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基质辅助激光解吸离子化—飞行时间质谱法在生化和基因工程药物分析研究中的应用进展
被引量：
6
1
作者
陈执中
《药物生物技术》
CAS
CSCD
2000年第2期122-125,共4页
综述基质辅助激光解吸离子化 飞行时间质谱法 (MALDI TOF MS)的原理、方法及其在多肽类药物研究、复杂化合物分析及基因工程药物分子量测定、结构和序列证实等的应用进展。方法简便、快速、灵敏、准确。对多肽、蛋白质、低聚核苷酸和...
综述基质辅助激光解吸离子化 飞行时间质谱法 (MALDI TOF MS)的原理、方法及其在多肽类药物研究、复杂化合物分析及基因工程药物分子量测定、结构和序列证实等的应用进展。方法简便、快速、灵敏、准确。对多肽、蛋白质、低聚核苷酸和低聚糖等生化新药及基因工程药物的研究和分析具有重要的意义。
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关键词
maldi
-
tof
质谱法
生化药物
基因工程药物
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职称材料
蒙古黄芪中核糖核酸酶活性蛋白AmPR-10的纯化和性质研究
被引量：
9
2
作者
任晋宏
王永辉
+5 位作者
薛慧清
刘晔
Divid Adelson
陈薛静
李敏
高丽
《中草药》
CAS
CSCD
北大核心
2017年第19期3945-3953,共9页
目的采用全自动智能蛋白纯化系统AKTA Avant25建立蒙古黄芪病程相关蛋白(Astragalus membranaceus pathogenesis-related protein-10,AmPR-10)的稳定快速分离纯化方法,并分析其理化性质和生物学活性。方法蒙古黄芪经Tris-HCl缓冲液浸提...
目的采用全自动智能蛋白纯化系统AKTA Avant25建立蒙古黄芪病程相关蛋白(Astragalus membranaceus pathogenesis-related protein-10,AmPR-10)的稳定快速分离纯化方法,并分析其理化性质和生物学活性。方法蒙古黄芪经Tris-HCl缓冲液浸提后阴离子交换色谱捕获目标蛋白,疏水色谱精细分离,凝胶滤过色谱进一步精细分离得到AmPR-10。采用MALDI-TOF/TOF质谱法测定相对分子质量,质谱检测后MS/MS Ion Search检索鉴定蛋白,高碘酸-Schiff法判断是否为糖蛋白,琼脂糖凝胶电泳分析核糖核酸酶活性及不同影响因素对核糖核酸酶活性的影响。结果蒙古黄芪粗提液经Q Sepharose Fast Flow、Butyl Sepharose High Performance和SuperdexTM 75 10/300 GL 3步纯化后可得到电泳纯AmPR-10;质谱测定其相对分子质量为16 801;蛋白鉴定其属于PR-10蛋白家族;糖蛋白染色显示其不含糖链。AmPR-10具有显著的核糖核酸酶活性,且其活性对Na Cl浓度、pH值和金属离子的敏感度低,仅0.5 mol/L NaCl、pH 9.0、Mg^(2+)和Co^(2+)对其有微弱的抑制作用,EDTA对AmPR-10核糖核酸酶活性无影响。结论离子交换色谱-疏水色谱-凝胶过滤色谱3步法纯化AmPR-10快速稳定,可应用于其他中药蛋白质的分离纯化。AmPR-10可能在蒙古黄芪抵御RNA病毒侵染中发挥重要作用。
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关键词
蒙古黄芪
AmPR-10
AKTA
Avant25
纯化
核糖核酸酶
活性蛋白
生物学活性
maldi
-
tof
/
tof
质谱法
高碘酸-Schiff
法
原文传递
题名
基质辅助激光解吸离子化—飞行时间质谱法在生化和基因工程药物分析研究中的应用进展
被引量：
6
1
作者
陈执中
机构
上海医科大学
出处
《药物生物技术》
CAS
CSCD
2000年第2期122-125,共4页
文摘
综述基质辅助激光解吸离子化 飞行时间质谱法 (MALDI TOF MS)的原理、方法及其在多肽类药物研究、复杂化合物分析及基因工程药物分子量测定、结构和序列证实等的应用进展。方法简便、快速、灵敏、准确。对多肽、蛋白质、低聚核苷酸和低聚糖等生化新药及基因工程药物的研究和分析具有重要的意义。
关键词
maldi
-
tof
质谱法
生化药物
基因工程药物
Keywords
maldi
-
tof
MS
Peptides and proteins
Determination of molecular weight
Structural validation
分类号
R977 [医药卫生—药品]
R927 [医药卫生—药学]
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职称材料
题名
蒙古黄芪中核糖核酸酶活性蛋白AmPR-10的纯化和性质研究
被引量：
9
2
作者
任晋宏
王永辉
薛慧清
刘晔
Divid Adelson
陈薛静
李敏
高丽
机构
山西中医药大学实验中心
阿德莱德大学生物信息与计算遗传学中心
出处
《中草药》
CAS
CSCD
北大核心
2017年第19期3945-3953,共9页
基金
国家国际合作专项项目(2013DFA30700)
山西省黄芪资源产业化及产业国际化协同创新中心项目(HQXTCXZX-007)
文摘
目的采用全自动智能蛋白纯化系统AKTA Avant25建立蒙古黄芪病程相关蛋白(Astragalus membranaceus pathogenesis-related protein-10,AmPR-10)的稳定快速分离纯化方法,并分析其理化性质和生物学活性。方法蒙古黄芪经Tris-HCl缓冲液浸提后阴离子交换色谱捕获目标蛋白,疏水色谱精细分离,凝胶滤过色谱进一步精细分离得到AmPR-10。采用MALDI-TOF/TOF质谱法测定相对分子质量,质谱检测后MS/MS Ion Search检索鉴定蛋白,高碘酸-Schiff法判断是否为糖蛋白,琼脂糖凝胶电泳分析核糖核酸酶活性及不同影响因素对核糖核酸酶活性的影响。结果蒙古黄芪粗提液经Q Sepharose Fast Flow、Butyl Sepharose High Performance和SuperdexTM 75 10/300 GL 3步纯化后可得到电泳纯AmPR-10;质谱测定其相对分子质量为16 801;蛋白鉴定其属于PR-10蛋白家族;糖蛋白染色显示其不含糖链。AmPR-10具有显著的核糖核酸酶活性,且其活性对Na Cl浓度、pH值和金属离子的敏感度低,仅0.5 mol/L NaCl、pH 9.0、Mg^(2+)和Co^(2+)对其有微弱的抑制作用,EDTA对AmPR-10核糖核酸酶活性无影响。结论离子交换色谱-疏水色谱-凝胶过滤色谱3步法纯化AmPR-10快速稳定,可应用于其他中药蛋白质的分离纯化。AmPR-10可能在蒙古黄芪抵御RNA病毒侵染中发挥重要作用。
关键词
蒙古黄芪
AmPR-10
AKTA
Avant25
纯化
核糖核酸酶
活性蛋白
生物学活性
maldi
-
tof
/
tof
质谱法
高碘酸-Schiff
法
Keywords
Astragalus membranaceus （Fisch.） Bge. var. mongholicus （Bge.） Hsiao
AmPR-10
AKTA Avant25
purification
ribonuclease
active protein
biologic activity
maldi
-
tof
/
tof
mass spectrometry
periodic acid-Schiffmethod
分类号
R284.2 [医药卫生—中药学]
原文传递
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
基质辅助激光解吸离子化—飞行时间质谱法在生化和基因工程药物分析研究中的应用进展
陈执中
《药物生物技术》
CAS
CSCD
2000
6
下载PDF
职称材料
2
蒙古黄芪中核糖核酸酶活性蛋白AmPR-10的纯化和性质研究
任晋宏
王永辉
薛慧清
刘晔
Divid Adelson
陈薛静
李敏
高丽
《中草药》
CAS
CSCD
北大核心
2017
9
原文传递
已选择
0
条
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参考文献
引证文献
统计分析
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