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下调MMSA-8基因对骨髓瘤细胞RPMI8226增殖和侵袭能力的影响 被引量：1
1
作者 何蕊 张王刚 +3 位作者 杨楠 刘捷 张鹏宇 李军辉 《山西医科大学学报》 CAS 2018年第5期482-487,共6页
目的探讨慢病毒介导的sh RNA干扰下调MMSA-8基因表达对骨髓瘤细胞RPMI8226体外增殖、迁移和侵袭能力的影响,并初步探讨MMSA-8表达水平变化与P53及MDM2表达水平变化的关系。方法用慢病毒介导的sh RNA稳定转染骨髓瘤RPMI8226细胞,下调MMS... 目的探讨慢病毒介导的sh RNA干扰下调MMSA-8基因表达对骨髓瘤细胞RPMI8226体外增殖、迁移和侵袭能力的影响,并初步探讨MMSA-8表达水平变化与P53及MDM2表达水平变化的关系。方法用慢病毒介导的sh RNA稳定转染骨髓瘤RPMI8226细胞,下调MMSA-8基因表达。设立五个实验组,RNAi组MMSA-8-sh RNA1、MMSA-8-sh RNA2、MMSA-8-sh RNA3(RNAi1、RNAi2、RNAi3组),空载体组(阴参组)和细胞未做任何处理组(空白组)用Q-PCR和Western blot方法检测RNA干扰后各组间MMSA-8、P53、MDM2的m RNA水平和蛋白水平。通过MTT增殖实验,流式细胞术检测各组间RPMI8226细胞细胞周期的差异。通过Transwell小室迁移和侵袭实验观察各组RPMI8226细胞侵袭数的差异。结果 RNA干扰后72 h,Q-PCR和Western blot检测表明,RNAi组(RNAi1、RNAi2、RNAi3组)MMSA-8的m RNA和蛋白水平较空白组和阴参组显著下降,其中RNAi3组下降最为明显(P<0.05);MTT实验显示RNAi3组的RPMI8226细胞增殖受到明显抑制(P<0.05);流式细胞仪检测细胞周期显示RNAi3组停留在sub-G1期的比例明显增大(P<0.05);Transwell实验显示RNAi3组的侵袭的细胞数较空白组和阴参组显著减少(P<0.01)。此外,RNAi3组P53表达水平较空白组和阴参组高,MDM2表达水平较空白组和阴参组高,差异有统计学意义(P<0.05)。结论慢病毒介导的sh RNA干扰能显著下调MMSA-8的表达水平,能够显著抑制骨髓瘤细胞RPMI8226的体外增殖、迁移和侵袭能力。MMSA-8对骨髓瘤细胞增殖、侵袭能力的影响可能是通过调节P53-MDM2环路实现的。 展开更多
关键词 多发性骨髓瘤 RNA干扰 mmsa-8 细胞增殖 细胞侵袭
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