ｈ以内高去极化电压较低去极化电压诱发的钙电流先受ＭＰＰ＋影响而下降；ＭＰＰ＋对未分化细胞的钙电流无显著作用（ｎ＝３）． 展开更多

关键词 钙电流 膜片钳 MPP mn9D细胞 神经元

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稳定表达GDNF的MN9D/GDNF工程细胞可明显改善帕金森病模型大鼠的旋转行为 被引量：1

13

作者 经兴军 马端端 +2 位作者 高红 王晓民 韩济生 《北京医科大学学报》 CSCD 1999年第3期212-215,共4页

目的：观察稳定表达ＧＤＮＦ的ＭＮ９Ｄ／ＧＤＮＦ工程细胞对６羟基多巴胺损毁所致帕金森病（Ｐａｒｋｉｎｓｏｎｄｉｓｅａｓｅ，ＰＤ）模型大鼠旋转行为有无治疗作用。方法：用６羟基多巴胺损毁大鼠单侧中脑黑质多巴胺能神经元、... 目的：观察稳定表达ＧＤＮＦ的ＭＮ９Ｄ／ＧＤＮＦ工程细胞对６羟基多巴胺损毁所致帕金森病（Ｐａｒｋｉｎｓｏｎｄｉｓｅａｓｅ，ＰＤ）模型大鼠旋转行为有无治疗作用。方法：用６羟基多巴胺损毁大鼠单侧中脑黑质多巴胺能神经元、２周后腹腔注射阿朴吗啡诱导大鼠出现偏侧旋转行为的方法制备ＰＤ模型大鼠。通过脑立体定位技术，将稳定表达ＧＤＮＦ的ＭＮ９Ｄ／ＧＤＮＦ工程细胞注入模型鼠损毁侧纹状体，１周后观察阿朴吗啡诱导的旋转行为有无改善。结果：稳定表达ＧＤＮＦ的ＭＮ９Ｄ／ＧＤＮＦ工程细胞可明显降低ＰＤ模型大鼠的异常旋转行为，治疗作用达１０周之久。结论：运用ｅｘｖｉｖｏ方法和防治兼顾的策略对于ＰＤ基因治疗的基础研究及临床应用具有重要意义。 展开更多

关键词 震颤性麻痹 GDNF mn9D/GDNF 工程细胞

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稳定表达GDNF基因的MN9D细胞可保护多巴胺能神经元 被引量：2

14

作者 王晓民 马端端 +6 位作者 陈光慧 韩松平 经兴军 王昕虹 蔡东 万有 韩济生 《北京医科大学学报》 CSCD 1997年第4期299-302,共4页

目的：建立一种可同时分泌多巴胺（DA）和GDNF的工程细胞，并研究其在帕金森病（PD）基因治疗中的可能作用。方法：克隆携带Kozak序列的GDNFcDNA，转染至可分泌DA的MN9D细胞系，将此工程细胞和大鼠原代多巴胶能神经元共培养，免疫组化检... 目的：建立一种可同时分泌多巴胺（DA）和GDNF的工程细胞，并研究其在帕金森病（PD）基因治疗中的可能作用。方法：克隆携带Kozak序列的GDNFcDNA，转染至可分泌DA的MN9D细胞系，将此工程细胞和大鼠原代多巴胶能神经元共培养，免疫组化检测DA能神经元。结果：发现该工程细胞可防止DA能神经元退变死亡，并有助于DA能神经元抵抗MPP+的毒性损伤。结论：本文首次将PD防治兼顾策略结合起来构建MN9D工程细胞，结果表明其在PD的基因治疗中可能具有重要的应用价值。 展开更多

关键词 多巴胺 治疗 GDNF mn9D细胞 震颤麻痹

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肾细胞癌MN/CA9蛋白的表达及其生物学意义

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作者 贾绍昌 殷广福 +2 位作者 苏长青 邓安梅 陈孙孝 《肿瘤防治杂志》 2000年第4期375-376,共2页

目的 :研究MN/CA9蛋白的表达和肾细胞癌的关系 ,探讨MN/CA9蛋白在肾细胞癌诊断研究中的应用。方法 :应用免疫组化和免疫印迹的方法 ,对正常肾组织、良性肾损害和肾细胞癌组织的MN/CA9蛋白的表达进行了分析。结果 :正常人肾组织和良性肾... 目的 :研究MN/CA9蛋白的表达和肾细胞癌的关系 ,探讨MN/CA9蛋白在肾细胞癌诊断研究中的应用。方法 :应用免疫组化和免疫印迹的方法 ,对正常肾组织、良性肾损害和肾细胞癌组织的MN/CA9蛋白的表达进行了分析。结果 :正常人肾组织和良性肾损害均为MN/CA9阴性 ,而在 30例肾癌中却有 2 8例为MN/CA9阳性 ,尤其是 2 6例富糖原型RCC均呈现MN/CA9强阳性。结论 展开更多

关键词 肾细胞癌 mn/CA9 表达

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