人参皂甙Rh_2逆转P-gp介导的MCF-7/ADM多药耐药性的基础研究 被引量：10

1

作者 张晖 王华庆 +2 位作者 张会来 孔棣 吴咸中 《肿瘤》 CAS CSCD 北大核心 2007年第5期365-369,共5页

目的:研究人参皂甙Rh2在逆转多药耐药(MDR)方面的作用及其机理。方法:Rh2和阿霉素单独或联合作用于MCF-7及MCF-7/ADM细胞,应用MTT法确定各组细胞的IC50。罗丹明123加入各组细胞,流式细胞仪分析Rh2和维拉帕米抑制罗丹明123外排的情况。RT... 目的:研究人参皂甙Rh2在逆转多药耐药(MDR)方面的作用及其机理。方法:Rh2和阿霉素单独或联合作用于MCF-7及MCF-7/ADM细胞,应用MTT法确定各组细胞的IC50。罗丹明123加入各组细胞,流式细胞仪分析Rh2和维拉帕米抑制罗丹明123外排的情况。RT-PCR检测各组mdr1 mRNA表达量及流式细胞仪检测各组P-gp的表达情况。结果:Rh2可以显著降低MCF-7/ADM的ADM IC50(P<0.05),对MCF-7细胞没有影响。Rh2和维拉帕米可以增加MCF-7/ADM细胞内罗丹明123荧光表达率(P<0.05),Rh2比维拉帕米抑制罗丹明123外排作用更强。在MCF-7细胞内Rh2和维拉帕米无此作用。Rh2对MCF-7/ADM细胞mdr1 mRNA表达及P-gp表达没有影响。结论:人参皂甙Rh2可以有效逆转P-gp介导的人乳腺癌细胞耐药细胞系MCF-7/ADM的耐药性。 展开更多

关键词 乳腺肿瘤 人参皂甙 P糖蛋白 mcf-7细胞系

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ER-α36过表达促进人乳腺癌MCF-7细胞侵袭转移能力 被引量：10

2

作者 刘旺根 张钦宪 +4 位作者 王云龙 孙新城 王国强 李恒思 李玉林 《基础医学与临床》 CSCD 北大核心 2013年第6期713-717,共5页

目的探讨雌激素受体新亚型ER-α36过表达对人雌激素受体阳性乳腺癌细胞侵袭转移潜力的影响及其机制。方法以野生型乳腺癌细胞系MCF-7/W、转染pcDNA3.1空载体的细胞系MCF-7/pcDNA3.1和转染重组载体pcDNA3.1/ER-α36的细胞系MCF-7/ER-α3... 目的探讨雌激素受体新亚型ER-α36过表达对人雌激素受体阳性乳腺癌细胞侵袭转移潜力的影响及其机制。方法以野生型乳腺癌细胞系MCF-7/W、转染pcDNA3.1空载体的细胞系MCF-7/pcDNA3.1和转染重组载体pcDNA3.1/ER-α36的细胞系MCF-7/ER-α36为研究对象,分别用细胞黏附实验观测肿瘤细胞与细胞外基质的黏附能力、Transwell侵袭小室实验检测细胞侵袭转移能力,用Western blot法检测NF-κB P65、MMP-2、MMP-9和TIMP-1蛋白表达。结果与MCF-7/W组细胞相比,MCF-7/ER-α36细胞的2 h细胞黏附率和24 h穿膜细胞数显著增加(P<0.05)。NF-κB P65、MMP-2、MMP-9和TIMP-1蛋白的相对表达量及MMP-2/TIMP-1、MMP-9/TIMP-1显著增高(P<0.05)。结论 ER-α36过表达能促进ER-α66阳性乳腺癌细胞的体外黏附能力和侵袭转移潜力,其机制可能与通过NF-κB途径提高MMP-2、MMP-9的表达水平及打破二者与TIMP-1之间的平衡有关。 展开更多

关键词 乳腺癌 雌激素受体-α36 mcf-7细胞系 侵袭转移 核因子-ΚB

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MCF-7细胞系乳腺癌裸鼠模型病理学特点及生物学性状的研究 被引量：7

3

作者 刘建中 谷俊朝 俞巍 《国际外科学杂志》 2010年第3期165-167,共3页

目的探讨荷人乳腺癌裸鼠移植模型的病理学特点及生物学性状，为乳腺癌病因学、发病学研究提供可靠的工具。方法在裸鼠右侧腋窝注射人乳腺癌MCF-7细胞悬液0．1mL（5×108个／mL），建立乳腺癌裸鼠动物模型。混合干预组小鼠，肿瘤接... 目的探讨荷人乳腺癌裸鼠移植模型的病理学特点及生物学性状，为乳腺癌病因学、发病学研究提供可靠的工具。方法在裸鼠右侧腋窝注射人乳腺癌MCF-7细胞悬液0．1mL（5×108个／mL），建立乳腺癌裸鼠动物模型。混合干预组小鼠，肿瘤接种部位旁皮下注射瘦素0．2mL（15×104ng／mL）和雌激素0．2mL（0．15mg／mL），每天1次；雌激素组注射雌激素0．2mL（0．15mg／mL）；瘦素组注射瘦素0．2mL（15×104ng／mL）；空白组注射0．9％氯化钠溶液，每日观察肿块生长情况及肿瘤体积变化。宰杀取材，观察肿瘤组织学特征。结果（1）空白组肿瘤移植成功率为33．3％（10／30），瘦素组为46．7％（14／30），模型失败。混合干预组肿瘤移植成功率为96．7％（29／30），雌激素组为93．3％（28／30），两组间无明显差异（P〉0．05）；（2）混合干预组裸鼠平均肿瘤最长径明显优于雌激素组，差异具有统计学意义（P〈0．05）；混合干预组裸鼠平均体积明显优于雌激素组，差异具有统计学意义（P〈0．05）；（3）病理诊断符合浸润性导管癌。结论（1）MCF-7裸鼠模型的成功建立，需体外补充雌激素。（2）瘦素有增强雌激素刺激MCF-7细胞在裸鼠体内增生的作用；（3）移植的肿瘤细胞保持了人乳腺癌肿瘤细胞的部分病理学特点及生物学特性，可以为病因学、发病学、临床治疗及疗效判断提供可靠的工具。 展开更多

关键词 mcf-7细胞系 裸鼠 乳腺癌 动物模型

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人参皂甙Rh_2致MCF-7/ADM凋亡的实验研究 被引量：6

4

作者 张晖 孔棣 +2 位作者 吴咸中 张会来 王华庆 《中国中西医结合外科杂志》 CAS 2007年第3期261-264,共4页

目的:本实验旨在研究Rh2对肿瘤细胞生长的抑制作用及其机理,以进一步阐述Rh2在抗肿瘤方面的作用。方法:Rh2作用于MCF-7及MCF-7/ADM细胞,应用MTT法确定各组细胞增殖抑制率。流式细胞仪分析Rh2导致MCF-7和MCF-7/ADM细胞坏死及凋亡的作用,... 目的:本实验旨在研究Rh2对肿瘤细胞生长的抑制作用及其机理,以进一步阐述Rh2在抗肿瘤方面的作用。方法:Rh2作用于MCF-7及MCF-7/ADM细胞,应用MTT法确定各组细胞增殖抑制率。流式细胞仪分析Rh2导致MCF-7和MCF-7/ADM细胞坏死及凋亡的作用,及其对细胞周期的影响,并检测Rh2对MCF-7和MCF-7/ADM细胞内Caspase3活性的影响。结果:Rh2可以显著抑制MCF-7和MCF-7/ADM的增殖(P<0.05),并有时间和剂量依赖关系,对MCF-7抑制作用更强。Rh2可以导致MCF-7坏死,通过Caspase途径诱导MCF-7/ADM凋亡(P<0.05),对两种细胞周期的影响也有所不同。结论:人参皂甙Rh2通过不同机制抑制了MCF-7和MCF-7/ADM细胞的增殖,Rh2促进耐药细胞系MCF-7/ADM凋亡的研究结果显示其在抗肿瘤作用方面的独特性。 展开更多

关键词 人参皂甙RH2 mcf-7细胞系 增殖抑制 凋亡

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人端粒酶逆转录亚单位(hTERT)基因特异性siRNA对MCF-7细胞生长抑制作用的研究 被引量：3

5

作者 薛晓荣 李欣 +1 位作者 刘民 汤华 《实用癌症杂志》 2005年第5期452-454,461,共4页

目的研究人端粒酶逆转录亚单位(hTERT)特异性siRNA对MCF-7细胞体外生长及体内肿瘤形成能力的抑制作用。方法设计并化学合成针对hTERT的siRNA,用脂质体转染法将其导入MCF-7细胞内,通过软琼脂克隆形成试验及接种裸鼠的肿瘤形成实验,观察hT... 目的研究人端粒酶逆转录亚单位(hTERT)特异性siRNA对MCF-7细胞体外生长及体内肿瘤形成能力的抑制作用。方法设计并化学合成针对hTERT的siRNA,用脂质体转染法将其导入MCF-7细胞内,通过软琼脂克隆形成试验及接种裸鼠的肿瘤形成实验,观察hTERT-siRNA对人乳腺癌MCF-7细胞体外及体内的生长抑制作用。结果软琼脂克隆形成试验显示,hTERT-siRNA转染的MCF-7细胞克隆形成数量明显少于对照组,抑制率达到84.1%。裸鼠体内实验结果显示,hTERT-siRNA转染组肿瘤生长速度也明显慢于对照组。结论hTERT-siRNA在体内外均显示可以有效、特异地抑制肿瘤细胞的生长。 展开更多

关键词 人端粒酶逆转录亚单位 RNA干扰 小干扰RNA 乳腺癌 mcf-7细胞系

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魟鱼骨素对人乳腺癌细胞系MCF-7的作用 被引量：3

6

作者 薛万里 李锦成 +1 位作者 朱德淼 陶维 《江苏医药》 CAS CSCD 北大核心 2011年第19期2236-2238,F0003,共4页

目的研究魟鱼骨素(RCE)对人乳腺癌细胞系MCF-7细胞生长周期的影响。方法以不同浓度RCE处理MCF-7细胞不同时间,采用MTT法检测各组MCF-7细胞增殖情况,流式细胞仪检测药物作用前后对细胞周期的变化,Western blot检测药物作用前后细胞周期... 目的研究魟鱼骨素(RCE)对人乳腺癌细胞系MCF-7细胞生长周期的影响。方法以不同浓度RCE处理MCF-7细胞不同时间,采用MTT法检测各组MCF-7细胞增殖情况,流式细胞仪检测药物作用前后对细胞周期的变化,Western blot检测药物作用前后细胞周期素D1及p21蛋白表达。结果 RCE对MCF-7细胞增殖的抑制呈浓度依赖性和时间依赖性(P<0.05),且存在最大抑制浓度10μmol/L。随着RCE作用时间延长,S期细胞百分比明显增加,而G2/M期细胞比例明显减少(P<0.05),且细胞凋亡率随药物作用时间的延长明显升高(P<0.05)。随着药物作用时间延长,MCF-7细胞中的细胞周期素D1表达降低,p21蛋白表达逐渐增高(P<0.05)。结论 RCE抑制MCF-7细胞增殖,阻滞细胞从S期向G2期转化;其机制可能与调控细胞周期蛋白表达有关。RCE可能成为未来治疗乳腺癌药物之一。 展开更多

关键词 乳腺癌 魟鱼骨素 mcf-7细胞系

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微小RNA-145影响乳腺癌细胞系MCF-7增殖和凋亡的机制 被引量：3

7

作者 齐玉林 韩慧芳 张海新 《解剖学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第1期58-61,共4页

目的探讨微小RNA-145(miR-145)参与乳腺癌MCF-7细胞增殖与凋亡的机制。方法体外培养永生化乳腺癌细胞系MCF-7细胞,并转染miR-145。分别应用Real-time PCR与Western blotting检测mRNA和蛋白水平。细胞计数试剂盒8(CCK-8)检测各组细胞增... 目的探讨微小RNA-145(miR-145)参与乳腺癌MCF-7细胞增殖与凋亡的机制。方法体外培养永生化乳腺癌细胞系MCF-7细胞,并转染miR-145。分别应用Real-time PCR与Western blotting检测mRNA和蛋白水平。细胞计数试剂盒8(CCK-8)检测各组细胞增殖水平,流式细胞术检测不同处理组MCF-7细胞的凋亡水平。结果 Real-time PCR结果表明,高表达miR-145对MCF-7细胞Caspase-3、增殖细胞核抗原(PCNA)和Bcl-2的mRNA水平并无影响;而Western blotting实验结果表明,与对照组相比,转染miR-145 96 h可显著提高Caspase-3的表达,并抑制PCNA与Bcl-2的表达。CCK-8实验结果表明,过表达miR-145 72 h、96 h后MCF-7细胞增殖率降低,差异具有统计学意义(P<0. 05)。流式细胞术结果表明,过表达组MCF-7细胞的凋亡率显著高于对照组,差异具有统计学意义(P<0. 05)。结论 miR-145可通过下调PCNA与Bcl-2蛋白、上调Caspase-3蛋白的表达,从而抑制MCF-7细胞增殖和促进MCF-7细胞凋亡,有望成为乳腺癌治疗的新靶点。 展开更多

关键词 乳腺癌 mcf-7细胞系 微小RNA-145 细胞增殖 免疫印迹法 人

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不同来源MCF-7细胞系的增殖速度及ERα表达上的差异 被引量：2

8

作者 许炜茹 林洪生 +1 位作者 陈信义 张英 《中国细胞生物学学报》 CAS CSCD 2010年第1期121-125,共5页

通过体外培养不同来源的乳腺癌MCF-7细胞系发现细胞的形态、增殖速度都存在很大的差异。随后进行了NOD/SCID小鼠异种移植实验并对瘤体进行免疫组织化学的检测,发现两株MCF-7细胞系均丢失人表皮生长因子受体2(human epidermal growth fac... 通过体外培养不同来源的乳腺癌MCF-7细胞系发现细胞的形态、增殖速度都存在很大的差异。随后进行了NOD/SCID小鼠异种移植实验并对瘤体进行免疫组织化学的检测,发现两株MCF-7细胞系均丢失人表皮生长因子受体2(human epidermal growth factor receptor2,Her2),并且其中一株细胞系的雌激素受体α(estrogen receptorα,ERα)也丢失。本研究提示MCF-7细胞系细胞增殖速度变快可能与ERα的丢失相关。 展开更多

关键词 乳腺癌 mcf-7细胞系 雌激素受体

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VEGF-C基因转染对人乳腺癌MCF-7细胞VEGF-C表达的影响 被引量：2

9

作者 单明 张建国 郭宝良 《中国普外基础与临床杂志》 CAS 2008年第10期739-742,共4页

目的探讨将真核表达载体pcDNA3.1-VEGF-C重组质粒转染入人乳腺癌MCF-7细胞后VEGF-C表达的变化。方法通过脂质体介导方法,将构建好含有VEGF-C的重组质粒转染入人乳腺癌MCF-7细胞中,新霉素(G418)筛选得到稳定转染细胞系,RT-PCR和Western b... 目的探讨将真核表达载体pcDNA3.1-VEGF-C重组质粒转染入人乳腺癌MCF-7细胞后VEGF-C表达的变化。方法通过脂质体介导方法,将构建好含有VEGF-C的重组质粒转染入人乳腺癌MCF-7细胞中,新霉素(G418)筛选得到稳定转染细胞系,RT-PCR和Western blot方法检测稳定转染后细胞中VEGF-C mRNA和蛋白的表达。结果成功转染并获得稳定高表达VEGF-C的乳腺癌MCF-7细胞系,其转染组VEGF-C mRNA相对吸光度值(12.382±2.183)较空载组(6.039±1.950)显著上调(P<0.01)。Western blot检测转染组VEGF-C蛋白相对灰度值(0.971±0.186)较空载组(0.594±0.196)明显上调(P<0.05)。结论脂质体介导重组质粒pcDNA3.1-VEGF-C转染入人乳腺癌MCF-7细胞中可显著增加VEGF-C表达水平。 展开更多

关键词 mcf-7细胞系 真核表达 质粒 血管内皮生长因子-C 基因转染

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重组人骨形态发生蛋白2对乳腺癌MCF-7细胞增殖的影响 被引量：2

10

作者 刘书中 劳立峰 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2019年第3期458-463,共6页

背景:有研究发现重组人骨形态发生蛋白2的临床应用可增加恶性肿瘤的患病风险,但关于重组人骨形态发生蛋白2对乳腺癌MCF-7细胞增殖作用的影响及机制尚未被阐明。目的:探讨在体外及体内条件下重组人骨形态发生蛋白2对乳腺癌MCF-7细胞增殖... 背景:有研究发现重组人骨形态发生蛋白2的临床应用可增加恶性肿瘤的患病风险,但关于重组人骨形态发生蛋白2对乳腺癌MCF-7细胞增殖作用的影响及机制尚未被阐明。目的:探讨在体外及体内条件下重组人骨形态发生蛋白2对乳腺癌MCF-7细胞增殖能力的影响及其作用机制。方法:①体外实验:无血清条件下,不同浓度的重组人骨形态发生蛋白2处理MCF-7细胞,通过MTT检测重组人骨形态发生蛋白2对细胞增殖能力的影响。利用流式细胞分析技术检测细胞周期,通过Real-time PCR检测不同浓度的重组人骨形态发生蛋白2对p21、cyclinE表达的影响,应用Westernblot技术检测不同浓度的重组人骨形态发生蛋白2处理对p21、cyclinE蛋白水平及对PI3K/Akt磷酸化水平的影响;②体内实验:将14只雌性裸鼠随机等分为实验组和对照组,实验组成瘤方案为MCF-7细胞+重组人骨形态发生蛋白2,对照组成瘤方案为等量MCF-7细胞,分别于6周龄裸鼠皮下注射。结果与结论:①体外实验:无血清条件下,不同浓度的重组人骨形态发生蛋白2处理细胞,发现重组人骨形态发生蛋白2可显著抑制乳腺癌细胞系MCF-7的增殖能力。无血清条件下,不同浓度的重组人骨形态发生蛋白2处理细胞24 h,发现重组人骨形态发生蛋白2可增加G1期细胞所占比率。重组人骨形态发生蛋白2可显著促进p21的表达,显著抑制cyclinE的表达,并显著抑制PI3K/Akt信号通路的磷酸化过程;②体内实验:实验组裸鼠皮下瘤体体积均较对照组低,免疫组化检测显示重组人骨形态发生蛋白2处理可显著降低瘤体组织中ki-67的表达水平;③研究证实在体外及体内条件下重组人骨形态发生蛋白2通过影响PI3K/Akt信号通路对乳腺癌MCF-7细胞增殖能力发挥显著抑制作用,从基础水平进一步论证了重组人骨形态发生蛋白2的临床应用不能显著增加乳腺癌的患病风险,为脊柱融合及骨不� 展开更多

关键词 重组人骨形态发生蛋白2 PI3K/AKT 乳腺癌 mcf-7细胞系 细胞增殖 细胞周期蛋白 体内实验 体外研究 临床应用 骨形态发生蛋白质类 肿瘤 细胞增殖 组织工程

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靶向DENN-SV基因的shRNA真核表达载体的构建 被引量：1

11

作者 骆振华 李锦成 +1 位作者 张秀梅 冯卓 《中国细胞生物学学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第1期36-40,共5页

该研究根据DENN-SV序列及shRNA设计原则,设计四个靶点序列,退火后用DNA重组技术与pRNAi-U6.1/Neo空载体连接,转化到感受态E.coli中。扩增菌株,抽提质粒,进行酶切、DNA测序鉴定。将重组的真核表达载体转染人乳腺癌MCF-7细胞并使用RT-PCR... 该研究根据DENN-SV序列及shRNA设计原则,设计四个靶点序列,退火后用DNA重组技术与pRNAi-U6.1/Neo空载体连接,转化到感受态E.coli中。扩增菌株,抽提质粒,进行酶切、DNA测序鉴定。将重组的真核表达载体转染人乳腺癌MCF-7细胞并使用RT-PCR及Western blot检测其抑制DENN-SV mRNA表达的效率,以MTT法绘制生长曲线。测序结果与设计序列相同,并已成功转染进入人乳腺癌MCF-7细胞,可见GFP(绿色荧光蛋白)表达,且都具有抑制作用(P<0.01),DS-1组的抑制效果最好;MTT法绘制生长曲线结果表明,实验组经该载体转染后细胞增殖程度显著减少(P<0.05)。该研究应用RNAi技术成功构建了小干扰RNA重组体,为进一步研究乳腺癌基因治疗奠定了基础。 展开更多

关键词 DENN-SV 短发夹RNA RNA干扰 mcf-7细胞系

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△Np63α过表达乳腺癌细胞系的建立 被引量：1

12

作者 杜志坚 王园园 +1 位作者 田延锋 赵增仁 《广东医学》 CAS CSCD 北大核心 2012年第5期593-595,共3页

目的建立稳定过表达△Np63α的乳腺癌细胞系,为研究△Np63α的功能奠定基础。方法利用MCF-7细胞系作为模型,通过表达△Np63α的PCDNA3.1质粒转染MCF-7细胞,利用质粒的抗药性筛选MCF-7细胞,从而获得稳定过表达△Np63α的MCF-7细胞,用Real... 目的建立稳定过表达△Np63α的乳腺癌细胞系,为研究△Np63α的功能奠定基础。方法利用MCF-7细胞系作为模型,通过表达△Np63α的PCDNA3.1质粒转染MCF-7细胞,利用质粒的抗药性筛选MCF-7细胞,从而获得稳定过表达△Np63α的MCF-7细胞,用Real-time PCR和Western blot方法检测验证目的基因表达。结果通过瞬时转染和药物筛选获得了稳定过表达△Np63α的MCF-7细胞。结论成功构建了过表达△Np63α的MCF-7细胞系和转染空质粒的MCF-7对照细胞系,为下一步研究NP63α的功能奠定了基础。 展开更多

关键词 P63 乳腺癌 mcf-7细胞系 过表达

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SCE诱导MCF-7细胞凋亡及其相关基因表达的研究

13

作者 张敏 陈莉 徐瑞成 《中国组织化学与细胞化学杂志》 CAS CSCD 2005年第5期525-530,共6页

目的观察鲨鱼软骨提取物(SCE)对MCF-7细胞凋亡的诱导作用,并进一步研究在此过程中BCL-2和Caspase-3的表达。方法将不同浓度的SCE作用于MCF-7细胞,观察其作用的时间效应及剂量效应;在光镜和电镜下观察其形态变化;用流式细胞术分析细胞DN... 目的观察鲨鱼软骨提取物(SCE)对MCF-7细胞凋亡的诱导作用,并进一步研究在此过程中BCL-2和Caspase-3的表达。方法将不同浓度的SCE作用于MCF-7细胞,观察其作用的时间效应及剂量效应;在光镜和电镜下观察其形态变化;用流式细胞术分析细胞DNA含量的改变;用免疫组织化学法观察在此过程中BCL-2和Caspase-3的表达。结果SCE能抑制MCF-7细胞生长,在一定剂量和时间范围内引起细胞凋亡,并显示剂量和时间效应,在此过程中BCL-2蛋白表达减弱。结论SCE能明显抑制MCF-7细胞体外生长,并可诱导MCF-7细胞凋亡,其作用机制可能与下调Bcl-2蛋白的表达水平有关。 展开更多

关键词 鲨鱼软骨提取物 mcf-7细胞系 细胞凋亡 BCL-2 CASPASE-3

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表达Cre重组酶Cre-pCEP4载体的构建及其在Cre/loxP重组系统中的应用

14

作者 周杨 朱建国 +6 位作者 唐小春 闫森 宋娜 张明军 李莉 欧阳红生 逄大欣 《吉林大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2011年第2期196-201,F0002,共7页

目的:构建表达Cre重组酶的载体Cre-pCEP4,并验证其能够有效识别loxP位点,为人类疾病动物模型的建立提供依据。方法:构建重组载体Cre-pCEP4和pStop-eGFP,利用Fugene HD转染猪胚胎成纤维细胞(PEF)和MCF-7细胞系,利用荧光显微镜观察绿色荧... 目的:构建表达Cre重组酶的载体Cre-pCEP4,并验证其能够有效识别loxP位点,为人类疾病动物模型的建立提供依据。方法:构建重组载体Cre-pCEP4和pStop-eGFP,利用Fugene HD转染猪胚胎成纤维细胞(PEF)和MCF-7细胞系,利用荧光显微镜观察绿色荧光蛋白表达情况。结果:成功构建重组载体Cre-pCEP4和pStop-eGFP,将2个载体瞬时共转染PEF;经潮酶素B筛选出Cre重组酶稳定表达的MCF-7细胞系瞬时转染pStop-eGFP,在荧光显微镜下观察2种细胞均有绿色荧光蛋白的表达。而单独转染pStop-eGFP的MCF-7细胞系和PEF均未见绿色荧光蛋白的表达。结论:重组载体Cre-pCEP4在细胞内能够表达Cre重组酶,并且表达的Cre重组酶能够识别loxP位点,删除两同向loxP间的DNA片段。 展开更多

关键词 Cre-pCEP4 CRE/LOXP重组系统 猪胚胎成纤维细胞 mcf-7细胞系

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基因枪介导不同真核质粒DNA转染体外细胞系的实验研究

15

作者 蒙世芳 陈建海 +1 位作者 刘艺杰 赖春丽 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第4期316-317,共2页

目的:建立基因枪子的弹制备及将不同质粒DNA转染体外培养MCF-7细胞系的方法。方法:以亚精氨-氯化钙沉淀法制备子弹,采用基因枪方法分别将真核表达质粒pEG-FP,Pmcherry转染对照组和实验组MCF-7细胞,转染24h后,利用荧光显微镜观察细胞中... 目的:建立基因枪子的弹制备及将不同质粒DNA转染体外培养MCF-7细胞系的方法。方法:以亚精氨-氯化钙沉淀法制备子弹,采用基因枪方法分别将真核表达质粒pEG-FP,Pmcherry转染对照组和实验组MCF-7细胞,转染24h后,利用荧光显微镜观察细胞中红、绿荧光蛋白的表达情况。结果:制备了基因枪子弹,基因枪介导的pEGFP、Pmcherry能够分别和共同转染入体外培养的MCF-7细胞中,转染后24h可检测到红、绿色荧光,而对照组则没有荧光蛋白的表达。结论:基因枪能够有效介导外源基因转移并能够实现两种基因的共同转移,基因枪转染的MCF-7细胞能够有效表达报告基因。 展开更多

关键词 基因枪 细胞转染 mcf-7细胞系

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阿司匹林对人乳腺癌细胞株MCF-7增殖和凋亡的影响

16

作者 李红涛 《中国实用医药》 2012年第15期159-160,共2页

目的研究阿司匹林对人乳腺癌癌细胞株MCF-7增殖和凋亡的影响。方法 MTT法、FCM法、电镜等技术。结果 MTT法显示阿司匹林对人乳腺癌MCF-7细胞有较强的抑制作用;FCM法细胞的凋亡率随阿司匹林浓度的增大而增加;电镜可见典型的细胞凋亡形态... 目的研究阿司匹林对人乳腺癌癌细胞株MCF-7增殖和凋亡的影响。方法 MTT法、FCM法、电镜等技术。结果 MTT法显示阿司匹林对人乳腺癌MCF-7细胞有较强的抑制作用;FCM法细胞的凋亡率随阿司匹林浓度的增大而增加;电镜可见典型的细胞凋亡形态学特征。结论阿司匹林能够显著抑制MCF-7细胞增殖及诱导凋亡。 展开更多

关键词 阿司匹林 mcf-7细胞系 凋亡

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新型大黄酸衍生物4F抑制MCF-7细胞增殖并通过旁凋亡途径诱导细胞死亡（英文） 被引量：3

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作者 刘云风 田炜 +4 位作者 蓝富 亢健康 庞会锋 侯华新 黎丹戎 《广西医科大学学报》 CAS 2019年第2期163-168,共6页

目的:探讨大黄酸及其衍生物4F对MCF-7细胞增殖能力、亚显微结构的影响及诱导细胞死亡的分子机制。方法:采用CCK-8法、克隆形成实验、流式细胞仪检测比较4F、大黄酸和顺铂对乳腺癌细胞MCF-7的抗肿瘤活性;采用透射电镜观察MCF-7细胞质空... 目的:探讨大黄酸及其衍生物4F对MCF-7细胞增殖能力、亚显微结构的影响及诱导细胞死亡的分子机制。方法:采用CCK-8法、克隆形成实验、流式细胞仪检测比较4F、大黄酸和顺铂对乳腺癌细胞MCF-7的抗肿瘤活性;采用透射电镜观察MCF-7细胞质空泡及线粒体;免疫印迹实验则用于测定旁凋亡、自噬和凋亡相关蛋p62、微管相关蛋白轻链3(LC3)、葡萄糖调节蛋白(Grp)78、cleaved caspase-9和caspase-7的表达水平。结果:4F比大黄酸具有更强的细胞毒性(P<0.05),但均对MCF-7细胞凋亡率无明显影响(P>0.05);4F处理的MCF-7细胞质中可观察到大量空泡及肿胀的线粒体;免疫印迹结果显示Grp78、p62及LC3表达水平增高(P<0.05),而凋亡相关蛋白cleaved caspase-9及caspase-7表达水平无显著改变(P>0.05)。结论:4F可能通过旁凋亡,一种非凋亡或自噬性死亡的方式,诱导MCF-7细胞死亡;4F有望成为克服凋亡耐药的候选药物。 展开更多

关键词 细胞质空泡 旁凋亡 细胞死亡 乳腺癌mcf-7细胞系 大黄酸

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靶向抑制基因DENN-SV诱导人乳腺癌细胞系MCF-7凋亡与NF-κB的关系 被引量：1

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作者 李锦成 骆振华 《中国妇幼保健》 CAS 北大核心 2014年第6期953-957,共5页

目的:研究DENN-SV基因在人乳腺癌细胞系MCF-7中抗凋亡作用的可能机制。方法:将前期试验筛选出的含最佳靶点序列的菌株扩增并抽提质粒,将实验分为空白组、空白载体转染组及最佳靶点组。将实验分为两组,每组分为空白组、空白载体转染组及... 目的:研究DENN-SV基因在人乳腺癌细胞系MCF-7中抗凋亡作用的可能机制。方法:将前期试验筛选出的含最佳靶点序列的菌株扩增并抽提质粒,将实验分为空白组、空白载体转染组及最佳靶点组。将实验分为两组,每组分为空白组、空白载体转染组及最佳靶点组,一组转染后48h给予TRAIL 25 ng/ml处理4 h,另一组不予TRAIL处理。收集细胞,采用流式细胞技术检测细胞凋亡率,采用Elisa法测定细胞裂解液中NF-κB含量,采用EMSA法检测核蛋白样品中NF-κB活性。结果:流式细胞仪检测TRAIL诱导凋亡效果增强,与空白组、阴性对照组相比较差异具有统计学意义(P<0.05);Elisa检测NF-κB结果示实验组的NF-κB表达量显著降低差异有统计学意义(P<0.05),EMSA检测NF-κB结果示实验组的NF-κB活性减弱差异有统计学意义(P<0.05)。结论:干扰DENN-SV基因的表达后,给予TRAIL处理可引起MCF-7细胞的凋亡率增高。这种现象的机制可能与NF-κB活性有关,且该现象与NF-κB的关系与TRAIL的作用没有直接联系。 展开更多

关键词 DENN—SV 短发夹RNA RNA干扰 人mcf-7细胞系 NF—κB

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瘦素对人乳腺癌MCF-7细胞DMBT1表达的影响 被引量：1

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作者 魏萌 司丽娜 +2 位作者 陈磊 程露阳 杨松鹤 《承德医学院学报》 2018年第3期252-253,共2页

乳腺癌是严重威胁女性生命与健康的恶性肿瘤之一,在中国,乳腺癌发病率已占女性恶性肿瘤首位[1]。肥胖已成为世界范围内的公共健康问题,而肥胖已被证实与乳腺癌的发生、发展及转移密切相关[2]。瘦素是肥胖基因(obese gene,Ob)的产物,具... 乳腺癌是严重威胁女性生命与健康的恶性肿瘤之一,在中国,乳腺癌发病率已占女性恶性肿瘤首位[1]。肥胖已成为世界范围内的公共健康问题,而肥胖已被证实与乳腺癌的发生、发展及转移密切相关[2]。瘦素是肥胖基因(obese gene,Ob)的产物,具有调节能量平衡、生殖、免疫、炎症、造血及细胞增殖等多种生物学作用[3]。研究显示,瘦素可通过正向调节雌激素的分泌,进而影响乳腺癌的发生发展[4]。DMBT1基因(deleted in malignant brain tumors)是一种候选的肿瘤抑制基因[5],也有研究证实,DMB T1是受雌激素调节的基因[6]。 展开更多

关键词 瘦素 乳腺癌mcf-7细胞系 DMBT1

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人体乳腺癌细胞系BGaP-37和MGF-7的细胞遗传学研究

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作者 刘喜富 柳家英 +5 位作者 阎武 邹俊华 韩玲 刘卉 王松霞 张嘉庆 《神经药理学报》 1992年第4期1-5,共5页

本文应用普通染色体G一显带技术和高分辨染色体显带技术对两个人体乳癌细胞系进厅了详尽的细胞遗传学研究。结果显示两个细胞系均具有较复,桀的染色体结构和数目_}辛常。Bcap一3 7细胞系染色体众数为62～63,具有23个可识别其结构的标记... 本文应用普通染色体G一显带技术和高分辨染色体显带技术对两个人体乳癌细胞系进厅了详尽的细胞遗传学研究。结果显示两个细胞系均具有较复,桀的染色体结构和数目_}辛常。Bcap一3 7细胞系染色体众数为62～63,具有23个可识别其结构的标记染色体。MCF一7细胞系染色体众效为55—56,具有l9个可识别其结构的标记染色体,进一步分析认为,第1、3、5、7、11、13和17号染色体的数目和结构改变,可能与乳腺癌的发生和演进有一定联系;染色体断点1p^(11)(1q^(11))、1p^(13)、3p^(21)、3q^(11)、5q^(11)、7p^(13)、7q^(22)及导致11p^-、17p^-6q^-、13q^-的断裂点可能通过癌基因的激活和抗癌基因的丢失而起一定怍用。 展开更多

关键词 人体乳隙癌 Bcap—37mcf—7细胞系 染色体G—显带

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