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mic2/CD99在经典型霍奇金淋巴瘤H/RS细胞中的表达及与Eber-1/LMP-1相关性的研究 被引量:9
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作者 沈丽佳 何滢 +3 位作者 蒋会勇 谢思明 朱梅刚 赵彤 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第4期776-780,共5页
目的:检测mic2基因与CD99蛋白和Eber-1基因与潜伏膜蛋白-1(LMP1)在经典型霍奇金淋巴瘤(cHL)H/RS细胞中的表达,探讨mic2/CD99表达与Eber-1/LMP-1的相关性。方法:采用分子原位杂交和免疫组化技术并结合组织芯片技术检测59例石蜡包埋淋巴... 目的:检测mic2基因与CD99蛋白和Eber-1基因与潜伏膜蛋白-1(LMP1)在经典型霍奇金淋巴瘤(cHL)H/RS细胞中的表达,探讨mic2/CD99表达与Eber-1/LMP-1的相关性。方法:采用分子原位杂交和免疫组化技术并结合组织芯片技术检测59例石蜡包埋淋巴瘤组织标本[43例cHL,16例非霍奇金淋巴瘤(NHL)]mic2/CD99和Eber-1/LMP-1的表达,比较分析mic2/CD99在两组中的表达及与Eber-1/LMP-1的关系。结果:cHL组CD99蛋白表达阳性率为2·3%,mic2基因表达为55·8%,LMP1表达为58·1%,Eber-1表达为53·5%;NHL组CD99蛋白与mic2基因表达高于cHL组(P<0·05);LMP1和Eber-1的表达低于cHL组(P<0·05);mic2基因的表达高于CD99蛋白的表达(P<0·05);Eber-1与LMP1的表达无统计学意义(P>0·05)。CD99蛋白与LMP1的表达呈负相关(P<0·05),各项指标的表达与性别无关。CD99蛋白与LMP1的表达与年龄呈负相关(P<0·05),mic2与Eber-1的表达与年龄无关(P>0·05)。结论:CD99蛋白在cHL H/RS细胞中低表达,并与LMP1的表达呈负相关。 展开更多
关键词 霍奇金淋巴瘤 基因 mic2 基因 Eber-1 蛋白质CD99 潜伏膜蛋白质1
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弓形虫ROP18-MIC2重组真核质粒的构建与表达 被引量:3
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作者 陈琳 何深一 +5 位作者 石娜 周怀瑜 丛华 白杨 赵广会 赵群力 《山东大学学报(医学版)》 CAS 北大核心 2012年第8期62-67,共6页
目的构建弓形虫棒状体蛋白18(ROP18)和微线体蛋白2(MIC2)的基因融合的重组真核表达质粒,并在转录和翻译水平进行鉴定。方法利用分子克隆技术构建重组真核表达质粒pBudCE4.1-ROP18-MIC2,经PCR、酶切及测序鉴定正确后,体外转染人包皮成纤... 目的构建弓形虫棒状体蛋白18(ROP18)和微线体蛋白2(MIC2)的基因融合的重组真核表达质粒,并在转录和翻译水平进行鉴定。方法利用分子克隆技术构建重组真核表达质粒pBudCE4.1-ROP18-MIC2,经PCR、酶切及测序鉴定正确后,体外转染人包皮成纤维细胞(HFF),采用RT-PCR在48 h时检测转录水平,SDS-PAGE在72 h时检测蛋白表达。结果重组真核表达质粒pBudCE4.1-ROP18-MIC2构建正确,经RT-PCR、SDS-PAGE鉴定,弓形虫ROP18、MIC2可在HFF细胞中瞬时表达。结论成功获得重组真核表达质粒pBudCE4.1-ROP18-MIC2,为进一步研究弓形虫疫苗的免疫保护性奠定基础。 展开更多
关键词 弓形虫属 基因 ROP18 基因 mic2 克隆 分子 真核细胞
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急性髓细胞性白血病以及相关疾病的MIC2(CD99)的免疫反应性 被引量:2
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作者 Zhang,PJ 陈国珍 《世界医学杂志》 2001年第2期3-8,共6页
关键词 急性髓细胞性白血病 mic2 CD99 免疫反应性 跨膜糖蛋白
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弓形虫微线体蛋白MIC2和M2AP真核表达载体的构建
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作者 谢彬彬 章庆伟 +4 位作者 陈亲芬 白炳君 林季 刘文权 梁韶晖 《中国病原生物学杂志》 CSCD 北大核心 2014年第9期820-823,共4页
目的构建弓形虫RH株微线体蛋白M2AP和MIC2的真核表达载pGAPZαA-mic2和pGAPZαA-m2ap,为建立同时表达MIC2和M2AP蛋白的重组毕赤酵母表达系统,制备重组粘附蛋白复合体MIC2-M2AP奠定基础。方法提取弓形虫RH株速殖子总RNA,用Oligo dT-Adap... 目的构建弓形虫RH株微线体蛋白M2AP和MIC2的真核表达载pGAPZαA-mic2和pGAPZαA-m2ap,为建立同时表达MIC2和M2AP蛋白的重组毕赤酵母表达系统,制备重组粘附蛋白复合体MIC2-M2AP奠定基础。方法提取弓形虫RH株速殖子总RNA,用Oligo dT-Adaptor引物逆转录合成cDNA。根据已知的弓形虫mic2和m2ap基因序列,采用引物设计软件Primer premier5.0自行设计并合成引物,以cDNA为模板,PCR扩增mic2和m2ap基因,克隆入pMD-19-simple-T载体,经酶切和测序鉴定后回收目的片段,分别插入至pGAPZαA内,构建重组毕赤酵母表达载体pGAPZαA-mic2和pGAPZαA-m2ap,转化入E.coli DH5α。提取转化菌质粒,进行酶切和测序鉴定。结果 PCR扩增得到的mic2和m2ap基因分别为2 200bp和1 000bp,与预期大小一致。T-A克隆重组质粒pMD19-T-mic2、pMD19-T-m2ap和重组酵母表达质粒pGAPZαA-mic2、pGAPZαA-m2ap经测序鉴定,与GenBank收录的弓形虫mic2基因和m2ap基因序列同源性为100%,重组毕赤酵母表达载体pGAPZαA-mic2和pGAPZαA-m2ap构建成功。结论成功构建弓形虫重组毕赤酵母表达载体pGAPZαA-mic2和pGAPZαA-m2ap,为进一步研究MIC2和M2AP相互作用机制及其免疫保护效应奠定了基础。 展开更多
关键词 刚地弓形虫 mic2 M2AP 真核表达
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基于IFA技术检测微线体蛋白2在艾美耳属球虫的空间分布 被引量:1
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作者 田秀玲 汤新明 +3 位作者 秦梅 索静霞 刘贤勇 索勋 《寄生虫与医学昆虫学报》 CAS 2014年第4期240-243,共4页
微线体蛋白2(Microneme protein2,Mic2)是艾美耳球虫入侵宿主细胞时分泌的主要功能蛋白之一。本研究中,以抗柔嫩艾美耳球虫微线体蛋白2(EtMic2)单克隆抗体为检测抗体,利用间接免疫荧光实验(IFA)检测了Mic2在柔嫩艾美耳球虫、... 微线体蛋白2(Microneme protein2,Mic2)是艾美耳球虫入侵宿主细胞时分泌的主要功能蛋白之一。本研究中,以抗柔嫩艾美耳球虫微线体蛋白2(EtMic2)单克隆抗体为检测抗体,利用间接免疫荧光实验(IFA)检测了Mic2在柔嫩艾美耳球虫、和缓艾美耳球虫、斯氏艾美耳球虫和无残艾美耳球虫等不同种艾美耳属球虫的空间分布。结果显示,Mic2在不同种艾美耳属球虫中均定位于子孢子的顶部(微线体部位),但表达强度存在差异。这提示Mic2可作为研究艾美耳属球虫相关蛋白空间分布的“参照物”。 展开更多
关键词 艾美耳属球虫 单克隆抗体 微线体蛋白2 空间分布 间接免疫荧光实验
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dsRNA抑制SAG3表达对弓形虫入侵蛋白ROP2、MIC2的影响
6
作者 张玉英 汪琦 +4 位作者 朱家勇 江钢锋 覃姗姗 李娟兰 金小宝 《中国病原生物学杂志》 CSCD 2009年第12期910-912,共3页
目的观察表面抗原3(SAG3)对弓形虫入侵相关蛋白的影响,为深入研究弓形虫的致病机制奠定基础。方法用电穿孔的方法将针对SAG3基因3-′UTR区的dsRNA转入弓形虫速殖子体内,转染后的虫体感染Hela细胞,转染后2 h提取总RNA,RT-PCR检测SAG3的... 目的观察表面抗原3(SAG3)对弓形虫入侵相关蛋白的影响,为深入研究弓形虫的致病机制奠定基础。方法用电穿孔的方法将针对SAG3基因3-′UTR区的dsRNA转入弓形虫速殖子体内,转染后的虫体感染Hela细胞,转染后2 h提取总RNA,RT-PCR检测SAG3的抑制效率,同时检测弓形虫入侵蛋白ROP2、MIC2的表达情况。结果dsRNA电穿孔转染弓形虫速殖子后抑制SAG3 mRNA表达,ROP2、MIC2的表达量显著低于对照组。结论抑制SAG3的表达影响ROP2、MIC2的表达。 展开更多
关键词 弓形虫 表面抗原3 棒状体蛋白2 微线体蛋白2
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鸡球虫微线基因mic2-7h在大肠杆菌中的表达 被引量:4
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作者 蒋建林 蒋金书 《中国农业科技导报》 CAS CSCD 1999年第1期67-70,共4页
本文在大肠杆菌中表达了鸡球虫孢子化7h微线基因mic2-7h.质粒pmic2-7h经AatⅡ酶切线化,用Sl核酸酶切平DNA分子,再用NotⅠ切出mic2-7h片段,插入表达质粒pET28-a(+)的6xHis下游NheⅠ处构建成表达载体pET28-mic2-7h.IPTG诱导表达后,经SDS-P... 本文在大肠杆菌中表达了鸡球虫孢子化7h微线基因mic2-7h.质粒pmic2-7h经AatⅡ酶切线化,用Sl核酸酶切平DNA分子,再用NotⅠ切出mic2-7h片段,插入表达质粒pET28-a(+)的6xHis下游NheⅠ处构建成表达载体pET28-mic2-7h.IPTG诱导表达后,经SDS-PAGE分析表明表达的重组蛋白大小为45kD,约比理论推算值(37kD)小,但Western-blotting杂交表明重组蛋白能与兔抗Etmic-2抗体反应.这进一步说明了Mic2-7h可能是Etmic-2的一种蛋白异形体. 展开更多
关键词 柔嫩艾美耳球虫 微线基因mic2-7h 大肠杆菌 基因表达
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mic2/CD99基因克隆及在霍奇金淋巴瘤L428细胞株中表达 被引量:3
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作者 黄作平 何滢 +5 位作者 周新华 韩西群 吴自勍 张艳 温宗华 赵彤 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第12期2407-2409,共3页
目的克隆mic2/CD99基因并表达于L428细胞株。方法通过PCR及双酶切方法,从Jurkat细胞基因组RNA中获得mic2/CD99全长基因编码序列,克隆到pcDNA3.1(+)质粒载体上,构建包含mic2/CD99全长基因载体;用脂质体转染法将mic2/CD99全长基因载体转染... 目的克隆mic2/CD99基因并表达于L428细胞株。方法通过PCR及双酶切方法,从Jurkat细胞基因组RNA中获得mic2/CD99全长基因编码序列,克隆到pcDNA3.1(+)质粒载体上,构建包含mic2/CD99全长基因载体;用脂质体转染法将mic2/CD99全长基因载体转染至L428细胞系;并从分子水平验证其存在。结果RT-PCR方法扩增出大小为558bp片段,序列测定其编码序列正确,酶切鉴定亚克隆序列正确。结论成功构建了mic2/CD99全长基因载体,并稳定转染于L428细胞株中。 展开更多
关键词 mic2/CD99 载体构建 L428细胞株
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Huge primitive neuroectodermal tumor of the pancreas:Report of a case and review of the literature 被引量:3
9
作者 Thilo Welsch Gunhild Mechtersheimer +4 位作者 Sebastian Aulmann Sascha A Mueller Markus W Buechler Jan Schmidt Peter Kienle 《World Journal of Gastroenterology》 SCIE CAS CSCD 2006年第37期6070-6073,共4页
Primitive neuroectodermal tumor (PNET) of the pancreas is an extremely rare tumor that usually occurs in children or young adults. We report a case of a 33-year-old male patient with an 18 cm × 18 cm × 16 cm... Primitive neuroectodermal tumor (PNET) of the pancreas is an extremely rare tumor that usually occurs in children or young adults. We report a case of a 33-year-old male patient with an 18 cm × 18 cm × 16 cm mass arising from the pancreatic body and tail with a one- day history of abdominal pain. Initial CT scan showed no signs of metastatic tumor spread. The tumor caused intrabdominal bleeding and the patient underwent primary tumor resection including partial gastrectomy, left pancreatic resection and splenectomy. Diagnosis of PNET was confi rmed by histology, immunohistochemistry and FISH analysis. All neoplastic cells were stained positive for MIC2-protein (CD99). Approximately one month after surgery, several liver metastases were observed and the patient underwent chemotherapy according to the Euro- Ewing protocol. Subsequent relaparotomy excluded any residual hepatic or extrahepatic abdominal metastases. Although PNET in the pancreas is an extremely rare entity, it should be considered in the diffential diagnosis of pancreatic masses, especially in young patients. This alarming case particularly illustrates that PNET in the pancreas although in an advanced stage can present with only a short history of mild symptoms. 展开更多
关键词 Primitive neuroectodermal tumor PANCREAS mic2-protein Ewing sarcoma Abdominal mass
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刚地弓形虫MIC2与醛缩酶作用位点的鉴定 被引量:1
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作者 郑斌 尹志奎 +3 位作者 姚志军 张海珠 任红斌 詹希美 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第7期698-700,708,共4页
目的确定刚地弓形虫微线体蛋白2(MIC2)与醛缩酶的作用位点。方法利用定点突变技术,将MIC2羧基端(MIC2C)的767位色氨酸(W767)突变为丙氨酸(A)。PCR扩增MIC2CW/A突变体基因片段;构建MIC2CW/A/pGEX-4T-1重组原核表达系统,IPTG诱导表达GST-M... 目的确定刚地弓形虫微线体蛋白2(MIC2)与醛缩酶的作用位点。方法利用定点突变技术,将MIC2羧基端(MIC2C)的767位色氨酸(W767)突变为丙氨酸(A)。PCR扩增MIC2CW/A突变体基因片段;构建MIC2CW/A/pGEX-4T-1重组原核表达系统,IPTG诱导表达GST-MIC2CW/A突变体蛋白。分别以该蛋白和GST-MIC2C蛋白(对照蛋白)作为探针蛋白与弓形虫速殖子裂解液进行GST pull-down实验,SDS-PAGE及Western blot分析。结果获得了MIC2CW/A突变体基因片段,制备了GST-MIC2CW/A突变体蛋白;GST-MIC2C蛋白的pull-down产物中有一蛋白条带,而且可以被醛缩酶抗体识别,而GST-MIC2CW/A蛋白的pull-down产物中未见蛋白条带。结论将MIC2的W767突变为A后,MIC2失去与醛缩酶的作用,即MIC2与醛缩酶的作用位点为色氨酸(W)。 展开更多
关键词 刚地弓形虫 微线体蛋白2 醛缩酶 点突变 GST pull—down
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mic2/CD_(99)基因克隆和测序
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作者 黄作平 何莹 +5 位作者 周新华 李锋 韩西群 张艳 温宗华 赵彤 《中国现代医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第19期2927-2930,共4页
目的构建mic2/CD99基因表达载体。方法通过PCR及双酶切方法,从Jurkat细胞基因组RNA中获得mic2/CD99全长基因编码序列,克隆到pcDNA3.1(+)质粒载体上,构建包含mic2/CD99全长基因载体,并从分子水平检测及验证。结果经PCR方法扩增出大小为58... 目的构建mic2/CD99基因表达载体。方法通过PCR及双酶切方法,从Jurkat细胞基因组RNA中获得mic2/CD99全长基因编码序列,克隆到pcDNA3.1(+)质粒载体上,构建包含mic2/CD99全长基因载体,并从分子水平检测及验证。结果经PCR方法扩增出大小为585bp片段,序列测定其编码序列正确,酶切鉴定亚克隆序列正确。结论成功构建了mic2/CD99全长基因载体,为后续研究打下基础。 展开更多
关键词 mic2/CD99 载体构建
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XG血型抗原研究进展
12
作者 史华山 李树中(审校) +2 位作者 李中华 李凌波 田丰 《临床血液学杂志》 CAS 2021年第10期742-745,752,共5页
XG抗原是Mann在1962年发现于1例白血病患者,1994年由国际输血协会(ISBT)确认和命名为红细胞系统抗原,抗原的系统命名是XG,系统编号012,2020年确认这个系统有2个抗原。目前XG抗原国内报道不多,本文参阅了近年来国内外对XG抗原的研究报道... XG抗原是Mann在1962年发现于1例白血病患者,1994年由国际输血协会(ISBT)确认和命名为红细胞系统抗原,抗原的系统命名是XG,系统编号012,2020年确认这个系统有2个抗原。目前XG抗原国内报道不多,本文参阅了近年来国内外对XG抗原的研究报道,在抗原的基因、各外显子编码序列,以及抗原的分子生物学构造、功能和抗原的免疫学反应格局及抗原的分布频率等方面做一简要综述。 展开更多
关键词 mic2/XG基因 XG糖蛋白 膜分化抗原 免疫黏附因子 肿瘤标志物
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刚地弓形虫MIC2突变体的构建及其特性分析
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作者 郑斌 尹志奎 许娜 《医学动物防制》 2016年第2期126-128,共3页
目的利用基因定点突变的方法将刚地弓形虫微线体蛋白2(MIC2)的767位氨基酸的碱基定点突变,蛋白相互作用技术分析突变体的特性。方法利用基因定点突变的方法,将MIC2蛋白羧基端(MIC2C)的767位色氨酸(tryptophan,W)的碱基突变为丙氨酸(alan... 目的利用基因定点突变的方法将刚地弓形虫微线体蛋白2(MIC2)的767位氨基酸的碱基定点突变,蛋白相互作用技术分析突变体的特性。方法利用基因定点突变的方法,将MIC2蛋白羧基端(MIC2C)的767位色氨酸(tryptophan,W)的碱基突变为丙氨酸(alanine,A)的碱基,PCR扩增MIC2C W/A突变体基因片段;构建MIC2C W/A/p GEX-4T-1重组原核表达系统,IPTG诱导表达GST-MIC2C W/A突变体蛋白。以该蛋白和MIC2C蛋白(未突变蛋白)为探针蛋白与弓形虫裂解液进行GST pull-down实验,SDS-PAGE及Western blot分析。结果获得了MIC2C W/A突变体基因片段,制备了GST-MIC2C W/A突变体蛋白;GST pull-down实验产物分析显示GST-MIC2C W/A蛋白的产物中未见蛋白条带,而未突变蛋白的产物中有一蛋白条带,且能被抗醛缩酶抗体识别。结论在体外获得了MIC2突变体;MIC2突变体不能沉降弓形虫裂解液中的醛缩酶,即MIC2突变体失去了与醛缩酶作用的特性。 展开更多
关键词 刚地弓形虫 微线体蛋白2 点突变 GST pull-down
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肌浆网钙泵基因过表达对快速起搏右房引起的急性心功能不全及电生理的影响 被引量:3
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作者 黄焰 孙娟 +4 位作者 张广伟 徐晓霞 杨曦 王凌鹏 侯月梅 《中国心脏起搏与心电生理杂志》 2012年第6期530-534,共5页
目的研究心肌肌浆网Ca2+-ATP酶(SERCA2a)基因过表达对快速起搏右房(RAP)兔心功能及电生理的影响。方法将新西兰大白兔动物模型随机分为假手术组(A组);腺相关病毒/绿色荧光蛋白(AAV1/EGFP)+心房颤动(简称房颤)模型组(B组);AAV1/SERCA2a+... 目的研究心肌肌浆网Ca2+-ATP酶(SERCA2a)基因过表达对快速起搏右房(RAP)兔心功能及电生理的影响。方法将新西兰大白兔动物模型随机分为假手术组(A组);腺相关病毒/绿色荧光蛋白(AAV1/EGFP)+心房颤动(简称房颤)模型组(B组);AAV1/SERCA2a+房颤模型组(C组);每组各12只。A、B、C组心包腔内分别注射生理盐水、含AAV1/EGFP液、含AAV1/SERCA2a液各500μl。4周后,行心脏超声检测心功能,并行短期RAP24 h,采用心内电生理技术检测各组心房有效不应期(AERP)。处死各组动物,行免疫组化检测SERCA2a在心肌中的表达情况。结果与A组比较,B组起搏8,12,24 h后AERP明显缩短(P<0.05),而C组无明显变化(P>0.05)。与A组比较,B组左室射血分数(LVEF)降低(P<0.05),C组未见明显变化(P>0.05),C组SERCA2a在心房心肌组织中呈强阳性表达。结论 SERCA2a在心房肌组织中过表达有抗快速起搏致AERP缩短作用,并有保护心功能的效益。 展开更多
关键词 心血管病学 心房颤动 肌浆网Ca2+-ATP酶 快速心房起搏 心房有效不应期 心功能
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