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Molecular phylogeny of Trametes and related genera,and description of a new genus Leiotrametes 被引量:3
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作者 Stéphane Welti Pierre-Arthur Moreau +5 位作者 Anne Favel Régis Courtecuisse Mireille Haon David Navarro Sabine Taussac Laurence Lesage-Meessen 《Fungal Diversity》 SCIE 2012年第4期47-64,共18页
A phylogenetic analysis of Trametes and related taxa is proposed,based on a wide sampling of temperate and tropical species.Concatenate sequences of ribosomal DNA(ITS1-5.8S-ITS2)and RPB2 gene from mycelia cultures wer... A phylogenetic analysis of Trametes and related taxa is proposed,based on a wide sampling of temperate and tropical species.Concatenate sequences of ribosomal DNA(ITS1-5.8S-ITS2)and RPB2 gene from mycelia cultures were analyzed by Maximum Likelihood and Bayesian methods,whilst morphological features were documented from the corresponding herbarium vouchers.Congruent results were obtained from analyses of ribosomal LSU sequences downloaded from Genbank.The Bayesian analysis of ITS+RPB2 sequences gave the best resolution for the phylogenetic reconstructions and revealed the existence of three main lineages in the Trametes-clade:1)a monospecific lineage represented by Artolenzites elegans 2)a lineage including the genus Pycnoporus in its traditional sense and several species usually classified in the genus Trametes(T.cingulata,T.lactinea,T.ljubarskyi,T.menziesii)&3)a lineage corresponding to the core genus Trametes,including type species of Trametes,Coriolopsis and Lenzites.The presence of a pseudostipe,aspect and structure of the abhymenial surface,colour change with 5%aqueous solutions of potassium hydroxide and topography of pigments on skeletal hyphae gave relevant morphological support to these clades.When the structure of the hymenial surface,presence of a black line below the tomentum and color of context(except for genus Pycnoporus)usually used in traditional polypore-classifications did not reveal any phylogenetic significance.A partial systematic arrangement of the Trametes clade is proposed,with the introduction of a new genus:Leiotrametes Welti&Courtec.gen.nov..Two new combinations:Leiotrametes lactinea(Berk.)Welti&Courtec.comb.nov.and L.menziesii(Berk.)Welti&Courtec.comb.nov.are proposed. 展开更多
关键词 BASIDIOMYCOTA POLYPORALES Artolenzites Coriolopsis lenzites Pycnoporus MORPHOLOGY BIOGEOGRAPHY
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Anti-hyperglycemic effects of aqueous Lenzites betulina extracts from the Philippines on the blood glucose levels of the ICR mice(Mus musculus)
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作者 Faizal Rajeeb Mangudadatu Hussin Rodel Jonathan Santos Vitor Ⅱ +2 位作者 Julie Ann Oraa Joaquin Melody Mendoza Clerigo Anamy Ma.Caterial Paano 《Asian Pacific Journal of Tropical Biomedicine》 SCIE CAS 2016年第2期155-158,共4页
Objective: To examine the anti-hyperglycemic effects of aqueous Lenzites betulina(L. betulina) extracts on normoglycemic glucose-loaded mice.Methods: Different doses of aqueous extract from L. betulina were administer... Objective: To examine the anti-hyperglycemic effects of aqueous Lenzites betulina(L. betulina) extracts on normoglycemic glucose-loaded mice.Methods: Different doses of aqueous extract from L. betulina were administered to 45 ICR mice(Mus musculus) to determine whether there was an effect of L. betulina extracts on the blood glucose level of the ICR mice. Aqueous extracts of L. betulina were orally gavaged to mice using oral glucose tolerance test. A total of five groups were used to determine the effect of the fungi on blood glucose of the mice. Group A(positive control)was given 16.7 mg/kg glimepiride; Group B(negative control) was given distilled water;Group C(low dosage) was given 200 mg/kg aqueous extract; Group D(mid dosage) was given 400 mg/kg aqueous extract and Group E(high dosage) was given 800 mg/kg aqueous extract. Baseline blood glucose value was firstly acquired before induction of hyperglycemia through D-glucose, after which another check on blood glucose was made after 0.5 h. Immediately, after the acquisition of hyperglycemic blood glucose level, the individual administration of treatments were done. After that, three blood collections were done spanning 3 h with 1 h interval.Results: The low dose(200 mg/kg) and the mid dose(400 mg/kg) of L. betulina extracts were significantly different(P < 0.05) from their respective baseline values throughout the whole experiment with the latter surpassing its baseline value during the 3rd hour. On the other hand, the high dose(800 mg/kg) during the 1st hour after administration was not significantly different(P > 0.05) from its corresponding baseline value, acting faster than the positive control(glimepiride), which only became significantly different(P < 0.05) at the 2nd hour.Conclusions: Aqueous L. betulina extract is able to produce hypoglycemic effects on the mice with all doses, which are able to normalize blood glucose levels at varying times. 展开更多
关键词 Anti-hyperglycemic GLUCOSE lenzites betulina ICR mice Oral GLUCOSE tolerance test
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Expression and analysis of zinc fi nger family gene in Lenzites gibbosa
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作者 Jun Zhang Yujie Chi +2 位作者 Shuxuan Li Jian Zhang Jie Chen 《Journal of Forestry Research》 SCIE CAS CSCD 2020年第5期1889-1898,共10页
Zinc finger transcription factors play significant roles in the growth and development of plant and animal,but their function remains obscure in fungi.Lenzites gibbosa mycelia were extracted and sequenced by transcrip... Zinc finger transcription factors play significant roles in the growth and development of plant and animal,but their function remains obscure in fungi.Lenzites gibbosa mycelia were extracted and sequenced by transcriptome analysis after growing on sawdust at different times to support mycelial growth of L.gibbosa in a nutrient matrix.Data bases used for analysis were the Kyoto encyclopedia of genes and genomes(KEGG)annotation,the cluster of orthologous groups of proteins(COG)and gene ontology(GO)annotation.Zinc finger class genes related to the growth and development of L.gibbosa were screened.GO annotation and enrichment analysis of diff erentially expressed genes were carried out.A total of 114.55 Gb Clean Data were obtained from the L.gibbosa transcriptome.The average Clean Data in each sample was 6.16 Gb.The relative efficiency of reads between each sample and the reference genome was 88.5%to 91.4%.The COG analysis showed that most zinc finger protein genes were related to replication,recombination and repair function.GO enrichment analysis showed that the expressed genes involved in cellular process,cell part and binding.We identifi ed seventy-two expressed genes including seven up-regulated genes and sixty-five down-regulated genes by applying DESeq2 data analysis software.By comparing the significantly expressed genes with KEGG database,66 annotated sequences were obtained,and 35 primary metabolic pathways were annotated.Pathway enrichment analysis showed that differentially expressed genes were signifi cantly enriched in protein processing in endoplasmic reticulum and ubiquitin-mediated proteolysis pathways.Gene_11750 and gene_5266 are highly correlated with the growth and development of L.gibbosa and are closely related to protein processing in endoplasmic reticulum and ubiquitin-mediated proteolysis pathway.According to gene functional analysis,seven important differentially expressed genes related to the growth and development of L.gibbosa were identified. 展开更多
关键词 lenzites gibbosa Differently expressed genes The transcriptome Zinc finger
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桦褶孔菌多糖的分离纯化及清除自由基活性 被引量:7
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作者 申翔宇 马涛 +2 位作者 马希 黄雅婷 刘春兰 《菌物学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第9期1271-1277,共7页
利用水提醇沉法对桦褶孔菌Lenzites betulina粗多糖HZKJc进行提取,随后经Sevage法和酶法联合脱蛋白,再经DEAE‐Sephadex A‐25,G‐100柱层析纯化后得到多糖纯品HZKJv。通过高效液相色谱(HPLC)测定上述纯化多糖的纯度和相对分子量分布;... 利用水提醇沉法对桦褶孔菌Lenzites betulina粗多糖HZKJc进行提取,随后经Sevage法和酶法联合脱蛋白,再经DEAE‐Sephadex A‐25,G‐100柱层析纯化后得到多糖纯品HZKJv。通过高效液相色谱(HPLC)测定上述纯化多糖的纯度和相对分子量分布;经纸层析(PC)、气相色谱(GC)、红外光谱(IR)进行单糖组成分析;并研究其清除自由基活性。分离纯化后得到的HZKJv为纯多糖,相对分子质量约为11 687。当HZKJv溶液浓度为3.0mg/m L时,其DPPH自由基清除率可达82%;浓度为2.0mg/m L时,对?OH自由基的清除率可达85%。表明HZKJv对?OH与DPPH自由基存在很好的清除作用。 展开更多
关键词 桦褶孔菌多糖 HPLC 单糖组成 抗氧化活性
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偏肿革裥菌GMC基因家族在木质条件下转录表达分析
5
作者 池玉杰 陈欣妍 +4 位作者 杨旭欣 郝雅昕 赵予璐 贾子烨 苏文浩 《吉林农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第2期228-238,共11页
为揭示偏肿革裥菌(Lenzites gibbosa)在分解木材过程中葡萄糖-甲醇-胆碱氧化还原酶(Glucosemethanol-choline oxidoreductases,GMCs)基因的功能,采用高通量测序技术对L.gibbosa分解木屑过程中0,3,5,7,11 d的菌丝体进行转录组测序,以Coun... 为揭示偏肿革裥菌(Lenzites gibbosa)在分解木材过程中葡萄糖-甲醇-胆碱氧化还原酶(Glucosemethanol-choline oxidoreductases,GMCs)基因的功能,采用高通量测序技术对L.gibbosa分解木屑过程中0,3,5,7,11 d的菌丝体进行转录组测序,以Count值与校正后的FPKM值为表达量进行基因筛选。分析基因表达量变化情况及在eggNOG,COG,GO,KEGG,NR,SwissProt和Pfam等数据库中的功能注释结果,通过qPCR验证基因表达量。根据基因注释结果共筛选到23个GMCs基因,表达量变化表明其中有9个是差异基因。功能注释及富集结果表明,L.gibbosa的GMCs至少有6种,分别为纤维二糖脱氢酶、葡萄糖氧化酶、吡喃糖脱氢酶、L-山梨糖1-脱氢酶、醇氧化酶、吡喃糖氧化酶,属于CAZy-AA3家族下的4个亚家族,在木材木质素与综纤维素的降解过程中,它们主要参与能量转运和代谢有关的碳代谢、甲烷代谢、氨基酸代谢和脂质代谢;GMCs与木质素降解过程中H_(2)O_(2)的形成有特定关系,可与FAD结合,将初级醇基氧化形成醛并释放H_(2)O_(2),为过氧化物酶提供恒定反应底物。由于能在木质素和纤维素的降解过程中发挥重要的辅助作用,GMCs属于与木材降解相关的重要辅助酶系,为白腐菌中GMC家族在木材降解过程中的功能研究提供了依据。 展开更多
关键词 偏肿革裥菌 葡萄糖-甲醇-胆碱氧化还原酶 木质素降解 转录组 差异表达基因
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桦褶孔菌不同溶剂萃取物抗氧化活性研究 被引量:6
6
作者 郭磊 高然 +3 位作者 田野 徐海 孔德仙 华燕 《西部林业科学》 CAS 北大核心 2020年第2期17-23,共7页
为了研究桦褶孔菌不同溶剂萃取物的体外抗氧化能力及总黄酮含量、多酚含量与抗氧化活性之间的相关性,采用不同极性溶剂对桦褶孔菌75%乙醇提取物进行萃取,得到石油醚相、乙酸乙酯相、正丁醇相和水相萃取物,测定不同萃取相中总黄酮和多酚... 为了研究桦褶孔菌不同溶剂萃取物的体外抗氧化能力及总黄酮含量、多酚含量与抗氧化活性之间的相关性,采用不同极性溶剂对桦褶孔菌75%乙醇提取物进行萃取,得到石油醚相、乙酸乙酯相、正丁醇相和水相萃取物,测定不同萃取相中总黄酮和多酚的含量,研究各萃取相清除DPPH自由基、ABTS自由基、羟自由基和超氧阴离子自由基能力,并分析总黄酮和多酚含量与抗氧化活性的相关关系。结果表明,石油醚相中的总黄酮含量最高,为(214.62±3.24)mg/g,乙酸乙酯相中多酚含量最高,为(50.34±30.13)mg/g。桦褶孔菌不同溶剂萃取物均具有一定的抗氧化活性,其中正丁醇相萃取物清除DPPH自由基和超氧阴离子自由基活性最强,其EC 50分别为(66.09±1.82)μg/mL和(47.94±1.68)μg/mL;正丁醇相萃取物浓度在0.5mg/mL时清除DPPH自由基的能力和V C相当;乙酸乙酯相萃取物清除超氧阴离子自由基活性仅次于正丁醇相萃取物,EC 50为(93.63±1.97)μg/mL。相关性显示桦褶孔菌不同萃取相中总黄酮和多酚含量与抗氧化活性呈现较好的相关关系(P<0.05)。研究结果表明正丁醇相和乙酸乙酯相萃取物具有较强的抗氧化活性,可为桦褶孔菌活性成分的分离奠定理论依据。 展开更多
关键词 桦褶孔菌 萃取物 总黄酮 多酚 抗氧化性
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三色革裥菌胞外漆酶发酵条件及部分特性研究 被引量:5
7
作者 林丽萍 赵敏 《中国造纸学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第2期113-117,共5页
对三色革裥菌 (Lenzitestricolor)漆酶的性质进行了初步研究 ,得到该酶最适反应温度为 40℃ ,最适反应pH值为 6 0。并通过正交实验研究了碳源、氮源、木素类似物以及初始pH值对该菌产胞外漆酶的影响。得到最佳培养基为 :淀粉 2 0g/L ,... 对三色革裥菌 (Lenzitestricolor)漆酶的性质进行了初步研究 ,得到该酶最适反应温度为 40℃ ,最适反应pH值为 6 0。并通过正交实验研究了碳源、氮源、木素类似物以及初始pH值对该菌产胞外漆酶的影响。得到最佳培养基为 :淀粉 2 0g/L ,牛肉蛋白胨 2 0g/L ,Na2 HPO4 ·1 2H2 O 0 47g/L ,KH2 PO4 0 45g/L ,MgSO4 ·7H2 O 0 5g/L ,CaCl2 0 0 1g/L ,MnSO4 ·4H2 O 0 0 0 1g/L ,FeSO4 ·7H2 O 0 0 0 1g/L ,ZnSO4 ·7H2 O 0 0 0 1g/L ,CuSO4 ·5H2 O 0 0 0 1g/L ,愈创木酚 0 0 62g/L及VB1 50 μg,高压灭菌后pH值约 5 0。在此基础上检测了不同培养方式下漆酶活性、菌丝绝干质量、残糖量及pH值变化情况 ,确定最佳培养方式为母液和发酵液均为静置培养。 展开更多
关键词 初始PH值 发酵条件 漆酶 反应温度 发酵液 母液 HPO 酶活性 菌丝 VB1
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偏肿革裥菌降解木质素关键基因挖掘 被引量:5
8
作者 赵清泉 池玉杰 +1 位作者 张健 冯连荣 《东北林业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第6期79-83,共5页
通过对白腐菌偏肿革裥菌( Lenzites gibbosa )在木质和非木质环境下的转录组进行测序,从而预测和筛选出 L.gibbosa 与木材降解有关的基因。采用高通量测序技术对木屑和非木屑处理条件下的菌丝样本进行转录组测序。利用eggNOG、GO等数据... 通过对白腐菌偏肿革裥菌( Lenzites gibbosa )在木质和非木质环境下的转录组进行测序,从而预测和筛选出 L.gibbosa 与木材降解有关的基因。采用高通量测序技术对木屑和非木屑处理条件下的菌丝样本进行转录组测序。利用eggNOG、GO等数据库注释方法对转录本进行比较分析,预测和筛选出 L.gibbosa与木材降解有关的基因。L.gibbosa 转录组测序两组试验组分别设置3个生物学重复样本,共得到6个样本42.71 Gb Clean Data,各样品Clean Data平均达到7.11 Gb,各样品的Reads与参考基因组的比对效率在88.51~91.37%。差异表达分析得到差异表达基因1 120个,其中上调370个,下调750个。差异基因被注释到GO数据库的有493个,注释到eggNOG数据库的有857个。eggNOG分析表明,差异基因表达多聚集在翻译后修饰、蛋白质折叠、蛋白分子伴侣;碳水化合物的运输和代谢;能量产生和转化;次生代谢产物的生物合成、运输和分解代谢等功能分类下。GO分析表明,显著性富集与频率较高的生物过程是氧化还原过程、氧化还原酶活性和木质素代谢过程。 L.gibbosa 降解木材与木质素分解代谢过程(GO:0046274)、氧化还原过程(GO:0055114)和氧化还原酶活性(GO:0016491)等3个基因本体功能类目密切相关。根据基因功能注释的结果得到7个与白腐菌降解木质素相关的重要差异表达基因。 展开更多
关键词 偏肿革裥菌 白腐菌 转录组 木质素 降解
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偏肿革裥菌产漆酶活性的诱导 被引量:4
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作者 石亚攀 池玉杰 于存 《林业科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2016年第12期150-155,共6页
【目的】研究不同诱导剂及其添加量对漆酶的诱导效果,以期在漆酶活性优化培养的基础上进一步提高偏肿革裥菌的漆酶活性。【方法】通过单项诱导剂筛选试验,检测在液体培养条件下12种不同诱导剂对漆酶活性的影响,进行最佳单项诱导剂浓度... 【目的】研究不同诱导剂及其添加量对漆酶的诱导效果,以期在漆酶活性优化培养的基础上进一步提高偏肿革裥菌的漆酶活性。【方法】通过单项诱导剂筛选试验,检测在液体培养条件下12种不同诱导剂对漆酶活性的影响,进行最佳单项诱导剂浓度的单因素试验,2种最佳诱导剂组合、Cu2+浓度、接种量、培养方式对漆酶活性的影响试验。【结果】在初始培养基中含有0.2 mmol·L^(-1)Cu2+的情况下,生物诱导剂麦麸和化学诱导剂愈创木酚对漆酶的诱导效果好、酶活性高,二者的最适添加量分别为1.5%和1.00 mmol·L^(-1),单独添加时在13天酶活性分别达1 873.16和1 975.72 U·L^(-1),是初始产酶培养基酶活性的13.0和13.7倍;而2种诱导剂组合即同时添加1.5%麦麸与1.00 mmol·L^(-1)愈创木酚,比单独使用其中1种诱导剂的效果更好,在150 r·min^(-1)摇动培养条件下,第11天酶活性峰值可达3 594.46 U·L^(-1),是初始培养条件酶活性的24.9倍。【结论】2种诱导剂组合可大幅度提高偏肿革裥菌的漆酶活性,比培养条件优化对酶活性的提高更显著。 展开更多
关键词 白腐菌 偏肿革裥菌 诱导剂 漆酶 酶活性
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偏肿革裥菌C2H2型转录因子SFP1基因克隆、生物信息学及表达分析
10
作者 王莹 池玉杰 +2 位作者 张健 谷新治 杨旭欣 《东北林业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第4期100-107,共8页
以L.gibbosa菌丝体总RNA反转录的cDNA为模板,通过RT-PCR克隆得到一个C2H2型锌指转录因子的cDNA序列。对该基因进行基因克隆、生物信息学分析,并利用实时荧光定量法对木屑处理下该基因的表达进行分析。通过保守结构域预测与结构分析发现... 以L.gibbosa菌丝体总RNA反转录的cDNA为模板,通过RT-PCR克隆得到一个C2H2型锌指转录因子的cDNA序列。对该基因进行基因克隆、生物信息学分析,并利用实时荧光定量法对木屑处理下该基因的表达进行分析。通过保守结构域预测与结构分析发现该基因为裂指蛋白1类(SFP1)C2H2型锌指转录因子,具有2个C2H2家族的保守结构域,将该基因命名为Lg-sfp1。该基因CDS全长1947 bp,编码一个由648个氨基酸组成的亲水性膜内蛋白,蛋白大小为68.27 ku。通过SWISS-MODEL预测的三级空间结构发现两个完整的C2H2结构。木屑处理下Lg-sfp1基因表达比无木屑处理下表达量低,推断木屑促进了L.gibbosa氧化应激反应,当氧化应激反应大量发生时,参与氧化应激反应负调控的sfp1基因表达受到抑制,为后续研究偏肿革裥菌sfp1基因在木材降解,特别是氧化应激反应中的功能提供了理论基础。 展开更多
关键词 偏肿革裥菌 锌指转录因子 SFP1 基因克隆 基因表达
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偏肿革裥菌木屑处理下纤维素酶基因表达
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作者 谷新治 张俊 池玉杰 《东北林业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第4期108-114,共7页
白腐真菌能够降解木质纤维基质的所有成分,为了深入探讨在分子层面其对纤维素降解的机制,检测了白腐真菌偏肿革裥菌(Lenzites gibbosa)在木质和非木质环境下滤纸酶、β-葡萄糖苷酶、内切葡聚糖酶和外切葡聚糖酶等纤维素酶的活性变化。... 白腐真菌能够降解木质纤维基质的所有成分,为了深入探讨在分子层面其对纤维素降解的机制,检测了白腐真菌偏肿革裥菌(Lenzites gibbosa)在木质和非木质环境下滤纸酶、β-葡萄糖苷酶、内切葡聚糖酶和外切葡聚糖酶等纤维素酶的活性变化。并在转录组测序的基础上,对偏肿革裥菌的各种纤维素酶基因进行筛选,分析表达量,结合功能注释、代谢通路富集与生物信息学分析探讨纤维素酶的具体催化分解功能,从而分析这些纤维素酶基因的表达规律。结果表明:滤纸酶、β-葡萄糖苷酶、内切葡聚糖酶和外切葡聚糖酶活性被木屑诱导效果明显,但并非一直被诱导表达;转录组测序共筛选出46个纤维素酶基因,京都基因与基因组百科全书数据库(KEGG)富集分析发现纤维素酶基因显著富集于淀粉和蔗糖代谢通路(ko00500)和氰基氨基酸代谢通路(ko00460),生物信息学分析发现β-葡萄糖苷酶基因产物中具有较多的非分泌蛋白及跨膜蛋白;β-葡萄糖苷酶基因的表达与其酶活变化关联性较差,其原因:一是对不在淀粉和蔗糖代谢通路中的相应同工酶基因未进行定量分析,二是纤维素酶活性不只受到基因转录水平的控制,且纤维素酶活性与基因转录水平没有直接的关系与关联,主要受到底物和培养条件的制约。本研究为深入了解白腐真菌的木材降解机制提供了纤维素酶基因及其表达的资料。 展开更多
关键词 偏肿革裥菌 转录组 纤维素酶 淀粉和蔗糖代谢通路
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桦褶孔菌中麦角甾醇类化学成分及其抗氧化活性研究
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作者 鲁斌 全伟 +2 位作者 陈勇杏 申开泽 华燕 《西南林业大学学报(自然科学)》 北大核心 2023年第6期173-178,共6页
对桦褶孔菌子实体的化学成分及其抗氧化活性进行研究。采用多种柱色谱技术对其甲醇提取物进行分离纯化,使用波谱分析技术鉴定6种麦甾醇类化合物的结构。其中,化合物麦角甾-7,22-二烯-6β-甲氧基-3β, 5α-二醇、3β, 5α-dihydroxy-(22E... 对桦褶孔菌子实体的化学成分及其抗氧化活性进行研究。采用多种柱色谱技术对其甲醇提取物进行分离纯化,使用波谱分析技术鉴定6种麦甾醇类化合物的结构。其中,化合物麦角甾-7,22-二烯-6β-甲氧基-3β, 5α-二醇、3β, 5α-dihydroxy-(22E, 24R)-ergosta-7, 22-dien-6-one、3β, 5α,9α-trihydroxyergosta-7, 22-dien-6-one首次从桦褶孔菌中分离得到。利用DPPH自由基清除模型,对6种化合物进行抗氧化活性评价。结果表明:化合物的浓度在400μg/mL时,对DPPH自由基的清除率均低于10%,虽不能全面地评价其抗氧化活性,但具有一定的指导意义。本研究对桦褶孔菌的化学成分进行研究,为进一步对其资源的开发利用提供参考依据。 展开更多
关键词 桦褶孔菌 化学成分 麦角甾醇 抗氧化活性
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偏肿革裥菌Lg-mnp1基因克隆及表达研究 被引量:4
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作者 闫洪波 池玉杰 吴书景 《安徽农业科学》 CAS 2014年第11期3186-3190,共5页
[目的]研究偏肿革裥菌Lg-mnp1基因的克隆及表达情况。[方法]根据白腐菌锰过氧化物酶(MnP)基因保守序列设计引物,采用PCR、RACE及染色体步移等方法,克隆偏肿革裥菌Lenzites gibbosa CB1的全长MnP1基因(GenBank登录号JQ327834),进行蛋白... [目的]研究偏肿革裥菌Lg-mnp1基因的克隆及表达情况。[方法]根据白腐菌锰过氧化物酶(MnP)基因保守序列设计引物,采用PCR、RACE及染色体步移等方法,克隆偏肿革裥菌Lenzites gibbosa CB1的全长MnP1基因(GenBank登录号JQ327834),进行蛋白序列分析,并通过双酶切的方法获得重组质粒,将该重组质粒电转化至巴斯德毕赤酵母中进行异源表达。[结果]获得偏肿革裥菌Lenzites gibbosa CB1的全长MnP1基因,命名为Lg-mnp1。蛋白序列分析表明Lg-MnP1含有4个二硫键属于短MnP,预测成熟蛋白分子量为35.94kD,pI为4.43。通过双酶切的方法将Lg-mnp1的开放阅读框(ORF)序列连接到pPICZB载体上,获得重组质粒pPICZB/Lg-mnp1,转化子经PCR验证后,在BMMY培养基中甲醇诱导培养,在未添加血红素的培养液中MnP胞外酶活在72 h达到最高为7 U/L,表明Lg-mnp1已被转化至毕赤酵母中并可诱导表达。[结论]该方法对偏肿革裥菌Lg-mnp1基因的克隆及表达情况进行研究,为偏肿革裥菌Lg-mnp1基因的进一步应用提供了依据。 展开更多
关键词 偏肿革裥菌 锰过氧化物酶 基因克隆 毕赤酵母 基因表达
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漆酶纯化及部分性质研究 被引量:4
14
作者 代海兵 王菡 《牡丹江医学院学报》 2008年第6期23-26,共4页
目的:研究三色革裥菌(Lenzites tricolor)所产漆酶的纯化及其部分酶学特性。方法:利用盐析、层析等方法纯化漆酶;测定漆酶的活力及不同金属离子对其的影响。结果:培养第6d时生长最快,漆酶活力最强。层析缓冲体系应选择:缓冲液Na2HPO4-C6... 目的:研究三色革裥菌(Lenzites tricolor)所产漆酶的纯化及其部分酶学特性。方法:利用盐析、层析等方法纯化漆酶;测定漆酶的活力及不同金属离子对其的影响。结果:培养第6d时生长最快,漆酶活力最强。层析缓冲体系应选择:缓冲液Na2HPO4-C6H8O7;pH值5.0;反荷离子强度范围0.4~0.5mol/L较合适。漆酶的Km值约为60.4μmol/L。Na+、Ba2+对漆酶活力无明显影响,Cu2+、Mn2+、Zn2+、Mg2+对漆酶有不同的抑制作用,而Ca2+对漆酶有明显的激活作用。经75%(NH4)2SO4盐析、Sephadex G-150层析后得到较好的纯化漆酶。结论:三色革裥菌所产漆酶经盐析、层析得到较好的纯化效果,不同金属离子对漆酶活力具有不同的影响。 展开更多
关键词 三色革裥菌 漆酶 纯化 酶学特性
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偏肿革裥菌漆酶基因克隆及不同染料脱色研究 被引量:4
15
作者 郑苗苗 池玉杰 《华中师范大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2012年第6期744-750,共7页
染料由于具有复杂的化学结构通常难以降解.漆酶粗酶液对终浓度为50mg/L的不同化学结构的染料的脱色研究,可快速对蒽醌类茜素红进行脱色可达100%;杂环类中性红、偶氮类刚果红和三苯基甲烷类结晶紫的脱色效果低于茜素红,测试的3种染料均... 染料由于具有复杂的化学结构通常难以降解.漆酶粗酶液对终浓度为50mg/L的不同化学结构的染料的脱色研究,可快速对蒽醌类茜素红进行脱色可达100%;杂环类中性红、偶氮类刚果红和三苯基甲烷类结晶紫的脱色效果低于茜素红,测试的3种染料均可在没有介体存在的条件下被漆酶脱色,显示出偏肿革裥菌(Lenzites gibbosa)漆酶对茜素红染料脱色具有较大的应用潜力,进而对废水处理具有更好的应用前景.利用PCR和RACE技术首次从该菌株中获得编码漆酶基因的cDNA及其基因组全长序列,基因组大小为2 106bp.通过比较该漆酶基因的cDNA和基因组DNA的全长序列,发现该基因包含11个外显子和10个内含子.cDNA序列的全长为1 982bp,其中包含一个完整的ORF,长度为1 563bp,编码520个氨基酸. 展开更多
关键词 偏肿革裥菌 漆酶基因 染料脱色 结构域
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偏肿革裥菌锰过氧化物酶酶学性质和染料脱色 被引量:3
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作者 张玉龙 池玉杰 冯连荣 《林业科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2017年第9期73-80,共8页
【目的】研究白腐菌偏肿革裥菌(Lenzites gibbosa)所产锰过氧化物酶(MnP)纯酶的序列特征、酶学性质及其对染料的脱色能力,为其应用于木质素降解、染料脱色奠定基础。【方法】将纯化后的样品经SDS-PAGE检测后获得的唯一L.gibbosa MnP条... 【目的】研究白腐菌偏肿革裥菌(Lenzites gibbosa)所产锰过氧化物酶(MnP)纯酶的序列特征、酶学性质及其对染料的脱色能力,为其应用于木质素降解、染料脱色奠定基础。【方法】将纯化后的样品经SDS-PAGE检测后获得的唯一L.gibbosa MnP条带切割,采用Nano液相色谱-电喷雾串联质谱法联用(Nano LC-ESI-MS/MS)多肽测序技术对蛋白氨基酸序列进行测定。利用该SDS-PAGE图谱,建立蛋白分子量与迁移率的标准直线,从标准直线上求出MnP纯酶样品的表观分子量;参照酶活测定方法检测最适反应温度及温度稳定性、最适反应p H值及p H稳定性;采用lineweaver-Burk双倒数作图法求解米氏动力学常数Km值。研究L.gibbosa菌种培养液和MnP纯酶液对蒽醌类的茜素红、偶氮类的刚果红、杂环类的中性红和三苯基甲烷类的结晶紫等4种不同类型染料的脱色能力。【结果】串联质谱扫描出2条MnP的保守序列肽段,与克隆到的基因Lg-mnp1编码的Lg-MnP1(Gen Bank登录号:ACO92620)序列完全吻合,表明其所代表的酶蛋白Lg-MnP1就是唯一电泳带中主要的蛋白。Lg-MnP1的表观分子量为45.39 k Da,最适反应温度为35℃,在低于40℃的条件下都具有一定的催化能力,但温度超过50℃后迅速失活;其最适反应pH值为3.5,p H超过4.5反应程度就迅速下降,在p H为2~3时最稳定;在以2,6-DMP为底物时,在21℃条件下其米氏常数Km为6.124 mmol·L^(-1)。L.gibbosa培养液对染料在1 h的脱色率分别为茜素红100%、中性红22.17%、刚果红19.09%,对结晶紫的脱色率很低,在36 h脱色率仅为0.018%。纯化后的Lg-MnP1溶液对染料的最大脱色率在2 h分别为中性红100%、刚果红95.55%、茜素红75.85%和结晶紫36.57%。【结论】SDS-PAGE得到的唯一一条电泳带中的MnP是Lg-MnP1。Lg-MnP1是一种中温性、偏酸性的酶,与2,6-DMP的亲和力较大。L.gibbosa含有菌丝的培养液对茜素红具有彻底的降解效果,但Lg-MnP1纯酶� 展开更多
关键词 偏肿革裥菌 锰过氧化物酶 纯化 酶学性质 染料脱色
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Lenzites gibbosa锰过氧化物酶1基因启动子序列的克隆 被引量:3
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作者 吴书景 池玉杰 闫洪波 《东北林业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第9期107-109,127,共4页
根据已克隆到的Lenzites gibbosa锰过氧化物酶1cDNA全长基因Lg-mnp1,在5'端设计了3个巢式特异性引物,利用染色体步移技术克隆得到了其上游1 568 bp的启动子序列。采用Signal Scan进行了启动子序列分析。结果表明,在起始密码子上游-9... 根据已克隆到的Lenzites gibbosa锰过氧化物酶1cDNA全长基因Lg-mnp1,在5'端设计了3个巢式特异性引物,利用染色体步移技术克隆得到了其上游1 568 bp的启动子序列。采用Signal Scan进行了启动子序列分析。结果表明,在起始密码子上游-92~-43 bp区域为Lg-mnp1启动子的基础启动子区;在-52 bp处有一个转录起始位点,-83 bp处有1个TATAAA-box,-119、-196 bp有2个反向CCAAT-box(ATTGG)。启动子区也存在多个顺式作用元件,包括转录因子SP-1(GGGCGG)、转录因子AP-2(CCCMNSSS)、热激元件HSE(NTTCNNGAAN)及6个推定的金属响应元件MRE(TGCRCNC)等。 展开更多
关键词 lenzitesgibbosa 锰过氧化物酶 启动子 染色体步移 序列分析
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茜素红诱导下偏肿革裥菌SSH-cDNA文库构建与差异表达基因筛选 被引量:3
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作者 韩树英 池玉杰 +1 位作者 张健 冯连荣 《吉林农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第4期386-394,共9页
为了探索白腐菌偏肿革裥菌降解染料茜素红过程中的生理机制和差异表达基因,在LNAS培养基上培养菌株,以添加茜素红为处理组,加入无菌水为对照组,采用抑制性消减杂交方法构建了在染料降解过程中的差异基因cDNA文库。经过2次差减杂交后所... 为了探索白腐菌偏肿革裥菌降解染料茜素红过程中的生理机制和差异表达基因,在LNAS培养基上培养菌株,以添加茜素红为处理组,加入无菌水为对照组,采用抑制性消减杂交方法构建了在染料降解过程中的差异基因cDNA文库。经过2次差减杂交后所得的阳性克隆,除去重复序列后得到75个独立基因的ESTs序列,即为差异基因的SSH-cDNA文库。文库中显著表达的差异基因主要有编码谷氨酰胺合成酶、热激蛋白70、ɑ,β水解酶、脯氨酰氨肽酶2、MFS普通基质转运蛋白、钙网结构域蛋白、20S蛋白酶体亚基α型3、3脱氧7磷酸庚酮糖合酶、醛酮还原酶、脂肪酸2羟化酶、辅酶Ⅰ黄素氧化还原酶、细胞色素P450等基因,这些差异基因及其产物参加了茜素红的氧化降解反应、糖类和蛋白质的降解作用、应激反应和信号转导途径。此研究结果可为进一步筛选偏肿革裥菌中与染料降解性状相关的基因奠定基础。 展开更多
关键词 偏肿革裥菌 抑制性差减杂交 差异表达基因 氧化还原酶 热激蛋白
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偏肿革裥菌C2H2型锌指基因表达分析 被引量:2
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作者 张俊 池玉杰 谷新治 《吉林农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第1期41-50,共10页
C2H2型锌指转录因子在植物、动物和部分真菌的生长发育过程中发挥着重要的作用,但其在偏肿革裥菌(Lenzites gibbosa)中的作用尚不清楚。通过对木屑处理后不同时期的偏肿革裥菌菌丝进行提取和转录组分析,为偏肿革裥菌在营养基质条件下菌... C2H2型锌指转录因子在植物、动物和部分真菌的生长发育过程中发挥着重要的作用,但其在偏肿革裥菌(Lenzites gibbosa)中的作用尚不清楚。通过对木屑处理后不同时期的偏肿革裥菌菌丝进行提取和转录组分析,为偏肿革裥菌在营养基质条件下菌丝的生长研究提供支持。运用COG、GO和KEGG数据库进行注释分析,筛选出与偏肿革裥菌生长发育相关的C2H2型锌指基因,并对差异表达基因进行GO Pathway富集分析以及实时荧光定量PCR分析。COG注释分析表明,C2H2型锌指蛋白差异基因大部分与复制、重组和修复功能有关。GO富集分析表明,C2H2型锌指蛋白差异基因参与了细胞过程、细胞部分和结合功能。将差异基因比对到KEGG数据库中,共得到35条注释的序列,其中4条初生代谢通路得到注释,对其进行Pathway富集分析,发现差异基因显著富集于内质网蛋白加工通路中,表明偏肿革裥菌的生长发育与内质网蛋白加工通路密切相关。在木屑诱导下,随着木屑诱导时间的延长,9406基因相对表达量呈逐渐增长的趋势,11332、7835和5947基因相对表达量呈"先升后降"的趋势,11819和4346基因相对表达量呈"升-降-升"的趋势,3913和5738基因相对表达量呈"降-升-降"的趋势。此研究结果对偏肿革裥菌菌丝体生长研究具有重要的参考价值,为深入研究木质纤维降解关键基因的功能与作用机制奠定基础。 展开更多
关键词 偏肿革裥菌 生长发育 转录组 C2H2型锌指基因
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偏肿革裥菌系统发育与Lg-mnp2和Lg-mnp3基因克隆及结构特征 被引量:2
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作者 池玉杰 闫洪波 吴书景 《东北林业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第2期64-69,87,共7页
白腐菌偏肿革裥菌Lenzites gibbosa能分泌降解木质素的锰过氧化物酶(MnPs),为进一步鉴定试验菌株,对菌株L. gibbosa CB1进行了ITS序列(Gen Bank登录号为JF279440)扩增与测序,并进行了基于ITS序列的比对与系统发育分析,结果表明CB1与桦... 白腐菌偏肿革裥菌Lenzites gibbosa能分泌降解木质素的锰过氧化物酶(MnPs),为进一步鉴定试验菌株,对菌株L. gibbosa CB1进行了ITS序列(Gen Bank登录号为JF279440)扩增与测序,并进行了基于ITS序列的比对与系统发育分析,结果表明CB1与桦革裥菌L. betulina和栓菌属Trametes等相关白腐菌的亲缘关系较近而聚类在一起,并与24个同种其他菌株的ITS序列覆盖度在85%~97%期间内的相似性都为99%,说明该菌株为偏肿革裥菌。为了获得该菌株多个编码MnP家族的基因,从而为研究MnP基因的表达调控奠定序列结构的基础,根据已知白腐菌MnPs基因保守区和已经扩增出的基因片段设计引物,以L. gibbosa CB1的基因组DNA和总RNA为模板,采用PCR、RT-PCR、RACE及染色体步移等方法,克隆到该菌株编码MnP2和MnP3的全长c DNA和DNA基因(Gen Bank登录号分别为JQ388597、JN571114; JQ411249、JN571116),分别命名为Lg-mnp2和Lg-mnp3。2个基因DNA全长分别为2 869、3 992 bp,都含有6个外显子和5个内含子;其启动子区域都含有TATA-Box、CAAT-Box、AP2、MRE等顺式作用元件,Lg-mnp2还含有AP1,Lg-mnp3还含有HSE;其c DNA基因分别含有50、52 bp的5'UTR,150、249 bp的3'UTR和1098、1 101 bp的完整开放阅读框ORF,分别编码了365、366个氨基酸的蛋白质多肽前体(Gen Bank登录号分别为AFC37493、AFC37494),成熟的Lg-mnp2蛋白含有339个氨基酸,比Lg-MnP1蛋白(Gen Bank登录号为ACO92620)多1个氨基酸;成熟的Lg-mnp3蛋白含有340个氨基酸,比Lg-MnP2蛋白多1个氨基酸。 展开更多
关键词 偏肿革裥菌 系统发育 锰过氧化物酶 基因克隆 序列分析
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