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鳖甲药材指纹图谱与其抗肝纤维化作用的谱效关系研究 被引量:16
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作者 肖云芝 于超 +4 位作者 刘朝勇 万露 徐平华 韩晋 袁海龙 《中草药》 CAS CSCD 北大核心 2014年第17期2506-2510,共5页
目的研究不同产地鳖甲药材的HPLC指纹图谱与其抗纤维化作用的谱效关系,揭示鳖甲药材抗肝纤维化作用的"药效成分组"。方法 HPLC-DAD法测定了12个产地鳖甲药材样品,采用中药色谱指纹图谱相似度评价系统2004 A进行评价,建立了共... 目的研究不同产地鳖甲药材的HPLC指纹图谱与其抗纤维化作用的谱效关系,揭示鳖甲药材抗肝纤维化作用的"药效成分组"。方法 HPLC-DAD法测定了12个产地鳖甲药材样品,采用中药色谱指纹图谱相似度评价系统2004 A进行评价,建立了共有模式,并进行主成分分析(PCA)。以LX-2肝星状细胞为模型研究其对肝细胞的抑制效果,采用SPSS软件对数据进行相关分析,研究谱效相关性。结果 12个产地鳖甲药材HPLC指纹图谱中共有7个特征共有峰,其中峰2、5与LX-2肝星状细胞抑制效果(A值)的相关性呈现中等程度相关,峰4的相关性最强。由PCA可知,峰4的量对鳖甲质量有着重要的影响。结论 12个产地鳖甲药材对LX-2肝星状细胞均有抑制作用,HPLC指纹图谱与其抗纤维化作用之间有一定的相关性,为进一步控制鳖甲药材内在质量提供参考。 展开更多
关键词 鳖甲 指纹图谱 纤维化作用 主成分分析 谱效关系 lx-2星状细胞
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六味五灵片抗肝纤维化作用的谱效关系 被引量:14
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作者 程玲 郑娟 +7 位作者 徐平华 沈刚 李娟娟 邱玲 张利红 武娜 韩晋 袁海龙 《中成药》 CAS CSCD 北大核心 2016年第4期820-825,共6页
目的研究六味五灵片(南五味子、女贞子、连翘等)抗肝纤维化作用的谱效关系,探索其药效物质基础。方法拉丁超立方法将六味五灵片中6味药材随机抽样成20个不同比例的组合,HPLC法获取其提取物的指纹图谱。以LX-2肝星状细胞为药效模型,MTT... 目的研究六味五灵片(南五味子、女贞子、连翘等)抗肝纤维化作用的谱效关系,探索其药效物质基础。方法拉丁超立方法将六味五灵片中6味药材随机抽样成20个不同比例的组合,HPLC法获取其提取物的指纹图谱。以LX-2肝星状细胞为药效模型,MTT法测定各组的抗肝纤维化作用。利用主成分分析及相关分析法,对药效数据和指纹图谱信息进行处理。结果 20个不同比例组合提取物对LX-2细胞均有抑制作用,HPLC指纹图谱有23个共有峰,其中14(五味子醇甲)、20(五味子甲素)、17、19、21号峰与药效关系密切。结论六味五灵片的抗肝纤维化作用可能是多成分相互影响的结果。 展开更多
关键词 六味五灵片 纤维化 lx-2星状细胞 谱效关系 HPLC MTT
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基于肝星状细胞增殖的复方鳖甲软肝片的溶出度初步研究 被引量:4
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作者 戴领 白金霞 +2 位作者 尹蓉莉 韩晋 袁海龙 《中国药学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第23期2018-2021,共4页
目的采用四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法从细胞增殖角度、结合高效液相色谱法(HPLC),探讨生物方法评价中药固体制剂体外溶出度的可行性,旨在弥补单纯化学方法难以客观反映中药固体制剂溶出度检测的不足。方法以复方鳖甲软肝片为模型药,考察... 目的采用四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法从细胞增殖角度、结合高效液相色谱法(HPLC),探讨生物方法评价中药固体制剂体外溶出度的可行性,旨在弥补单纯化学方法难以客观反映中药固体制剂溶出度检测的不足。方法以复方鳖甲软肝片为模型药,考察在pH 7.4 PBS溶出介质中,不同溶出时间的复方鳖甲软肝片溶出液对LX-2肝星状细胞的抑制作用,提出基于细胞抑制率所得复方鳖甲软肝片的累积溶出度,结合HPLC测定芍药苷指标成分所得溶出度,运用f2相似因子法进行相关性评价。结果 f2相似因子小于50,表明单纯化学方法所测的指标成分溶出度不能等同于全方的生物效价。结论生物方法有望成为评价中药固体制剂体外溶出度的手段之一。 展开更多
关键词 MTT比色法 lx-2星状细胞溶出度 复方鳖甲软
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敲低HSC-LX2人肝星状细胞钙网蛋白引起细胞内Ca^(2+)水平升高并促进细胞凋亡 被引量:3
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作者 戴琳玉 王路广 +1 位作者 刘海英 肖永红 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第6期501-506,共6页
目的探讨沉默钙网蛋白(CALR)基因对人肝星状细胞(HSC-LX2)凋亡及细胞内Ca^(2+)水平的影响.方法设计靶向CALR的小干扰RNA(siRNA),脂质体法转染至HSC-LX2细胞,筛选出敲低CALR的HSC-LX2细胞.采用异硫氰酸荧光素标记的膜联素V/碘化丙啶(anne... 目的探讨沉默钙网蛋白(CALR)基因对人肝星状细胞(HSC-LX2)凋亡及细胞内Ca^(2+)水平的影响.方法设计靶向CALR的小干扰RNA(siRNA),脂质体法转染至HSC-LX2细胞,筛选出敲低CALR的HSC-LX2细胞.采用异硫氰酸荧光素标记的膜联素V/碘化丙啶(annexinⅤ-FITC/PI)双标记结合流式细胞术检测细胞凋亡,Fluo 3-AM钙离子荧光探针负载结合激光共聚焦显微镜观察细胞内Ca^(2+)浓度变化,反转录PCR检测细胞CALR、B细胞淋巴瘤分子2(Bcl2)、Bcl2相关X蛋白(BAX)的mRNA水平,Western blot法检测CALR、BAX、Bcl2蛋白表达.结果敲低HSC-LX2细胞CALR后,细胞凋亡率显著增加,Ca^(2+)浓度也有明显升高,BAX的表达显著增加,Bcl2表达明显降低,且BAX/Bcl2比值显著升高.结论敲低HSC-LX2细胞CALR的表达会增加细胞Ca^(2+)水平,上调BAX/Bcl2的比值,促进细胞凋亡. 展开更多
关键词 HSC-lx2人星状细胞 钙网蛋白(CALR) 小干扰RNA(siRNA) 细胞凋亡 CA^(2+)
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委陵菜酸通过阻断核因子κB(NF-κB)信号通路抑制LX-2人肝星状细胞增殖并促进其凋亡 被引量:1
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作者 李艳 张晓琳 +3 位作者 韦园园 温淑娟 林兴 黄权芳 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第10期897-903,共7页
目的研究委陵菜酸(TA)对核因子κB(NF-κB)信号通路的调控作用,分析其对LX-2人肝星状细胞增殖和凋亡的影响及机制。方法将培养的LX-2细胞分为正常组、血小板源性生长因子BB(PDGF-BB)刺激组(20 ng/mL)、1-吡咯烷二硫代羧酸铵盐(PDTC)组(P... 目的研究委陵菜酸(TA)对核因子κB(NF-κB)信号通路的调控作用,分析其对LX-2人肝星状细胞增殖和凋亡的影响及机制。方法将培养的LX-2细胞分为正常组、血小板源性生长因子BB(PDGF-BB)刺激组(20 ng/mL)、1-吡咯烷二硫代羧酸铵盐(PDTC)组(PDGF-BB联合10 mmol/L PDTC)、TA处理组[PDGF-BB分别联合(35、25、15)μmol/LTA]。噻唑蓝(MTT)法检测TA对细胞增殖的影响,试剂盒检测天冬氨酸氨基转移酶(AST)、丙氨酸转氨酶(ALT)和总胆红素(TBIL)的活性;流式细胞术检测细胞凋亡情况。实时定量PCR检测核因子κBp65(NF-κB p65)mRNA水平,Western blot法检测NF-κB p65、磷酸化的NF-κB p65(p-NF-κB p65)、NF-κB p65抑制蛋白α(IκBα)、α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)和转化生长因子β(TGF-β)、B细胞淋巴瘤因子2(Bcl2)、Bcl2相关X蛋白(BAX)的蛋白表达。结果与模型组相比,TA明显抑制LX-2细胞的活化增殖,降低α-SMA和TGF-β的蛋白表达;同时,TA处理可降低细胞中ASL、ALT和TBIL的水平,减少细胞损伤;TA明显诱导LX-2细胞凋亡,下调Bcl2表达同时上调BAX的表达。TA能明显抑制NF-κB p65 mRNA和蛋白表达,抑制NF-κB p65和IκBα蛋白的磷酸化。结论TA通过阻断NF-κB信号通路抑制肝星状细胞增殖,促进细胞凋亡。 展开更多
关键词 委陵菜酸(TA) lx-2人星状细胞 核因子κB(NF-κB) 细胞增殖 细胞凋亡
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