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题名人PPARαLBD在大肠杆菌中的表达纯化及鉴定
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作者
李苌清
袁野
杨贵忠
章涛
周岐新
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机构
重庆医科大学药学院药理教研室重庆市生物化学及分子药理学重点实验室
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出处
《中国生物工程杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2006年第12期18-21,共4页
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基金
国家自然科学基金资助项目(30572353)
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文摘
过氧化物酶体增殖物活化受体α(peroxisomeprolifterator-activatedreceptorα,PPARα)属于Ⅱ型核受体,通过其配体结合区(ligandbindingdomain,LBD)结合特定的激动剂对参与机体代谢的关键酶、受体等的表达起调节作用。从人肝组织提取总RNA,RT-PCR扩增出PPARαLBD的cDNA,将其克隆入表达载体pMAL-p2X麦芽糖结合蛋白(maltosebindingprotein,MBP)编码基因malE序列的下游,重组质粒转化E·coliTB1,进行了高效的可溶性融合蛋白表达。产物经多糖亲和树脂(amylose-resin)纯化后,获得了电泳纯的MBP-PPARαLBD。MBP-PPARαLBD用Xa因子酶切,经Amylose-resin亲和层析、DE-52阴离子交换层析纯化回收,获得了电泳纯的PPARαLBD。为进一步比较MBP-PPARαLBD和PPARαLBD的功能,筛选PPARα配体奠定了基础。
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关键词
PPARαLBD
mbp融合蛋白表达纯化
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Keywords
PPARαLBD mbp Fusion protein expression Purification
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分类号
Q786
[生物学—分子生物学]
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