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基于胶乳增强免疫比浊法的食物过敏原检测试剂盒方法学的建立及临床应用评价 被引量：2
1
作者 卢玲玲 郑国军 +2 位作者 涂斐佩 吴海鸥 林晓琼 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第3期377-381,共5页
目的:建立基于胶乳增强免疫比浊法的食物过敏原检测试剂的方法并应用于临床。方法:采用胶乳增强免疫比浊法,对检测体系的标准曲线、最低检测量、稳定性、精密度、干扰实验等相关性能指标进行评价,通过检测健康体检人员及临床过敏人群血... 目的:建立基于胶乳增强免疫比浊法的食物过敏原检测试剂的方法并应用于临床。方法:采用胶乳增强免疫比浊法,对检测体系的标准曲线、最低检测量、稳定性、精密度、干扰实验等相关性能指标进行评价,通过检测健康体检人员及临床过敏人群血液标本并与目前应用于临床的较成熟的ELISA方法进行比对,评价胶乳增强免疫比浊法的食物过敏原检测试剂的临床应用可行性。结果:该方法的标准曲线Y=837.1x^2-125.2x+10.036,线性范围:0~400 U/ml,相关系数为0.996,最低检测限为19.600 U/ml。批内、批间精密度均<10%。该方法的正常参考范围为<33.5 U/ml,敏感度89.61%,特异性65.22%,准确度84.00%,阳性预示值89.61%,阴性预示值65.22%,ROC的曲线下面积(AUC)为0.957,该方法与目前应用较广泛的ELISA法具有很强的相关性(r=0.890 2)。结论:胶乳增强免疫比浊法的食物过敏原检测试剂符合临床诊断的相关要求,可应用于临床食物过敏性患者的诊断及疾病监测。 展开更多
关键词 胶乳 免疫比浊 方法学 过敏原
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乳胶过敏原Hev b1二级结构及抗原表位的预测 被引量：1
2
作者 何颖 刘雪婷 +2 位作者 王珊 张俊艳 邹泽红 《国际医药卫生导报》 2013年第11期1553-1555,共3页
目的利用生物信息学软件预测乳过敏原Hevb1的二级结构及B细胞和T细胞的抗原表位。方法在Uniprot数据库中获得Heyb1蛋白序列，通过GOR4在线软件预测其二级结构；采用DNAStar的Protean模块预测Hevb1蛋白的亲水性、表面可及性、柔韧性及抗... 目的利用生物信息学软件预测乳过敏原Hevb1的二级结构及B细胞和T细胞的抗原表位。方法在Uniprot数据库中获得Heyb1蛋白序列，通过GOR4在线软件预测其二级结构；采用DNAStar的Protean模块预测Hevb1蛋白的亲水性、表面可及性、柔韧性及抗原指数，从而综合预测其B细胞表位；应用NetMHCⅡ2．2在线服务器预测Hevb1蛋白的T细胞表位。结果乳胶过敏原Heyb1的B细胞优势抗原表位为1—14，40一46；T细胞优势抗原表位为56—64，76—84，97—116。结论通过生物信息学分析获得乳胶过敏原Hevb1的B细胞和T细胞优势抗原表位，可为乳胶过敏原Hevb1的抗体设计、过敏原性改浩等研奔打下略宴的基础． 展开更多
关键词 乳胶过敏原 HEY b 1 抗原表位 二级结构
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乳胶过敏原Hev b 3的克隆表达和纯化及其过敏原性检测
3
作者 谭光宏 黄风迎 +3 位作者 郑少江 罗凌青 钟江华 林岷格 《海南医学院学报》 CAS 2003年第2期84-86,95,共4页
目的:克隆乳胶主要过敏原Hevb3基因,构建其原核表达载体并表达和纯化重组蛋白,了解重组的Hevb3是否具有和相应IgE特异结合的过敏原特性。方法:用RT-PCR方法从新鲜海南橡胶树叶提取的总RNA中扩增出Hevb3的cDNA,将其克隆于原核表达载体pQ... 目的:克隆乳胶主要过敏原Hevb3基因,构建其原核表达载体并表达和纯化重组蛋白,了解重组的Hevb3是否具有和相应IgE特异结合的过敏原特性。方法:用RT-PCR方法从新鲜海南橡胶树叶提取的总RNA中扩增出Hevb3的cDNA,将其克隆于原核表达载体pQE30质粒,转化大肠杆菌XL1-Blue,酶切和测序验证构建的载体,利用Ni-NTA柱层析纯化重组蛋白并用SDS-PAGE和WesternBlot验证。结果:酶切和测序结果证实克隆了正确的Hevb3序列,重组表达并纯化的蛋白具有和特异IgE抗体结合的过敏原特性。结论:成功构建了乳胶主要过敏原的原核表达载体,并纯化了具有过敏原特性的重组蛋白,为过敏原的标准化创造了条件。 展开更多
关键词 乳胶过敏原 Hevb3 表达 纯化 过敏原性 检测 克隆
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