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前列腺癌LNCaP-AI+F细胞外泌体促进基质细胞WPMY-1功能活化
被引量:
4
1
作者
范维肖
雷琳
+5 位作者
李蕊
刁艳君
常亮
杨柳
马越云
郝晓柯
《中国肿瘤生物治疗杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2019年第3期293-298,共6页
目的:探讨前列腺癌外泌体对基质细胞WPMY-1迁移和侵袭能力的影响及其作用机制。方法:超速离心法提取前列腺癌LNCaP-AI+F细胞上清中的外泌体,电镜观察外泌体的典型形态结构,Zetaview检测外泌体的粒径分布,Wb鉴定外泌体标志蛋白及其他相...
目的:探讨前列腺癌外泌体对基质细胞WPMY-1迁移和侵袭能力的影响及其作用机制。方法:超速离心法提取前列腺癌LNCaP-AI+F细胞上清中的外泌体,电镜观察外泌体的典型形态结构,Zetaview检测外泌体的粒径分布,Wb鉴定外泌体标志蛋白及其他相关蛋白。将WPMY-1细胞与前列腺癌外泌体(40μg/ml)共孵育后,激光共聚焦显微镜观察WPMY-1细胞对PKH67标记的外泌体的摄取情况,Transwell实验检测WPMY-1细胞迁移和侵袭能力,qPCR检测IL-8、PDGFB和MMP9等三种肿瘤相关成纤维细胞(cancer-associated fibroblast,CAF)分子表达水平,Wb检测EGFR和ERK1/2蛋白磷酸化水平。结果:电镜下可观察到典型茶托状外泌体结构,外泌体粒径分布集中在100 nm左右,其标志蛋白CD63和ALIX的表达证实了所提取颗粒为外泌体。此外,外泌体还表达EGFR、HER2和SRC等三种与前列腺癌进展相关的蛋白。WPMY-1细胞与外泌体共孵育后,共聚焦显微镜下可看到该细胞摄取大量外泌体,明显促进WPMY-1细胞的迁移和侵袭能力(均P<0.01);与对照组比较,外泌体(40μg/ml)处理后WPMY-1 IL-8、PDGFB及MMP9表达水平增高(P<0.05或P<0.01);且外泌体促进了WPMY-1细胞EGFR和ERK1/2的磷酸化(P<0.01)。结论:前列腺癌细胞可通过外泌体作用于基质细胞WPMY-1,使其高表达多种CAF相关分子,促进EGFR和ERK1/2的磷酸化,增强其迁移和侵袭能力。
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关键词
前列腺癌
lncap
-
ai
+
f
细胞
外泌体
迁移
侵袭
WPMY-1细胞
肿瘤相关成纤维细胞
下载PDF
职称材料
题名
前列腺癌LNCaP-AI+F细胞外泌体促进基质细胞WPMY-1功能活化
被引量:
4
1
作者
范维肖
雷琳
李蕊
刁艳君
常亮
杨柳
马越云
郝晓柯
机构
空军军医大学西京医院检验科
出处
《中国肿瘤生物治疗杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2019年第3期293-298,共6页
基金
国家自然科学基金资助项目(No.81872347)~~
文摘
目的:探讨前列腺癌外泌体对基质细胞WPMY-1迁移和侵袭能力的影响及其作用机制。方法:超速离心法提取前列腺癌LNCaP-AI+F细胞上清中的外泌体,电镜观察外泌体的典型形态结构,Zetaview检测外泌体的粒径分布,Wb鉴定外泌体标志蛋白及其他相关蛋白。将WPMY-1细胞与前列腺癌外泌体(40μg/ml)共孵育后,激光共聚焦显微镜观察WPMY-1细胞对PKH67标记的外泌体的摄取情况,Transwell实验检测WPMY-1细胞迁移和侵袭能力,qPCR检测IL-8、PDGFB和MMP9等三种肿瘤相关成纤维细胞(cancer-associated fibroblast,CAF)分子表达水平,Wb检测EGFR和ERK1/2蛋白磷酸化水平。结果:电镜下可观察到典型茶托状外泌体结构,外泌体粒径分布集中在100 nm左右,其标志蛋白CD63和ALIX的表达证实了所提取颗粒为外泌体。此外,外泌体还表达EGFR、HER2和SRC等三种与前列腺癌进展相关的蛋白。WPMY-1细胞与外泌体共孵育后,共聚焦显微镜下可看到该细胞摄取大量外泌体,明显促进WPMY-1细胞的迁移和侵袭能力(均P<0.01);与对照组比较,外泌体(40μg/ml)处理后WPMY-1 IL-8、PDGFB及MMP9表达水平增高(P<0.05或P<0.01);且外泌体促进了WPMY-1细胞EGFR和ERK1/2的磷酸化(P<0.01)。结论:前列腺癌细胞可通过外泌体作用于基质细胞WPMY-1,使其高表达多种CAF相关分子,促进EGFR和ERK1/2的磷酸化,增强其迁移和侵袭能力。
关键词
前列腺癌
lncap
-
ai
+
f
细胞
外泌体
迁移
侵袭
WPMY-1细胞
肿瘤相关成纤维细胞
Keywords
prostate
cancer
lncap
-
ai
+
f
cell
exosome
migration
invasion
WPMY-1
cell
cancer-associated
f
ibroblast(CA
f
)
分类号
R73-361 [医药卫生—肿瘤]
R734.2 [医药卫生—临床医学]
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题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
前列腺癌LNCaP-AI+F细胞外泌体促进基质细胞WPMY-1功能活化
范维肖
雷琳
李蕊
刁艳君
常亮
杨柳
马越云
郝晓柯
《中国肿瘤生物治疗杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2019
4
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