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卡格列净通过抑制长链非编码RNA CO9缓解高糖环境下肾小管上皮细胞凋亡 被引量：1
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作者 卫芳祎 邵明玮 +6 位作者 宋怡 范迅捷 甘甜 张薇 罗媛媛 樊亚亚 秦贵军 《中华糖尿病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第4期320-328,共9页
目的探讨高糖环境下卡格列净通过抑制lncRNA CO9缓解肾小管上皮细胞凋亡的作用及其机制。方法体外培养人近端肾小管上皮细胞系(HK-2),将其分为正常葡萄糖(NG)组、高渗(HO)组、高糖(HG)组、高糖+二甲基亚砜组(DMSO组)、高糖+卡格列净组(C... 目的探讨高糖环境下卡格列净通过抑制lncRNA CO9缓解肾小管上皮细胞凋亡的作用及其机制。方法体外培养人近端肾小管上皮细胞系(HK-2),将其分为正常葡萄糖(NG)组、高渗(HO)组、高糖(HG)组、高糖+二甲基亚砜组(DMSO组)、高糖+卡格列净组(CANA组)、高糖+阴性对照小干扰RNA组(si-NC组)、高糖+lncRNA CO9小干扰RNA组(si-CO9组)、高糖+空载质粒组(PEX-NC组)、高糖+lncRNA CO9过表达质粒组(PEX-CO9组)、高糖+卡格列净+lncRNA CO9过表达质粒组(CANA+PEX-CO9组)。采用细胞计数试剂-8(CCK-8)法与四唑盐(MTT)比色法检测细胞增殖率;Western blotting检测凋亡相关蛋白[B细胞淋巴瘤2相关X蛋白(Bax)、B细胞淋巴瘤2(Bcl-2)、半胱氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)、活化型Caspase-3]与核因子(NF)-κB p50亚基及其前体p105蛋白的相对表达量,计算Bax/Bcl2蛋白相对表达量比值;流式细胞术检测细胞凋亡率;实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测lncRNA CO9与NF-κB1 mRNA的相对表达量。采用荧光原位杂交检测lncRNA CO9亚细胞定位,基因本体论(GO)、京都基因与基因组百科全书(KEGG)分析预测其功能。收集临床正常对照组(NC组,5例)与糖尿病肾脏病组患者(DKD组,5例)肾脏样本,检测其近端肾小管上皮细胞lncRNA CO9的表达。两组间比较采用独立样本t检验,多组间比较采用单因素方差分析。结果与NG组相比,HG组细胞增殖率降低,Bax/Bcl2蛋白相对表达量比值、Caspase-3与活化型Caspase-3蛋白相对表达量、细胞凋亡率、lncRNA CO9均显著上调;而与HG组相比,CANA组细胞凋亡率下降,lncRNA CO9表达下调(P<0.05)。lncRNA CO9定位于细胞质。GO与KEGG分析显示,lncRNA CO9与细胞凋亡通路相关。在DKD组肾脏组织近端肾小管上皮细胞lncRNA CO9表达较NC组上调(P<0.05)。相较于HG组,si-CO9组凋亡蛋白相对表达量、凋亡率及NF-κB1 mRNA、NF-κB p50亚基及其前体p105蛋白相对表达量下降,PEX-CO9组则增高(P<0.05)。与CANA 展开更多
关键词 糖尿病肾病 卡格列净 钠-葡萄糖共转运蛋白2抑制剂 凋亡 长链非编码rna co9
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