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三重LAMP法检测食品中沙门氏菌、单增李斯特菌和金黄色葡萄球菌 被引量:35
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作者 姜侃 吕沁风 +3 位作者 汪新 夏琳 张峥 陈小珍 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2013年第24期182-187,共6页
为能一步快速检测沙门氏菌、金黄色葡萄球菌和单增李斯特菌3种食源性致病菌,建立了三重环介导等温扩增(LAMP)检测方法。针对沙门氏菌的侵袭蛋白(invA)基因、金黄色葡萄球菌的耐热核酸酶(nuc)基因、单增李斯特菌(hly)基因3个高度保守的基... 为能一步快速检测沙门氏菌、金黄色葡萄球菌和单增李斯特菌3种食源性致病菌,建立了三重环介导等温扩增(LAMP)检测方法。针对沙门氏菌的侵袭蛋白(invA)基因、金黄色葡萄球菌的耐热核酸酶(nuc)基因、单增李斯特菌(hly)基因3个高度保守的基因,设计出3套LAMP引物。以8株代表目标菌株,三重LAMP反应体系中Mg2+浓度4.6mmol/L、扩增温度61℃。通过电泳检测、离心观察沉淀和荧光检测证明该方法能够在90min内一次性检出以上3种致病菌。3种菌的检测灵敏度均约为10fg/μL,是PCR检测灵敏度(10pg/μL)的1000倍。以无害李斯特菌等常见的20株非目标菌株为对照,证明了此方法的特异性。LAMP产物DNA测序结果与预期一致,证明了该方法的正确性。该三重LAMP检测方法具有快速、特异、灵敏度高的优点,适用于食品中沙门氏菌、金黄色葡萄球菌和单增李斯特菌的快速检测。 展开更多
关键词 LAMP 沙门氏菌 金黄色葡萄球菌 单增李斯特菌 快速检测
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酸性电解水对纯培养及食品中食源性致病菌杀菌效果比较研究 被引量:17
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作者 林婷 王敬敬 +1 位作者 潘迎捷 赵勇 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2013年第15期69-74,共6页
比较研究不同有效氯质量浓度的酸性电解水对纯培养单增李斯特菌和副溶血性弧菌,以及人工接种到黄瓜上的单增李斯特菌和副溶血性弧菌处理不同时间后的杀灭效果。结果表明:酸性电解水分别对在纯培养条件下及在黄瓜上的2种食源性致病菌均... 比较研究不同有效氯质量浓度的酸性电解水对纯培养单增李斯特菌和副溶血性弧菌,以及人工接种到黄瓜上的单增李斯特菌和副溶血性弧菌处理不同时间后的杀灭效果。结果表明:酸性电解水分别对在纯培养条件下及在黄瓜上的2种食源性致病菌均具有很强的杀灭效果,其杀菌效果随着有效氯(ACC)质量浓度和处理时间的增加而增强。对纯培养物的杀菌实验表明:当酸性电解水ACC质量浓度为30mg/L时,0.5min内可以完全杀灭副溶血性弧菌;当ACC质量浓度为40mg/L时,0.5min内可以完全杀灭单增李斯特菌。酸性电解水处理上述黄瓜时,当ACC质量浓度为40mg/L时,1.5min内可将黄瓜表面的副溶血性弧菌全部杀灭;当ACC质量浓度为50mg/L时,2.5min内可杀灭黄瓜表面的单增李斯特菌约5(lg(CFU/g))。检测使用后的酸性电解水废液,发现其中无任何微生物残留,排放后不会对环境造成二次污染。 展开更多
关键词 酸性电解水 单增李斯特菌 副溶血性弧菌 黄瓜 杀菌效果
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实时荧光环介导等温扩增技术检测熏肉中单增李斯特氏菌的研究 被引量:2
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作者 李森 贾丽娜 +5 位作者 王鑫 杨倩 马晓燕 魏丹 袁耀武 张伟 《食品科技》 CAS 北大核心 2018年第8期319-324,共6页
建立一种实时荧光环介导等温扩增方法(Real-Time Fluorescence Loop-mediated Isothermal Amplification,RTF-LAMP)来快速、灵敏地检测熏肉中单增李斯特氏菌。针对单增李斯特氏菌的特异性基因inl B设计4条LAMP引物,并建立一套最优的RTF-... 建立一种实时荧光环介导等温扩增方法(Real-Time Fluorescence Loop-mediated Isothermal Amplification,RTF-LAMP)来快速、灵敏地检测熏肉中单增李斯特氏菌。针对单增李斯特氏菌的特异性基因inl B设计4条LAMP引物,并建立一套最优的RTF-LAMP反应体系。对该方法进行特异性验证,同时对灵敏度和人工污染熏肉的检出限进行测定。3株单增李斯特氏菌被检测为阳性,17株非单增李斯特氏菌为阴性。表明引物具有良好的特异性。RTF-LAMP和传统LAMP检测单增李斯特氏菌的灵敏度分别为1.1×10~1、1.1×10~2 CFU/m L。通过对熏肉进行人工污染,得出RTF-LAMP的检出限为3.5×10~1 CFU/g。通过与国标方法GB 4789.30—2016进行对比并计算RTF-LAMP反应的敏感性,特异性和准确度,结果分别为100.00%、98.44%和98.46%。研究建立的RTF-LAMP能够实时、快速地检测熏肉中单增李斯特氏菌,具有良好的应用前景。 展开更多
关键词 实时荧光环介导等温扩增 单增李斯特氏菌 inlB 检测 熏肉
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绵羊李氏杆菌病的诊断
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作者 杨咏洁 鲁承 +2 位作者 李明哲 金洪范 金银吉 《延边大学农学学报》 2004年第4期245-247,共3页
2004年6月4日,吉林省珲春市某个体养殖户送检1只主要表现为神经症状的绵羊.为查明原因,对该病羊进行迫杀,通过解剖检查、病原体分离与鉴定及致病性试验,再结合流行病学调查和临床表现,确诊为李氏杆菌引起的脑炎.
关键词 李氏杆菌 脑炎 分离鉴定 致病性试验
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上杭县人畜李斯特氏菌病发病与带菌调查研究 被引量:5
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作者 郭仰霖 曾凡伟 +1 位作者 王培玉 郭大为 《海峡预防医学杂志》 CAS 1999年第3期9-9,共1页
目的:摸清上杭县畜间李斯特氏菌病发病特点和流行规律,提出防治对策和建议。方法:定点进行了流行病学调查和病原学研究。结果:共检测各类标本970份,分离出161株李斯特氏菌,总检出率为1660%,其中致病菌型占69%,... 目的:摸清上杭县畜间李斯特氏菌病发病特点和流行规律,提出防治对策和建议。方法:定点进行了流行病学调查和病原学研究。结果:共检测各类标本970份,分离出161株李斯特氏菌,总检出率为1660%,其中致病菌型占69%,带菌率高低与本病流行有密切关系。其流行特点:流行5~6月份出现第1高峰,11~12月份出现第2高峰。结论:本病目前主要在畜间流行,目前尚缺理想的防制方法。产H2S型李斯特氏菌为新型菌,可致猪、牛发生死亡,应加强对该菌的进一步研究。 展开更多
关键词 李氏杆菌病 李斯特菌 发病特点防治
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