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Lgr5在结肠癌组织中的表达及促进转移的临床研究 被引量:9
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作者 舒新军 《海南医学院学报》 CAS 2016年第9期833-835,共3页
目的:检测G蛋白耦联受体5(Lgr5)在结肠癌组织中表达,探讨其与临床病理特征的关系,及促进肿瘤侵袭转移的作用。方法:收集2013年4月~2015年10月在山东省宁津县人民医院普外科行手术切除的结肠癌患者标本102例,结肠腺瘤标本35例,同时... 目的:检测G蛋白耦联受体5(Lgr5)在结肠癌组织中表达,探讨其与临床病理特征的关系,及促进肿瘤侵袭转移的作用。方法:收集2013年4月~2015年10月在山东省宁津县人民医院普外科行手术切除的结肠癌患者标本102例,结肠腺瘤标本35例,同时收集相应标本的正常结肠组织137例,采用免疫组织方法检测Lgr5表达。结果:腺癌组织Lgr5阳性率为62.75%,显著高于腺瘤组织的阳性率(28.57%),显著高于正常组织的阳性率(16.06%)。结肠癌组织的Lgr5阳性表达与患者的腺癌分化程度、Dukes分期、淋巴结转移以及远处转移有关(P〈0.01),同时经logistic回归发现,腺癌组织的分化程度、淋巴结转移和远处转移是Lgr5阳性表达的独立预测因子。结论:Lgr5基因表达增加可能参与结肠癌的形成、分化、浸润及转移,有望成为针对结直肠癌干细胞的新治疗靶点。 展开更多
关键词 结肠癌 lgr5 细胞 免疫组织化学
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CD44及Lgr5在卵巢癌组织中的表达及其与预后的相关性分析 被引量:8
2
作者 马琳 刘杏巧 +2 位作者 张志革 高敏 郑炜 《标记免疫分析与临床》 CAS 2017年第10期1175-1179,1186,共6页
目的探讨含亮氨酸重复序列G-蛋白偶联受体5(1eucine-rich repeat-containing G protein coupled receptor 5,Lgr5)及CD44在卵巢癌中的表达及其与预后的关系。方法选取2006年5月至2010年1月住院并接受手术治疗的卵巢癌患者140例,选取同... 目的探讨含亮氨酸重复序列G-蛋白偶联受体5(1eucine-rich repeat-containing G protein coupled receptor 5,Lgr5)及CD44在卵巢癌中的表达及其与预后的关系。方法选取2006年5月至2010年1月住院并接受手术治疗的卵巢癌患者140例,选取同期本院因卵巢良性病变行肿物剥除或附件切除的40例患者作为对照,应用免疫组化(S-P)方法检测140例卵巢癌组织(卵巢癌组)、140例卵巢癌癌旁组织(癌旁组)、正常卵巢组织40例(正常组)中的Lgr5及CD44蛋白表达,分析其与卵巢癌患者临床病理指标的关系。结果 (1)Lgr5在正常卵巢组织、癌旁组织和卵巢癌中的阳性率分别为5.0%、18.3%和95.7%,差异具有统计学意义(F=24.581,P=0.001);CD44在正常卵巢组织、癌旁组织和卵巢癌中的阳性率分别为7.5%、15.7%和90.0%,差异具有统计学意义(P<0.05)。(2)Lgr5表达与肿瘤分化程度、淋巴结转移及TNM分期有关(P<0.05)。CD44表达与肿瘤分化程度、浸润深度、淋巴结转移及TNM分期有关(P<0.05)。(3)Lgr5及CD44存在正相关性(r=0.3,P<0.05)。(4)Lgr5高表达者(+++)和低表达者(+)^(++)5年总生存率分别为29.2%和51.2%(HR=11.637,95%CI:4.351~18.439;P=0.002);CD44高表达者(+++)和低表达者(+)^(++)5年总生存率分别为35.3%和41.3%(HR=10.142,95%CI:4.285~17.013;P=0.006)。结论 Lgr5及CD44的增强表达与卵巢癌侵袭性增强有密切关系,其表达可作为判断卵巢癌患者预后的指标。 展开更多
关键词 卵巢肿瘤 lgr5 CD44 肿瘤干细胞
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胃腺癌组织中Lgr5和Wnt1蛋白的表达 被引量:7
3
作者 张晓峰 张连峰 程鹏 《郑州大学学报(医学版)》 CAS 北大核心 2014年第5期689-692,共4页
目的:检测胃腺癌组织中Lgr5和Wnt1蛋白的表达。方法:采用免疫组化SP法检测76例胃腺癌组织及30例癌旁正常胃组织中Lgr5和Wnt1蛋白的表达。结果:Lgr5和Wnt1蛋白在胃腺癌组织中的阳性表达率高于癌旁正常胃组织(χ2=16.332和14.609,P均<0... 目的:检测胃腺癌组织中Lgr5和Wnt1蛋白的表达。方法:采用免疫组化SP法检测76例胃腺癌组织及30例癌旁正常胃组织中Lgr5和Wnt1蛋白的表达。结果:Lgr5和Wnt1蛋白在胃腺癌组织中的阳性表达率高于癌旁正常胃组织(χ2=16.332和14.609,P均<0.05)。Lgr5和Wnt1蛋白的表达与胃腺癌的大小、TNM分期、分化程度以及淋巴结转移情况有关(P均<0.05)。胃腺癌组织中Lgr5和Wnt1蛋白的表达呈正关联(rP=0.329,P=0.002)。结论:Lgr5和Wnt1蛋白在胃腺癌的发生、分化、浸润和转移中起重要作用,有望成为胃腺癌早期诊断的指标和治疗靶点。 展开更多
关键词 lgr5 WNT1 肿瘤干细胞 胃肿瘤 腺癌
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干细胞标志分子LGR5研究:肿瘤治疗新靶点 被引量:7
4
作者 高菲 魏衍财 杨辰 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2015年第6期962-968,共7页
背景:近期研究表明,肿瘤干细胞在肿瘤的发生发展中起关键性作用,因此对其标记分子的研究必将对肿瘤发生发展的了解及肿瘤的临床诊断、治疗都带来深远的影响。目的:综述干细胞标志分子LGR5在干细胞和肿瘤干细胞中的研究进展。方法:由第... 背景:近期研究表明,肿瘤干细胞在肿瘤的发生发展中起关键性作用,因此对其标记分子的研究必将对肿瘤发生发展的了解及肿瘤的临床诊断、治疗都带来深远的影响。目的:综述干细胞标志分子LGR5在干细胞和肿瘤干细胞中的研究进展。方法:由第一作者在PubM ed数据库及万方数据库中检索1998年1月至2014年12月有关LGR5与干细胞/肿瘤干细胞研究的相关文献。英文检索词为"LGR5,stem cell,cancer stem cells",中文关键词为"LGR5,干细胞,肿瘤干细胞"。计算机初检得到178篇文献,阅读标题和摘要进行初筛,排除与研究目的相关性差及内容陈旧、重复的文献123篇,纳入55篇符合标准的文献。结果与结论:LGR5是肠道、胃、毛囊等干细胞的表面标志分子,并与结直肠癌、胃癌、肺癌、卵巢癌、肝癌、基底细胞癌等多种肿瘤的发生发展预后密切相关,是肿瘤干细胞的候选标志分子,有望成为肿瘤治疗的新靶点。研究发现R-spondins(RSPOs)是LGR5的高亲和力配体,二者相结合参与Wnt信号通路,调节细胞增殖分化。 展开更多
关键词 受体 G-蛋白偶联 肿瘤干细胞 肿瘤标记 生物学 细胞 细胞标记物 lgr5 结直肠癌 胃癌 肺癌 卵巢癌 肝癌 基底细胞 食管病变 Wnt信号通路
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Lgr5、β-catenin在卵巢上皮性癌组织中的表达及对SKOV3细胞增殖迁移的影响 被引量:6
5
作者 张展 朱海 +1 位作者 宋华 王金铭 《郑州大学学报(医学版)》 CAS 北大核心 2017年第2期138-142,共5页
目的:探讨G蛋白偶联受体家族Lgr5和β-catenin在卵巢上皮性癌中的表达及对SKOV3细胞增殖和迁移能力的影响。方法:收集卵巢正常、良性肿瘤及上皮性癌组织标本各30例,采用免疫组化法检测Lgr5和β-catenin蛋白的表达情况。用Lgr5 shRNA、NC... 目的:探讨G蛋白偶联受体家族Lgr5和β-catenin在卵巢上皮性癌中的表达及对SKOV3细胞增殖和迁移能力的影响。方法:收集卵巢正常、良性肿瘤及上皮性癌组织标本各30例,采用免疫组化法检测Lgr5和β-catenin蛋白的表达情况。用Lgr5 shRNA、NC shRNA转染卵巢癌SKOV3细胞,同时以未转染细胞作空白对照,分别采用Western blot和实时荧光定量PCR法检测3组细胞中lgr5、β-catenin蛋白和mRNA的表达水平,分别采用CCK-8和划痕实验检测3组细胞的增殖和迁移能力。结果:卵巢上皮性癌组织中Lgr5、β-catenin阳性表达率分别为63.3%(19/30)、83.3%(25/30),二者表达水平均较良性肿瘤、正常卵巢组织升高(P<0.05),且两者表达呈正关联(rp=0.373,P=0.028)。与空白对照组、NC shRNA转染组比较,Lgr5 shRNA转染组SKOV3细胞中Lgr5、β-catenin蛋白和mRNA的表达均显著降低(P<0.05),细胞的增殖能力和迁移能力显著降低(P<0.05)。结论:Lgr5可能通过增强Wnt/β-catenin信号通路参与卵巢癌细胞增殖、迁移能力的调控。 展开更多
关键词 lgr5 WNT/Β-CATENIN信号通路 卵巢上皮性癌 细胞增殖 细胞迁移 SKOV3细胞
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干细胞基因Lgr5在食管鳞癌组织中的表达及其临床意义 被引量:6
6
作者 吕转 李砺锋 +2 位作者 范智蕊 马望 王留兴 《肿瘤防治研究》 CAS CSCD 北大核心 2016年第10期863-869,共7页
目的探讨干细胞基因Lgr5在食管鳞癌组织及其成球细胞中的表达意义。方法采用免疫组织化学法(IHC)检测280例食管鳞癌和150例癌旁组织中Lgr5蛋白的表达水平;低黏附培养法培养食管鳞癌细胞KYSE70形成成球细胞,Quantitative real-time PCR(q... 目的探讨干细胞基因Lgr5在食管鳞癌组织及其成球细胞中的表达意义。方法采用免疫组织化学法(IHC)检测280例食管鳞癌和150例癌旁组织中Lgr5蛋白的表达水平;低黏附培养法培养食管鳞癌细胞KYSE70形成成球细胞,Quantitative real-time PCR(q RT-PCR)、Western blot法检测干性相关基因SOX2、ALDH1A1、NANOG以及Lgr5在亲代细胞和成球细胞中的表达差异;Transwell实验检测成球细胞的迁移和侵袭能力、q RT-PCR法检测成球细胞中上皮间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)相关标志物Vimentin和N-cadherin的表达水平。结果 Lgr5在食管鳞癌组织的表达水平明显高于癌旁正常食管组织(P<0.05),且与淋巴结转移、浸润深度、肿块大小、分化程度、肿瘤分期密切相关(均P<0.05)。与亲代细胞相比,食管鳞癌成球细胞中干性相关基因SOX2、ALDH1A1、NANOG表达水平升高(均P<0.05),Lgr5在食管鳞癌成球细胞中的表达水平也明显升高(P<0.05),并且其迁移和侵袭能力增强(P<0.05),EMT相关标志物Vimentin和N-cadherin的m RNA表达水平升高(均P<0.05)。结论Lgr5可能为食管鳞癌复发、进展、侵袭转移的标志之一,Lgr5高表达的食管鳞癌细胞可能具有干细胞样特性,并且可能为食管鳞癌细胞的一个干性调控基因。 展开更多
关键词 lgr5 食管鳞癌 肿瘤干细胞 KYSE70 成球细胞
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LGR5在结直肠癌中的作用机制及靶向治疗研究进展 被引量:5
7
作者 彭立雄 常江 +4 位作者 张博威 胡学渝 谭忠鹏 柳增善 胡盼 《生命科学》 CSCD 北大核心 2021年第10期1231-1238,共8页
LGR5是7次跨膜G蛋白偶联受体(G protein-coupled receptor,GPCR)超家族成员,在结直肠癌中高表达。研究发现,LGR5是结直肠癌干细胞的标志物,其异常表达能够促进结直肠癌的进展和转移,被认为是重要的结直肠癌预后不良分子。LGR5主要通过W... LGR5是7次跨膜G蛋白偶联受体(G protein-coupled receptor,GPCR)超家族成员,在结直肠癌中高表达。研究发现,LGR5是结直肠癌干细胞的标志物,其异常表达能够促进结直肠癌的进展和转移,被认为是重要的结直肠癌预后不良分子。LGR5主要通过Wnt/β-catenin通路参与结直肠癌的发生发展,近年来针对该靶点的治疗研究不断增加。虽然靶向LGR5的ADCs类药物在治疗结直肠癌后存在复发的情况,但是联合用药使治疗结直肠癌的效果显著提升。该文综述了LGR5在结直肠癌中的作用机制及靶向治疗进展,表明靶向LGR5联合用药对于结直肠癌患者个性化治疗具有潜在的应用价值。 展开更多
关键词 lgr5 结直肠癌 肿瘤干细胞 WNT/Β-CATENIN 靶向治疗
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肿瘤干细胞标志物LGR5及ALDH1在卵巢癌组织中的表达及临床意义 被引量:5
8
作者 沈娟娟 潘静 王登兰 《标记免疫分析与临床》 CAS 2017年第7期743-748,共6页
目的探讨肿瘤干细胞标志物含亮氨酸重复序列G-蛋白偶联受体5(1eucine-rich repeat-containing G protein coupled receptor 5,Lgr5)及乙醛脱氢酶1(aldehyde dehydro-genase 1,ALDH1)在卵巢癌中的表达与临床意义。方法选取2006年5月至201... 目的探讨肿瘤干细胞标志物含亮氨酸重复序列G-蛋白偶联受体5(1eucine-rich repeat-containing G protein coupled receptor 5,Lgr5)及乙醛脱氢酶1(aldehyde dehydro-genase 1,ALDH1)在卵巢癌中的表达与临床意义。方法选取2006年5月至2010年1月住院并接受手术治疗的卵巢癌患者140例,选取同期本院因卵巢良性病变行肿物剥除或附件切除的40例患者作为对照,应用免疫组化(S-P)方法检测140例卵巢癌组织(卵巢癌组)、140例卵巢癌癌旁组织(癌旁组)、正常卵巢组织40例(正常组)中的Lgr5及ALDH1蛋白表达,分析其与卵巢癌患者临床病理指标的关系。结果 (1)Lgr5在正常卵巢组织、癌旁组织和卵巢癌中的阳性率(5.0%vs 18.3%vs 95.7%)差异具有统计学意义(P=0.001);ALDH1在正常卵巢组织、癌旁组织和卵巢癌中的阳性率(7.5%vs 15.7%vs 90.0%)差异具有统计学意义(P<0.05)。(2)Lgr5表达与肿瘤分化程度、淋巴结转移及TNM分期有关(P<0.05)。ALDH1表达与肿瘤分化程度、浸润深度、淋巴结转移及TNM分期有关(P<0.05)。(3)Lgr5及ALDH1存在正相关性(r=0.3,P<0.05)。(4)Lgr5高表达者(+++)和低表达者(+)^(++)5年总生存率分别为51.2%和29.2%(HR=11.637,95%CI:4.351~38.213;P=0.002);ALDH1高表达者(+++)和低表达者(+)^(++)5年总生存率分别为41.3%和35.3%(HR=10.143,95%CI:4.285~33.275;P=0.006)。。多因素Cox回归分析显示,Lgr5蛋白(+++)表达(P=0.002)、ALDH1蛋白(+++)表达(P=0.006)、分化程度(P=0.036)、浸润深度(P=0.001)和远处转移(P=0.002)是影响胃癌患者预后的独立因素。结论 Lgr5及ALDH1的增强表达与卵巢癌侵袭性增强有密切关系,其表达可作为判断卵巢癌患者预后的指标。 展开更多
关键词 卵巢肿瘤 lgr5 ALDH1 肿瘤干细胞
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Lgr5蛋白和E-钙黏蛋白在胃癌组织中表达的研究 被引量:4
9
作者 冯宁 林峰 +4 位作者 张旭 薛帆 崔佑刚 马洋 刘文志 《中国普外基础与临床杂志》 CAS 2020年第3期309-314,共6页
目的检测胃癌组织中Lgr5及E-钙黏蛋白(E-cad)的蛋白表达情况并分析其与胃癌患者临床病理特征及预后的关系。方法采用免疫组织化学SABC方法检测69例胃癌组织及30例癌旁正常胃黏膜组织中Lgr5及E-cad的蛋白表达情况,同时分析其与胃癌患者... 目的检测胃癌组织中Lgr5及E-钙黏蛋白(E-cad)的蛋白表达情况并分析其与胃癌患者临床病理特征及预后的关系。方法采用免疫组织化学SABC方法检测69例胃癌组织及30例癌旁正常胃黏膜组织中Lgr5及E-cad的蛋白表达情况,同时分析其与胃癌患者临床病理特征和生存的关系。结果Lgr5和E-cad蛋白分别在60例(87.0%)和30例(43.5%)胃癌患者的胃癌组织中呈阳性表达,分别有5例(16.7%)和30例(100%)在癌旁正常胃黏膜组织中呈阳性表达,二者在不同组织中的蛋白表达阳性率比较差异均有统计学意义(Lgr5蛋白:χ^2=45.814,P<0.001;E-cad蛋白:χ^2=11.249,P=0.001)。Lgr5和E-cad蛋白在胃癌组织中的阳性表达均与分化程度和浸润深度有关(P<0.05),Lgr5蛋白在胃癌组织中的阳性表达还与淋巴结转移和幽门螺杆菌(HP)感染有关(P<0.05)而E-cad蛋白阳性表达却与此无关(P>0.05)。Lgr5蛋白表达阳性和阴性患者的5年总生存情况比较差异无统计学意义(χ^2=1.819,P=0.117),而E-cad蛋白表达阳性胃癌患者的5年总生存情况明显优于E-cad蛋白表达阴性胃癌患者(χ^2=5.814,P=0.016)。Lgr5蛋白表达与E-cad蛋白表达呈明显的负相关(rs=-0.355,P=0.003)。结论Lgr5蛋白可能参与了肿瘤组织局部浸润、淋巴结转移过程,与肿瘤恶生程度有关,未发现其阳性表达与预后有关;E-cad的表达可能参与了肿瘤的肿瘤局部侵袭和进展且与患者预后有关。 展开更多
关键词 胃癌 lgr5蛋白 E-钙黏蛋白 肿瘤干细胞 免疫组织化学 生存分析
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Lgr5在Barrett食管和早期食管鳞癌中的表达 被引量:3
10
作者 丁黎葭 陈世耀 +2 位作者 纪元 马丽黎 练晶晶 《胃肠病学》 2011年第6期328-331,共4页
背景:Lgr5为Wnt信号通路的靶基因和肿瘤干细胞标记物,有作为Barrett食管相关异型增生和食管腺癌生物学标记的潜能。目的:探讨Lgr5在Barrett食管和早期食管鳞癌中的表达及其临床意义。方法:选取Barrett食管、早期食管鳞癌和轻度食管炎组... 背景:Lgr5为Wnt信号通路的靶基因和肿瘤干细胞标记物,有作为Barrett食管相关异型增生和食管腺癌生物学标记的潜能。目的:探讨Lgr5在Barrett食管和早期食管鳞癌中的表达及其临床意义。方法:选取Barrett食管、早期食管鳞癌和轻度食管炎组织各20例,以免疫组化方法检测Lgr5的表达和分布,根据阳性细胞比例和染色强度行半定量评分。结果:Lgr5表达于腺体细胞的细胞质和鳞状细胞的细胞核。Barrett食管组织腺上皮Lgr5表达评分显著高于轻度食管炎组织(3.65±1.95对2.55±1.70,P=0.049)。早期食管鳞癌癌灶组织Lgr5表达评分显著高于相应癌旁组织(5.39±0.61对3.06±1.06,P=0.000);原位癌、黏膜内癌与黏膜下癌间Lgr5表达评分差异无统计学意义(5.00±0.63、5.56±0.53和6.00±0.58,P=0.174)。结论:Lgr5可能作为辅助诊断Barrett食管和早期食管鳞癌的生物学标记。 展开更多
关键词 lgr5 BARRETT食管 鳞状细胞 免疫组织化学
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miR-582-5p通过调控Wnt通路影响胃癌AGS细胞的增殖和耐药 被引量:2
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作者 刘栋 王建华 +11 位作者 段降龙 孙学军 刘斌 武敏 刘思达 毛智军 张涛 薛飞 普彦淞 李晓帆 高增战 龙延滨 《山西医科大学学报》 CAS 2018年第5期470-476,共7页
目的观察micro RNA-582-5p(miR-582-5p)对人胃癌细胞AGS增殖和耐药功能的影响,探讨其分子机制。方法miR-582-5p mimics通过脂质体转染人胃癌AGS细胞(实验组),同时设置阴性对照组(转染Negative Control)和空白对照组(untreated cell)。... 目的观察micro RNA-582-5p(miR-582-5p)对人胃癌细胞AGS增殖和耐药功能的影响,探讨其分子机制。方法miR-582-5p mimics通过脂质体转染人胃癌AGS细胞(实验组),同时设置阴性对照组(转染Negative Control)和空白对照组(untreated cell)。实时荧光定量PCR、MTT法、流式细胞技术分别检测转染3组细胞后miR-582-5p的表达变化、增殖能力、药物敏感性、细胞周期;Target Scan Human网站预测LGR5基因可能是miR-582-5p的靶基因之一,并用双荧光素酶报告载体验证其靶基因;Western blot检测3组细胞中cyclin D1、c-myc、survivin和LGR5蛋白的表达。结果相比阴性对照组和空白对照组,实验组中AGS细胞增殖能力下降,在第72,96小时生长速度明显抑制,差异有统计学意义(P<0.05)。相比阴性对照组和空白对照组,实验组细胞周期被抑制,G_0/G_1期细胞比例明显增多(P<0.05),S期细胞比例减少(P<0.05),细胞对奥沙利铂的敏感性增强,耐药性降低(P<0.05)。相比阴性对照组和空白对照组,实验组含有LGR5基因的3'UTR荧光素酶活性明显得到抑制,而且Wnt通路下游靶基因cyclin D1、c-myc、survivin和LGR5蛋白表达下调,差异有统计学意义(P<0.05);阴性对照组和空白对照组比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论 miR-582-5p在胃癌细胞中可作为抑癌因子调控胃癌细胞增殖能力、化疗药物奥沙利铂耐药性、细胞周期变化,并通过下调LGR5调控Wnt信号通路,推测miR-582-5p和胃癌的发生和发展有关。 展开更多
关键词 胃癌 miR-582-5p lgr5 细胞增殖 细胞周期 奥沙利铂 耐药性
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毛囊上皮细胞对Hedgehog信号的响应与短期毛发再生无关
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作者 应沁心 陶一昕 +2 位作者 杨青春 凌学剑 马钢 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2019年第25期4044-4049,共6页
背景:Hedgehog信号通路对于多种组织的发育、动态平衡以及修复起了重要的作用,前人的研究强调了Hedgehog信号对于毛发模式形成是至关重要的。目的:探究Hedgehog信号在成年后的毛囊上皮动态平衡中发挥的作用。方法:Lgr5-EGFP-Ires-Cre E... 背景:Hedgehog信号通路对于多种组织的发育、动态平衡以及修复起了重要的作用,前人的研究强调了Hedgehog信号对于毛发模式形成是至关重要的。目的:探究Hedgehog信号在成年后的毛囊上皮动态平衡中发挥的作用。方法:Lgr5-EGFP-Ires-Cre ERT2小鼠、Smofl/fl小鼠与K14-CreER小鼠均来自TheJacksonLaboratory,实验经上海交通大学实验动物伦理与使用委员会批准,批准号为1602028。①首先利用Lgr5-EGFP-Ires-Cre ERT2小鼠特异地标记Lgr5+细胞亚群,确认了在Lgr5+毛囊上皮干细胞/前体细胞中多个Hedgehog信号通路成员高度富集表达。而后用Lgr5-EGFP-Ires-CreERT2小鼠与Smofl/fl小鼠交配得到了Lgr5-EGFP-Ires-CreERT2;Smofl/fl小鼠;在刚进入第二轮长静息期的P49天进行背部剃毛,接着用他莫昔芬诱导Hedgehog信号通路的介导蛋白Smo敲除,观察在Lgr5+细胞中敲除Smo对毛发再生速度的影响;之后实验在P50-54天他莫昔芬诱导Smo敲除后1周进行脱毛,进一步评估bulge上皮干细胞在突变小鼠的功能是否有变化;②用K14-Cre ER小鼠与Smofl/fl小鼠交配以得到K14-CreER;Smofl/fl小鼠,同上实验方法,在毛囊整个上皮细胞这一更大范围内用他莫昔芬诱导敲除Smo,观察是否有毛发再生障碍及毛囊Bulge干细胞功能障碍。结果与结论:Lgr5-EGFP-Ires-Cre ERT2;Smofl/fl小鼠模型及K14-CreER;Smofl/fl小鼠模型中均没有观测到明显的毛发再生障碍,毛囊Bulge干细胞也没有受到影响。说明Lgr5+细胞群和整个毛囊上皮对于Hedgehog信号通路的响应与毛囊静息期向生长期转换以及短期的毛发再生无关,且与bulge上皮干细胞的维持也无关。这一发现强调了组织发育和动态平衡之间的不同分子机制,为人们更加准确地理解毛囊再生和组织生长的机制提供了重要依据。 展开更多
关键词 Hedgehog信号 lgr5+细胞 bulge上皮干细胞 静息期-生长期转换 毛发再生 lgr5-EGFP-Ires-Cre ERT2小鼠 Smofl/fl小鼠 K14-CreER小鼠 国家自然科学基金
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人毛囊干细胞分离培养与鉴定方法的研究
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作者 姜金豆 胡葵葵 +4 位作者 陈容容 夏学颖 孙赛 李丽燕 张碧芳 《中国美容整形外科杂志》 CAS 2015年第11期644-647,共4页
目的实现毛囊干细胞的高效快速分离。方法将人头部皮肤标本显微分离毛囊隆突区组织由中性蛋白酶消化后,将其直接接种于Matrigel包被的培养板中培养。细胞迁出后,待细胞融合达到60%~70%时,传代培养。取传代培养4周的人毛囊干细胞... 目的实现毛囊干细胞的高效快速分离。方法将人头部皮肤标本显微分离毛囊隆突区组织由中性蛋白酶消化后,将其直接接种于Matrigel包被的培养板中培养。细胞迁出后,待细胞融合达到60%~70%时,传代培养。取传代培养4周的人毛囊干细胞进行流式细胞学分析及克隆形成能力测定,鉴定毛囊干细胞的表型及增殖潜能。结果分离培养所得毛囊干细胞呈铺路石样生长,细胞胞体较大,细胞核大而明显,具有较高的核质比,干细胞细胞学特征明显。流式细胞仪鉴定毛囊干细胞表面标记物Lgr5阳性率为84.02%,Lgr6阳性率为66.32%。细胞增殖能力及克隆形成能力测定结果显示,毛囊干细胞具有较强的增殖潜能,可由单细胞生成明显的克隆集落。结论本研究通过显微解剖结合消化法,实现了人头皮毛囊干细胞的高效快速分离培养。采用显微分离培养获得毛囊隆突区细胞,细胞表型分析证实其Lgr5及Lgr6阳性干细胞比率、细胞形态、细胞周期及克隆形成能力均符合干细胞特性。 展开更多
关键词 人毛囊干细胞 lgr5 lgr6 细胞增殖
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Lgr5和Ki-67蛋白在胃癌组织中的表达研究 被引量:1
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作者 冯宁 朱瑞萍 +6 位作者 程瑶 林峰 薛帆 崔佑刚 张旭 马洋 刘文志 《中国普外基础与临床杂志》 CAS 2019年第11期1293-1297,共5页
目的检测Lgr5和Ki-67蛋白在胃癌组织及其正常胃黏膜组织中的表达情况并分析其在胃癌发生及发展中的作用。方法采用SABC免疫组织化学方法测定69例胃癌患者的胃癌组织及其相应的正常胃黏膜组织中Lgr5和Ki-67蛋白表达情况并分析其与胃癌患... 目的检测Lgr5和Ki-67蛋白在胃癌组织及其正常胃黏膜组织中的表达情况并分析其在胃癌发生及发展中的作用。方法采用SABC免疫组织化学方法测定69例胃癌患者的胃癌组织及其相应的正常胃黏膜组织中Lgr5和Ki-67蛋白表达情况并分析其与胃癌患者临床病理特征的关系。结果Lgr5和Ki-67蛋白在胃癌组织中的表达阳性率均较其在正常胃黏膜组织中高[Lgr5蛋白:87.0%(60/69)比16.7%(5/30),χ2=45.81,P<0.001;Ki-67蛋白:79.7%(55/69)比36.7%(11/30),χ2=17.43,P<0.001]。Lgr5及Ki-67蛋白在低-未分化、N1~N3期及幽门螺杆菌(HP)感染阳性胃癌组织中的蛋白表达阳性率明显高于高-中分化、N0期及HP感染阴性患者(P<0.050),Lgr5蛋白表达还与胃癌浸润深度有关(P<0.050),而Ki-67蛋白表达与此无关(P>0.050)。Lgr5及Ki-67蛋白表达与胃癌患者的性别和远处转移均无关(P>0.050)。Lgr5蛋白表达与Ki-67蛋白表达呈明显的正相关关系(rs=0.340,P=0.004)。结论Lgr5蛋白可能参与了肿瘤组织的局部浸润和淋巴结转移过程并与肿瘤恶性程度有关,Ki-67蛋白也可能参与了肿瘤淋巴结转移过程且也与肿瘤恶性程度有关,且此二者在肿瘤发生和发展中可能具有协同作用,同时HP感染可能与Lgr5和Ki-67蛋白协同参与了肿瘤发生、发展过程。 展开更多
关键词 胃癌 lgr5蛋白 KI-67蛋白 肿瘤干细胞 幽门螺杆菌
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姜黄素、氯丙胺对人结肠癌肿瘤样干细胞CD44、Lgr5表达的作用 被引量:1
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作者 谢光洪 金海 +1 位作者 朱蓉 赵逵 《世界华人消化杂志》 CAS 2016年第9期1398-1404,共7页
目的:探讨姜黄素和胃泌素受体不全拮抗剂氯丙胺对体外培养的人结肠癌肿瘤样干细胞生长增殖的抑制作用及作用机制.方法:取对数生长期的结肠癌SW480细胞用10%的完全培养基继续培养48 h后,换用无血清培养基进行同步化培养24 h,然后进行分组... 目的:探讨姜黄素和胃泌素受体不全拮抗剂氯丙胺对体外培养的人结肠癌肿瘤样干细胞生长增殖的抑制作用及作用机制.方法:取对数生长期的结肠癌SW480细胞用10%的完全培养基继续培养48 h后,换用无血清培养基进行同步化培养24 h,然后进行分组:姜黄素组、氯丙胺组、联合用药组,每一种药物组又分为对照组、低浓度组、中浓度组、高浓度组,联合用药组的浓度梯度依次为两药浓度的对应叠加,继续培养48 h,加入FITC标记的小鼠抗人CD44单克隆抗体20μL,同时在对照组细胞中加入同型对照抗体IgG2b 20μL,4℃避光放置30 min,然后使用目筛网滤过,上流式细胞仪进行检测CD44的表达变化.采用Western blot检测Lgr5在3种不同药物浓度作用下在细胞中的蛋白表达差异.结果:姜黄素和氯丙胺均呈时间和剂量依赖性抑制SW480细胞的生长增殖,且二者具有协同抑制作用;单独应用姜黄素和氯丙胺干预时,SW480细胞增殖逐渐减慢,数量减少,细胞逐渐变形,并出现崩解及死亡,细胞中CD44蛋白质的表达较对照组有所降低,Lgr5蛋白质的表达均低于对照组,单独用药组与对照组比较具有统计学意义(P<0.05);二者联合应用时,CD44、Lgr5蛋白质的表达均显著降低,而且与对照组和各单一用药组比较差异具有统计学意义(P<0.05).结论:(1)姜黄素和氯丙胺呈剂量依赖性地抑制体外培养的人结肠癌肿瘤样干细胞的生长增殖,且二者具有协同抑制作用;(2)姜黄素和氯丙胺可能是通过下调CD44和Lgr5分子的表达来抑制肿瘤干细胞增殖. 展开更多
关键词 姜黄素 氯丙胺 CD44 lgr5 胃泌素 肿瘤干细胞
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阿司匹林诱导人结肠癌细胞Caco-2凋亡与Lgr5的关系 被引量:1
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作者 陈小燕 吴应强 +1 位作者 朱蓉 赵逵 《医药导报》 CAS 北大核心 2021年第8期1010-1016,共7页
目的研究阿司匹林对人结肠癌细胞株Caco-2的生长作用以及对Lgr5表达的影响,探讨其预防结肠癌发生的可能机制。方法运用噻唑蓝(MTT)比色法检测阿司匹林对Caco-2细胞存活率的影响;流式细胞术分析不同药物浓度和不同时间对Caco-2细胞凋亡... 目的研究阿司匹林对人结肠癌细胞株Caco-2的生长作用以及对Lgr5表达的影响,探讨其预防结肠癌发生的可能机制。方法运用噻唑蓝(MTT)比色法检测阿司匹林对Caco-2细胞存活率的影响;流式细胞术分析不同药物浓度和不同时间对Caco-2细胞凋亡的影响;采用实时-反转录聚合酶链反应(RT-PCR)法测定各组阿司匹林干预不同时间后Caco-2细胞中Lgr5 mRNA表达;免疫组化Envison法检测阿司匹林对Lgr5蛋白在Caco-2细胞内定位变化。结果阿司匹林对Caco-2细胞增殖有抑制作用,且有明显的浓度和时间依赖性;对Caco-2细胞促凋亡作用(包括早期凋亡和总凋亡)呈明显的浓度和时间依赖性,不同浓度组和不同时间组与对照组比较均差异有统计学意义(均P<0.05);阿司匹林呈时间依赖性地抑制Caco-2细胞中Lgr5 mRNA的表达,各实验组与对照组比较均差异有统计学意义(均P<0.05);Lgr5蛋白在Caco-2细胞中大量表达,主要位于细胞质,少数定位于细胞膜,而细胞核不着色;5.0 mmol·L^(-1)组中Lgr5蛋白亚细胞定位与对照组相同,10.0 mmol·L^(-1)组和15.0 mmol·L^(-1)组可见Lgr5蛋白亚细胞定位发生了改变,除了细胞膜、细胞质有表达外,细胞核也有表达。结论阿司匹林通过抑制Lgr5基因的表达,并影响Lgr5蛋白亚细胞定位,呈时间和浓度依赖性地抑制体外培养的结肠癌Caco-2细胞的存活以及促进细胞凋亡,可能是阿司匹林防治结直肠癌的重要机制之一。 展开更多
关键词 阿司匹林 结肠癌 CACO-2 lgr5 肿瘤干细胞
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转染Lgr5基因对结肠癌细胞株体外生物学特性影响的研究 被引量:1
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作者 高菲 傅丰庆 +3 位作者 徐俊驰 高兵 胡玉敏 张学光 《国际免疫学杂志》 CAS 2013年第3期216-220,共5页
目的构建pIRES2-EGFP-Lgr5重组表达载体,获得SW480/Lgr5瞬时基因转染细胞株,并探讨转染Lgr5基因对结肠癌细胞株生物学特性的影响。方法运用逆转录聚合酶链式反应(RT—PCR)技术从结肠癌组织中获得Lgr5全长基因,经双酶切(XhoI和Ba... 目的构建pIRES2-EGFP-Lgr5重组表达载体,获得SW480/Lgr5瞬时基因转染细胞株,并探讨转染Lgr5基因对结肠癌细胞株生物学特性的影响。方法运用逆转录聚合酶链式反应(RT—PCR)技术从结肠癌组织中获得Lgr5全长基因,经双酶切(XhoI和BamHI)连接入真核表达载体pIRES2-EGFP中,利用脂质体法转染SW480细胞,经流式细胞术、Westernblot、免疫细胞化学法检测Lgr5分子的表达;CCK-8法和悬滴实验分析Lgr5对结肠癌细胞增殖率和成球能力的影响,划痕实验分析Lgr5对结肠癌细胞迁移能力的影响。结果成功构建真核表达载体pIRES2。EGFP/hLgr5,并获得SW480/Lgr5瞬时基因转染细胞株;转染Lgr5基因的结肠癌细胞体外增殖速度加快,形成的细胞球大而紧密但迁移能力下降。结论Lgr5基因转染促进结肠癌细胞株体外的生长,为进一步研究人Lgr5分子的生物学特性及其在结肠癌中的作用机制奠定了基础。 展开更多
关键词 lgr5基因 真核表达载体 转染 SW480细胞 生物学特性
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Crypt region localization of intestinal stem cells in adults
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作者 Hugh James Freeman 《World Journal of Gastroenterology》 SCIE CAS CSCD 2008年第47期7160-7162,共3页
The intestinal epithelial lining plays a central role in the digestion and absorption of nutrients,but exists in a harsh luminal environment that necessitates continual renewal.This renewal process involves epithelial... The intestinal epithelial lining plays a central role in the digestion and absorption of nutrients,but exists in a harsh luminal environment that necessitates continual renewal.This renewal process involves epithelial cell proliferation in the crypt base and later cell migration from the crypt base to the luminal surface.This process is dependent on multi-potent progenitor cells,or stem cells,located in each crypt.There are about 4 to 6 stem cells per crypt,and these stem cells are believed to generate distinct end-differentiated epithelial cell types,including absorptive cells,goblet cells,enteroendocrine cells and Paneth cells,while also maintaining their own progenitor cell state.Earlier studies suggested that intestinal stem cells were located either in the crypt base interspersed between the Paneth cells [i.e.crypt base columnar(CBC) cell model] or at an average position of 4 cells from the crypt base [i.e.label-retaining cells(LRC +4) model].Recent studies have employed biomarkers in the in vivo mammalian state to more precisely evaluate the location of these progenitor cells in the intestinal crypt.Most notable of these novel markers are Lgr5,a gene that encodes a G-protein-coupled receptor with expression restricted to CBC cells,and Bmi 1,which encodes a chromatin remodeling protein expressed by LRC.These studies raise the possibility that there may be separate stem cell lines or different states of stem cell activation involved in the renewal of normal mammalian intestinal tract. 展开更多
关键词 Crypt base columnar cells Intestinal epithelial cell renewal lgr5 gene Polycomb bmil protein Progenitor cells Stem cells +4 stem cellmodel
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shRNA干扰LGR5对HeLa细胞增殖及耐药性的影响
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作者 陈庆 赵金燕 +1 位作者 卢晓宁 郑鹏生 《西安交通大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2017年第2期206-209,共4页
目的探讨富含亮氨酸重复序列G-蛋白偶联受体5(LGR5)基因在HeLa细胞增殖及耐药性中的作用及可能机制。方法采用shRNA技术干扰LGR5表达,构建LGR5干扰(shLGR5)的HeLa细胞,并设对照组(shCon)。采用细胞计数、平板克隆以及MTT实验观察shLGR5... 目的探讨富含亮氨酸重复序列G-蛋白偶联受体5(LGR5)基因在HeLa细胞增殖及耐药性中的作用及可能机制。方法采用shRNA技术干扰LGR5表达,构建LGR5干扰(shLGR5)的HeLa细胞,并设对照组(shCon)。采用细胞计数、平板克隆以及MTT实验观察shLGR5对HeLa细胞增殖及耐药性的影响;采用Western blot检测LGR5、β-catenin在HeLa细胞中的表达。结果成功构建了LGR5干扰的HeLa细胞系;与shCon组相比,shLGR5组细胞生长速度及克隆形成率明显降低,差异具有统计学意义(P<0.01);shLGR5组与shCon组HeLa细胞对顺铂的耐药性差异亦具有统计学意义(P<0.01);且干扰LGR5抑制HeLa细胞中β-catenin蛋白的表达。结论 LGR5基因在HeLa细胞增殖及耐药性中有重要作用,且与Wnt/β-catenin通路有关。 展开更多
关键词 lgr5 细胞增殖 β-catenin 耐药性 HELA细胞 Western BLOT SHRNA
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Lgr5与胃癌发生关系的研究进展 被引量:1
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作者 蒋振华 李修岭 +3 位作者 丁松泽 杨帆 黄宇博 崔艳霞 《医药论坛杂志》 2016年第12期F0003-F0004,共2页
Lgr5是富亮氨酸重复序列G蛋白偶联受体5的简称,属于G蛋白偶联7次跨膜蛋白家族。它被认为是一种干细胞标志物,其阳性细胞可长期自我更新并具有多向分化潜能。
关键词 lgr5 细胞 胃癌 预后价值
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