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Soluble forms of extracellular cytokeratin 18 may differentiate simple steatosis from nonalcoholic steatohepatitis 被引量:19
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作者 Yusuf Yilmaz Enver Dolar +8 位作者 Engin Ulukaya Semra Akgoz Murat Keskin Murat Kiyici Sibel Aker Arzu Yilmaztepe Selim Gurel Macit Gulten Selim Giray Nak 《World Journal of Gastroenterology》 SCIE CAS CSCD 2007年第6期837-844,共8页
AIM: To investigate whether serum levels of two soluble forms of extracellular cytokeratin 18 (M30-antigen and M65-antigen) may differentiate nonalcoholic steatohepatitis (NASH) from simple steatosis in patients with ... AIM: To investigate whether serum levels of two soluble forms of extracellular cytokeratin 18 (M30-antigen and M65-antigen) may differentiate nonalcoholic steatohepatitis (NASH) from simple steatosis in patients with nonalcoholic fatty liver disease (NAFLD). METHODS: A total of 83 patients with suspected NAFLD and 49 healthy volunteers were investigated. Patients with suspected NAFLD were classified according to their liver histology into four groups: definitive NASH (n = 45), borderline NASH (n = 24), simple fatty liver (n = 9), and normal tissue (n = 5). Serum levels of caspase-3 generated cytokeratin-18 fragments (M30-antigen) and total cytokeratin-18 (M65-antigen) were determined by ELISA. RESULTS: Levels of M30-antigen and M65-antigen were significantly higher in patients with definitive NASH compared to the other groups. An abnormal value (> 121.60 IU/L) of M30-antigen yielded a 60.0% sensitivity and a 97.4% specificity for the diagnosis of NASH. Sensitivity and specificity of an abnormal M65-antigen level (> 243.82 IU/L) for the diagnosis of NASH were 68.9% and 81.6%, respectively. Among patients with NAFLD, M30-antigen and M65-antigen levels distinguished between advanced fibrosis and early-stage fibrosis with a sensitivity of 64.7% and 70.6%, and a specificity of 77.3% and 71.2%, respectively. CONCLUSION: Serum levels of M30-antigen and M65-antigen may be of clinical usefulness to identify patients with NASH. Further studies are mandatory to better assess the role of these apoptonecrotic biomarkers in NAFLD pathophysiology. 展开更多
关键词 STEATOSIS STEATOHEPATITIS Cytokeratin 18 M30-antigen M65-antigen
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斯氏肺吸虫成虫10-30KD抗原蛋白的分离及在免疫诊断中的应用 被引量:5
2
作者 张锡林 李燎 陈文碧 《泸州医学院学报》 1996年第3期170-173,共4页
在酶免疫转移印渍技术(EITB)分析斯氏肺吸虫虫体成份,显示10~30KD抗原蛋白(主带22、24和26KD)对该病具免疫诊断价值的基础上,将SDS-PAGE和电洗脱技术相结合,分离并纯化出斯氏肺吸虫成虫的10~30KD蛋白组份,采用Dot-ELISA方... 在酶免疫转移印渍技术(EITB)分析斯氏肺吸虫虫体成份,显示10~30KD抗原蛋白(主带22、24和26KD)对该病具免疫诊断价值的基础上,将SDS-PAGE和电洗脱技术相结合,分离并纯化出斯氏肺吸虫成虫的10~30KD蛋白组份,采用Dot-ELISA方法免疫诊断肺吸虫。10~30kD的斯氏肺吸虫成虫抗原与斯氏、卫氏肺吸虫病人血清均呈阳性反应,与其它吸虫病和健康人血清末产生反应。该结果进一步表明10~30KD斯氏肺吸虫成虫抗原的Dot-ELISA为肺吸虫病高度特异、敏感的免疫诊断方法。并为两种肺吸虫的共同抗原,可用于免疫诊断斯氏、卫氏肺吸虫病。 展开更多
关键词 肺吸虫病 纯化 10-30KD 抗原 免疫诊断 蛋白
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靶向CD30的CAR-T细胞慢病毒转导条件优化研究
3
作者 田高辉 张琴星 +5 位作者 史江舟 赵芬芳 王宁 赵家旋 卢玉琳 徐瑶 《中国癌症杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第7期646-654,共9页
背景与目的:嵌合抗原受体T(chimeric antigen receptor T,CAR-T)细胞技术在血液肿瘤治疗领域已被广泛应用,慢病毒转导是CAR-T细胞制备的关键环节,与CAR-T细胞的质量密切相关,因此慢病毒转导过程涉及的各项参数仍需进一步优化。本研究旨... 背景与目的:嵌合抗原受体T(chimeric antigen receptor T,CAR-T)细胞技术在血液肿瘤治疗领域已被广泛应用,慢病毒转导是CAR-T细胞制备的关键环节,与CAR-T细胞的质量密切相关,因此慢病毒转导过程涉及的各项参数仍需进一步优化。本研究旨在探讨携带CD30抗体序列的慢病毒转导T细胞的感染复数(multiplicity of infection,MOI)、温育密度、转导前活化时间和转导体系高度对抗CD30 CAR-T细胞的影响,优化CAR-T细胞的转导条件,提高转导效率和CAR-T细胞功能。方法:采用不同的MOI、温育密度、转导前活化时间和转导体系高度等对人外周血来源的T细胞进行转导优化,转导后分别检测抗CD30 CAR-T细胞的增殖能力、转导效率、细胞存活率和体外杀伤效率等,以确定最优的T细胞转导条件。结果:MOI为1.00、1.50和3.00时转导效率和有效细胞数显著高于0.00、0.25和0.50组。在温育密度大于1.0×10^(7)个/mL时,温育密度对T细胞转导效率无影响。活化时间为72 h组细胞存活率低于80%,显著低于其他组;24、48 h的转导效率显著高于0、8、16 h组;48 h组CAR-T细胞的增殖速率显著高于24 h组。转导体系高度为0.16 mm时转导效率和增殖倍数都显著高于0.53 mm组,但对CAR-T细胞的体外杀伤效率无影响。结论:通过对CAR-T细胞功能的综合评估,确定慢病毒的最佳转导条件为MOI=1、温育密度为1.0×10^(7)个/mL、转导前活化48h、转导体系高度为0.16mm。 展开更多
关键词 慢病毒载体 抗CD30嵌合抗原受体T细胞 转导条件
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不同佐剂的弓形虫亚单位疫苗免疫效果观察 被引量:7
4
作者 黄炳成 陈少卿 +3 位作者 付婷霞 魏庆宽 李瑾 胡迎新 《中国热带医学》 CAS 2004年第1期12-14,共3页
目的 探讨不同佐剂增强弓形虫P3 0 3 5亚单位疫苗刺激肌体产生免疫应答和保护性免疫力效果。 方法 应用拟菌颗粒、脂磷壁酸、蜂胶 3种佐剂分别和弓形虫P3 0 3 5特异蛋白组分混合、碾磨、免疫小白鼠 ,以福氏完全佐剂作对照 ,检测其... 目的 探讨不同佐剂增强弓形虫P3 0 3 5亚单位疫苗刺激肌体产生免疫应答和保护性免疫力效果。 方法 应用拟菌颗粒、脂磷壁酸、蜂胶 3种佐剂分别和弓形虫P3 0 3 5特异蛋白组分混合、碾磨、免疫小白鼠 ,以福氏完全佐剂作对照 ,检测其细胞免疫和体液免疫 ,并观察其受到弓形虫攻击感染后的生存情况。 结果 拟菌颗粒佐剂能辅助弓形虫P3 0 3 5特异蛋白组分刺激宿主产生较高的细胞免疫和体液免疫 ,并能提供较好的免疫保护力。拟菌颗粒产生的IL -2较福氏完全佐剂稍低 ,但明显高于其它实验和对照组 (P <0 0 1) ,特别是IFN -γ和CD4 + CD8+ 比值 ,两者差异均无显著性 (P >0 0 5 ) ,并且拟菌颗粒刺激机体产生的IgG明显高于福氏完全佐剂 (P <0 0 1)。脂磷壁酸佐剂和蜂胶佐剂辅助P3 0 3 5刺激产生的细胞免疫应答及免疫保护力低于拟菌颗粒佐剂和福氏完全佐剂。 结论 拟菌颗粒佐剂与福氏佐剂具有相似增强免疫应答和提高P3 0 3 5特异蛋白组分抗原的免疫原性作用 ,可用于弓形虫亚单位疫苗的研制。 展开更多
关键词 弓形虫 亚单位疫苗 免疫效果 佐剂 免疫应答 拟菌颗粒 脂磷壁酸 蜂胶
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弓形虫主要表膜P30抗原的免疫保护作用研究 被引量:3
5
作者 陈秀春 李永华 +2 位作者 刘锦华 杨春贵 周世昌 《泰山医学院学报》 CAS 2001年第1期1-4,共4页
目的 研究弓形虫主要表膜P30抗原免疫小鼠所诱导的免疫性保护作用及免疫保护机制。方法 将单克隆抗体免疫亲和层析分离纯化的P30抗原免疫C57BL/ 6纯系小鼠 ,然后用弓形虫RH株速殖子和Fukaya株包囊攻击感染 ,观察P30抗原免疫对急性弓... 目的 研究弓形虫主要表膜P30抗原免疫小鼠所诱导的免疫性保护作用及免疫保护机制。方法 将单克隆抗体免疫亲和层析分离纯化的P30抗原免疫C57BL/ 6纯系小鼠 ,然后用弓形虫RH株速殖子和Fukaya株包囊攻击感染 ,观察P30抗原免疫对急性弓形虫感染鼠死亡时间及慢性感染鼠脑内包囊形成的影响 ,同时对感染后不同时间鼠血清特异性抗体水平、IL 2及IFN r细胞因子水平和脾T淋巴细胞亚群的动态变化进行了测试分析。结果 显示P30抗原免疫可在一定程度上延长感染小鼠的存活时间 ,减少脑内包囊的形成数量 ,增强小鼠抵抗急慢性弓形虫感染的能力。在感染后不同时期免疫鼠血清中特异性抗体水平及IFN r、IL 2水平均高于同期对照鼠 ,而且免疫鼠脾CD4 + 和CD8+ T淋巴细胞尤其是CD8+ 细胞的数量在感染早期升高较快 ,至感染后第 4周达高峰 ,两者的比值随感染时间的延长而逐渐下降。结论 P30抗原免疫对感染小鼠具有明显的保护作用 ,是细胞免疫和体液免疫共同作用的结果 。 展开更多
关键词 弓形虫 P30抗原 免疫应答 免疫保护作用
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弓形虫主要表膜P30抗原的纯化与鉴定
6
作者 李永华 陈秀春 +3 位作者 刘锦华 杨春贵 周世昌 李新华 《泰山医学院学报》 CAS 2000年第4期256-266,共11页
目的 应用单克隆抗体免疫亲和层析技术提纯弓形虫主要表膜P30抗原并进行鉴定。方法 将我们已建立的分泌抗表膜P30抗原单克隆抗体的E3杂交瘤细胞注入BALB/c小鼠腹腔 ,收集腹水 ,用饱和硫酸胺沉淀和DEAE—纤维柱层析法提纯单克隆抗体 ,... 目的 应用单克隆抗体免疫亲和层析技术提纯弓形虫主要表膜P30抗原并进行鉴定。方法 将我们已建立的分泌抗表膜P30抗原单克隆抗体的E3杂交瘤细胞注入BALB/c小鼠腹腔 ,收集腹水 ,用饱和硫酸胺沉淀和DEAE—纤维柱层析法提纯单克隆抗体 ,将其偶联至溴化氢活化的琼脂糖 4B上装柱 ,经免疫亲和层析技术 ,从大量的低功率超声粉碎速殖子抗原中分离纯化P30蛋白质 ,并用SDS—PAGE进行鉴定。结果 本次实验约获得了 8 1mg的P30蛋白质 ,且纯度较高。结论 单克隆抗体免疫亲和层析技术可获得一定量的P30抗原。 展开更多
关键词 弓形虫 表膜 P30抗原 纯化 鉴定 制备
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斑点免疫金渗滤法检测弓形虫感染效果 被引量:3
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作者 宋成 沈振海 +2 位作者 徐明 盛青松 王亚平 《中国血吸虫病防治杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第5期479-481,共3页
目的建立一种简捷、准确的弓形虫感染检测方法。方法将弓形虫P30抗原包被在硝酸纤维素膜上,与待检血清中的相应抗体结合,通过金标记Protein-A蛋白直接显色。结果用该试剂检测5种血清样本共221份,其中弓形虫感染病人血清58份,敏感性为96.... 目的建立一种简捷、准确的弓形虫感染检测方法。方法将弓形虫P30抗原包被在硝酸纤维素膜上,与待检血清中的相应抗体结合,通过金标记Protein-A蛋白直接显色。结果用该试剂检测5种血清样本共221份,其中弓形虫感染病人血清58份,敏感性为96.55%(56/58)。正常人群对照血清68份,检测结果全部为阴性,特异性为100%。检测25份类风湿病人血清、18份血吸虫病人血清及22份肺炎支原体病人血清,仅有1例类风湿病人血清出现阳性交叉反应。结论用弓形虫P30为抗原,以金标记Protein-A蛋白为探针显色系统的斑点免疫金渗滤法,对检测弓形虫病人血清抗体具有较高的敏感性和特异性,且操作简单、快速。 展开更多
关键词 弓形虫病 P30抗原 斑点免疫金渗滤法 胶体金
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白细胞介素18受体和CD30抗原在移植肾组织中的表达 被引量:1
8
作者 郝俊文 李香铁 +2 位作者 闵志廉 郑军华 丁吉元 《临床泌尿外科杂志》 2006年第5期334-336,共3页
目的:探讨白细胞介素18受体(IL18R)和CD30抗原在移植肾排异反应中的局部表达及其临床意义。方法:采用链霉亲合素过氧化物酶(SP)免疫组织化学法检测44例移植肾切除标本[其中超急性排异反应(HAR)8例,急性排异反应(AR)16例,慢性排异反应(CR... 目的:探讨白细胞介素18受体(IL18R)和CD30抗原在移植肾排异反应中的局部表达及其临床意义。方法:采用链霉亲合素过氧化物酶(SP)免疫组织化学法检测44例移植肾切除标本[其中超急性排异反应(HAR)8例,急性排异反应(AR)16例,慢性排异反应(CR)12例和非免疫因素导致肾功能损害8例]及6例正常肾组织中IL18R和CD30的表达。结果:IL18R表达主要发生在肾小管上皮细胞,胞质表达为主。正常对照组肾小管上皮细胞表达为+~++,肾小球系膜细胞无表达。HAR、AR肾小管及肾小球的表达明显增强。CR组IL18R表达减弱。正常对照组肾小球、肾小管上皮细胞均无CD30抗原表达。HAR肾小球系膜细胞CD30(+),其余各组肾小球系膜细胞均无CD30抗原表达。CD30阳性均表现为胞质表达。肾小管上皮细胞CD30抗原表达多见于HAR和AR。CR及其他组肾小管上皮细胞CD30抗原表达较少。结论:IL18R和CD30抗原可能参与HAR、AR过程。检测IL18R和CD30抗原可为评价移植肾病理改变和肾移植预后提供重要参考。 展开更多
关键词 白细胞介素18受体 CD30抗原 肾移植 排异反应 免疫组化
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抗弓形虫主要表膜P30抗原单克隆抗体的制备与鉴定
9
作者 李永华 陈秀春 +2 位作者 刘锦华 杨春贵 李新华 《泰山医学院学报》 2000年第2期81-82,共2页
目的 制备抗弓形虫主要表膜P30抗原单克隆抗体 (McAb)并进行鉴定 ,为弓形虫病的诊断、抗原的提纯及亚单位疫苗的研制等提供可靠依据。方法 用RH株弓形虫速殖子膜抗原为免疫原免疫BALB/C小鼠 ,取其脾细胞与小鼠SP2 / 0骨髓瘤细胞融合 ... 目的 制备抗弓形虫主要表膜P30抗原单克隆抗体 (McAb)并进行鉴定 ,为弓形虫病的诊断、抗原的提纯及亚单位疫苗的研制等提供可靠依据。方法 用RH株弓形虫速殖子膜抗原为免疫原免疫BALB/C小鼠 ,取其脾细胞与小鼠SP2 / 0骨髓瘤细胞融合 ,筛选出能够稳定分泌高滴度抗P30抗原McAb杂交瘤细胞株 ,并测定McAb免疫球蛋白亚类和单抗效价 ,用IFAT进行单抗识别的抗原定位 ,并通过SDS PAGE和Western blot分析鉴定。结果 本实验获得了 2株抗P30抗原的杂交瘤细胞株E3 和G2 ,分泌的抗体滴度分别为 1∶2 5 880和 1∶10 2 6 0 ,其分泌的抗体与肺孢子虫、隐孢子虫等抗原均不发生交叉反应 ,2株单抗均属IgG1亚类 ,且识别的抗原定位于速殖子表膜。 展开更多
关键词 弓形虫 P30抗原 单克隆抗体 制备 鉴定
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抗弓形虫表膜抗原 P30单克隆抗体的制备与鉴定(英文)
10
作者 李永华 张洪花 +3 位作者 陈秀春 刘锦华 扬春贵 李新华 《中国寄生虫病防治杂志》 CSCD 2000年第4期254-257,共4页
为制备抗弓形虫主要表膜抗原 P30单克隆抗体并进行鉴定 ,进而为弓形虫病诊断、抗原的提纯及亚单位疫苗的制备等提供可靠依据。用弓形虫速殖子膜蛋白为免疫原免疫 BAL B/ c小鼠 ,取其脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞 SP2 / 0融合 ,筛选出能够稳... 为制备抗弓形虫主要表膜抗原 P30单克隆抗体并进行鉴定 ,进而为弓形虫病诊断、抗原的提纯及亚单位疫苗的制备等提供可靠依据。用弓形虫速殖子膜蛋白为免疫原免疫 BAL B/ c小鼠 ,取其脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞 SP2 / 0融合 ,筛选出能够稳定分泌高滴度抗 P30单克隆抗体的杂交瘤细胞株 ,并测定单克隆抗体免疫球蛋白亚类和抗体效价 ,用 IFAT进行单抗识别的抗原定位 ,并通过 SDS- PAGE和 Western- Blot分析鉴定。结果获得了两株抗 P30抗原的杂交瘤细胞株 E3和 G2 ,其分泌的抗体与肺孢子虫、隐孢子虫等抗原均不发生交叉反应。 2株单抗均属 Ig G1亚类 ,且识别的抗原定位于速殖子表膜。结果表明 ,制备的抗 P30抗原的杂交瘤细胞株能分泌高滴度和特异性的单克隆抗体。 展开更多
关键词 弓形虫 P30抗原 单克隆抗体 制备 鉴定
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弓形虫P30抗原基因的体外扩增、克隆及原核表达 被引量:1
11
作者 李永华 陈秀春 +1 位作者 刘锦华 周世昌 《中国寄生虫病防治杂志》 CSCD 1998年第1期19-22,共4页
根据已知弓形虫主要表面抗原P30的基因序列,用已合成的一对引物,通过聚合酶链反应,从弓形虫RH、ZS1和ZS2株中扩增了P30的编码基因,经纯化及相应酶切后插入质粒pcDNA3中并转化大肠杆菌TG1。经含氨苄青霉素L... 根据已知弓形虫主要表面抗原P30的基因序列,用已合成的一对引物,通过聚合酶链反应,从弓形虫RH、ZS1和ZS2株中扩增了P30的编码基因,经纯化及相应酶切后插入质粒pcDNA3中并转化大肠杆菌TG1。经含氨苄青霉素LB培养基初筛后,挑菌扩增双酶切鉴定,阳性克隆子在TG1中表达,产物经SDS-PAGE分析显示,P30基因在大肠杆菌中高效表达。 展开更多
关键词 弓形虫 P30抗原 基因 聚合酶链反应 克隆 表达
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两种抗原检测弓形虫病IgM的效果
12
作者 王亚平 张英 +1 位作者 徐明 盛青松 《中国血吸虫病防治杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第5期582-584,共3页
目的观察弓形虫P30重组抗原及可溶性抗原检测弓形虫病IgM的效果。方法建立斑点免疫金渗滤法(DIGFA)。采用2种抗原分别包被在两条硝酸纤维素膜(NC)上,与待检血清中的相应IgM抗体结合,通过金标记兔抗人IgM直接显色,以检测弓形虫病IgM。2... 目的观察弓形虫P30重组抗原及可溶性抗原检测弓形虫病IgM的效果。方法建立斑点免疫金渗滤法(DIGFA)。采用2种抗原分别包被在两条硝酸纤维素膜(NC)上,与待检血清中的相应IgM抗体结合,通过金标记兔抗人IgM直接显色,以检测弓形虫病IgM。2种抗原的DIGFA分别检测弓形虫IgM抗体阳性、类风湿、支原体肺炎、血吸虫病人和正常人血清。结果两种抗原建立的DIGFA检测试剂共检测5种血清样本166份,其中弓形虫感染IgM抗体阳性病人血清38份,弓形虫P30DIGFA敏感性为92.1%(35/38),可溶性抗原DIGFA敏感性为81.6%(31/38),差异无统计学意义(P>0.05)。正常人群对照血清63份,检测全部阴性,特异性为100%。检测类风湿病人血清30份、血吸虫病人血清25份及支原体肺炎病人血清10份,仅类风湿病人血清出现阳性交叉反应,其中弓形虫P30DIGFA阳性2例,可溶性抗原DIGFA阳性3例。结论弓形虫P30重组抗原检测弓形虫病人血清IgM的DIGFA试剂可用于临床早期或急性期弓形虫病的诊断。 展开更多
关键词 弓形虫 P30重组抗原 可溶性抗原 斑点免疫金渗滤法
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CD30抗原在ALCL免疫靶向治疗中的研究进展
13
作者 陈玉玲 邓飞 《按摩与康复医学》 2014年第9期9-11,共3页
渐变性大细胞淋巴瘤(anaplastic large—cell lymphoma,ALCL)属于恶性侵袭性T细胞淋巴瘤的一个亚型,因诊断性细胞的细胞膜核旁及Golgi区域强烈特征性表达CD30抗原,以CD30抗原为基础的免疫靶向治疗成为了一种理想的治疗策略。虽然... 渐变性大细胞淋巴瘤(anaplastic large—cell lymphoma,ALCL)属于恶性侵袭性T细胞淋巴瘤的一个亚型,因诊断性细胞的细胞膜核旁及Golgi区域强烈特征性表达CD30抗原,以CD30抗原为基础的免疫靶向治疗成为了一种理想的治疗策略。虽然早期的未结合型CD30单克隆抗体在临床研究中表现出了一定的治疗效果,但以抗体药物偶联剂代表药物SGN-35的疗效较为突出。本文主要以SGN-35的分子结构、临床应用及研究前景方面作一综述。 展开更多
关键词 渐变性大细胞淋巴瘤 CD30抗原 免疫靶向治疗 SGN-35 综述
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