U0126对谷氨酸神经毒性损伤模型大鼠的脑保护作用 被引量：7

1

作者 赵精咪 孙莉 +1 位作者 梁浩 程焱 《天津医药》 CAS 北大核心 2019年第3期235-240,共6页

目的探索U0126对脑组织谷氨酸神经毒性的保护作用及可能机制。方法健康成年雄性SD大鼠皮层注射N-甲基-D-天冬氨酸(NMDA)建立脑组织谷氨酸神经毒性模型。首先,采用不同浓度NMDA(50、100、200mmol/L)及处理不同时间(3、6、12、24 h)筛选... 目的探索U0126对脑组织谷氨酸神经毒性的保护作用及可能机制。方法健康成年雄性SD大鼠皮层注射N-甲基-D-天冬氨酸(NMDA)建立脑组织谷氨酸神经毒性模型。首先,采用不同浓度NMDA(50、100、200mmol/L)及处理不同时间(3、6、12、24 h)筛选最佳的建模条件。根据选定的最佳条件,实验设对照组、MAPK/ERK1/2抑制剂U0126单独处理组(2 g/L)、NMDA组(200 mmol/L)、不同浓度(0.5、1、2 g/L)U0126联合NMDA处理组。各组处理24 h后处死动物,脑组织切片后行HE染色组织评价损伤;蛋白质印迹法检测损伤部位环氧合酶-2(COX-2)、诱导型一氧化氮合酶(iNOS)、Caspase-3(活化形式)及磷酸化ERK1/2(p-ERK1/2)表达水平,确定U0126在脑组织谷氨酸神经毒性损伤中的保护作用。结果 (1)NMDA以时间和浓度依赖的方式导致大鼠皮层兴奋毒性损伤,激活MAPK/ERK1/2信号通路,加重脑组织损伤,选取200 mmol/L NMDA处理24 h进行建模。(2)与对照组相比,NMDA组脑损伤部位COX-2、iNOS、Caspase-3(活化形式)、p-ERK1/2表达明显增加。U0126+NMDA处理组与NMDA组相比,COX-2、iNOS、Caspase-3(活化形式)、p-ERK1/2表达水平随U0126浓度升高而降低,脑损伤的面积显著减小。结论 U0126对大鼠皮层谷氨酸神经毒性损伤具有保护作用,其机制可能与抑制ERK1/2激活及其下游的炎症、凋亡信号途径有关。 展开更多

关键词 谷氨酸 N-甲基天冬氨酸 map激酶激酶激酶类 神经毒性 mapK/ERK1/2 环氧合酶-2 诱导型一氧化氮合酶 Caspase-3

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治疗性低温减轻大鼠脑缺血再灌注损伤时GSTM1与ASK1-JNK-p38MAPK信号通路的关系

2

作者 朱慧杰 盖群 +3 位作者 王明山 时飞 袁阳 张高峰 《中华麻醉学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第4期476-481,共6页

目的评价治疗性低温减轻大鼠脑缺血再灌注损伤(CIRI)时谷胱甘肽S转移酶μ1(GSTM1)与细胞凋亡信号调节激酶1(ASK1)-c-Jun氨基末端激酶(JNK)/p38丝裂原活化蛋白激酶(p38 MAPK)信号通路的关系。方法清洁级健康雄性SD大鼠100只,8周龄,体质量... 目的评价治疗性低温减轻大鼠脑缺血再灌注损伤(CIRI)时谷胱甘肽S转移酶μ1(GSTM1)与细胞凋亡信号调节激酶1(ASK1)-c-Jun氨基末端激酶(JNK)/p38丝裂原活化蛋白激酶(p38 MAPK)信号通路的关系。方法清洁级健康雄性SD大鼠100只,8周龄,体质量260~280 g,采用随机数字表法分为5组(n=20):假手术组(S组)、脑缺血再灌注组(I/R组)、治疗性低温组(H组)、GSTM1抑制剂+治疗性低温组(IH组)和GSTM1抑制剂+ASK1抑制剂+治疗性低温组(IAH组)。采用线栓法建立CIRI模型,阻断大鼠左侧大脑中动脉2 h后拔出线栓恢复血流灌注,手术期间维持大鼠脑温36~37℃。H组于再灌注即刻用75%酒精擦拭大鼠头部及颈部,维持脑温32~33℃3 h,其余同I/R组;IH组分别于造模前24和1 h时腹腔注射GSTM1抑制剂依他尼酸8.6 mg/kg,其余同H组;IAH组于造模前4 d开始口服ASK1抑制剂Selonsertib 10 mg/kg,1次/d,连续4 d,其余同IH组。于再灌注24 h行改良神经功能缺损评分(mNSS),随后处死大鼠后取脑,采用TTC染色法观察脑梗死情况并计算梗死体积百分比,Western blot法检测GSTM1、ASK1、磷酸化ASK1(p-ASK1)、JNK、磷酸化JNK(p-JNK)、p-38 MAPK、磷酸化p-38 MAPK(p-p38 MAPK)的表达水平;HE染色观察神经细胞形态改变,TUNEL法检测神经细胞凋亡率。结果与S组比较,I/R组mNSS、神经细胞凋亡率、脑梗死体积百分比、p-ASK1/ASK1比值、p-JNK/JNK比值及p-p38 MAPK/p38MAPK比值升高,GSTM1表达下调(P<0.05);与I/R组和IH组比较,H组mNSS、神经细胞凋亡率、脑梗死体积百分比、p-ASK1/ASK1比值、p-JNK/JNK比值及p-p38 MAPK/p38 MAPK比值降低,GSTM1表达上调(P<0.05),神经细胞损伤减轻;与IH组比较,IAH组mNSS、神经细胞凋亡率、脑梗死体积百分比、p-ASK1/ASK1比值、p-JNK/JNK比值及p-p38 MAPK/p38 MAPK比值降低(P<0.05),GSTM1表达差异无统计学意义(P>0.05),神经细胞损伤减轻。结论治疗性低温减轻大鼠CIRI的机制与上调GSTM1表达,抑制ASK1-JNK-p38 展开更多

关键词 低温 人工 再灌注损伤 脑 谷胱甘肽S转移酶 map激酶激酶激酶类 JNK丝裂原活化蛋白激酶类 p38丝裂原活化蛋白激酶

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磷酸化MEK／ERK／核因子κB在寻常性银屑病皮损中高表达 被引量：6

3

作者 蔓小红 张晓艳 +3 位作者 应航宇 唐娟 张立新 尤立平 《中华皮肤科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第3期160-163,共4页

目的探讨MAPK信号转导通路中磷酸化MEK和ERK及核因子（NF）-κB在寻常性银屑病发病中的作用。方法采用免疫组化和Western印迹法检测30例寻常性银屑病皮损及15例正常人表皮中磷酸化MEK、ERK和NF—κB的表达，并利用计算机图像采集与分析... 目的探讨MAPK信号转导通路中磷酸化MEK和ERK及核因子（NF）-κB在寻常性银屑病发病中的作用。方法采用免疫组化和Western印迹法检测30例寻常性银屑病皮损及15例正常人表皮中磷酸化MEK、ERK和NF—κB的表达，并利用计算机图像采集与分析系统对免疫组化结果进行平均吸光度（A值）测定，并对免疫印迹测定结果进行灰度扫描、统计学处理。结果免疫组化检测显示，寻常性银屑病皮损中磷酸化MEK、ERK和NF—κB的表达（A值分别为0．36±0．03、0．36±0．04和0．26±0．04）明显高于正常人皮肤（A值分别为0．22±0．02、0．18±0．03和0．16±0．03），两组比较，P值均〈0．01。Western印迹结果（两组比较，P值均〈0．01）与免疫组化检测一致。结论寻常性银屑病皮损中磷酸化MEK、ERK和NF-κB表达水平均增高，MAPK信号通路中上下游分子的异常激活可能参与了银屑病的发病。 展开更多

关键词 银屑病 细胞外信号调节map激酶类 map激酶激酶激酶类 NF—κB

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木犀草苷对阿尔茨海默病模型细胞凋亡和炎性因子表达的研究 被引量：2

4

作者 王翠 杨畅 +4 位作者 金玉 高蜜 张雯 王琼 金海涛 《天津医药》 CAS 北大核心 2023年第7期701-706,共6页

目的探究木犀草苷通过下调有丝分裂原活化蛋白激酶激酶激酶3(MEKK3)对阿尔茨海默病(AD)模型细胞凋亡和炎性因子表达的影响及可能机制。方法体外培养PC12细胞,经不同剂量(6.25、12.5、25 mg/L)木犀草苷孵育24 h后,建立β淀粉样肽(Aβ)_(2... 目的探究木犀草苷通过下调有丝分裂原活化蛋白激酶激酶激酶3(MEKK3)对阿尔茨海默病(AD)模型细胞凋亡和炎性因子表达的影响及可能机制。方法体外培养PC12细胞,经不同剂量(6.25、12.5、25 mg/L)木犀草苷孵育24 h后,建立β淀粉样肽(Aβ)_(25-35)诱导的AD细胞模型;另转染MEKK3小干扰RNA或过表达载体至PC12细胞,经25 mg/L木犀草苷孵育24 h后,建立Aβ_(25-35)诱导的AD细胞模型。细胞计数试剂盒-8(CCK-8)检测细胞增殖抑制率,流式细胞术检测细胞凋亡率,酶联免疫吸附试验(ELISA)检测炎性因子[肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素(IL)-6、IL-1β]水平,蛋白免疫印迹法(Western blot)检测MEKK3蛋白表达。结果木犀草苷可降低Aβ_(25-35)诱导的PC12细胞增殖抑制率、凋亡率、炎性因子(TNF-α、IL-6、IL-1β)水平,且降低细胞中MEKK3蛋白表达(P<0.05);敲减MEKK3可降低Aβ_(25-35)诱导的PC12细胞增殖抑制率、凋亡率、炎性因子(TNF-α、IL-6、IL-1β)水平,过表达MEKK3呈相反作用;上调MEKK3表达可减弱木犀草苷对Aβ_(25-35)诱导的PC12细胞增殖抑制率、凋亡率和炎性因子水平的影响。结论木犀草苷可能通过下调MEKK3抑制AD模型细胞凋亡及炎性因子水平,具有治疗AD的潜在价值。 展开更多

关键词 木犀草苷 阿尔茨海默病 PC12细胞 map激酶激酶激酶类 细胞凋亡 炎性因子

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TAK1促进人晶状体上皮细胞上皮间质转化的体外研究 被引量：3

5

作者 董宁 汤欣 +2 位作者 苑晓勇 宋慧 李军 《中华眼科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第4期278-284,共7页

目的 探讨转化生长因子活化蛋白激酶1（TAK1）在LEC上皮间质转化中的作用.方法 实验研究.构建TAK1-pcDNA3和转化生长因子活化蛋白激酶1结合蛋白1（TAB1）-pcDNA3表达载体,采用脂质体介导转染技术将TAK1-pcDNA3和TAB 1-pcDNA3表达载体瞬... 目的 探讨转化生长因子活化蛋白激酶1（TAK1）在LEC上皮间质转化中的作用.方法 实验研究.构建TAK1-pcDNA3和转化生长因子活化蛋白激酶1结合蛋白1（TAB1）-pcDNA3表达载体,采用脂质体介导转染技术将TAK1-pcDNA3和TAB 1-pcDNA3表达载体瞬时转染入人LEC系人晶状体上皮（HLE）B-3细胞中,免疫印迹法测定验证过表达效果.免疫印迹法及免疫荧光染色检测LEC中TAK1、磷酸化的TAK1、E-cadherin和纤维连接蛋白的表达.采用实时定量PCR分析LEC中α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）和Ⅰ型胶原的表达.计量资料比较采用Student＇st检验、单样本的t检验或单因素方差分析（多重比较采用LSD检验）.结果 通过构建人TAK1-pcDNA3和TAB1-pcDNA3表达载体获得TAK1和TAB1共同过表达的HLE B-3细胞.免疫印迹法测定TAK1蛋白表达量,TAK1-pcDNA3过表达组（1.00±0.03）与对照组（0.19±0.09）对比：t=8.02,P＜0.01;TAB1蛋白表达量,TAB1-pcDNA过表达组（1.00±0.02）与对照组（0.22±0.08）对比：t=7.63,P＜0.01.TAK1和TAB1共同过表达促使HLE B-3细胞内的E-cadherin表达下调：免疫印迹法测定E-cadherin蛋白表达量/Beta-actin,对照组、TAK1和TAB1共同过表达组、TAK1过表达组、TAB1过表达组分别为1.00±0.02、0.12±0.03、0.98±0.09、0.92±0.08（F=31.03,P＜0.01）;而纤维连接蛋白表达上调：免疫印迹法测定纤维连接蛋白表达量/Beta-actin,对照组、TAK1和TAB1共同过表达组、TAK1过表达组、TAB1过表达组分别为0.11±0.03、1.00±0.05、0.16±0.04、0.21±0.05（F=35.12,P＜0.01）,TAK1和TAB1共同过表达使LEC发生上皮间质转化.HLE B-3细胞在TGF-β2的刺激下明显发生上皮间质转化,但这种效果被TAK1 siRNA和TAK1化学抑制剂所抑制.结论 TAK1可诱导HLE B-3细胞发生上皮间质转化. 展开更多

关键词 晶体 上皮细胞 上皮-间质转化 map激酶激酶激酶类 衔接蛋白质类 信号转导

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靶向Tak1基因的siRNA干扰对小鼠腹腔巨噬细胞的生物学效应 被引量：3

6

作者 王钦富 李坤 +3 位作者 李志 徐娜 董敏 韩慧 《中国医药生物技术》 CSCD 2011年第1期36-39,共4页

目的通过小干扰RNA(siRNA)使小鼠腹腔巨噬细胞Tak1基因沉默,观察Tak1基因对腹腔巨噬细胞细胞因子释放的影响。方法以靶向Tak1基因的siRNA作为实验组,同时设立空白对照组,瞬时转染昆明种小鼠腹腔巨噬细胞,采用荧光定量PCR技术定量检测Tak... 目的通过小干扰RNA(siRNA)使小鼠腹腔巨噬细胞Tak1基因沉默,观察Tak1基因对腹腔巨噬细胞细胞因子释放的影响。方法以靶向Tak1基因的siRNA作为实验组,同时设立空白对照组,瞬时转染昆明种小鼠腹腔巨噬细胞,采用荧光定量PCR技术定量检测Tak1 mRNA表达水平;采用Western blotting技术测定Tak1表达抑制情况,进而实现Tak1siRNA干扰作用的优化;并观察LPS攻击后腹腔巨噬细胞IL-1β的表达水平。结果细胞分别转染0.6、1.2、1.6μmol/LTak1 siRNA,mRNA抑制率为69.73%、80.85%、88.78%,最佳转染浓度为1.6μmol/L。Tak1蛋白在转染48h出现良好沉默效果,以1.6μmol/L siRNA效果最好。转染后小鼠腹腔巨噬细胞在100ng/ml LPS刺激下,细胞因子IL-1β分泌水平明显升高(P<0.01)。结论靶向Tak1基因的siRNA具有较好的靶基因沉默效果。 展开更多

关键词 转化生长因子Β RNA 小分子干扰 map激酶激酶激酶类 巨噬细胞 腹膜

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微小RNA调控的信号通路在急性淋巴细胞白血病耐药中的研究进展 被引量：3

7

作者 李曾莉 刘文君 《国际输血及血液学杂志》 CAS 2019年第4期344-350,共7页

急性淋巴细胞白血病(ALL)是最常见的儿童恶性肿瘤之一,也是儿童癌症相关死亡的主要原因。目前,化疗是ALL的主要治疗方法,但是对化疗药物耐药是ALL患儿治疗过程中的主要障碍。微小RNA(miRNA)是一类内源性非编码的单链小分子RNA,在细胞增... 急性淋巴细胞白血病(ALL)是最常见的儿童恶性肿瘤之一,也是儿童癌症相关死亡的主要原因。目前,化疗是ALL的主要治疗方法,但是对化疗药物耐药是ALL患儿治疗过程中的主要障碍。微小RNA(miRNA)是一类内源性非编码的单链小分子RNA,在细胞增殖、分化和凋亡等多种生理过程中发挥重要作用。近年研究发现,miRNA在ALL耐药中发挥重要作用。ALL耐药机制复杂,PI3K/Akt/mTOR、MAPK、Cyclin D1、Notch1、核因子-κB等信号通路在其中发挥重要作用,而miRNA可以通过对上述信号通路中蛋白激酶、磷酸酶及其蛋白构象的调控,介导ALL细胞耐药。笔者拟就miRNA调控的信号通路在ALL耐药中的最新研究进展进行综述。 展开更多

关键词 微RNAS 前体细胞淋巴母细胞白血病淋巴瘤 信号传导 抗药性 肿瘤 map激酶激酶激酶类

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中波紫外线对体外培养HaCaT细胞MAPK信号通路的影响 被引量：3

8

作者 徐倩倩 陈旭 +6 位作者 李莉 徐松 丁兰 张云 鞠梅 李新宇 施辛 《中华皮肤科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第6期391-394,共4页

目的 探讨中波紫外线照射后不同时间点体外培养的HaCaT细胞MAPK信号通路受调控效应.方法 1.5、4.5、7.5、10、20、30、50 mJ/cm2中波紫外线照射HaCaT细胞后8h,对照组细胞除不进行UVB照射外,其他处理同各剂量UVB组,蛋白免疫印迹法测定ERK... 目的 探讨中波紫外线照射后不同时间点体外培养的HaCaT细胞MAPK信号通路受调控效应.方法 1.5、4.5、7.5、10、20、30、50 mJ/cm2中波紫外线照射HaCaT细胞后8h,对照组细胞除不进行UVB照射外,其他处理同各剂量UVB组,蛋白免疫印迹法测定ERK1/2、JNK和p38蛋白表达及磷酸化水平;50 mJ/cm2中波紫外线照射HaCaT细胞,蛋白免疫印迹法测定照射后2、4、8、12h4个时间点,细胞ERK1/2、JNK和p38蛋白表达及磷酸化水平.使用Quantity One软件计算目的条带吸光度,以相应蛋白条带的吸光度值与GAPDH蛋白内参条带吸光度值的比值表示相对蛋白含量.结果 7.5、10、20、30、50 mJ/cm2 UVB照射HaCaT细胞后8h,ERK1/2、JNK磷酸化水平明显上调（P＜0.05）,20、30、50 mJ/cm2 UVB照射HaCaT细胞后p38磷酸化水平上调显著（P＜0.05）,且都在50 mJ/cm2照射后效应最为显著（P＜0.05）.50 mJ/cm2 UVB照射HaCaT细胞后8h,ERK1/2磷酸化产物水平出现上调,在处理后的12h,与对照组（10.277±0.320）比较,差异有统计学意义（44.844±2.023,P＜ 0.05）,而p38和JNK磷酸化产物水平在照射后2h即开始上调（P＜0.05）,4、8、12h,p38和JNK与对照相比,UVB照射后虽存在着显著地磷酸化水平差异（P＜0.05）,但随时间推移JNK磷酸化产物水平这种上调的趋势逐渐弱化（P＜0.05）.结论 在50 mJ/cm2中波紫外线照射后的HaCaT细胞中,ERK1/2、p38、JNK这3种MAPK信号通路产生了活化效应,具有一定的时间效应差异. 展开更多

关键词 紫外线 细胞 培养的 角蛋白细胞 信号传导 map激酶激酶激酶类

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TAK1信号通路在高糖诱导骨髓来源巨噬细胞激活中的作用 被引量：3

9

作者 冯世尧 徐兴欣 +3 位作者 邵云侠 李媛媛 付欣 吴永贵 《中华肾脏病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第1期37-42,共6页

目的观察高糖对骨髓来源巨噬细胞（bonemal Tow-derive dmacrophages，BMDM）激活的影响，并探讨转化生长因子B激活激酶1（TGF-pactivatedkinase．1，TAK1）信号通路在其中的作用机制。方法分离获取小鼠BMDM，运用流式细胞术鉴定BMDM细... 目的观察高糖对骨髓来源巨噬细胞（bonemal Tow-derive dmacrophages，BMDM）激活的影响，并探讨转化生长因子B激活激酶1（TGF-pactivatedkinase．1，TAK1）信号通路在其中的作用机制。方法分离获取小鼠BMDM，运用流式细胞术鉴定BMDM细胞纯度。高糖作为刺激因素，TAK1特异性抑制剂5z．7-oxozeaenol作为干预因素，分别设正常对照组（1640培养基）、渗透浓度对照组（25mmol／L甘露醇）、高糖组（33mmol／L葡萄糖）和高糖＋抑制剂组（33mmo]／L葡萄糖＋300nmol／L5Z-7-oxozeaen01）。采用细胞免疫荧光和流式细胞术检测BMDMM1表型，实时定量PCR检测各组细胞单核细胞趋化因子1（MCP-1）和肿瘤坏死因子α（TNF—n）mRNA水平，Western印迹法检测各组磷酸化（P）-TAKl、TAKl结合蛋白（TAKlbindingprotein，TABl）、p-JNK、p-p38MAPK和NF．KBp65蛋白的表达。结果BMDM诱导分化成功，其纯度达99．36％。10—300nmol／L5Z．7．oxozeaenol对高糖环境中BMDM细胞活性无影响（均P〉0．05）。与正常对照组比较，高糖组M1型巨噬细胞增加，MCP．1、TNF-αmRNA水平均上调（均P〈0．01），P-TAK1、TAB1、P—JNK、p-p38MAPK、NF-KBp65蛋白表达也显著升高（均P〈0．05）；TAKl特异性抑制剂5z．7-oxozeaenol作用均能抑制高糖诱导产生的效应（均P〈0．05）。结论高糖能诱导BMDM向M1表型转化，TAK1特异性抑制剂5-一7．oxozeaenol可能通过抑制TAKl／MAPKs和TAKl／NF-KB通路，抑制巨噬细胞M1型活化和炎性因子的表达。 展开更多

关键词 巨噬细胞活化 map激酶激酶激酶类 map激酶信号系统 炎症

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miR-145对高血压大鼠心肌细胞p38MAPK信号通路的影响 被引量：2

10

作者 耿蓬勃 徐晓辉 +4 位作者 张龙 张丹凤 郭纪文 武卫党 师军峰 《心血管康复医学杂志》 CAS 2021年第5期562-566,共5页

目的:研究微小RNA(miR)-145对高血压大鼠心肌细胞p38促分裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号通路的影响。方法:12只自发性高血压(SHR)被随机均分为SHR miR-145组(注射miR-145模拟物20nmol/L)和SHR miR-145抑制组(注射miR-145抑制物20nmol/L),选... 目的:研究微小RNA(miR)-145对高血压大鼠心肌细胞p38促分裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号通路的影响。方法:12只自发性高血压(SHR)被随机均分为SHR miR-145组(注射miR-145模拟物20nmol/L)和SHR miR-145抑制组(注射miR-145抑制物20nmol/L),选择6只魏-凯氏大鼠作为健康对照组。观察比较各组心肌细胞凋亡情况,p38MAPK蛋白及mRNA表达量。结果:HE染色结果显示:健康对照组大鼠左心室心肌细胞少数凋亡、心肌纤维排列不规则、少量胞浆出现肿胀,SHR miR-145组大鼠心肌纤维排列状况显著优于健康对照组,心肌细胞多;可是SHR miR-145抑制组心肌细胞减少、排列无规则,大量胞浆出现肿胀。与健康对照组比较,SHR miR-145组p38MAPK蛋白[(1.19±0.15)比(0.71±0.19)]及mRNA表达量[(1.31±0.17)比(0.75±0.21)]、心肌细胞凋亡率[(6.74±0.33)%比(4.02±0.27)%]均显著降低,SHR miR-145抑制组p38MAPK蛋白(1.68±0.31)及mRNA表达量(1.72±0.36)、心肌细胞凋亡率(9.59±0.41)%均显著升高,且与SHR miR-145组比较,SHR miR-145抑制组上述指标均显著升高,P<0.05或<0.01。结论:miR-145可抑制p38MAPK蛋白活性,减轻高血压大鼠心肌细胞凋亡,对高血压大鼠心肌具保护作用。 展开更多

关键词 高血压 微RNAS map激酶激酶激酶类

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异丙酚对ATP耗竭再恢复诱导人肾小管上皮细胞纤维化的影响：TAK1在其中的作用 被引量：2

11

作者 伍辉萍 杨承祥 +3 位作者 周俊 洪彬源 何万友 熊清明 《中华麻醉学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第6期678-681,共4页

目的探讨异丙酚对ATP耗竭再恢复诱导人肾小管上皮细胞（HK-2细胞）纤维化的影响及转化生长因子β激活激酶1（TAK1）在其中的作用。方法HK-2细胞接种于96孔板，采用随机数字表法分为4组（n=36）：空白对照组（C组）、ATP耗竭再恢复组（D... 目的探讨异丙酚对ATP耗竭再恢复诱导人肾小管上皮细胞（HK-2细胞）纤维化的影响及转化生长因子β激活激酶1（TAK1）在其中的作用。方法HK-2细胞接种于96孔板，采用随机数字表法分为4组（n=36）：空白对照组（C组）、ATP耗竭再恢复组（D／R组）、异丙酚（P组）和TAKI过表达组（T组）。采用抗霉素A耗竭HK-2细胞ATP后更换正常培养液恢复补充代尉底物的方法制备ATP耗竭再恢复损伤模型。于ATP耗竭前1h，P组用含异丙酚终浓度为20μmol／L的DMEM培养基孵育1h，T组用含异丙酚终浓度为20μmol／L、滴度为2×10^7TU／ml的TAK1慢病毒的DMEM培养基孵育1h，其余处理同D／R组。于ATP再恢复12h时，采用MTT法测定细胞活力，TUNEL法测定细胞凋亡情况，并进行凋亡评分；于ATP再恢复12、24和48h时，采用Western blot法测定TAK1的表达水平，于ATP再恢复48h时测定α平滑肌肌动蛋白（αSMA）、纤维粘连蛋白（FN）、胶原蛋白1（COL1）的表达水平。结果与C组比较，D／R组、P组和T组细胞活力降低，凋亡评分升高，ATP再恢复后TAKI、COL1、αSMA和FN表达上调（P〈0．05）；与D／R组比较，P组和T组细胞活力增强，凋亡评分降低，ATP再恢复后TAK1、COL1、αSMA和FN表达下调（P〈0．05）；与P组比较，T组细胞活力降低，凋亡评分升高，再恢复后TAK1、COL1、αSMA和FN表达上调（P〈0．05）。结论异丙酚可减轻ATP耗竭再恢复诱导的HK-2细胞纤维化，机制可能与下调TAK1表达有关。 展开更多

关键词 二异丙酚 再灌注损伤 肾 纤维化 map激酶激酶激酶类

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Rho激酶抑制剂法舒地尔通过抑制MLK3－JNK信号通路保护脑缺血再灌注大鼠海马CAl区神经元 被引量：1

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作者 魏秀娥 张清秀 +1 位作者 荣良群 刘春风 《国际脑血管病杂志》 北大核心 2011年第1期69-74,共6页

目的探讨Rho激酶抑制剂法舒地尔对脑缺血再灌注大鼠混合性谱系激酶（mixed—lineagekinase3，MLK3）、c—Jun—N末端激酶（c-JunNH2-terminalkinase，JNK）磷酸化、胱冬酶-3表达以及海马CAl区神经元损伤的影响。方法72只Sprague—Dawle... 目的探讨Rho激酶抑制剂法舒地尔对脑缺血再灌注大鼠混合性谱系激酶（mixed—lineagekinase3，MLK3）、c—Jun—N末端激酶（c-JunNH2-terminalkinase，JNK）磷酸化、胱冬酶-3表达以及海马CAl区神经元损伤的影响。方法72只Sprague—Dawley大鼠随机分为假手术组、缺血再灌注组、生理盐水对照组和法舒地尔组。四血管结扎法制作大鼠全脑缺血模型。免疫印迹分析检测MLK3和JNK磷酸化水平以及胱冬酶-3表达，采用焦油紫染色图像分析检测海马CAl区存活神经元数量。结果缺血再灌注6h时，法舒地尔组MLK3磷酸化水平（1．13±0．03）显著低于生理盐水对照组（2．08±0．01，P=0．0003），但MLK3水平无显著差异（P=0．69）；缺血再灌注3d时，法舒地尔组JNK磷酸化水平（1．27±0．02）显著低于生理盐水对照组（2．09±0．01，P=0．0002），但JNK水平无显著差异（P=0．83）；缺血再灌注6h时，法舒地尔组胱冬酶-3表达水平（1．28±0．02）显著低于生理盐水对照组（2．10±0．01，P=0．0006）；缺血再灌注5d时，法舒地尔组海马CAl区存活锥体细胞数量为（82．8±3．2）个，显著多于生理盐水对照组的（11．8±1．6）个（P〈0．05）。结论法舒地尔能显著抑制缺血再灌注诱导的MLK3、JNK磷酸化水平以及胱冬酶-3蛋白表达，进而减轻海马CAl区神经元损伤。 展开更多

关键词 脑缺血 法舒地尔 神经保护药 p-相关激酶 map激酶激酶激酶类 JNK促有丝分裂 激活蛋白激酶 胱冬酶3 海马 大鼠

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雷公藤内酯醇对HaCaT细胞表皮生长因子受体磷酸化及其下游信号激酶MEK的影响 被引量：1

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作者 李新宇 钱之玉 《中华皮肤科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第10期590-592,共3页

目的探讨雷公藤内酯醇对表皮生长因子(EGF)信号刺激HaCaT细胞后EGF受体磷酸化以及下游MEK途径的影响。方法在HaCaT细胞培养体系中,用外源性重组人EGF为刺激信号,用免疫印迹法检测总EGF受体及其磷酸化受体,以及总MEK及其磷酸化激酶的表... 目的探讨雷公藤内酯醇对表皮生长因子(EGF)信号刺激HaCaT细胞后EGF受体磷酸化以及下游MEK途径的影响。方法在HaCaT细胞培养体系中,用外源性重组人EGF为刺激信号,用免疫印迹法检测总EGF受体及其磷酸化受体,以及总MEK及其磷酸化激酶的表达。结果雷公藤内酯醇对rhEGF引起的细胞总EGF受体表达无明显影响,但抑制磷酸化EGF受体表达,抑制作用呈剂量依赖性,IC_(50)值为2．38×10^(-10)mol/L。对细胞总MEK1/2表达也不影响,但明显下调磷酸化MEK,抑制作用的IC_(50)值约为6．03×10^(-11)mol/L。结论雷公藤内酯醇对EGF信号引起的EGF受体磷酸化及下游MEK激酶磷酸化均有抑制作用。 展开更多

关键词 角蛋白细胞 受体 表皮生长因子 map激酶激酶激酶类 雷公藤内酯醇

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念珠菌抗氧化损伤机制的研究进展

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作者 闻轶旸 黄欣 赵敬军 《国际皮肤性病学杂志》 2015年第2期129-132,共4页

念珠菌是人类最常见的机会致病菌，近年来，念珠菌感染的发病率呈上升趋势。念珠菌是否能致病，取决于其对环境中各种压力的抵抗及适应能力，其中又以抗氧化能力最为重要。在念珠菌中存在抗氧化损伤机制作用的主要有：促丝裂原活化蛋白... 念珠菌是人类最常见的机会致病菌，近年来，念珠菌感染的发病率呈上升趋势。念珠菌是否能致病，取决于其对环境中各种压力的抵抗及适应能力，其中又以抗氧化能力最为重要。在念珠菌中存在抗氧化损伤机制作用的主要有：促丝裂原活化蛋白激酶转导通路、抗氧化酶系统、谷胱甘肽系统等。念珠菌的抗氧化过程是通过上述一个或多个机制同时发挥作用，通过对这些机制的了解，可以为寻找新的药物作用靶点提供理论依据，从而在临床上更好地治疗念珠菌病。 展开更多

关键词 念珠菌病 念珠菌属 抗氧化剂 map激酶激酶激酶类 谷胱甘肽 硫氧还原蛋白过氧化物酶类

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