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hLMO1编码基因重组质粒的构建及蛋白的表达和定位
被引量：
1
1
作者
蔡鑫泽
顾卉
+1 位作者
刘彤
李丰
《中国医科大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2009年第11期816-819,共4页
目的构建hLMO1真核表达载体并证实融合蛋白在细胞内的表达及定位。方法以人胎脑文库cDNA为模板,PCR扩增hLMO1基因cDNA全长,亚克隆至pEGFP表达载体中。将构建的重组质粒进行酶切测序鉴定,并转染到人上皮细胞——HEK293细胞中,提取细胞蛋...
目的构建hLMO1真核表达载体并证实融合蛋白在细胞内的表达及定位。方法以人胎脑文库cDNA为模板,PCR扩增hLMO1基因cDNA全长,亚克隆至pEGFP表达载体中。将构建的重组质粒进行酶切测序鉴定,并转染到人上皮细胞——HEK293细胞中,提取细胞蛋白进行Western blot检测。利用激光扫描共聚焦显微镜观察pEGFP-hLMO1在HEK293细胞内的定位。结果hLMO1基因cDNA全长克隆到了真核表达载体pEGFP中,酶切鉴定片段为471bp。Western blot检测到了融合蛋白表达,分子量约为45kDa。pEGFR-LMO1在人HEK293细胞核与细胞质均有表达。结论成功构建了hLMO1基因cDNA全长的真核表达载体,pEGFP-LMO1蛋白定位于HEK293细胞的细胞质和细胞核内。
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关键词
hLMO
1
基因
质粒构建
基因表达与定位
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职称材料
题名
hLMO1编码基因重组质粒的构建及蛋白的表达和定位
被引量：
1
1
作者
蔡鑫泽
顾卉
刘彤
李丰
机构
中国医科大学附属第一医院中心实验室
中国医科大学基础医学院细胞生物学教研室
出处
《中国医科大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2009年第11期816-819,共4页
基金
国家自然科学基金资助项目(30771128)
文摘
目的构建hLMO1真核表达载体并证实融合蛋白在细胞内的表达及定位。方法以人胎脑文库cDNA为模板,PCR扩增hLMO1基因cDNA全长,亚克隆至pEGFP表达载体中。将构建的重组质粒进行酶切测序鉴定,并转染到人上皮细胞——HEK293细胞中,提取细胞蛋白进行Western blot检测。利用激光扫描共聚焦显微镜观察pEGFP-hLMO1在HEK293细胞内的定位。结果hLMO1基因cDNA全长克隆到了真核表达载体pEGFP中,酶切鉴定片段为471bp。Western blot检测到了融合蛋白表达,分子量约为45kDa。pEGFR-LMO1在人HEK293细胞核与细胞质均有表达。结论成功构建了hLMO1基因cDNA全长的真核表达载体,pEGFP-LMO1蛋白定位于HEK293细胞的细胞质和细胞核内。
关键词
hLMO
1
基因
质粒构建
基因表达与定位
Keywords
lim
domain
only
1
gene
plasmid
construction
gene
expression
and
localization
分类号
R [医药卫生]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
hLMO1编码基因重组质粒的构建及蛋白的表达和定位
蔡鑫泽
顾卉
刘彤
李丰
《中国医科大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2009
1
下载PDF
职称材料
已选择
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参考文献
引证文献
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