黄芪甲苷对马兜铃酸诱导的巨噬细胞M1型极化的作用及机制研究 被引量：3

1

作者 徐维佳 陈揭剑 +3 位作者 严丽群 张勇 王丽萍 庄永泽 《现代生物医学进展》 CAS 2021年第6期1040-1045,共6页

目的:探讨黄芪甲苷对马兜铃酸诱导的RAW264.7细胞向M1型极化的影响,并初步探索其可能的作用机制。方法:分别采用马兜铃酸和脂多糖(LPS)刺激RAW264.7细胞24 h,伴或不伴黄芪甲苷进行药物干预处理。采用细胞计数检测试剂盒-8(CCK 8)检测细... 目的:探讨黄芪甲苷对马兜铃酸诱导的RAW264.7细胞向M1型极化的影响,并初步探索其可能的作用机制。方法:分别采用马兜铃酸和脂多糖(LPS)刺激RAW264.7细胞24 h,伴或不伴黄芪甲苷进行药物干预处理。采用细胞计数检测试剂盒-8(CCK 8)检测细胞活性变化,流式细胞仪检测巨噬细胞分型,酶联免疫吸附试验(ELISA)检测细胞上清液中白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的分泌量。反转录实时定量PCR(RT-qPCR)技术检测RAW264.7细胞IL-6、TNF-αmRNA表达。蛋白免疫印迹法(Western blot)检测RAW264.7细胞p-p38和p38 MAPK蛋白表达水平。结果:CCK8结果提示黄芪甲苷在5~50μg/mL浓度范围对RAW264.7巨噬细胞无明显毒性,本研究选取10μg/mL作为实验干预浓度。黄芪甲苷能够显著改善马兜铃酸诱导的巨噬细胞活性(P<0.05),同时减少IL-6和TNF-α的分泌水平和mRNA表达水平(均P<0.05),抑制马兜铃酸和LPS诱导的M1/M2巨噬细胞比例(P<0.05)。黄芪甲苷可部分抑制马兜铃酸诱导的巨噬细胞p38 MAPK磷酸化水平(P<0.05)。结论:黄芪甲苷可减少巨噬细胞M1型极化,降低炎症因子IL-6和TNF-α水平,减少巨噬细胞的活性,从而起到减缓马兜铃酸肾损害的作用,其作用机制可能与部分抑制p38 MAPK信号活性有关。 展开更多

关键词 黄芪甲苷 马兜铃酸 巨噬细胞 M1型极化 p38 MAPK信号通路

原文传递

七氟醚可抑制氧化型低密度脂蛋白诱导巨噬细胞M1型极化 被引量：2

2

作者 徐国兴 徐国亭 李海中 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第1期33-39,共7页

目的探究七氟醚通过JAK3/STAT5信号通路对氧化型低密度脂蛋白(oxidized low-density lipoprotein,Ox-LDL)诱导巨噬细胞M1型极化的影响。方法酶联免疫法检测细胞培养液上清中肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白细胞介... 目的探究七氟醚通过JAK3/STAT5信号通路对氧化型低密度脂蛋白(oxidized low-density lipoprotein,Ox-LDL)诱导巨噬细胞M1型极化的影响。方法酶联免疫法检测细胞培养液上清中肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)、转化生长因子-β(transforming growth factor-β,TGF-β)和白细胞介素-10(interleukin-10,IL^(-1)0)的水平,Westernblot检测诱导型一氧化氮合酶(inducible nitric oxide synthase,iNOS)和精氨酸酶1(Arginase 1,Arg1)的表达。结果与对照组相比,Ox-LDL组巨噬细胞中i NOS蛋白的表达和培养液上清中TNF-α和IL-6的水平增加(P<0.05),而细胞中Arg1蛋白的表达水平和培养液上清中TGF-β和IL^(-1)0的水平降低(P<0.05),p-JAK3/JAK3和p-STAT5/STAT5的比值增加(P<0.05);与Ox-LDL组相比,Ox-LDL+Sevoflurane组的巨噬细胞中iNOS蛋白的表达和培养液上清中TNF-α和IL-6的水平降低(P<0.05),Arg1蛋白的表达水平和培养液上清中TGF-β和IL^(-1)0的水平升高(P<0.05),p-JAK3/JAK3和p-STAT5/STAT的比值降低(P<0.05);与Ox-LDL组相比,Ox-LDL+HY-P1061组巨噬细胞中iNOS蛋白的表达和培养液上清中TNF-α和IL-6的水平升高(P<0.05),Arg1蛋白的表达水平和培养液上清中TGF-β和IL^(-1)0的水平降低(P<0.05);与Ox-LDL+Sevoflurane组相比,Ox-LDL+Sevoflurane+HY-P1061组巨噬细胞中i NOS蛋白的表达和培养液上清中TNF-α和IL-6的水平升高(P<0.05),而细胞中Arg1蛋白的表达水平和培养液上清中TGF-β和IL^(-1)0的水平降低(P<0.05)。结论七氟醚抑制Ox-LDL诱导的巨噬细胞M1型极化,其机制可能与JAK3/STAT5信号通路的失活相关。 展开更多

关键词 OX-LDL 七氟醚 巨噬细胞 M1型极化 JAK3/STAT5信号通路

下载PDF 职称材料

Cl-amidine通过JAK3-STAT5抑制巨噬细胞M1型极化在强直性脊柱炎中的作用

3

作者 李儒琳 杜壮文 王恩梁 《广东医学》 CAS 2023年第11期1328-1334,共7页

目的 探究Cl-amidine对巨噬细胞M1型极化的影响以及其对强直性脊柱炎(AS)的临床指导意义。方法 选择60例AS患者,根据疾病活动度评分将患者分为低AS疾病组和高AS疾病组,同期纳入30例健康受试者作为对照组。EILSA检测三组人群血清PAD4、i... 目的 探究Cl-amidine对巨噬细胞M1型极化的影响以及其对强直性脊柱炎(AS)的临床指导意义。方法 选择60例AS患者,根据疾病活动度评分将患者分为低AS疾病组和高AS疾病组,同期纳入30例健康受试者作为对照组。EILSA检测三组人群血清PAD4、iNOS和骨形成指标BGP水平,皮尔逊相关系数分析肽酰基精氨酸脱亚胺酶4(PAD4)、一氧化氮合酶(iNOS)和骨钙素(BGP)的相关性;流式细胞术检测3组人群外周血M1型巨噬细胞(CD68^(+)CD86^(+))比例。培养THP-1单核细胞系,体外诱导为M1型巨噬细胞,期间加入Cl-amidine共孵育,分组为:M0组、M1组、M1+Cl-amidine组,Western blot检测各组细胞PAD4和iNOS蛋白表达水平。RNA-seq检测M1组、M1+Cl-amidine组细胞差异表达基因并进行KEGG分析,Western blot检测JAK3、p-JAK3、STAT5、p-STAT5蛋白表达水平。结果 与对照组相比,低AS疾病组PAD4、iNOS水平升高,BGP水平降低,M1型巨噬细胞比例升高;与低AS疾病组相比,高AS疾病组PAD4、iNOS水平升高,BGP水平降低,M1型巨噬细胞比例升高。PAD4水平与iNOS水平呈正相关,PAD4、iNOS水平与BGP水平呈负相关。与M0组相比,M1组PAD4和iNOS蛋白表达升高;与M1组相比,M1+Cl-amidine组有163个基因表达上调,272个基因表达下调。上调基因主要参与JAK-STAT信号通路。与M1组相比,M1+Cl-amidine组iNOS、p-JAK3/JAK3、p-STAT5/STAT5蛋白表达降低。结论 PAD4和M1型巨噬细胞水平与AS疾病程度呈正相关。PAD4抑制剂Cl-amidine可能通过JAK3-STAT5信号通路抑制巨噬细胞向M1极化,该作用机制有助于AS临床治疗的研究。 展开更多

关键词 强直性脊柱炎 巨噬细胞 M1型极化 精氨酸脱亚胺酶4

下载PDF 职称材料

猫爪草醇类提取物对小鼠骨髓来源巨噬细胞极化的影响

4

作者 亓凯 刘芊伊 +5 位作者 刘利萍 蒙祖迪 卫麟娜 高雪涵 宋涛 罗军敏 《遵义医科大学学报》 2023年第5期438-443,共6页

目的探讨猫爪草(RTR)醇类提取物对于小鼠骨髓来源巨噬细胞(BMDM)极化的影响。方法提取6~8周BALB/c雌鼠骨髓细胞,用DMEM完全培养基(含有20 ng/mL GM-CSF)培养7 d诱导为BMDM。用CCK8摸索RTR刺激巨噬细胞的最适浓度,并观察巨噬细胞的形态... 目的探讨猫爪草(RTR)醇类提取物对于小鼠骨髓来源巨噬细胞(BMDM)极化的影响。方法提取6~8周BALB/c雌鼠骨髓细胞,用DMEM完全培养基(含有20 ng/mL GM-CSF)培养7 d诱导为BMDM。用CCK8摸索RTR刺激巨噬细胞的最适浓度,并观察巨噬细胞的形态变化。ELISA检测细胞培养液中iNOS、TGF-β、TNF-α、IL-10的变化;qRT-PCR检测细胞内的IL-6、TNF-α、iNOS、TGF-β、IL-10、Arg-1的表达;FCM检测细胞表面标志物NOS2和CD206的表达。结果RTR刺激BMDM的最佳浓度为100μg/mL,刺激24 h后呈梭形改变。RTR处理组与对照组相比,TNF-α和iNOS分泌水平升高,TNF-α、iNOS和IL-6的mRNA表达水平升高(P<0.05);TGF-β和IL-10分泌水平降低,TGF-β、IL-10和Arg-1的mRNA表达水平降低(P<0.05);刺激36 h后,巨噬细胞表面高表达NOS2,CD206低表达(P<0.05)。结论猫爪草醇类提取物可刺激小鼠骨髓来源巨噬细胞产生M1型极化。 展开更多

关键词 猫爪草 巨噬细胞 M1型极化

下载PDF 职称材料

辐射诱导的小鼠肺泡上皮细胞死亡通过干扰素基因刺激因子通路促进RAW细胞M1型极化研究 被引量：2

5

作者 赵鑫尧 张沛 +8 位作者 杜乐辉 解传滨 马娜 雷霄 韩亚楠 梁延杰 郭兴东 谭鑫 曲宝林 《中国医学装备》 2022年第3期183-186,共4页

目的:探讨细胞中重要的DNA感受器干扰素基因刺激因子(STING)在小鼠单核巨噬细胞(RAW264.7)细胞活化中的作用。方法:收集^(60)Co γ射线照射后小鼠肺泡上皮细胞(MLE-12)的培养上清,对RAW264.7细胞进行刺激,使用蛋白免疫印迹(Western Blot... 目的:探讨细胞中重要的DNA感受器干扰素基因刺激因子(STING)在小鼠单核巨噬细胞(RAW264.7)细胞活化中的作用。方法:收集^(60)Co γ射线照射后小鼠肺泡上皮细胞(MLE-12)的培养上清,对RAW264.7细胞进行刺激,使用蛋白免疫印迹(Western Blot)检测刺激后RAW264.7细胞中STING蛋白的表达,使用酶联免疫吸附测定(ELISA)法检测处理后RAW264.7细胞经典激活的巨噬细胞(M1)型和非经典激活的巨噬细胞(M2)型相关细胞因子的表达水平。结果:Western Blot检测结果显示,刺激后RAW264.7细胞中STING蛋白的表达水平显著上调;ELISA检测结果表明,刺激后RAW264.7细胞上清中的肿瘤坏死因子α(TNF-α)和白细胞介素-1(IL-1)显著增加;脱氧核糖核酸酶I(DNase I)处理能够抑制RAW264.7细胞中STING通路的激活。ELISA检测结果表明,DNase I能够抑制RAW264.7细胞向M1型极化。结论:辐射诱导的MLE-12细胞死亡能够释放DNA,从而激活RAW264.7细胞中的环磷酸鸟苷-腺苷酸合成酶(cGAS)-STING信号通路,进而促进其向M1型极化。 展开更多

关键词 干扰素基因刺激因子(STING) 巨噬细胞 经典激活的巨噬细胞(M1) 极化

下载PDF 职称材料

贝壳杉烷型二萜类化合物PV006对THP-1源性巨噬细胞M1型极化的调节作用 被引量：2

6

作者 张加芬 李新宇 +1 位作者 宋莎莎 王永芳 《医学研究杂志》 2018年第5期64-69,共6页

目的利用体外诱导巨噬细胞向M1型极化的模式,初探贝壳杉烷型二萜类化合物PV006对M1型极化的影响。方法用佛波酯(PMA)联合脂多糖(LPS)及重组人干扰素-γ(rh IFN-γ)刺激人单核细胞株THP-1细胞,促使其向M1型巨噬细胞分化。通过显微镜观察... 目的利用体外诱导巨噬细胞向M1型极化的模式,初探贝壳杉烷型二萜类化合物PV006对M1型极化的影响。方法用佛波酯(PMA)联合脂多糖(LPS)及重组人干扰素-γ(rh IFN-γ)刺激人单核细胞株THP-1细胞,促使其向M1型巨噬细胞分化。通过显微镜观察细胞形态学变化,qRT-PCR法检测诱导后的细胞内IL-1β、TNF-α、IL-6以及IL-8 mRNA表达水平,Western blot法检测核转录因子-κB磷酸化P65蛋白(NF-κB p-P65)和磷酸化信号转导与转录激活物1(p-STAT1)蛋白的表达,确认THP-1细胞向M1型极化,同时检测PV006处理后对上述指标的影响。结果经PMA联合LPS及rh IFN-γ诱导后,THP-1细胞形态由圆形转变为特征的长梭形或纺锤形,IL-1β、TNF-α、IL-6、IL-8 mRNA表达升高,NF-κB p-P65和p-STAT1蛋白表达增强。不同浓度PV006同步处理后,作M1型极化诱导的THP-1细胞未出现特征性的长梭形或纺锤形,大部分细胞仍为圆形。IL-1β、TNF-α、IL-6、IL-8 mRNA表达水平下调(P<0.05),NF-κB p-P65和p-STAT1蛋白表达减弱。结论 PMA联合LPS及rh IFN-γ可诱导THP-1源性巨噬细胞向M1型极化,PV006有抑制巨噬细胞向M1型分化的作用。 展开更多

关键词 巨噬细胞M1型极化 磷酸化核转录因子-κB P65 磷酸化信号转导与转录激活物1

下载PDF 职称材料

丹皮酚通过下调miR-155/JAK1-STAT1通路抑制巨噬细胞M1极化 被引量：22

7

作者 孙颖 刘玲 +3 位作者 施晓艳 何海 黄翰文 戴敏 《中国中药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第9期2158-2164,共7页

探究丹皮酚(paeonol)对小鼠腹腔巨噬细胞RAW264.7 M1型极化的影响,并从基因层面探讨该干预作用是否与miR-155的下调及下游JAK1-STAT1通路受抑制有关,进一步为丹皮酚抗动脉粥样硬化(atherosclerosis,AS)的分子机制提供新的思路。实验采... 探究丹皮酚(paeonol)对小鼠腹腔巨噬细胞RAW264.7 M1型极化的影响,并从基因层面探讨该干预作用是否与miR-155的下调及下游JAK1-STAT1通路受抑制有关,进一步为丹皮酚抗动脉粥样硬化(atherosclerosis,AS)的分子机制提供新的思路。实验采用脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)和干扰素-γ(interferon-γ,IFN-γ)共刺激24 h建立巨噬细胞M1型极化的模型,丹皮酚在刺激前24 h给予细胞起到预保护作用。CCK-8法检测LPS和IFN-γ共刺激对细胞的损伤作用,流式细胞术检测M1型表面标志物F4/80和CD86的表达,ELISA法检测细胞上清液中炎症因子白介素-6(interleukin 6,IL-6)、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)的分泌,RT-qPCR法检测各组细胞miR-155的表达,Western blot法检测JAK1-STAT1-SOCS1通路上的蛋白表达。结果显示,LPS和IFN-γ在最适浓度下对细胞没有明显损伤作用,但可诱导巨噬细胞向M1极化,使得细胞表面的M1型标志性因子F4/80和CD86高表达,同时导致细胞表面炎症因子IL-6和TNF-α的分泌增多(P<0.05或P<0.01)。丹皮酚可显著降低RAW264.7细胞由LPS和IFN-γ诱导的表面M1型标志物F4/80和CD86的高表达,同时减少了炎症因子IL-6和TNF-α的分泌(P<0.05或P<0.01),降低了miR-155的表达水平,显著下调了JAK1-STAT1的蛋白磷酸化水平,上调SOCS1蛋白表达(P<0.01)。结果表明,丹皮酚通过下调细胞表面标志性因子及细胞分泌的炎症因子,达到抑制巨噬细胞M1型极化的作用,这种作用可能与丹皮酚下调miR-155的表达,抑制JAK1-STAT1通路的活化有关。 展开更多

关键词 丹皮酚 MIR-155 JAK1-STAT1通路 M1极化

原文传递

维吉尼亚雪松精油的GC-MS分析及体外药理活性研究 被引量：7

8

作者 席祖卫 王雨佳 +3 位作者 陈金虎 王梦如 李婷 刘衡 《药物分析杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第2期335-341,共7页

目的:对市售维吉尼雪松精油主要挥发性成分分析,并探究其体外药理活性。方法:采用气相-质谱联用法,色谱柱为Agilent HP-5MS(250μm×30 m,0.25μm),载气为高纯氦气,进样量0.2μL;分流比10∶1;柱流量1.0 mL·min^(-1),进样口温度... 目的:对市售维吉尼雪松精油主要挥发性成分分析,并探究其体外药理活性。方法:采用气相-质谱联用法,色谱柱为Agilent HP-5MS(250μm×30 m,0.25μm),载气为高纯氦气,进样量0.2μL;分流比10∶1;柱流量1.0 mL·min^(-1),进样口温度220℃。离子源为EI,离子源温度230℃,电离能量70 eV,质量扫描范围m/z 12~550,溶剂延迟3 min;采用面积归一化法测定各组分的相对含量;牛津杯法测定抑菌圈的大小,评价其对金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌及白色念珠菌的体外抑菌活性;通过建立脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)刺激RAW264.7细胞系炎症模型,探究其对巨噬细胞相关炎症因子TNF-α表达量的影响;噻唑蓝(Methyl Thiazolyl Tetrazolium,MTT)法测定其对HT-29肿瘤细胞体外细胞毒活性。结果:从维吉尼亚雪松精油样品中共检测出21个成分,占总峰面积的95.67%,主要成分为雪松醇(26.58%)、α-雪松烯(24.05%)、顺罗汉柏烯(23.46%)等萜烯类和萜醇类化合物;维吉尼亚雪松精油可显著提高TNF-α的表达量,呈成剂量依赖性抑制HT-29细胞的增殖,但对3个菌敏感度均不高。结论:维吉尼亚雪松精油成分丰富,具有一定的抗菌活性,同时能促进LPS诱导RAW264.7细胞向M1型极化的作用,并有较好的抗HT-29肿瘤细胞增殖作用。 展开更多

关键词 雪松 精油 气相色谱-质谱 抗菌 M1型极化

原文传递

黄芪甲苷促M2型巨噬细胞极化的作用研究 被引量：6

9

作者 戴良成 袁保红 +2 位作者 罗晓春 黄萍 尹辉 《广东药学院学报》 CAS 2016年第4期494-497,502,共5页

目的探讨黄芪甲苷对M2型巨噬细胞极化的影响。方法黄芪甲苷体外作用小鼠原代巨噬细胞,用流式细胞仪检测其表面分子(CD206、MHCII和CD80/86)表达,Real time-PCR检测M1/M2型巨噬细胞特征基因(i NOS、YM1和Arg1)的表达,ELISA测定炎症相关... 目的探讨黄芪甲苷对M2型巨噬细胞极化的影响。方法黄芪甲苷体外作用小鼠原代巨噬细胞,用流式细胞仪检测其表面分子(CD206、MHCII和CD80/86)表达,Real time-PCR检测M1/M2型巨噬细胞特征基因(i NOS、YM1和Arg1)的表达,ELISA测定炎症相关细胞因子(TNF-α、IL-6、TGF-β)的表达。结果黄芪甲苷单独处理未能诱导M2型巨噬细胞生成,但其与IL-13联合处理可明显上调M2型巨噬细胞标志CD206、YM1和Arg1的表达,下调抗原提呈相关分子MHCII和CD80/86的表达,促进抑炎细胞因子TGF-β的分泌。结论黄芪甲苷通过协同作用方式促进M2型巨噬细胞极化。 展开更多

关键词 黄芪甲苷 巨噬细胞 M1/M2型极化 TGF-Β

下载PDF 职称材料

SOCS3调控JAK/STAT3通路对PD-1/PD-L1抑制剂所致小鼠心脏毒性的影响 被引量：1

10

作者 符基定 曾丽斯 +4 位作者 林颉 韦伊尔 徐维 徐睿 冼乐武 《西部医学》 2024年第3期338-343,350,共7页

目的 探讨细胞因子信号转导抑制因子3(SOCS3)通过调控酪氨酸激酶/转录激活因子3(JAK/STAT3)通路影响巨噬细胞M1型极化的作用机制,及其对程序性死亡受体1/程序性死亡配体1(PD-1/PD-L1)抑制剂所致小鼠心脏毒性的影响。方法 将RAW 264.7细... 目的 探讨细胞因子信号转导抑制因子3(SOCS3)通过调控酪氨酸激酶/转录激活因子3(JAK/STAT3)通路影响巨噬细胞M1型极化的作用机制,及其对程序性死亡受体1/程序性死亡配体1(PD-1/PD-L1)抑制剂所致小鼠心脏毒性的影响。方法 将RAW 264.7细胞分为对照组、LPS组、pc-NC组、pc-SOCS3组、si-NC组、si-SOCS3组及抑制剂组,细胞转染相应质粒并使用100 ng/mL LPS干预;50只SPF级6周龄BALB/c小鼠分为正常组、模型组、NC组、SOCS3组及抑制剂组,每组10只,除正常组外,其余各组小鼠通过腹腔注射PD-1/PD-L1抑制剂BMS-1 10 mg/kg建立PD-1/PD-L1抑制剂诱导的小鼠心脏毒性模型,并通过尾静脉注射相应质粒或腹腔注射相应药物。HE染色观察小鼠心脏组织病理;ELISA法检测细胞上清和小鼠血清IL-10、TNF-α和IL-1β水平;Western blot检测细胞SOCS3、CD86、CD80以及JAK/STAT3信号通路相关蛋白表达。结果 细胞过表达SOCS3会促进巨噬细胞细胞炎症因子水平和M1型极化,并抑制JAK/STAT3通路相关蛋白表达;细胞SOCS3低表达后,细胞炎症因子水平降低,并抑制巨噬细胞M1型极化,激活JAK/STAT3通路(P<0.05);BMS-1干预后小鼠心脏组织损伤严重,心脏指数、血清炎症水平及CD86、CD80蛋白表达明显升高,JAK/STAT3通路相关蛋白表达明显降低(P<0.05);过表达SOCS3组小鼠心脏损伤减轻,心脏指数、血清炎症因子及心脏CD86、CD80蛋白表达明显降低,JAK/STAT3通路相关蛋白表达明显升高(P<0.05);JAK/STAT3通路抑制剂AG490逆转了低表达SOCS3对PD-1/PD-L1抑制剂诱导小鼠心脏损伤减轻作用和M1型巨噬细胞极化作用。结论 低表达SOCS3可通过激活JAK/STAT3通路抑制巨噬细胞M1型极化并减轻PD-1/PD-L1抑制剂所致小鼠心脏毒性。 展开更多

关键词 细胞因子信号转导抑制因子3 JAK/STAT3信号通路 巨噬细胞M1型极化 PD-1/PD-L1抑制剂 心脏毒性

下载PDF 职称材料

香叶木素调节巨噬细胞M1/M2型极化对CVB3诱导的乳小鼠病毒性心肌炎的保护作用 被引量：5

11

作者 张晓文 范娜 +2 位作者 郭耀东 王学军 程敏 《中国药理学与毒理学杂志》 CAS 北大核心 2019年第7期502-510,共9页

目的研究香叶木素是否通过调节巨噬细胞M1/M2型极化对柯萨奇病毒B3(CVB3)诱导的病毒性心肌炎起保护作用。方法 BALB/c乳小鼠单次ip 0.1 mL CVB3 1×10^5pfu,记为D 0;24 h后(D1),ig给予香叶木素12.5,25和50 mg·kg^-1,连续7 d。... 目的研究香叶木素是否通过调节巨噬细胞M1/M2型极化对柯萨奇病毒B3(CVB3)诱导的病毒性心肌炎起保护作用。方法 BALB/c乳小鼠单次ip 0.1 mL CVB3 1×10^5pfu,记为D 0;24 h后(D1),ig给予香叶木素12.5,25和50 mg·kg^-1,连续7 d。实验结束,检测乳小鼠的平均动脉压(MAP)、心率(HR)和左室收缩压(LVSP);血清中肌酸激酶(CK)、CK的MB型同工酶(CK-MB)和肌红蛋白(Mb)水平;通过流式细胞术分析和分选外周血中巨噬细胞M1和M2极化情况;HE染色和TUNEL染色观察心肌组织病理变化;Western印迹法检测心肌组织中活化的胱天蛋白酶3和活化的胱天蛋白酶9蛋白表达水平。从乳小鼠脾组织分选巨噬细胞,分别用干扰素γ(IFN-γ)5 mg·L^-1、CVB3 1×10^5pfu、香叶木素20μmol·L^-1、CVB3 1×10^5pfu^+香叶木素20μmol·L^-1处理巨噬细胞24 h,Western印迹法检测细胞中诱导型一氧化氮合酶(iNOS)和精氨酸酶1(Arg-1)表达水平。结果与正常对照组相比,模型组乳小鼠上述指标均显著降低(P<0.05);与模型组相比,香叶木素12.5,25和50 mg·kg^-1组乳小鼠的MAP,HR和LVSP均显著升高(P<0.05)。与正常对照组相比,模型组乳小鼠血清中CK,CK-MB和Mb水平以及心肌细胞凋亡率均显著升高(P<0.05),心肌组织活化的胱天蛋白酶3和活化的胱天蛋白酶9表达水平显著升高(P<0.05);与模型组相比,香叶木素12.5,25和50mg·kg^-1组乳小鼠血清中上述指标均显著降低(P<0.05),且心肌组织中活化的胱天蛋白酶3和活化的胱天蛋白酶9表达水平也显著降低(P<0.05)。与正常对照组相比,模型组乳小鼠外周血中F4/80^+iNOS^+,F4/80^+TLR4^+和F4/80^+CD40^+的细胞百分比显著升高(P<0.05),F4/80^+CD14^+,F4/80^+Arg-1^+和F4/80^+CD206^+的细胞百分比明显降低(P<0.05);与模型组相比,香叶木素12.5,25和50 mg·kg^-1组小鼠外周血中F4/80^+iNOS^+,F4/80^+TLR4^+和F4/80^+CD40^+的细胞百分比显著降低(P<0.05),F4/80^+CD14^+,F4/80^+Arg-1^+和F4/80^+CD206^+的细胞百分比� 展开更多

关键词 香叶木素 巨噬细胞 M1/M2型极化 病毒性心肌炎

下载PDF 职称材料

胶质母细胞瘤脂肪酸合酶调控巨噬细胞M1极化影响细胞迁移和侵袭能力的实验研究

12

作者 张文欣 季佳宇 +6 位作者 周贤喆 王佳琳 袁桂强 张梦梦 张俊文 刘福生 金贵善 《中华神经外科杂志》 CSCD 北大核心 2024年第3期283-290,共8页

目的 探究胶质母细胞瘤(GBM)细胞中脂肪酸合酶(FASN)表达对巨噬细胞U937极化状态的影响.方法 采用慢病毒转染GBM细胞(U87和LN229)构建稳定干扰FASN的细胞株,获得干扰RNA对照组(sh-con,即U87sh-con组、LN229sh-con组)和敲低FASN实验组(sh... 目的 探究胶质母细胞瘤(GBM)细胞中脂肪酸合酶(FASN)表达对巨噬细胞U937极化状态的影响.方法 采用慢病毒转染GBM细胞(U87和LN229)构建稳定干扰FASN的细胞株,获得干扰RNA对照组(sh-con,即U87sh-con组、LN229sh-con组)和敲低FASN实验组(sh-FASN,即U87sh-FASN组、LN229sh-FASN组),收集以上4组的细胞上清液(GBM细胞条件培养基)后分别与经佛波酯(PMA)诱导分化后的U937巨噬细胞共培养(共培养后的细胞上清为巨噬细胞条件培养基),再分别将4组巨噬细胞条件培养基与GBM细胞(U251)进行共培养.通过蛋白质免疫印迹法(WB)和(或)细胞免疫荧光(IF)实验检测 U87sh-con、U87sh-FASN、LN229sh-con、LN229sh-FASN 4 组细胞中FASN蛋白的表达情况及GBM条件培养基与U937细胞共培养后环氧合酶2(COX-2)、精氨酸酶1(ARG1)蛋白的表达情况;通过CCK-8实验检测敲低FASN后U87和LN229细胞的增殖情况;通过实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)实验检测4组GBM条件培养基与U937细胞共培养后成熟巨噬细胞标志物CD68,巨噬细胞M1表型标志物CD11c、COX-2及M2表型标志物白细胞介素10(IL-10)、ARG1的表达情况;通过Transwell小室实验检测4组巨噬细胞条件培养基对U251细胞迁移、侵袭能力的影响.统计学以P<0.05为差异有统计学意义.结果 成功构建了FASN蛋白稳定敲低的U87、LN229细胞株,WB和IF结果均显示,与对应细胞的sh-con组相比,U87、LN229细胞sh-FASN组的FASN蛋白表达均降低(均P<0.05);CCK-8结果显示,48 h时U87sh-con组与U87sh-FASN组细胞活力的差异具有统计学意义[(588.391±10.032)%对比(547.009±1.860)%,P=0.002];24、48 h 时LN229sh-con组与LN229sh-FASN组细胞活力的差异均具有统计学意义[24 h:(235.033±1.598)%对比(218.026±3.593)%;48 h:(441.190±5.196)%对比(388.306±9.887)%;均P<0.05),而 8、12 h时U87、LN229细胞sh-con组与sh-FASN组细胞活力的差异均无统计学意义(均P>0.05).qRT-PCR结果显示,与U937细胞相比,经诱导分化� 展开更多

关键词 胶质母细胞瘤 脂肪酸合酶 巨噬细胞 M1极化 细胞迁移 细胞侵袭

原文传递

结核分枝杆菌Rv2986c对小鼠树突状细胞成熟和功能的影响 被引量：4

13

作者 孙妍 王心倩 +5 位作者 吴启航 赵隆麒 李海波 占卫红 张舒林 余晓丽 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第12期1028-1033,共6页

目的探索结核分枝杆菌Rv2986c蛋白诱导小鼠树突状细胞成熟及Na?ve CD4^+T细胞极化的作用。方法克隆表达Rv2986c蛋白,用纯化后的蛋白刺激小鼠树突状细胞,流式检测树突状细胞MHC-Ⅱ表面分子,ELISA检测培养上清中IL-6和IL-12p40分泌情况。... 目的探索结核分枝杆菌Rv2986c蛋白诱导小鼠树突状细胞成熟及Na?ve CD4^+T细胞极化的作用。方法克隆表达Rv2986c蛋白,用纯化后的蛋白刺激小鼠树突状细胞,流式检测树突状细胞MHC-Ⅱ表面分子,ELISA检测培养上清中IL-6和IL-12p40分泌情况。将Na?ve CD4^+T细胞与经Rv2986c刺激后的树突状细胞共培养,检测培养上清中IFN-γ的分泌水平。结果成功克隆表达了Rv2986c蛋白。经Rv2986c蛋白刺激后,树突状细胞MHC-Ⅱ表面分子表达水平显著增高,IL-6和IL-12p40释放水平显著升高。淋巴细胞共培养上清液中IFN-γ分泌量显著增加。结论结核分枝杆菌蛋白Rv2986c能促进小鼠树突状细胞成熟,激活抗原递呈作用,诱导CD4^+T向Th1型极化。 展开更多

关键词 结核分枝杆菌 Rv2986c 树突状细胞 Th1型极化

下载PDF 职称材料

全反式维甲酸对M1型巨噬细胞极化的影响 被引量：1

14

作者 薛高峰 王琳源 +1 位作者 关宁 高秀秋 《中国医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第1期17-22,共6页

目的利用M1型巨噬细胞极化模型,探讨全反式维甲酸(ATRA)对M1型巨噬细胞极化的影响。方法选用8周龄C57BL/6雌性小鼠,提取并纯化腹腔巨噬细胞,随机分为M组、M1组、DMSO组和ATRA组。脂多糖(LPS,100 ng/mL)联合干扰素-γ(IFN-γ,20 ng/mL)... 目的利用M1型巨噬细胞极化模型,探讨全反式维甲酸(ATRA)对M1型巨噬细胞极化的影响。方法选用8周龄C57BL/6雌性小鼠,提取并纯化腹腔巨噬细胞,随机分为M组、M1组、DMSO组和ATRA组。脂多糖(LPS,100 ng/mL)联合干扰素-γ(IFN-γ,20 ng/mL)诱导巨噬细胞构建M1型巨噬细胞极化模型,ATRA(30μg/mL)处理24 h。Annexin V-PE/7-AAD双染法检测ATRA对巨噬细胞凋亡的影响,流式细胞仪检测F4/80+iNOS+M1型细胞的表达,实时PCR检测白细胞介素-1β(IL-1β)、诱导型一氧化氮合酶(iNOS)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的mRNA表达。结果与M1组相比,ATRA组中巨噬细胞凋亡率无明显变化(P>0.05),F4/80+iNOS+M1型细胞比例明显降低(P<0.05);IL-1β、iNOS、TNF-αmRNA表达明显降低(P<0.05)。结论ATRA对巨噬细胞无细胞毒作用且可抑制巨噬细胞向M1型的极化。 展开更多

关键词 全反式维甲酸 M1型巨噬细胞 巨噬细胞极化

下载PDF 职称材料

微机井中激电仪的应用效果

15

作者 孙建刚 武建章 于光 《物探与化探》 CAS CSCD 1993年第4期273-278,共6页

简述DJJ-1型井中激电仪软件系统和几个应用实例。实例表明，在钻孔见矿的情况下，方位测量可用于查明矿体的空间形态和延展情况。

关键词 DJJ-1型 井中激电仪 应用效果

下载PDF 职称材料