二烯丙基二硫化物对MDCC-MSB-1细胞凋亡的影响

1

作者 张佩琪 周鹏飞 +3 位作者 叶正钦 刘进辉 王宜平 纪春晓 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第7期1354-1358,1406,共6页

以50,100,150μmol/L二烯丙基二硫化物(diallyl disulfide, DADS)处理MDCC-MSB-1细胞24 h后,利用吖啶橙(acridine orange, AO)染色法对细胞凋亡的形态进行初步观察;Annexin V-FITC/PI双染法检测细胞凋亡率;JC-1染色法检测线粒体膜电位... 以50,100,150μmol/L二烯丙基二硫化物(diallyl disulfide, DADS)处理MDCC-MSB-1细胞24 h后,利用吖啶橙(acridine orange, AO)染色法对细胞凋亡的形态进行初步观察;Annexin V-FITC/PI双染法检测细胞凋亡率;JC-1染色法检测线粒体膜电位的变化;Western blot检测P53的蛋白表达;蛋白活性检测试剂盒检测Caspase-3和Caspase-9的活性变化;Q-PCR检测Caspase-3和Caspase-9 mRNA的表达情况。结果显示,与空白组相比,DADS诱导MDCC-MSB-1细胞发生凋亡形态变化,增加细胞凋亡率,同时诱导p53蛋白表达量和线粒体膜电位下降,上调Caspase-3和Caspase-9基因表达水平和蛋白活性。 展开更多

关键词 二烯丙基二硫化物 鸡马立克病 mdcc-msb-1细胞 线粒体凋亡途径

原文传递

MDCC-MSB-1细胞增殖抑制机制研究进展

2

作者 张佩琪 李真诚 +3 位作者 王宜平 岑美珍 刘进辉 纪春晓 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第7期1445-1450,共6页

MDCC-MSB-1细胞是鸡马立克氏病毒（MDV）诱导产生的T淋巴细胞增生性肿瘤细胞系之一，已被作为模型广泛应用于抗肿瘤药物的研究中。本文旨在探讨与MDCC—MSB-1细胞周期被阻滞在G1期的调控因子作用机制，以及诱导MDCC-MSB-1细胞凋亡的信... MDCC-MSB-1细胞是鸡马立克氏病毒（MDV）诱导产生的T淋巴细胞增生性肿瘤细胞系之一，已被作为模型广泛应用于抗肿瘤药物的研究中。本文旨在探讨与MDCC—MSB-1细胞周期被阻滞在G1期的调控因子作用机制，以及诱导MDCC-MSB-1细胞凋亡的信号传导通路。MDV所致瘤细胞增殖抑制机制的深入研究，为人类肿瘤病的治疗研究提供良好的动物模型展望，也为新型药物的开发开辟出新的思路。 展开更多

关键词 mdcc-msb-1细胞 细胞周期 凋亡通路

原文传递

MDCC-MSB1细胞酵母双杂交cDNA表达文库的构建与鉴定 被引量：5

3

作者 崔鹏鹏 高宏雷 +4 位作者 李凯 高立 高玉龙 祁小乐 王笑梅 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2013年第5期22-25,共4页

提取生长状态良好的MDCC-MSB1细胞的mRNA,以5′端标记有生物素的Oligo dT primer为引物反转录,合成双链后连接Adapter。分级纯化后,通过BP重组反应构建入门文库,滴度为1×105 CFU/mL,文库总容量为1.1×106 CFU,平均插入片段长度... 提取生长状态良好的MDCC-MSB1细胞的mRNA,以5′端标记有生物素的Oligo dT primer为引物反转录,合成双链后连接Adapter。分级纯化后,通过BP重组反应构建入门文库,滴度为1×105 CFU/mL,文库总容量为1.1×106 CFU,平均插入片段长度为1190bp,阳性重组率为100%。入门文库扩增后提取质粒,通过LR重组反应转化为表达文库,平均滴度为1×105 CFU/mL,文库总容量为1.2×106 CFU,平均插入片段长度为1087bp,重组率为100%。构建的表达文库具有较高的质量,为研究鸡传染性贫血病毒的受体及其细胞嗜性奠定了基础。 展开更多

关键词 mdcc-msb1细胞 CDNA文库 鸡传染性贫血 酵母双杂交

下载PDF 职称材料

鸡TGFβ1对MDCC-MSB1细胞增殖、凋亡、迁移与侵袭的影响 被引量：3

4

作者 余祖华 丁轲 +13 位作者 贾艳艳 郁川 何雷 廖成水 李静 张春杰 李银聚 吴庭才 程相朝 门凯凯 张瑾 余祖玲 周子誉 罗俊 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第10期2567-2575,共9页

旨在探讨鸡TGFβ1对MDCC-MSB1细胞增殖、凋亡、迁移与侵袭的影响。作者将构建的鸡TGFβ1过表达载体、干扰表达载体以及相应阴性对照转染MDCC-MSB1细胞,然后检测转染后各组细胞鸡TGFβ1的表达水平、细胞增殖能力、细胞周期与凋亡,细胞的... 旨在探讨鸡TGFβ1对MDCC-MSB1细胞增殖、凋亡、迁移与侵袭的影响。作者将构建的鸡TGFβ1过表达载体、干扰表达载体以及相应阴性对照转染MDCC-MSB1细胞,然后检测转染后各组细胞鸡TGFβ1的表达水平、细胞增殖能力、细胞周期与凋亡,细胞的迁移与侵袭能力。结果显示,与相应阴性对照相比,转染TGFβ1过表达质粒可显著上调MDCC-MSB1细胞的TGFβ1表达水平,显著抑制MDCC-MSB1细胞的增殖,且使G1期细胞增加、S和G2期细胞减少,同时增加细胞凋亡率,降低细胞的迁移与侵袭能力;转染TGFβ1干扰表达质粒可显著下调MDCC-MSB1细胞的TGFβ1表达水平,显著促进MDCC-MSB1细胞的增殖,G1期细胞减少、S和G2期细胞增加,同时降低细胞凋亡率,增加细胞的迁移与侵袭能力。结果表明,鸡TGFβ1可抑制MDCC-MSB1细胞增殖、迁移与侵袭,促进其凋亡。 展开更多

关键词 TGFΒ1 mdcc-msb1细胞 细胞增殖 细胞凋亡 迁移 侵袭

下载PDF 职称材料

gga-miR-155对MDCC-MSB1细胞生物学行为的影响 被引量：3

5

作者 余祖华 丁轲 +11 位作者 郁川 贾艳艳 何雷 廖成水 李静 张春杰 李银聚 吴庭才 程相朝 张梦珂 邱静静 罗俊 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第11期2496-2504,共9页

为了解gga-miR-155对MDCC-MSB1细胞生物学行为的影响,将人工合成的gga-miR-155模拟物、gga-miR-155抑制物以及阴性对照瞬时转染MDCC-MSB1细胞。然后采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测MDCC-MSB1细胞中gga-miR-155的表达水平,CCK-8法检测... 为了解gga-miR-155对MDCC-MSB1细胞生物学行为的影响,将人工合成的gga-miR-155模拟物、gga-miR-155抑制物以及阴性对照瞬时转染MDCC-MSB1细胞。然后采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测MDCC-MSB1细胞中gga-miR-155的表达水平,CCK-8法检测转染后细胞增殖能力的变化,流式细胞术检测MDCC-MSB1细胞的细胞周期与凋亡的变化,Transwell检测MDCC-MSB1细胞的迁移、侵袭能力的变化。结果显示,gga-miR-155模拟物可显著上调MDCC-MSB1细胞gga-miR-155表达水平,促进MDCC-MSB1细胞增殖,细胞G1期细胞减少,S和G2期细胞增加,同时凋亡减少,迁移、侵袭能力增加;gga-miR-155抑制物可显著下调MDCCMSB1细胞gga-miR-155表达水平,抑制MDCC-MSB1细胞增殖,细胞G1期细胞增加、S和G2期细胞减少,同时凋亡增加,迁移、侵袭能力下降。结果表明,gga-miR-155可促进MDCC-MSB1细胞增殖、迁移和侵袭,抑制其凋亡。 展开更多

关键词 gga-miR-155 mdcc-msb1细胞 细胞增殖 细胞凋亡 迁移 侵袭

下载PDF 职称材料

硝酸镧对MDCC-MSB1细胞形态及细胞周期的影响 被引量：1

6

作者 林洪金 丁岚峰 +1 位作者 李金龙 徐世文 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2009年第1期70-74,共5页

以体外培养的MDCC-MSB1细胞为研究对象,分别经终浓度为0、8、32、64μg/mL的硝酸镧作用24、48、72 h后,采用台盼蓝染色测定细胞活性,荧光显微镜观察细胞的形态学变化,流式细胞术测定细胞周期。研究了硝酸镧对鸡MD肿瘤细胞株MDCC-MSB1细... 以体外培养的MDCC-MSB1细胞为研究对象,分别经终浓度为0、8、32、64μg/mL的硝酸镧作用24、48、72 h后,采用台盼蓝染色测定细胞活性,荧光显微镜观察细胞的形态学变化,流式细胞术测定细胞周期。研究了硝酸镧对鸡MD肿瘤细胞株MDCC-MSB1细胞形态及细胞周期的影响,进而探讨硝酸镧对MDCC-MSB1细胞的影响机制。结果表明,硝酸镧能够降低MDCC-MSB1的细胞活性,能够引起典型的凋亡形态学变化及细胞周期的改变,并呈现细胞凋亡的细胞型,变化均呈现时间-剂量效应。证实,一定浓度的硝酸镧具有诱导体外培养MDCC-MSB1细胞凋亡的作用。 展开更多

关键词 硝酸镧 mdcc—msb1细胞 细胞周期 细胞凋亡

下载PDF 职称材料

鸡p15因子抑制MDCC-MSB1细胞的增殖及端粒酶活性 被引量：1

7

作者 艾永兴 邹亚学 +2 位作者 潘风光 郝军元 张玉静 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第11期1296-1300,共5页

为探讨鸡p15基因的生物学功能,试验构建了鸡p15基因的真核表达载体pcDNA3.1(+)-p15,并转染到鸡MDV转化的淋巴细胞系MDCC-MSB1,应用G418筛选掉未转染的细胞,对存活细胞p15蛋白的表达、细胞增殖力、群体倍增时间、细胞周期和端粒酶的活性... 为探讨鸡p15基因的生物学功能,试验构建了鸡p15基因的真核表达载体pcDNA3.1(+)-p15,并转染到鸡MDV转化的淋巴细胞系MDCC-MSB1,应用G418筛选掉未转染的细胞,对存活细胞p15蛋白的表达、细胞增殖力、群体倍增时间、细胞周期和端粒酶的活性进行了检测。结果表明,与转染空质粒pcDNA3.1(+)细胞相比,转染了p15基因的细胞稳定表达了p15蛋白;细胞的增殖受到了抑制,抑制率达45%～74%;群体倍增时间从27h延长至416h;流式细胞仪分析细胞周期发现,p15蛋白引起了细胞多停滞于G0/G1期,S和G2/M期细胞比例下降;端粒酶活性受到抑制。 展开更多

关键词 P15 mdcc—msb1 细胞增殖 端粒酶活性

下载PDF 职称材料

牛磺酸对MDCC-MSB1细胞端粒酶表达水平及其活性的影响 被引量：1

8

作者 于洋洋 陈涛 +3 位作者 邱淑敏 林淑梅 胡建民 汉丽梅 《饲料工业》 北大核心 2014年第5期17-19,共3页

为探讨牛磺酸对鸡MDCC-MSB1肿瘤细胞系增殖的影响及其可能的作用机理,研究在牛磺酸应用适宜浓度范围内,使用添加0%、0.5%、1.0%、2.0%牛磺酸的RPMI1640培养基,培养MDCCMSB1细胞系,探讨牛磺酸对鸡MD肿瘤细胞chTERT的表达及其端粒酶活性... 为探讨牛磺酸对鸡MDCC-MSB1肿瘤细胞系增殖的影响及其可能的作用机理,研究在牛磺酸应用适宜浓度范围内,使用添加0%、0.5%、1.0%、2.0%牛磺酸的RPMI1640培养基,培养MDCCMSB1细胞系,探讨牛磺酸对鸡MD肿瘤细胞chTERT的表达及其端粒酶活性的影响。结果显示,与对照组相比,各牛磺酸组MD肿瘤细胞chTERT转录水平和端粒酶活性均降低,其中1%、2%牛磺酸浓度组的chTERT转录水平和端粒酶活性显著低于对照组(P<0.05)。牛磺酸对chTERT转录水平及端粒酶活性的下调,可能抑制肿瘤细胞的增殖。 展开更多

关键词 牛磺酸 端粒酶 mdcc—msb1细胞系

下载PDF 职称材料

鸡传染性贫血病病毒在MDCC-MSB1细胞的传代致弱研究

9

作者 李鸿鑫 吴波良 +4 位作者 张新珩 杨瑞杰 蔺文成 陈伟国 谢青梅 《中国家禽》 北大核心 2017年第15期26-29,共4页

为研究鸡传染性贫血病(Chicken infectious anemia,CIA)减毒活疫苗,试验将鸡传染性贫血病病毒(CIAV)在鸡淋巴细胞MDCC-MSB1上进行37℃和40℃传代致弱。结果显示:40℃条件下传至60代和37℃下传至90代,病毒的VP1氨基酸分别有2个和3个突变... 为研究鸡传染性贫血病(Chicken infectious anemia,CIA)减毒活疫苗,试验将鸡传染性贫血病病毒(CIAV)在鸡淋巴细胞MDCC-MSB1上进行37℃和40℃传代致弱。结果显示:40℃条件下传至60代和37℃下传至90代,病毒的VP1氨基酸分别有2个和3个突变,两种条件下有2个突变是在同一位置;VP2和VP3很稳定,在试验中未发生氨基酸突变;致病性试验发现,突变毒株仍具有致病性,但有降低的趋势。试验表明,鸡淋巴细胞传代CIAV可以引发包含中和抗原表位的VP1突变,且提高温度能促进变异速度,为进一步研究CIAV的变异特征、弱毒疫苗研发提供了参考依据。 展开更多

关键词 鸡传染性贫血病病毒 mdcc-msb1细胞 传代致弱 疫苗

下载PDF 职称材料

gga-miRNA-155对MDCC-MSB1细胞增殖的影响

10

作者 余祖华 丁轲 +8 位作者 郁川 贾艳艳 何雷 廖成水 李静 张梦珂 邱静静 张春杰 程相朝 《西北农林科技大学学报（自然科学版）》 CSCD 北大核心 2019年第2期1-6,共6页

【目的】构建gga-miRNA-155前体基因(pre-gga-miRNA-155)真核表达载体,验证gga-miRNA-155在MDCC-MSB1细胞中的表达效果,探究其对MDCC-MSB1细胞增殖的影响。【方法】采用PCR方法从鸡肝脏基因组DNA中扩增gga-miRNA-155前体基因片段pre-gga... 【目的】构建gga-miRNA-155前体基因(pre-gga-miRNA-155)真核表达载体,验证gga-miRNA-155在MDCC-MSB1细胞中的表达效果,探究其对MDCC-MSB1细胞增殖的影响。【方法】采用PCR方法从鸡肝脏基因组DNA中扩增gga-miRNA-155前体基因片段pre-gga-miRNA-155,并将其克隆入pMD-18T载体,构建克隆载体pMD-18T-pre-gga-miRNA-155。用EcoRⅠ和XhoⅠ双酶切pcDNA6.2-GW/EmGFP-miRNA真核表达载体和pMD-18T-pre-gga-miRNA-155,将pre-gga-miRNA-155酶切回收片段与pcDNA6.2-GW/EmGFP-miRNA的酶切回收片段进行连接,构建重组真核表达载体pcDNA6.2-pre-gga-miRNA-155,对其进行PCR、EcoRⅠ和XhoⅠ双酶切及DNA测序鉴定。将重组载体转染到MDCC-MSB1细胞中,应用实时荧光定量PCR (Real-time PCR)检测gga-mi-RNA-155的表达水平,利用MTT法检测细胞增殖能力的变化。【结果】PCR扩增获得了长度约154bp的鸡pre-gga-mi-RNA-155基因。成功构建了pre-gga-miRNA-155的真核表达载体pcDNA6.2-pre-gga-miRNA-155,瞬时转染MD-CC-MSB1细胞后gga-miRNA-155表达水平显著增加,且MDCC-MSB1细胞的体外增殖能力增强。【结论】成功构建了pre-gga-miRNA-155的真核表达载体,其可在MDCC-MSB1细胞中过表达gga-miRNA-155,且可促进MDCC-MSB1细胞的体外增殖。 展开更多

关键词 gga-miRNA-155 表达载体 mdcc-msb1细胞 细胞增殖

下载PDF 职称材料

拯救鸡传染性贫血突变株对宿主细胞生长周期及凋亡的影响

11

作者 孙丹丹 杨兵 +2 位作者 史万玉 苏霞 满坤 《中国农学通报》 CSCD 北大核心 2011年第26期60-64,共5页

通过流式细胞术,观察拯救鸡传染性贫血病毒突变株(CIAVM突变株)对宿主细胞MSB1的生长周期及凋亡的影响。拯救CIAVM突变株接于MDCC-MSB1细胞系,并相应设立阴性组(正常SPF鸡肝脏细胞液),阳性组(CUX-1标准毒株),进行培养24～48h。用PI及FIT... 通过流式细胞术,观察拯救鸡传染性贫血病毒突变株(CIAVM突变株)对宿主细胞MSB1的生长周期及凋亡的影响。拯救CIAVM突变株接于MDCC-MSB1细胞系,并相应设立阴性组(正常SPF鸡肝脏细胞液),阳性组(CUX-1标准毒株),进行培养24～48h。用PI及FITC Annexin V染色方法,用流式细胞仪测定宿主细胞生长周期及凋亡,并用SPSS13.0进行结果统计学分析。接种拯救CIAV M突变株的宿主细胞G0/G1期的累积细胞百分率为(59.33±4.04)%,S期为(32.92±3.65)%,G2/M期为(7.75±3.11)%,与阴性组相比,G0/G1期细胞累积百分率有所上升;与CUX组相比,G0/G1期有所下降,但结果经统计学分析,差异均不显著(P>0.05)。试验组宿主细胞凋亡率为(37.00±4.65)%,与阴性组相比,凋亡率上升,统计学差异显著(P<0.05);与阳性组相比,凋亡率下降,统计学差异显著(P<0.05)。试验结果显示,经过VP3基因突变的CIAV M突变株,经过病毒拯救并回归SPF鸡后,对宿主细胞MSB1的生长周期没有显著的抑制,但能引起宿主细胞的显著性凋亡,且凋亡程度与CUX-1引起的宿主细胞凋亡率相比有所降低。可以表明,通过VP3密码子移位的基因突变,能够将CIAV的致凋亡作用降低,从而相应降低病毒的致病性,为以后构建CIAV减毒疫苗株奠定理论基础。 展开更多

关键词 拯救CIAV M突变株 宿主细胞msb1 生长周期 凋亡

下载PDF 职称材料