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题名多枝赖草高分子量核DNA的有效制备
被引量：3
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作者
周玉雷
徐粤宇
赵茂林
曹致中
王志平
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机构
甘肃农业大学草业学院
首都师范大学生命科学学院
北京市农林科学院农业生物技术研究中心
北京市土肥工作站
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出处
《草业科学》
CAS
CSCD
2007年第10期52-56,共5页
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基金
国家自然科学基金资助项目(30370905和30571135)
北京市自然科学基金资助项目(5032009)
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文摘
以多枝赖草Leymus multicaulis黄化苗幼嫩叶片为材料,在液氮中研磨成粉末,加入冰冷的细胞核抽提缓冲液,经一系列钢制细胞筛过滤,离心分离细胞核,相差显微镜镜检后,用低熔点琼脂糖包埋,蛋白酶K原位裂解,经脉冲场电泳分离,用1%低熔点琼脂糖回收获得了较纯净的分子量大于2 Mb的核DNA,Southern杂交显示没有叶绿体和线粒体DNA的污染。利用该方法制备的高分子量核DNA,可用于后续可转化人工染色体(TAC)文库的构建和基因组分析。
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关键词
多枝赖草
高分子量核DNA
脉冲场电泳
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Keywords
leymus muiticaulis
high molecular weight nuclear DNA
pulsed-field gel electrophoresis
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分类号
S543.9
[农业科学—作物学]
Q781
[生物学—分子生物学]
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