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转铁蛋白-多聚乙烯亚胺体外转染小鼠骨肉瘤细胞的实验研究 被引量：1
1
作者 叶树楠 杨述华 +3 位作者 吴强 杨操 李进 许伟华 《肿瘤》 CAS CSCD 北大核心 2005年第4期321-324,共4页
目的评价转铁蛋白-多聚乙烯亚胺(transfertin-polyethylenimine,Tf-PEI)靶向性转染小鼠骨肉瘤细胞的可行性,并确定最佳的转染条件。方法以Tf-PEI为载体,将绿色荧光蛋白基因和荧光素酶基因分别导入小鼠骨肉瘤细胞,用荧光显微镜及荧光素... 目的评价转铁蛋白-多聚乙烯亚胺(transfertin-polyethylenimine,Tf-PEI)靶向性转染小鼠骨肉瘤细胞的可行性,并确定最佳的转染条件。方法以Tf-PEI为载体,将绿色荧光蛋白基因和荧光素酶基因分别导入小鼠骨肉瘤细胞,用荧光显微镜及荧光素酶检测系统检测其转染效率。以游离转铁蛋白竞争性拮抗Tf-PEI,并观察它对转染效率的影响。结果Tf-PEI可以高效的、靶向性的转染小鼠骨肉瘤细胞。当N/P比值为5时,Tf-PEI的转染效率最高。游离转铁蛋白能够显著的拮抗Tf-PEI的转染。结论Tf-PEI是一种高效率、低毒性、肿瘤靶向性的基因转染载体,它可以作为体外恶性肿瘤基因治疗试验的一个有效工具。 展开更多
关键词 多聚乙烯亚胺 转铁蛋白 转染 骨肉瘤 基因疗法 lm8细胞
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大蒜素诱导LM-8细胞凋亡及相关基因表达的实验研究 被引量：9
2
作者 周钢 杨述华 何宇 《中国中医骨伤科杂志》 CAS 2007年第8期6-8,共3页
目的:探讨大蒜素对C3H小鼠骨肉瘤细胞株LM-8细胞增殖的影响及与bcl-2、bax凋亡基因表达的关系,以初步探索其诱导凋亡的机制。方法:用水溶性四唑盐WST-8比色法检测大蒜素对LM-8细胞株生长的影响;倒置显微镜观察细胞形态变化;流式细胞仪... 目的:探讨大蒜素对C3H小鼠骨肉瘤细胞株LM-8细胞增殖的影响及与bcl-2、bax凋亡基因表达的关系,以初步探索其诱导凋亡的机制。方法:用水溶性四唑盐WST-8比色法检测大蒜素对LM-8细胞株生长的影响;倒置显微镜观察细胞形态变化;流式细胞仪检测细胞调亡率的变化;免疫细胞组化技术检测bcl-2和bax基因表达。结果:大蒜素能明显抑制LM-8细胞的生长,与大蒜素的浓度和时间有关,在72h其药物半数抑制率浓度是11.09μg/ml;5μg/ml、10μg/ml和15μg/ml浓度的大蒜素作用72h后可诱导LM-8细胞凋亡(P<0.05);大蒜素可以降低bcl-2表达,增强bax表达,经15μg/ml大蒜素作用72h,bcl-2和bax基因表达阳性率及bcl-2/bax分别为(7.24±1.18)%(、47.56±7.43)%和0.15±0.02,对照组分别为(24.40±9.96)%、(11.28±1.31)%和2.18±0.93,与对照组比较,差异有显著性意义(P<0.05)。结论:大蒜素可以诱导LM-8细胞凋亡,其机制涉及到bcl-2表达上调及bax表达下调。 展开更多
关键词 大蒜素 细胞凋亡 骨肉瘤 lm-8细胞
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大蒜素对LM-8细胞Bcl-2及Bax表达的影响 被引量：2
3
作者 何宇 杨述华 周钢 《中国组织工程研究与临床康复》 CAS CSCD 北大核心 2008年第15期2997-3000,共4页
背景:有研究证实,大蒜素对LM-8细胞增殖及凋亡有影响。目的:观察大蒜素干预C3H小鼠骨肉瘤细胞株LM-8细胞Bcl-2、Bax凋亡蛋白的表达,以及LM-8细胞的形态学变化与Bcl-2及Bax变化的关系。设计:随机分组,非盲法,细胞水平体外实验。单位:实验... 背景:有研究证实,大蒜素对LM-8细胞增殖及凋亡有影响。目的:观察大蒜素干预C3H小鼠骨肉瘤细胞株LM-8细胞Bcl-2、Bax凋亡蛋白的表达,以及LM-8细胞的形态学变化与Bcl-2及Bax变化的关系。设计:随机分组,非盲法,细胞水平体外实验。单位:实验于2006-09/2007-05在华中科技大学同济医学院附属协和医院中心实验室完成。材料:实验所用C3H小鼠LM-8骨肉瘤细胞株购自解放军第四军医大学实验动物中心。大蒜素为武汉汇海公司产品,是从大蒜球茎中分离出的硫化物。CellCountingKit-8试剂购于上海同仁化学研究所,Bcl-2和Bax抗体及SP试剂盒购于福州迈新生物技术开发公司。方法:以含体积分数为0.1新生牛血清的1640完全培养基,培养LM-8细胞,制作细胞爬片。SP免疫细胞组织化学技术检测细胞爬片中Bcl-2和Bax蛋白表达;倒置显微镜下观察5.0,10.0和15.0mg/L质量浓度大蒜素作用前后LM-8细胞形态变化;将LM-8细胞调整至7.5×107L-1接种于96孔板,用1.0,5.0,10.0和15.0mg/L质量浓度的大蒜素处理细胞,设立不加任何处理因素的对照组及不含细胞和药物的培养基空白组,孵育24,48,72h后取出培养板,加入CCK-8测定吸光度值,计算LM-8细胞生长抑制率;以5.0,10.0和15.0mg/L质量浓度大蒜素干预LM-8细胞24,48,72h,消化离心收集细胞,以流式细胞仪分析细胞凋亡率的变化。主要观察指标:LM-8细胞中Bcl-2和Bax蛋白表达;LM-8细胞形态及增殖、凋亡情况。结果:①Bcl-2和Bax蛋白表达:大蒜素可以降低Bcl-2表达,增强Bax表达,经15.0mg/L大蒜素作用72h,Bcl-2和Bax蛋白表达阳性率及Bcl-2/Bax表达与对照组比较,差异有显著性意义(P<0.01)。②LM-8细胞的形态:经不同质量浓度大蒜素干预后均出现明显凋亡表现。③LM-8细胞的增殖:大蒜素能明显抑制LM-8细胞的增殖,当大蒜素浓度从1.0mg/L增加到15.0mg/L,LM-8细胞72h时生长抑制率由(23.87±3.26)%增至(58.32±5.38)%,在72h其� 展开更多
关键词 凋亡相关基因 大蒜素 细胞凋亡 骨肉瘤 lm-8细胞
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光动力疗法在骨肉瘤治疗中的初步实验探讨
4
作者 龚海洋 胡硕 +1 位作者 姚建忠 蔡郑东 《中国肿瘤外科杂志》 CAS 2010年第5期262-266,共5页
目的观察光敏剂BCPD-17对小鼠骨肉瘤细胞株LM-8及小鼠皮下移植骨肉瘤的光动力效应。方法将不同浓度的光敏剂BCPD-17(0.5、1.0、2.0、4.0、8.0μg/mL)与小鼠骨肉瘤细胞株LM-8共同孵育4 h,再采用不同激光剂量照射LM-8细胞(激光波长为630 ... 目的观察光敏剂BCPD-17对小鼠骨肉瘤细胞株LM-8及小鼠皮下移植骨肉瘤的光动力效应。方法将不同浓度的光敏剂BCPD-17(0.5、1.0、2.0、4.0、8.0μg/mL)与小鼠骨肉瘤细胞株LM-8共同孵育4 h,再采用不同激光剂量照射LM-8细胞(激光波长为630 nm,光照能量分别为1.5、3.0、6.0、9.0 J/cm^2),与空白对照组(不加光敏剂,不接受激光照射)、暗毒性组(只加光敏剂,不接受激光照射)、激光组(不加光敏剂,只接受激光照射)比较,24 h后采用MTT法测定其光密度值(OD_(540)),计算抑制率,并于光镜下观察光动力疗法(photo dynamictherapy,PDT)后24 h细胞形态的变化。30只C3H小鼠左侧腰骶部接种LM-8小鼠骨肉瘤细胞,待皮下瘤块直径约10~12 mm时,随机分成空白对照组、低能量密度及高能量密度光动力治疗组,观察4周后有无复发。结果单独光照或光敏剂孵育均无杀伤效应,光敏剂浓度及激光剂量是影响杀伤效应的重要因素。BCPD-17浓度为4μg/mL,光照能量为3 J/cm^2时,对LM-8细胞有明显的光动力杀伤效果,抑制率为57.0%。光镜下可见细胞形态发生明显的变化,呈坏死或凋亡样改变。动物模型实验中,光动力治疗4周后,对照组中10只没有联合PDT的小鼠,仅1只小鼠没有复发,在手术联合PDT治疗的低剂量激光组(240 J/cm^2)小鼠中,4只小鼠出现肿瘤局部复发,在高剂量激光组(360 J//cm^2)小鼠中,只有2只局部复发。结论 BCPD-17对小鼠骨肉瘤LM-8细胞株具有明显的光动力杀伤作用,也能够降低小鼠移植骨肉瘤的局部复发率,PDT是很有前景的治疗骨肉瘤的新方法。 展开更多
关键词 光动力疗法 骨肉瘤 BCPD-17 lm-8细胞株 小鼠移植骨肉瘤皮下模型
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