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HSV1-tk 报告基因真核表达载体的构建及其在人肺腺癌 AGZY 细胞中的表达 被引量：1
1
作者 栾厦 付鹏 +4 位作者 金钟男 田国梅 姜廷军 曹学良 赵长久 《实用肿瘤学杂志》 CAS 2014年第2期97-101,共5页
目的：构建含有HSV1-tk（ Herpes simplex virus type 1 thymidine kinase， HSV1-tk）基因的真核表达载体，并检测其在人肺腺癌AGZY细胞系中的表达。方法应用PCR反应从质粒pHSV106质粒中扩增HSV1-tk基因后与pMD18-T载体连接，构建重组... 目的：构建含有HSV1-tk（ Herpes simplex virus type 1 thymidine kinase， HSV1-tk）基因的真核表达载体，并检测其在人肺腺癌AGZY细胞系中的表达。方法应用PCR反应从质粒pHSV106质粒中扩增HSV1-tk基因后与pMD18-T载体连接，构建重组质粒pHSV1-tk/18T。将测序正确的重组质粒插入plRES2-EGFP 载体内，通过LipofectamineTM 2000将表达载体转染人肺腺癌AGZY细胞。结果酶切鉴定结果表明扩增的HSV1-tk基因序列正确；用荧光显微镜观察HSV1-tk基因的转入和表达；RT-PCR和Western blot结果显示在AGZY细胞中HSV1-tk基因在转录水平和蛋白水平均可以正确表达。MTT结果显示转染后AGZY细胞与未转染细胞在细胞增殖能力方面无明显差别。结论成功构建HSV1-tk报告基因的真核表达载体，在人肺腺癌AGZY细胞中能有效表达。 展开更多
关键词 HSV1-TK 真核表达载体 报告基因显像 肺腺癌agzy细胞
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