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人MAdCAM-1真核表达载体的构建及其表达细胞株的建立
被引量：
1
1
作者
赖燕来
高杰英
+1 位作者
陈志华
孔祥英
《中国免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2002年第1期9-12,共4页
目的:建立表达人MAdCAM-1的细胞模型。方法:从pUC21/hMAdCAM-1质粒酶切下hMAdCAM-1全长cDNA片段,将其克隆于巨细胞病毒载体pCIneo中,构建出由CMV启动子控制的重组真核表达载体pCIneo-hMAd,经脂质体介导转染至CHO细胞,以G418筛选抗性克...
目的:建立表达人MAdCAM-1的细胞模型。方法:从pUC21/hMAdCAM-1质粒酶切下hMAdCAM-1全长cDNA片段,将其克隆于巨细胞病毒载体pCIneo中,构建出由CMV启动子控制的重组真核表达载体pCIneo-hMAd,经脂质体介导转染至CHO细胞,以G418筛选抗性克隆。结果:筛选出的阳性克隆细胞以免疫荧光和免疫酶标染色法检测,表明有人MAdCAM-1分子表达;其细胞裂解物经免疫印迹分析,证实约63 kD的新增蛋白带与抗 hMAdCAM-1抗体有特异性结合反应;淋巴细胞粘附实验结果提示表达产物具有一定的功能活性。结论:成功地获得了表达人MAdCAM-1分子的细胞株,为进一步研究其生物学功能及其作用机制奠定了基础。
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关键词
粘膜血管地址素
真核表达
中华仓鼠
卵巢细胞
madcam
-
1
真核表达载体
下载PDF
职称材料
题名
人MAdCAM-1真核表达载体的构建及其表达细胞株的建立
被引量：
1
1
作者
赖燕来
高杰英
陈志华
孔祥英
机构
军事医学科学院微生物流行病研究所
出处
《中国免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2002年第1期9-12,共4页
基金
国家973课题(G1999 054 103)
文摘
目的:建立表达人MAdCAM-1的细胞模型。方法:从pUC21/hMAdCAM-1质粒酶切下hMAdCAM-1全长cDNA片段,将其克隆于巨细胞病毒载体pCIneo中,构建出由CMV启动子控制的重组真核表达载体pCIneo-hMAd,经脂质体介导转染至CHO细胞,以G418筛选抗性克隆。结果:筛选出的阳性克隆细胞以免疫荧光和免疫酶标染色法检测,表明有人MAdCAM-1分子表达;其细胞裂解物经免疫印迹分析,证实约63 kD的新增蛋白带与抗 hMAdCAM-1抗体有特异性结合反应;淋巴细胞粘附实验结果提示表达产物具有一定的功能活性。结论:成功地获得了表达人MAdCAM-1分子的细胞株,为进一步研究其生物学功能及其作用机制奠定了基础。
关键词
粘膜血管地址素
真核表达
中华仓鼠
卵巢细胞
madcam
-
1
真核表达载体
Keywords
madcam
-1
eukaryotic
expression
cho
cell
分类号
R392.11 [医药卫生—免疫学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
人MAdCAM-1真核表达载体的构建及其表达细胞株的建立
赖燕来
高杰英
陈志华
孔祥英
《中国免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2002
1
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职称材料
已选择
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参考文献
引证文献
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