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鸭MHCⅡα基因的表达纯化与抗体制备
被引量:
1
1
作者
张舒婕
邓干臻
+4 位作者
龚炎长
杨庆磊
胡福利
杨桓
彭秀丽
《中国兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2009年第4期464-467,共4页
根据NCBI上已发表的序列自行设计引物,通过RT-PCR从北京鸭脾脏的总RNA中扩增得到鸭MHCⅡα基因,将其克隆至pMD18-T,经酶切分析及序列测定鉴定后,进一步亚克隆至原核表达载体pET-28a。转化大肠杆菌BL21中诱导表达。电洗脱纯化蛋白,用于...
根据NCBI上已发表的序列自行设计引物,通过RT-PCR从北京鸭脾脏的总RNA中扩增得到鸭MHCⅡα基因,将其克隆至pMD18-T,经酶切分析及序列测定鉴定后,进一步亚克隆至原核表达载体pET-28a。转化大肠杆菌BL21中诱导表达。电洗脱纯化蛋白,用于免疫昆明小鼠制备多克隆抗体。结果表明:克隆了鸭MHCⅡα基因,大小为633 bp,经核苷酸测序与已登录的基因序列同源性为99%;成功构建了原核表达载体,融合蛋白得到了高效表达且纯化后纯度可达90%,制备的鼠抗鸭MHCⅡα多克隆抗体经酶联免疫吸附试验(ELISA)与免疫印迹法(Western-blot)证实了抗体的效价高、特异性强,研究结果为研究鸭MHCⅡ分子奠定了基础。
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关键词
:鸭
mhc
ⅱ
α
基因
克隆
原核表达
纯化
多克隆抗体
下载PDF
职称材料
题名
鸭MHCⅡα基因的表达纯化与抗体制备
被引量:
1
1
作者
张舒婕
邓干臻
龚炎长
杨庆磊
胡福利
杨桓
彭秀丽
机构
华中农业大学教育部动物遗传育种与繁殖重点实验室
出处
《中国兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2009年第4期464-467,共4页
基金
湖北省"十一五"重大科攻关资助项目(2006AA202-A03)
文摘
根据NCBI上已发表的序列自行设计引物,通过RT-PCR从北京鸭脾脏的总RNA中扩增得到鸭MHCⅡα基因,将其克隆至pMD18-T,经酶切分析及序列测定鉴定后,进一步亚克隆至原核表达载体pET-28a。转化大肠杆菌BL21中诱导表达。电洗脱纯化蛋白,用于免疫昆明小鼠制备多克隆抗体。结果表明:克隆了鸭MHCⅡα基因,大小为633 bp,经核苷酸测序与已登录的基因序列同源性为99%;成功构建了原核表达载体,融合蛋白得到了高效表达且纯化后纯度可达90%,制备的鼠抗鸭MHCⅡα多克隆抗体经酶联免疫吸附试验(ELISA)与免疫印迹法(Western-blot)证实了抗体的效价高、特异性强,研究结果为研究鸭MHCⅡ分子奠定了基础。
关键词
:鸭
mhc
ⅱ
α
基因
克隆
原核表达
纯化
多克隆抗体
Keywords
duck
mhc
ⅱ
α
gene
cloning
protokaryotic expression
purification
polyclonal antibody
分类号
S852.2 [农业科学—基础兽医学]
下载PDF
职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
鸭MHCⅡα基因的表达纯化与抗体制备
张舒婕
邓干臻
龚炎长
杨庆磊
胡福利
杨桓
彭秀丽
《中国兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2009
1
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参考文献
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