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LukS-PV通过C5aR诱导急性髓系白血病细胞THP-1凋亡的研究 被引量：5
1
作者 彭静 马筱玲 +1 位作者 孙晓曦 潘请 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2017年第2期164-168,共5页
目的探讨金黄色葡萄球菌杀白细胞毒素亚组分(LukS-PV)是否通过C5aR发挥其诱导急性髓系白血病细胞THP-1凋亡的作用。方法将THP-1细胞株分为5组:未处理细胞为对照组,使用不同浓度的C5aR拮抗剂(0、50、100、150 nmol/L)预先作用于THP-1细胞... 目的探讨金黄色葡萄球菌杀白细胞毒素亚组分(LukS-PV)是否通过C5aR发挥其诱导急性髓系白血病细胞THP-1凋亡的作用。方法将THP-1细胞株分为5组:未处理细胞为对照组,使用不同浓度的C5aR拮抗剂(0、50、100、150 nmol/L)预先作用于THP-1细胞后,再使用1μmol/L LukS-PV刺激细胞为处理组。24 h后通过Annexin V/PI染色法,线粒体膜电位法检测细胞凋亡,qRT-PCR法检测凋亡相关基因,Western blot法检测凋亡相关蛋白,酶标仪法检测Caspase-3活性。结果经过不同浓度C5aR拮抗剂干预后,LukS-PV诱导THP-1细胞凋亡的比率逐渐下降,促凋亡基因Bax、Bak、Bim和促凋亡蛋白cleaved-Caspase-3、Bak、Bax的表达量也逐渐减低,抑凋亡基因Bcl-2、Bcl-w、Bcl-x和抑凋亡蛋白Bcl-2的表达量逐渐升高,Caspase-3活性逐渐降低。结论LukS-PV可能通过结合C5aR从而激活下游线粒体通路,发挥其诱导人急性髓系白血病细胞THP-1凋亡的作用。 展开更多
关键词 C5AR luks-pv THP-1细胞 诱导凋亡
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C5aR在金黄色葡萄球菌LukS-PV诱导非小细胞肺癌细胞凋亡中的作用
2
作者 张鹏 王杨燕 李婕 《皖南医学院学报》 CAS 2024年第1期24-27,32,共5页
目的:探讨金黄色葡萄球菌杀白细胞素S组分(LukS-PV)通过活化补体5受体(C5aR)对非小细胞肺癌(NSCLC)细胞A549和H460凋亡的影响。方法:将敲低C5aR表达的慢病毒载体转染至A549和H460细胞中,qRT-PCR和Western blot检测C5aR敲低率,Annexin V... 目的:探讨金黄色葡萄球菌杀白细胞素S组分(LukS-PV)通过活化补体5受体(C5aR)对非小细胞肺癌(NSCLC)细胞A549和H460凋亡的影响。方法:将敲低C5aR表达的慢病毒载体转染至A549和H460细胞中,qRT-PCR和Western blot检测C5aR敲低率,Annexin V/PI染色法检测敲低C5aR对细胞凋亡的影响。对敲低C5aR的细胞再加入LukS-PV,通过Annexin V/PI染色法和凋亡相关蛋白检测细胞凋亡情况。结果:与PBS对照组相比,LukS-PV可促进A549和H460细胞凋亡(P<0.05)。慢病毒载体转染A549和H460细胞敲低C5aR后,细胞C5aR表达水平降低(P<0.05)。在敲低C5aR基础上再加入LukS-PV,细胞凋亡受到抑制(P<0.05)。结论:敲低C5aR可抑制LukS-PV诱导NSCLC细胞的凋亡。 展开更多
关键词 活化补体5受体 金黄色葡萄球菌杀白细胞素S组分 非小细胞肺癌 细胞凋亡
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LukS-PV对乳腺癌细胞MAD-MB-231增殖、凋亡及细胞周期的影响 被引量：2
3
作者 于文伟 许良飞 +2 位作者 汪自然 强雅雯 马筱玲 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2019年第5期701-704,709,共5页
目的在体外研究金黄色葡萄球菌杀白细胞素S组分(LukS-PV)对三阴乳腺癌(TNBC)细胞(MAD-MB-231)形态、增殖、周期和凋亡的影响。方法 0.25、0.5、0.75、1μmol/L LukS-PV刺激乳腺癌细胞MAD-MB-231后,利用倒置显微镜观察细胞形态的改变;用C... 目的在体外研究金黄色葡萄球菌杀白细胞素S组分(LukS-PV)对三阴乳腺癌(TNBC)细胞(MAD-MB-231)形态、增殖、周期和凋亡的影响。方法 0.25、0.5、0.75、1μmol/L LukS-PV刺激乳腺癌细胞MAD-MB-231后,利用倒置显微镜观察细胞形态的改变;用CCK-8检测LukS-PV对MAD-MB-231细胞增殖的影响;通过PI单染流式细胞术检测LukS-PV对MAD-MB-231细胞周期的改变;采用Annexin V/PI双染流式细胞术检测LukS-PV对MAD-MB-231细胞凋亡的影响,利用Western blot检测Bcl-2相关的X蛋白(Bax)、B淋巴细胞瘤-2 (Bcl-2)、天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶-3(Caspase3)、Caspase8表达的变化。结果 LukS-PV作用MAD-MB-231后,细胞逐渐变圆,随着浓度增加,悬浮细胞增多。LukS-PV以时间和浓度依赖性的方式抑制乳腺癌细胞的增殖。LukS-PV可使MAD-MB-231周期阻滞在G1/G0期,呈浓度依赖性。LukS-PV可诱导MAD-MB-231凋亡,上调Bax、活化的caspase3(Cleved-caspase3)、活化的caspase8(Cleved-caspase8)的表达,下调Bcl-2的表达。结论 LukS-PV可抑制MAD-MB-231增殖,使其周期阻滞在G1/G0期,并诱导其凋亡。 展开更多
关键词 MAD-MB-231 luks-pv 增殖 细胞周期 凋亡
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金葡菌杀白细胞素S组分LukS-PV抑制急性髓系白血病细胞增殖的机制研究 被引量：1
4
作者 施岚 许良飞 +2 位作者 聂正超 常文娇 马筱玲 《临床输血与检验》 CAS 2020年第6期603-609,共7页
目的 探讨金葡菌杀白细胞素S组分LukS-PV通过下调甲基转移酶SET8对急性髓系白血病(AML)细胞THP-1和HL-60增殖的影响。方法 采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)和Western blot检测不同浓度LukS-PV处理后THP-1和HL-60细胞的SET8 mRNA和蛋白的... 目的 探讨金葡菌杀白细胞素S组分LukS-PV通过下调甲基转移酶SET8对急性髓系白血病(AML)细胞THP-1和HL-60增殖的影响。方法 采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)和Western blot检测不同浓度LukS-PV处理后THP-1和HL-60细胞的SET8 mRNA和蛋白的表达水平。将敲低SET8表达的慢病毒载体转染至THP-1和HL-60细胞中,qRT-PCR和Western blot检测SET8敲低效率,EdU实验检测敲低SET8对细胞增殖的影响。在敲低SET8的基础上,加入LukS-PV处理,通过EdU检测细胞增殖探究LukS-PV是否通过下调SET8抑制白血病细胞THP-1和HL-60的增殖。结果 在AML细胞系THP-1和HL-60中,与PBS对照组相比,LukS-PV处理组SET8及其修饰位点H4K20me1的表达水平明显降低并具有浓度依赖性(P<0.05)。与阴性对照组相比,在THP-1和HL-60细胞转染敲低SET8慢病毒载体后,SET8表达水平明显降低(P<0.05),细胞增殖能力明显降低(P<0.05)。与PBS对照组相比,敲低SET8可抑制细胞增殖(P<0.05),而在此基础上加入LukS-PV处理后,细胞增殖抑制更加明显(P<0.05)。结论 下调SET8抑制AML细胞THP-1和HL-60的增殖;且LukS-PV可以通过下调SET8抑制细胞增殖,发挥抗白血病作用。 展开更多
关键词 Luk S-pv SET8 白血病 增殖
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saeRS对金黄色葡萄球菌临床分离株的hla和lukS-PV表达的影响 被引量：3
5
作者 屠金晶 张协 +6 位作者 许园园 尚永朋 楼丹萍 武有聪 瞿涤 王良兴 余方友 《中华微生物学和免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第2期91-96,共6页
目的研究双组分信号调控系统saeRS对金黄色葡萄球菌临床分离株a溶血素基因（hla）和Panton．Valentine杀白细胞素基因（1ukSIF-PV）表达的影响。方法利用同源重组技术敲除saeRS基因，获得金黄色葡萄球菌saeRS基因敲除株，并构建saeRS回... 目的研究双组分信号调控系统saeRS对金黄色葡萄球菌临床分离株a溶血素基因（hla）和Panton．Valentine杀白细胞素基因（1ukSIF-PV）表达的影响。方法利用同源重组技术敲除saeRS基因，获得金黄色葡萄球菌saeRS基因敲除株，并构建saeRS回复突变株。应用SDS-PAGE检测金黄色葡萄球菌saeR／S野生株、敲除株及回复突变株分泌蛋白的变化，采用RT—PCR检测金黄色葡萄球菌saeR／S野生株、敲除株及回复突变株hlamRNA和lukS—PVmRNA。结果成功构建了金黄色葡萄球菌saeRS基因敲除株SA75AsaeRS。与野生株SA75相比，SA75／XsaeRS的生长无明显差异，但分泌蛋白种类和数量有明显减少且溶血能力明显减弱。saeRS基因回复突变株SA75／XsaeRS—C可以基本恢复敲除株的溶血能力。在3、6和10h3个时间点与野生株相比，SA75AsaeRS的hlamRNA均有明显下降，分别是野生株的7．6％、0％和0．1％。lukS—PVmRNA也均有明显下降，分别是野生株lukS—PV表达量的37．2％、19．2％和20．4％。结论saeRS基因是调节金黄色葡萄球菌分泌蛋白的关键因子。saeRS基因对金黄色葡萄球菌的hla和lukS—PV的表达具有正调控作用。 展开更多
关键词 金黄色葡萄球菌 saeRS HLA luks F-pv
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